新型器官保存液低温保存猪小肠的实验研究

探讨Lifor器官保存液对猪小肠的低温保存效果.方法 24只白色杂种猪,随机分成Lifor液组和威斯康星大学保存液(University of Wisconsin solution,UW液)组,分别采用4 ℃的Lifor液和UW液灌洗并低温保存移植小肠,每组再根据供肠保存时间的不同随机分成两个亚组,分别为保存6 h、9 h组,每个亚组6只动物.建立猪自体节段性小肠移植模型.比较低温保存小肠结束时Lifor液组和UW液组小肠黏膜的组织病理学及三磷腺苷(ATP)含量的改变,并测定移植小肠造口输注麦芽糖后各时间点的血糖水平,观察移植后小肠吸收功能情况.结果 供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠组织病理学改变基本一致,比较差异无统计学意义(均为P>0.05),保存9 h的小肠黏膜形态异常,损伤较保存6 h的小肠黏膜严重.供肠保存6 h和9 h后,Lifor液组与UW液组的小肠黏膜ATP含量比较差异无统计学意义(均为P>0.05),小肠黏膜的ATP含量随保存时间的延长逐渐降低.移植后7、14 d两组小肠吸收功能差异亦无统计学意义(P>0.05).结论 Lifor液低温保存小肠的效果与UW液相当,且成本低廉,具有一定的临床应用前景.     

同种异体切削软骨移植──动物实验观察

新鲜块状猪肋软骨及切成２ｍｍ×１ｍｍ的片状软骨异体移植，同时行相对应的块状及片状异体猪肋软骨经０．４％戊二醛、甲醛混合液库存４周后的同期移植，移植后分别于１、３、５个月取材。取材样本分别行组织、组化、生物化学、电镜及显微图象定量分析手段研究与测定。结果提示，新鲜异体软骨移植物主要发生了血管化及吸收性改变，移植效果差，而经保存液处理的块状及片状移植物未见明显的血管侵袭及吸收性改变，主要发生了钙化性退变，尤其是片切软骨更为显著。结果显示库存软骨移植物的组织、组化、形态学及基质中胶原含量变化存在一定规律。本实验结果提示：切削与雕刻因素是造成软骨移植物退变的一种重要原因，但是经保存液处理的切削软骨行异体移植时具有一定的整形外科支架优势     

器官保存及保存液的研究

正器官移植是治疗各种器官终末期疾病的唯一有效治疗方案。随着器官移植医学的快速发展,尤其是手术技术的进步及新型免疫抑制剂、器官保存方式的应用,器官移植病人的生存率得到显著提高。器官移植也在世界范围内广泛开展。移植等待病人数量不断增加,远远超过器官捐献的数量,器官供应严重不足,而高质量的供体是器官移植成功的先决条件和基本保障[1]。     

用自制XZF液保存大鼠胰腺的实验研究

我们采用乳果糖做为主要非渗透因子，加入磷酸盐缓冲液、组氨酸、谷胱甘肽等配制成一种新的等渗保存液－ＸＺＦ液，将大鼠供胰腺以ＸＺＦ液作低温灌洗保存１２、１８小时后行移植术。受体为糖尿病大鼠模型。胰腺保存１２小时组，受体的移植物有功能存活一周以上述８３％。保存１８小时组为５０％。     

SX-1液对肝脏保存效果的实验研究

目的 应用改良后的Kamada二袖套法大鼠原位肝移植模型,检验SX-1液、HC-A液和UW液对肝脏保存的效果.方法 在无菌条件下配制肝脏保存液.建立大鼠原位肝移植模型.使用SX-1液、UW液和HC-A液保存大鼠肝脏2、8、24 h后行大鼠原位肝移植,于移植后6 h比较各项肝脏功能.结果 对于ALT、AST,SX-1液组(2、8、24 h)与UW液组同步升高,分析无统计学意义(P＞0.05),与HC-A液组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).对于LDH,SX-1液组(2 h、8 h、24 h)与HC-A液组同步升高,差异无统计学意义(P＞0.05),与UW液组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).对于分泌胆汁的肝脏个数,各组别与分泌胆汁的肝脏个数无差别(P＞0.05).本组内各时间点分泌胆汁个数有差别(P＜0.05).随肝脏保存时间增长,分泌胆汁的肝脏个数减少.结论 经大鼠原位肝移植模型证实,SX-1液在肝脏酶学方面与UW液作用相当,超过HC-A液水平.肝移植后6 h肝脏分泌胆汁的个数方面,SX-1液与HC-A液、UW液间无明显差别.     

多器官保存液组成探讨

本文综述了器官保存的原理及要求，指出一种成功的器官保存液的组成应满足五个要求：１、减少由于低温保存导致的细胞水肿；２、防止细胞的酸化作用；３、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；４、防止氧自由基损伤；５、提供再生高能磷酸化合物的底物。并对ＵＷ、ＨＴＫ液的各个组成部分进行了分析和探讨。     

不同保存液保存小肠的效果评估

目的 评价乳酸林格（ＬＲ）液、Ｅｕｒｏ－Ｃｏｌｌｉｎｓ（ＥＣ）液、高渗枸橼酸嘌呤（ＨＣ－Ａ）液和武汉医学院器官１号（ＭＷＯ－１）液保存猪小肠的效果。方法 根据不同保存液将动物随机分成４组,每组又根据保存时间不同分成３个亚组,供肠保存２后行自体移植。结果 小肠保存１０小时后移植,术后３周各组受体的存活率均为１００％;保存１８小时,ＬＲ液组、ＥＣ液组、ＨＣ＝Ａ液组和ＷＭＯ－１液组受体的存活率分别为６０     

Celsior液和UW液保存供肝的前瞻性随机对照研究

目的比较Celsior液和UW液保存供肝的效果。方法随机选取拟行肝移植的患者60例，平均分为两组，一组接受以Celsior液灌洗和冷保存的供肝（Celsior液组）移植，另一组接受以UW液灌洗和冷保存的供肝（UW液组）移植，两组在患者年龄、性别构成、肝功能分级以及原发病、肝移植术式等方面的差异无统计学意义。比较两组供肝组织学变化、术后早期肝功能恢复情况及术后3个月内缺血性胆道狭窄的发生率。结果Celsior液组供肝冷缺血时间为（8．83±1．53）h，UW液组为（9．08±1．85）h，差异无统计学意义（P〉0．05）。两组术后早期血清丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转移酶、胆红素总量、出血时间及胆汁量的差异无统计学意义（P〉0．05），术后3个月内，Celsior液组缺血性胆道狭窄发生率为6．7％（2／30），UW液组为13．3％（4／30），差异无统计学意义（P〉0．05）。两组移植肝的组织学改变相似。结论在冷缺血时间一致的情况下，Celsior液保存供肝的效果与UW液相同。     

体外培养保存关节软骨组织细胞凋亡的研究

[目的]体外培养保存关节软骨组织,研究分析软骨细胞凋亡规律、培养液中组织代谢产物(NO、MDA、SOD)与细胞凋亡之间的相关性.[方法]切取新西兰大白兔膝关节骨软骨柱,使用普通无菌MEME培养液保存,分时间点检测实验指标:采用流式细胞技术测定细胞凋亡数量,比色法测定细胞培养液上清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)活性.[结果]随保存时间延长,软骨细胞凋亡率、培养液中NO、MDA含量均逐渐增加、SOD活力逐渐降低,与前段时间点相比较有统计学意义(P＜0.05);培养液中代谢产物含量与细胞凋亡率高度相关(P＜0.01).[结论]体外培养保存软骨组织,细胞凋亡率逐渐增加,呈时间依赖性,28 d时尤为明显;NO诱导的细胞凋亡对保存软骨组织活性降低起到重要作用.     

异体脸面复合组织移植供体保存的研究

目的 探讨异体脸面部复合组织移植供体的有效保存方法，以减轻组织缺血缺氧损伤。方法 取狗的脸面部复合组织瓣，分别用4℃生理盐水和UW液灌注、保存，用MTT法检测复合组织瓣取下即刻、保存12、24、48h的各组织的活力，计算其与未保存组织相比的活力百分比，并进行病理学观察。结果 各种组织用UW液保存48h后活力仍为未保存组织的75％以上。保存后24、48h活力百分比与生理盐水组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。病理切片示保存24、48h，生理盐水组皮肤、黏膜组织真皮层纤维排列疏松，轻度水肿，皮肤毛囊周围可见组织玻璃化，毛囊内可见细胞水肿，肌束间间隙扩大，腺体有部分腺泡细胞界限模糊，其他组织未见明显变化；UW液组各组织未见明显组织学变化。结论 UW液可以考虑用于临床异体脸面部复合组织瓣保存的保存液。     

玻璃化法保存异体动脉的实验研究

目的　探讨玻璃化法保存动脉的可行性和异体移植的有效性。　方法　家兔6 0只。其中2 4只切取双侧股动脉共计4 8条,平分为2组,分别采用玻璃化法和低温冷冻法保存14 d,作为移植材料。其余36只作为移植对象,平分为3组,每组12只2 4条动脉。A组行新鲜家兔动脉自体移植,B组行玻璃化保存家兔动脉异体移植,C组行低温冷冻保存家兔动脉异体移植。移植前对动脉进行大体和组织学观察。术后行动脉造影了解移植后动脉的通畅率,并分别于术后14、30、6 0和12 0 d取材,对动脉进行大体和组织学观察,测定内膜/中膜比值,并进行组间比较。　结果　移植前B组的动脉完整率为91.6 7% ,优于C组的5 4 .17% ,二者差异有统计学意义(P<0 .0 1)。移植后B组的累计通畅率达到87.5 0 % ,与A组差异无统计学意义,但优于C组的6 6 .6 7% ,二者差异有统计学意义(P<0 .0 5 )。B组的内膜/中膜比值与A、C组比较,差异有统计学意义(P<0 .0 5 )。　结论　玻璃化法保存动脉在降温和复温过程中冰晶较少,对动脉整体结构和活性影响较小,能较好地保存动脉的组织结构;玻璃化法保存的动脉异体移植的效果优于低温冷冻法保存的动脉异体移植。     

自制CMU-1液保存大鼠肝脏的实验研究

目的　探讨CMU 1液保存大鼠肝脏的效果。方法　根据灌注液和保存液的种类将Wistar大鼠分为两组 :UW组和CMU 1组 ,每组分 6h、12h、2 4h 3个保存时限 ,每亚组 6只大鼠。采用离体循环灌注模型 ,研究CMU 1保存液对保存肝脏能量代谢、生化功能、胆汁分泌及形态学方面的影响。结果　随着保存时间延长 ,肝组织TAN含量及AEC逐渐降低 ,CMU 1组较UW组下降略缓慢 ,保存 2 4h后高于UW组 (P <0 0 5 )。再灌注 12 0min后CMU 1组的肝脏分泌胆汁量较UW组多 (P <0 0 5 )。相同时限相比 ,灌出液中ALT、LDH值两组之间无显著差异 (P >0 0 5 )。肝脏组织学变化两组间无明显差异。保存 6h后 ,保存液pH值无明显变化 ;保存 12h后pH值下降 ,两组无明显差异 ;保存2 4h后 ,UW组pH值下降较CMU 1组明显。结论　CMU 1保存液保存大鼠肝脏效果与UW液相似 ,在改善保存肝脏能量代谢、预防细胞内酸中毒、胆汁分泌方面略优于UW液。     

新型器官保存液低温保存猪肾效果的研究

目的研究新型器官保存液Lifor液对猪肾脏的低温保存效果。方法 24只白色杂种猪,随机均分为Lifor液保存组和威斯康星大学保存液（UW液）组各12只,建立离体肾脏非循环灌注模型,供肾取出后分别以0~4℃的Lifor液和UW液灌注并低温保存,再根据保存时间随机分成2个亚组,分别为保存24h、48h组,然后行猪自体肾移植。比较两组肾脏低温保存结束后其病理学及肾皮质三磷腺苷（ATP）含量的改变,并观察自体肾移植后肾功能恢复情况。结果供肾离体保存24h、48h后,Lifor液组与UW液组的肾组织病理学改变基本一致,肾皮质ATP含量比较差异无统计学意义（P〉0.05）。移植后两组血清肌酐水平比较差异亦无统计学意义（P〉0.05）。结论 Lifor液低温保存肾脏的效果与UW液相当,且成本低廉,因此更具有临床应用前景。     

在体阻断软骨下营养对关节软骨影响的实验研究

背景：关节软骨无血管分布,其营养来自关节液和软骨下骨,哪条营养通路对关节软骨更为重要是学者们争论的焦点。目的：研究软骨下营养对关节软骨的影响,并探讨软骨下营养与骨关节炎的关系。方法：45只5个月龄雄性新西兰大白兔,建立股骨滑车骨软骨缺损的动物模型,并随机分为3组：自体骨软骨块移植组（Control组,n=15）;假手术组（Sham组,n=15）,用环钻在股骨滑车钻取骨软骨块,将其置入管状PVC内,原位回植;阻断软骨下营养组（DNBM组,n=15）,取出骨软骨后,将其置入帽状PVC内,原位回植。术后4周、8周、12周,每组5只（10膝）,取出膝关节进行大体评分、组织学评分、软骨厚度测量、凋亡染色（TUNEL染色）。结果：与Control组相比,大体评分结果提示,DNBM组软骨无明显退变;组织学评分结果提示,术后12周时DNBM组软骨明显退变（P〈0.005）;软骨厚度测量结果提示,术后8周、12周时DNBM组软骨厚度明显变小（P=0.00）;TUNEL染色结果提示,术后8周、12周时DNBM组关节软骨细胞凋亡明显增加（P〈0.01）。结论：软骨下营养是软骨的重要营养来源,失去软骨下营养,软骨会逐渐发生退变。     

组织培养法在关节软骨保存中的应用

[目的]探讨3种保存方法对关节软骨细胞活性的不同影响,寻求效果优良的软骨组织保存方法.[方法]切取成年猪骨软骨,制成约4.5 mm×5 mm大小的圆柱形骨软骨块.采用组织培养法、慢速梯度降温冷冻法、传统慢速连续降温冷冻法对软骨块进行保存处理,观察并比较保存后软骨细胞活性的变化.[结果]保存8周时,采用传统冷冻法的关节软骨细胞存活率不足50%,软骨基质成分大量丢失;采用慢速梯度降温冷冻法的细胞存活率66%,而使用组织培养法保存的关节软骨细胞存活率高达76%以上,软骨基质成分仅少量丢失.[结论]3种方法相比较,组织培养法可以长期保存关节软骨组织活性,是更为理想的软骨组织保存方法.     

对四种心肌保存液保存效果的评价

本文评价了4种心肌保存液的保存效果。结论是HTK液和UW液是良好的心肌保存液，尤其是HTK液保存效果优于UW液，Celsior液仅可用于心脏保存,对其它器官的保存效果还有待于进一步观察，Euro-Collins液中含有葡萄糖，使用复杂，现在几乎不再用保存心肌，低温对器官保存十分重要。UW液在0－4度条件下保存效果最好，HTK液在4度和8度时的保存效果无明显差别。     

对四种心肌保存液保存效果的评价

本文评价了4种心肌保存液的保存效果。结论是HTK液和UW液是良好的心肌保存液,尤其是HTK液保存效果优于UW液。Celsior液仅可用于心脏保存,对其它器官的保存效果还有待于进一步观察。Euro-Collins液中含有葡萄糖,使用复杂,现在几乎不再用于保存心肌。低温对器官保存十分重要。UW液在0～4℃条件下保存效果最好,HTK液在4℃和8℃时的保存效果无明显差别。     

多器官保存液组成探讨

本文综述了器官保存的原理及要求，指出一种成功的器官保存液的组成应满足五个要求：１、减少由于低温保存导致的细胞水肿；２、防止细胞的酸化作用；３、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；４、防止氧自由基损伤；５、提供再生高能磷酸化合物的底物。并对ＵＷ、ＨＴＫ液的各个组成部分进行了分析和探讨。     

人异体骨软骨移植物保存方法研究

[目的]探讨六种保存方法对人关节软骨组织结构和细胞活性的影响,寻求一种保存效果较好的方法,为临床提供一种有活性的异体骨软骨移植物.[方法]自捐献新鲜尸体膝关节利用专用手术器械获取4.5 mm ×4.5 mm大小的人骨软骨块,分别采用梯度降温法、Co60射线照射+梯度降温法、玻璃化法、连续降温法、直接液氮法和酒精浸泡法对软骨块进行保存处理,分别于保存第8、15、30、60d时,采用蕃红-O组织染色、扫描电镜、软骨细胞胎盼蓝染色、MTT法等,观察并比较以上6种方法保存后关节软骨细胞存活率及其代谢功能变化.[结果]除了酒精保存方法外,其余保存方法随着时间延长软骨组织的细胞成活率和细胞代谢活性逐渐降低;保存60d时,采用玻璃化法保存软骨组织的细胞存活率为62.47％,软骨基质成分丢失较少,胶原纤维断裂不明显;采用慢速梯度降温法保存软骨组织的细胞存活率为59.75％,软骨基质成分丢失较多,胶原纤维断裂明显;其他保存方法软骨细胞存活率不足40％,软骨基质成分大量丢失,胶原纤维杂乱.[结论]六种保存方法中,玻璃化保存法能够较好的保存关节软骨,活性最好,其次是梯度降温保存法,两者均具有一定临床价值.Co60射线照射对软骨细胞有一定的损伤作用;酒精浸泡不能保存软骨细胞活性.