胚胎玻璃化冷冻技术在辅助生殖治疗中的应用

目的探讨人类卵裂期胚胎玻璃化冷冻在临床治疗中的应用效果。方法经患者知情同意后,将实施体外受精一胚胎移植术患者第3天移植后剩余的符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。如果新鲜周期妊娠失败,根据患者情况解冻胚胎,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻84个周期,解冻胚胎207枚,解冻后存活胚胎198枚,存活率为95．7％;完整存活胚胎187枚,完整存活胚胎率为90．3％;种植胚胎41枚,种植率为19．8％;临床妊娠28倒,临床妊娠率为33．3％。早期流产3例,足月分娩5例,20例继续妊娠。结论玻璃化冷冻法适于人类早期胚胎的冷冻保存,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

不同胚胎冷冻方法对人类早期胚胎解冻后的复苏效果及临床结局的影响

目的 比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对人类早期胚胎解冻后复苏效果及临床结局的影响.方法 辅助生殖技术获取的剩余可利用人类胚胎2 884枚,其中采用玻璃化冷冻复苏666个周期,解冻胚胎1 516枚、复苏1 383枚、移植胚胎1 375枚;程序化冷冻复苏506个周期,解冻胚胎1 368枚、复苏1 090枚、移植1 077枚.比较两种方法的复苏效果及临床结局.结果 玻璃化冷冻组胚胎复苏率、胚胎完整率分别为92.02％、92.11％,高于程序化冷冻组的79.68％、69.63％(P＜0.05);两组种植率、临床妊娠率、周期取消率、多胎妊娠率、早期流产率、新生儿胎龄、早产率、新生儿出生体重、出生缺陷率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 玻璃化冷冻较程序化冷冻有更高的胚胎复苏率及胚胎完整率,胚胎利用率高,两种冷冻方法的临床结局相似,适用于人类胚胎的冷冻.     

玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类胚胎中的应用价值。方法选择2014年3月~2016年2月在我院生殖中心做试管婴儿的264例不孕不育患者,经患者知情同意后,将实施体外受精-胚胎移植术患者卵裂期胚胎和囊胚符合冷冻标准的胚胎进行玻璃化冷冻保存。根据患者情况解冻胚胎移植,观察胚胎复苏后的临床妊娠效果。结果玻璃化冷冻74个周期,解冻胚胎149枚,解冻后存活胚胎147枚,存活率98.66%;种植胚胎56枚,种植率38.10%;临床妊娠42例(单胎27例,双胎14例,宫外孕1例),临床妊娠率为56.76%。结论玻璃化冷冻法是人类胚胎保存的优选方法,获得了理想的复苏率、种植率和妊娠率。     

人卵子玻璃化冷冻原因及其技术在辅助生殖中的应用

目的探讨人卵子玻璃化冷冻的原因及其技术在辅助生殖中的可行性和临床应用价值。方法回顾性研究2008年1月~ 2018年10月在南方医科大学南方医院生殖医学中心行卵子玻璃化冷冻的26例患者共27个取卵周期,分析卵子玻璃化冷冻原 因、卵子解冻后受精情况及临床妊娠结局。结果26例患者27个取卵周期共冷冻卵子274枚,卵子冷冻原因主要包括取卵日男 方精子数量及质量差无可用精子、男方处于各种疾病急性期不适宜取精及男方因各种原因未能到场取精等。共19个周期行卵 子解冻,该19个周期共冻存卵子217枚,解冻后存活176枚,卵子解冻存活率81.11%,其中131枚卵子解冻后行卵胞浆内单精子 注射,正常受精98枚,正常受精率74.81%;卵裂88枚,卵裂率89.80%（88/98）;共形成可移植胚胎53枚,其中优质胚胎36枚,优 质胚胎率36.73%（36/98）。15个移植周期共移植胚胎27枚,临床妊娠率为53.33%（8/15）,活产率为33.33%（5/15）。随患者年龄 增加,与<35岁组相比,≥35岁组患者卵子复苏率（82.76% vs 74.42%,P=0.211）、临床妊娠率（77.78% vs 16.67%,P=0.041）及活 产率（55.56% vs 0,P=0.044）均呈下降的趋势。结论卵子玻璃化冷冻可作为不孕夫妻取卵当日因男方因素不能提供精子患者 的临床补救措施;卵子玻璃化冻融后的受精率、临床妊娠率结局良好,卵子复苏率与年龄存在相关性,女性≤35岁者冻卵能够获 得满意的临床妊娠结局。     

程序化与玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局比较

目的比较程序化和玻璃化冷冻保存人D2和D3胚胎的临床结局,分析探讨不同冷冻方法对人D2和D3胚胎冷冻的影响。方法回顾性分析了本中心170个D2和D3胚胎复苏周期,比较程序化和玻璃化冷冻复苏后的存活率、卵裂球存活指数、完胚率、≥1完胚移植率、种植率、临床妊娠率、流产率等指标。结果程序化解冻移植周期47个,存活率73.60%,卵裂球存活指数65.88%,完胚率31.46%,≥1完胚移植率80.85%,胚胎种植率14.17%,临床妊娠率36.17%,流产率11.76%。玻璃化解冻移植周期120个,存活率92.96%,卵裂球存活指数86.49%,完胚率68.04%,≥1完胚移植率90.83%,胚胎种植率18.84%,临床妊娠率35.83%,流产率9.30%。玻璃化冷冻比程序冷冻能显著提高胚胎存活率、卵裂球存活指数和完胚率(P<0.05),但在≥1完胚移植率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率上无显著性差异。无论采用哪种冷冻方法,D2和D3胚胎在所有统计指标上差异均没有显著意义。结论玻璃化冷冻是一种有效的冷冻方法,其复苏存活率、卵裂球存活指数和完胚率均明显高于程序化冷冻,可作为传统程序化冷冻的替代方法。D3胚胎冷冻没有比D2胚胎更有优势,对于工作量较大的IVF实验室可选择D2胚胎冷冻移植。     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法应用玻璃化冷冻保存技术冻存了22例患者的96枚4-16细胞期的早期胚胎。结果对82枚冷冻胚胎进行了解冻,存活65枚,胚胎存活率为79.27%（65/82）,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法。     

卵裂期胚胎、囊胚的玻璃化冷冻解冻的妊娠结果分析

目的 比较卵裂期胚胎、囊胚行玻璃化冷冻解冻后的妊娠结果.方法 回顾性分析2010年6月～2010年9月在该院生殖中心行玻璃化冷冻解冻患者共185周期的妊娠情况;其中卵裂期胚胎冷冻解冻后移植者127周期,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养后移植者42周期,囊胚冻融后移植16周期.结果 玻璃化冷冻解冻患者共185周期,移植176周期,获得妊娠75周期,妊娠率42.61%;卵裂期胚胎冻融后移植者,卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养者,囊胚冻融移植者复苏率分别为96.76%(299/309)、95.83%(161/168)、94.12%(32/34),着床率分别为22.37%(66/295)、23.44%(15/64)、50%(14/28).妊娠率分别为40.94%(52/127)、33.33%(11/33)、75%(12/16).卵裂期胚胎解冻后行囊胚培养的患者共42人,其中有9人未形成可移植囊胚而取消移植.其他两组解冻后没有取消移植的例数.结论 3组的玻璃化冻融复苏率无统计学差异.囊胚冷冻解冻能获得较高的着床率和妊娠率.     

剩余胚胎继续培养囊胚的潜在价值

目的:探讨在新鲜周期中,经ⅣF/ICSI-ET、冷冻后的剩余胚胎在体外继续培养至囊胚的意义。方法:在新鲜周期中,将D3天发育的胚胎选择评分较高的进行移植,部分胚胎玻璃化冷冻保存后,所剩余的胚胎通过序贯微滴培养法在体外继续培养至囊胚阶段,将优质囊胚进行玻璃化冷冻。在未妊娠患者下一周期将其解冻、移植,比较同时期D3通过玻璃化冷冻解冻移植后的卵裂期胚胎与囊胚期胚胎的植入率、妊娠率、单胎率和多胎率。结果:422例不孕症患者D3天移植冷冻后剩余的胚胎1842枚形成囊胚437枚(23.72%),优质囊胚315枚(17.10%);将优质囊胚行玻璃化冷冻;其中42例患者的62枚囊胚在下一周期解冻后移植,其植入率(41.94%)极显著高于243例患者的536枚卵裂期胚胎解冻后移植的植入率(20.90%)(P<0.01);而妊娠率(54.76%)显著高于解冻后卵裂期胚胎的妊娠率(36.63%)(P<0.05);但是单胎率(71.26%vs 85.71%)和多胎率(28.74%vs 13.64%)无显著差异(P>0.05)。结论:囊胚体外培养可以筛选出具有发育潜能的剩余胚胎,最大限度地利用胚胎,从而提高可用胚胎数和临床妊娠率。     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

实施ICSI后对复苏胚胎的妊娠结局

目的 讨论卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection ICSI)与常规体外受精(in vitro fetrilizationⅣF)受精方式对冷冻胚胎的解冻和移植后对临床妊娠的影响.方法 慢速冷冻IVF或ICSI周期中剩余的优质胚胎,随后用快速融解法复苏后进行移植.观察各组胚胎冷冻解冻后的胚胎存活率及相关指标和临床妊娠率.结果 50例患者中,IVF组为30个周期,妊娠4例,妊娠率为13.33%,ICSI组为20个周期,妊娠5例,妊娠率为25%,ICSI组冷冻胚胎优胚率、复苏后胚胎存活率、存活胚胎累积细胞数与复苏胚胎的累积细胞数百分比(累积细胞存活率)和存活胚胎累积评分与复苏细胞累积评分的百分比(累积评分率)有显著差异.结论 冷冻胚胎的优胚率及复苏后获得高质量的胚胎是影响解冻胚胎移植的临床妊娠率重要因素.     

玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻中的应用价值

目的：观察采用玻璃化冷冻技术行全胚胎冷冻后解冻移植患者的临床结局,并与同期新鲜周期移植患者相比较,探讨玻璃化冷冻技术在全胚胎冷冻并行复苏移植中的应用价值。方法：全胚胎冷冻组为体外受精(IVF)未移植患者40个周期,新鲜周期组为同期体外受精及胚胎移植（IVF-ET）患者300例,对2组的平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度、雌二醇（E2）水平、临床妊娠率进行比较。结果：2组之间在平均移植胚胎数、优质胚胎数、子宫内膜厚度方面的差异均无统计学意义（P＞0.05）;新鲜周期组的E2水平明显高于全胚胎冷冻组（P<0.05）, 临床妊娠率明显低于全胚胎冷冻组（P<0.05）。结论：玻璃化冷冻技术是一种简便、可靠、高效的胚胎冷冻技术;对于符合要求的患者,全胚胎冷冻并适时行冻胚移植是可行的胚胎移植策略,值得临床深入研究和推广。     

囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用探讨

目的探讨囊胚期冷冻胚胎移植的临床应用价值.方法对2002年10月～2003年12月在湘雅医院生殖医学中心接受囊胚培养并行囊胚期冷冻胚胎移植的病例进行分析,了解囊胚期与卵裂期冷冻胚胎解冻后的胚胎成活率、植入率及妊娠率.结果冷冻囊胚解冻后胚胎数、胚胎成活率、植入率和妊娠率与卵裂期冷冻胚胎无显著差别(P＞0.05),囊胚解冻后经15 h过夜培养,42枚中有22枚成活,其中8枚Ⅰ,Ⅱ级继续发育或囊胚腔扩张,3例获得妊娠,妊娠率为37.5%.结论囊胚期冷冻胚胎移植同样能达到卵裂期冷冻胚胎移植的临床效果,同时增加解冻与移植间隔时间可更好地选择冻融囊胚移植,对提高妊娠率可能有一定意义.     

玻璃化冷冻在卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻中的应用

目的比较慢速程序化冷冻法(慢速法)和玻璃化冷冻法(玻璃化法)对卵巢过度刺激综合征全胚胎冷冻分裂期胚胎发育潜能的影响。方法选择为避免过度刺激而行全胚胎冷冻的不孕患者162例,按其冷冻方法的不同,分成慢速程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,并对其随后进行首次解冻移植的胚胎复苏率、胚胎种植率、妊娠率和多胎妊娠率进行分析。结果玻璃化冷冻组72例胚胎解冻后,其溶解率、复苏率、种植率、妊娠率、多胎妊娠率分别为7.84%、96.08%、52.38%、69.44%和50.00%,慢速程序化冷冻组90例胚胎解冻后,上述指标分别为17.79%、90.38%、30.32%、52.22%和19.15%,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论玻璃化冷冻法能够更好地保存胚胎复苏后的发育潜能,更适合卵巢过度刺激综合征患者胚胎的冷冻保存。     

卵母细胞玻璃化冻融获成功妊娠1例

目的 探讨玻璃化冷冻方法在冷冻保存卵母细胞中的临床应用价值.方法 2015年3月在我中心行卵母细胞玻璃化冷冻1例,于2015年7月行玻璃化解冻,行卵胞浆内单精子注射受精,获得胚胎后进行移植和冷冻.结果 共冷冻13枚卵母细胞,解冻后存活12枚(92.3％),对12枚成熟卵母细胞行单精子卵浆内显微注射,9枚(75.0％)正常受精,8枚(88.9％)卵裂,再次解冻移植获单胎妊娠,现正在妊娠中.结论 玻璃化冻融卵母细胞是一种方便可行的方法,在特殊情况下发挥着不可替代的作用,可以获得临床妊娠.     

玻璃化冷冻人卵母细胞体外受精－胚胎移植9例临床分析

目的：探讨人卵母细胞玻璃化冷冻在体外受精－胚胎移植（ IVF-ET）中的应用效果。方法行IVF-ET 治疗、因取卵日男方因素无法进行受精的患者9例,对其成熟卵子进行玻璃化冷冻保存,解冻后进行卵胞浆内显微授精（ICSI）,记录卵子复苏、受精、卵裂及移植后妊娠情况。结果9例患者共解冻复苏58枚卵子,复苏率68．2％（58／85）;复苏后进行ICSI的成熟卵子中,受精40枚,形成胚胎34枚,受精率69．0％,卵裂率85．0％。7个移植周期共移植胚胎15枚,临床妊娠3例,临床妊娠率42．9％。结论人卵母细胞玻璃化冷冻可以获得一定的临床妊娠率,在IVF-ET中可作为临床治疗的选择之一。     

玻璃化冷冻囊胚复苏移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的妊娠结局比较

目的比较玻璃化冷冻囊胚复苏后移植与玻璃化冷冻胚胎复苏后继续培养至囊胚移植的临床妊娠结局。方法回顾性分析2013年1月至2014年12月在郑州大学第二附属医院生殖中心行玻璃化冷冻复苏后移植囊胚的不孕症患者134例(134个周期)的妊娠情况,其中卵裂期胚胎培养至囊胚冷冻复苏后移植者79个周期(A组),卵裂期胚胎冷冻复苏后继续培养至囊胚再移植者55个周期(B组)。比较2组患者临床妊娠率、着床率及早期流产率。结果 A组79个周期,复苏囊胚数151个,存活囊胚数133个,复苏率88.08%(133/151);获得可移植囊胚72个周期,妊娠周期46个,妊娠率为63.89%(46/72),着床率51.56%(66/128),早期流产率为15.21%(7/46)。B组55个周期227个胚胎,复苏存活170个胚胎,复苏率74.89%(170/227);其中45个周期共形成可移植囊胚93个,囊胚形成率为54.70%(93/170);获得妊娠周期23个,妊娠率为51.11%(23/45),着床率为36.56%(34/93),早期流产率13.04%(3/23)。A组囊胚复苏率高于B组卵裂期胚胎复苏率(P<0.05),且A组着床率显著高于B组(P<0.05),但2组临床妊娠率、流产率、异位妊娠率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论玻璃化冷冻囊胚复苏移植能获得较高的着床率和妊娠率,囊胚可能是玻璃化冷冻胚胎的较好阶段。     

玻璃化冷冻法保存人类胚胎干细胞

[目的]探讨玻璃化冷冻方法保存人类胚胎干细胞的效率.[方法]冷冻保存人类胚胎干细胞,按冷冻方法的不同分为玻璃化冷冻组和慢速冷冻组,比较两组解冻后人类胚胎干细胞的细胞复苏率、克隆生长与分化情况,并比较分析解冻后的与未经冷冻的胚胎干细胞的生长、分化情况,鉴定解冻后人类胚胎干细胞的全能性.[结果]玻璃化冷冻组与慢速冷冻组解冻后的细胞复苏率分别为81.9%和22.8%(P＜0.001).慢速冷冻组解冻后克隆生长较玻璃化冷冻组缓慢且更易分化.两组未分化的胚胎干细胞继续培养的生长与分化情况一致.玻璃化冷冻组解冻后第6代人类胚胎干细胞染色体核型正常,SSEA-4、SSEA-3阳性,表达OCT-4基因.人类胚胎干细胞来源的畸胎瘤包含了来源于3个胚层的组织细胞.[结论]玻璃化冷冻是保存人类胚胎干细胞的有效方法,解冻后的干细胞在继续培养过程中仍可保持其正常核型和全能性.     

玻璃化与程序化两种不同胚胎冻融方法的临床应用效果比较

目的探讨玻璃化与程序化冻融胚胎的临床应用价值。方法回顾分析广西壮族自治区人口和计划生育研究中心的609个胚胎冷冻周期,其中366个程序化胚胎冻融周期与243个玻璃化冻融周期,比较两种不同冻融方法的胚胎复苏率、胚胎移植率、胚胎种植率、临床妊娠率等指标。结果玻璃化冷冻法与程序化冷冻法比较,其胚胎复苏率（94.75%,74.13%）、解冻移植率（97.94%,87.98%）、种植率（28.88%,16.94%）和临床妊娠率（42.86%,30.75%）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论玻璃化冷冻法比程序化冷冻法更适于人类胚胎的冷冻保存。     

麦管玻璃化法冻存人早期胚胎的临床应用

目的探讨麦管玻璃化法冷冻技术的临床应用效果。方法应用麦管玻璃化法冷冻技术保存17例患者的116枚4～8细胞期胚胎。结果复苏了7例患者的37枚胚胎,存活25枚,胚胎存活率为67.56%,其中完整胚胎24枚,移植23枚,种植2枚,种植率为8.69%(2/23),1例获得妊娠,妊娠率为12.5%(1/8),并足月剖宫产一健康女活婴。结论麦管玻璃化法是一种可应用于临床的冷冻保存人早期卵裂期胚胎的技术。     

解剖、生理和组胚学

081623封闭式拉细麦管法玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床结果观察/童先宏…∥现代妇产科进展.—2008,17(8).—613～615,619该文作者在早期实验研究的基础上,用自制的封闭式拉细麦管冷冻保存的人类早期胚胎,一共复苏了151个周期,464枚胚胎,丢失胚胎27枚,胚胎存活率88.79%(388/437),移植周期临床妊娠率21.77%(32/147),种植率9.52%(36/378),流产率12.5%(4/32),诞生18例健康婴儿。IVF组、ICSI组、IVM组三种助孕方式获得的胚胎解冻后的胚胎存活率、临床妊娠率、种植率均无差异(P>0.05)。冷冻前胚胎质量对解冻后移植周期的临床妊娠率有明显的影响。当移植至少一枚Ⅰ级或Ⅱ级胚胎时,其临床妊娠率、种植率和流产率分别是28.72%和12.02%和0%,流产率低于常规的新鲜胚胎移植流产率。作者认为,与采用Cryoloop和Cryotip为装载容器的玻璃化冷冻方法相比,该法的临床妊娠相近,但避免了液氮潜在的污染,是冷冻早期胚胎理想的方法。表3参12(周继铭)081624两种短效曲普瑞林降调节方案诱发排卵效果比较/裴莉…∥现代妇产科进展.—2008,17...