ELISA法测定血清S100B蛋白

目的建立ELISA测定血清S100B蛋白的方法。方法制备S100B单克隆和多克隆抗体,以双抗体夹心法测定血清S100B蛋白。结果方法的平均回收率为93.7%-104%,批内及批间平均变异分别为3.7%和5.9%,方法的线性为0-12.5μg/l,参考值范围为0.14-0.38μg/l。结论该法简便、快速、特异、敏感,适于临床常规应用。     

ELISA法测定血清S100B篮白

目的 建立ELISA测定血清S100B蛋白的方法.方法 制备S100B单克隆和多克隆抗体,以双抗体夹心法测定血清S100B蛋白.结果 方法的平均回收率为93.7%-104%,批内及批间平均变异分别为3.7%和5.9%,方法的线性为0-12.5μg/l,参考值范围为0.14-0.38μg/l.结论 该法简便、快速、特异、敏感,适于临床常规应用.     

血清S100B蛋白的检测方法综述

S100B蛋白是一种小分子钙结合蛋白,约96%表达于脑内胶质细胞中。血清中S100B蛋白浓度较低,但在一些脑损伤所导致的病理状态下则可透过血脑屏障而急性升高,并且其升高的程度与神经系统疾病的病情及预后具有密切关系,被认为是脑的特异性蛋白。因此,准确、方便且快捷的S100B检测方法对临床和科研工作尤为重要。本文根据近年来的相关文献,对S100B蛋白现有的检测方法及对比研究进行综述。     

抗卵巢抗体ELISA间接检测法的建立与临床应用

抗卵巢抗体ＥＬＩＳＡ间接检测法的建立与临床应用张毅林，黄邱朝，武建国（南京军区南京总医院临床免疫科，南京２１０００２）抗卵巢抗体（ａｎｔｉｏｖａｒｉａｎａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ＡＯＡｂ）是一种针对卵巢颗粒细胞、卵母细胞和激素生成细胞的自身抗体。目前检测...     

血清S-100b蛋白自身抗体与精神分裂症的相关性研究

目的研究精神分裂症患者病程、症状、疗效与血清抗S-100b蛋白自身抗体的关系。方法用间接ELISA检测153例正常人、32例连续服抗精神药物的复发精神分裂症患者、入院前至少14 d未服抗精神药物并完成12周治疗的复发精神分裂症60例及30例初发精神分裂症患者血清抗S-100b蛋白自身抗体;病人入院时及完成12周治疗后应用PANSS量表对患者进行精神分裂症阴、阳性症状评定。结果抗S-100b蛋白自身抗体阳性率初发病组与复发组相比有显著差异(P<0.01);复发组之间病程长短无显著差异(P>0.05)。精神分裂症患者入院初抗S-100b蛋白自身抗体,与PANSS量表评分呈现正相关(r=0.28,P<0.05);进一步观察与PANSS量表的N(阴性症状)呈正相关(r=0.33,P<0.05),60例精神分裂症患者,治疗有效组与治疗无效组抗S-100b蛋白自身抗体比较无差异(P>0.05)。结论抗体与分裂症患者病程及严重程度相关,并与阴性症状呈正相关;在治疗过程中治疗是否有效与抗体无关。     

血清S-100b蛋白自身抗体与精神分裂症的相关性研究

目的研究精神分裂症患者病程、症状、疗效与血清抗S-100b蛋白自身抗体的关系。方法用间接ELISA检测153例正常人、32例连续服抗精神药物的复发精神分裂症患者、入院前至少14d未服抗精神药物并完成12周治疗的复发精神分裂症60例及30例初发精神分裂症患者血清抗S-100b蛋白自身抗体;病人人院时及完成12周治疗后应用PANSS量表对患者进行精神分裂症阴、阳性症状评定。结果抗S-100b蛋白自身抗体阳性率初发病组与复发组相比有显著差异（P〈0．01）;复发组之间病程长短无显著差异（P〉0．05）。精神分裂症患者入院初抗S-100b蛋白自身抗体,与PANSS量表评分呈现正相关（r=0．28,P〈0．05）;进一步观察与PANSS量表的N（阴性症状）呈正相关（r=0．33,P〈0．05）,60例精神分裂症患者,治疗有效组与治疗无效组抗S-100b蛋白自身抗体比较无差异（P〉0．05）。结论抗体与分裂症患者病程及严重程度相关,并与阴性症状呈正相关;在治疗过程中治疗是否有效与抗体无关。     

抗环胞素A结合蛋白自身抗体的ELISA测定法和临床初步应用

抗环胞素Ａ结合蛋白自身抗体的ＥＬＩＳＡ测定法和临床初步应用张文辉（温洲医学院一附院，浙江温洲３２５０００）李晓军，丁庆，武建国（南京军区南京总医院）环胞素Ａ结合蛋白（ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎＡ－ｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＣｓＡ－ｂＰ）是一种在真核细...     

血清高敏C反应蛋白及S100B蛋白与脑出血关系的研究

目的 探讨血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)及S100B蛋白水平与脑出血病情、出血量及预后的关系.方法 对脑出血患者155例分型,用免疫透射比浊法测定hs-CRP含量,用双抗体夹心ELISA法测S100B蛋白含量,观察二者水平与脑出血病情、出血量及预后的关系.结果 ①腩出血病情愈重,血清hs-CRP及S100B蛋白含量愈高(P<0.01);②脑出血患者出血量愈多,ks-CRP及S100B蛋白含量愈高(P<0.01);③hs-CRP及S100B过高者,脑出血预后不良.④hs-CRP及S100B水平呈正相关(r=0.7,P=0.001).结论hs-CRP及S100B水平是判断脑出血患者病情和预后的良好监测指标.     

S100B检测的临床应用进展

S100蛋白是一种酸性钙离子结合蛋白，因其在中性pH硫酸铵中溶解度为100％而得名。近年来研究表明，患有神经系统疾病和其他一些疾病的患者血清中S100B蛋白浓度显著增高，S100B被认为是神经组织生化标志物。测定S100B蛋白浓度有助于临床上判断神经组织的病变程度、治疗效果和预测患者的预后等。现根据近年来的文献报道，对S100B蛋白的生物学基础、生理变化、检测方法及临床应用进展综述如下。     

ELISA检测脑脊液S100B蛋白及临床意义

Ｓ１００蛋白是广泛分布于不同组织的一类分子量较小（９～１３ ｋｕ）的ＥＦ臂型钙结合蛋白，目前已发现该家族至少有１９个成员，Ｓ１００Ｂ（旧称Ｓ１００β）９６％存于脑组织中，因而被认为是脑特异性蛋白［１，２］。近年来，动物实验和；临床发现，脑血管疾病和脑损伤后，脑脊液和血清中Ｓ１００Ｂ含量升高，可作为中枢神经系统疾病的标志物。我们建立了抗Ｓ１００Ｂ蛋白单隆抗体为包被抗体，抗Ｓ１００多克隆抗体为检测抗体的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ，对中枢神经系统损伤患者以及正常对照（无中枢神经系统损伤，无肿瘤）病人脑脊液Ｓ…     

间接酶联免疫吸附试验检测血清抗凝血酶原抗体

目的 建立人抗凝血酶原抗体IgG、IgM的间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法.方法 纯化人凝血酶原浓度10 μg/ml包被于高吸附活性的聚氯乙烯微孔中,用山羊血清封闭,血清在Tirs盐酸缓冲生理盐水并含有1%牛血清清蛋白的溶液中按1∶100稀释,第2抗体为辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG或IgM,稀释度为1∶10 000,以四甲基联苯胺为底物,1 mmol/L HCl为终止液建立的ELISA反应体系检测血清中的抗凝血酶原抗体(aPT)-IgG与IgM.结果 本实验建立检测血清中aPT-IgG、IgM的ELISA法,稳定性、特异性及重复性佳,与国外商品试剂盒有很好的相关性,有较好的准确度及精密度.结论 本实验应用的间接ELISA半定量检测aPT,适合于实验研究及临床应用.     

Measurement of gp210 autoantibodies in sera of patients with primary biliary cirrhosis

Primary biliary cirrhosis (PBC) is an autoimmune liver disease with unknown etiology. Patients with PBC have antimitochondrial autoantibodies (AMA) and additionally 50% of them have antinuclear antibodies (ANA). A 15-amino acid fragment (DRKASPPSGLWSPAY) from the C-terminal part of the nuclear envelope glycoprotein gp210 has been proposed as one of the antigenic targets for ANA. The aim of this work was to develop an immunoenzymatic assay for determination of gp210 autoantibodies using for its binding a synthetic pentadecapeptide derived from the gp210 amino acid sequence and to determine level of these autoantibodies in sera of patients with PBC and other autoimmune liver diseases from Poland. Polystyrene microtitration plates coated with the synthetic peptide were consecutively incubated with diluted sera, anti-human immunoglobulin G (IgG) antibodies conjugated with horseradish peroxidase, and with tetramethylobenzidine. Optical density (OD) was read at 450 nm. The mean values of the intra- and interassay of variation coefficients of the test were 4.1 and 10.2%, respectively. Anti-gp210 was detected in 44% of PBC patients and in 6% of patients with PSC. The results were negative for healthy blood donors and other controls. The specificity of the test was 99%, so the anti-gp-210 autoantibodies estimated on DRKASPPSGLWSPAY can be a reliable marker of PBC.     

血清中心肌肌钙蛋白Ⅰ自身抗体的检测及临床意义

[目的]建立血清中心肌肌钙蛋白I（cTnI）自身抗体的ELISA检测方法,探讨其在冠心病诊断中的临床意义。[方法]采用间接ELISA方法,检测90例冠心病患者血清,其中急性心肌梗死（AMI）患者30例,不稳定性心绞痛（UA）患者30例,稳定性心绞痛（SA）患者30例,另健康对照者30例,进行比较和统计学分析。[结果]cTnI自身抗体阳性率在冠心病各组明显高于健康对照组,AMI组阳性率高于UA组,uA组高于SA组。[结论]cTnI自身抗体的出现与心肌损伤程度显示呈正相关,对病情严重程度的判定具有一定意义。     

急性脑卒中患者血清S-100B蛋白的检测

目的 讨论急性脑卒中患者血清S-100B蛋白的表达规律及临床意义.方法 用ELISA法对70例急性脑卒中患者发病24 h内的血清S-100B蛋白含量及健康对照组40例进行检测.结果 急性脑卒中缺血性和出血性患者血清S-100B蛋白含量均显著高于健康对照组(P＜0.01);急性脑卒中缺血性和出血性患者血清S-100B蛋白含量比较,差异无统计学意义(P＞0.05);脑卒中含量高低与病情严重程度有密切关系.结论 血清S-100B蛋白的含量可作为急性脑卒中病情监测的指标.     

冠心病患者血清中相关自身抗体的检测及临床意义

目的：探讨血清中抗氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体和抗内皮细胞抗体(AECA)这2种自身抗体与冠状动脉粥样硬化的关系。方法：分别用酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)检测118例冠状动脉硬化性心脏病患及44名健康对照血清ox-LDL和AECA水平，同时用生化方法检测其血脂水平。结果：冠心病组血清抗ox-LDL抗体阳性率为32．20％，明显高于正常对照组阳性率6．82％．(P=-0．001)；血清抗内皮细胞抗体阳性率冠心病组为38．14％，健康对照组为13．64%(P=0．002)。在血脂正常的冠心病组中抗ox-LDL抗体阳性率25．00％也高于正常对照组(P=0．045)。结论：血清中上述2种自身抗体阳性率与冠状动脉粥样硬化密切相关，而且抗ox-LDL抗体阳性率与血脂无明显相关性，自身免疫反应是动脉粥样硬化的一种可能的发病机制。     

70例急性脑梗死患者血清OX—LDL及S—100B蛋白检测分析

目的讨论急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白的表达规律及临床意义。方法用ELISA法检测70例急性脑梗死患者发病24h内及40例正常时照组血清OX-LDL、S-100B蛋白含量。结果急性脑梗死患者血清0X—LDL、S-100B蛋白含量均显著高于正常对照组（P〈0．01）,它们分别为（615．9±197．6）μg／L、（0．884±0．594）μg／L;正常对照组为（158．6±68．4）μg／L、（0．065±0．02）μg／L。急性脑梗死患者血清OX-LDL、S-100B蛋白含量呈正相关（r=0．536,P〈0．01）,且含量高低与病情严重程度有密切关系。结论血清OX-LDL、S-100B蛋白的含量可作为急性脑梗死病情监测的指标。     

层粘连蛋白的ELISA检测

应用本室的制备的两株抗人胎盘层粘连蛋白（ＬＮ）单克隆抗体３Ａ１５和１Ｂ５及ＬＮ标准，建立了测定血清Ｌ怕双单放夹心ＥＬＩＳＡ法，本法稳定，检测下限为１０μｇ／Ｌ，在１０－５００μｇ／Ｌ之间呈线性关系，两份样本批内平均ＣＶ为６．８％和９．２％，批间ＣＶ为５．６％和６．１％，回收率平均为８８％。     

定量酶联免疫吸附试验检测各种结缔组织病患者血清中的抗可提取核抗原抗体

目的　定量检测各种结缔组织疾病 (CTD)患者血清中抗可提取核抗原 (ENA)自身抗体滴度 ,并探索其临床意义。方法　自制抗各种ENA单克隆抗体 ,以夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)定量检测 1 2 8例CTD患者、5 0例非CTD患者及 6 0名健康人血清的各种抗ENA自身抗体滴度。用健康人血清各ENA抗体滴度的均数加上 3倍标准差 ( x +3s)为cutoff值 ,界定各种ENA抗体检出率。结果　与健康对照组和非CTD患者组比较 ,抗Sm抗体在系统性红斑狼疮 (SLE)、抗ul RNP抗体在SLE和混合性结缔组织病 (MCTD)、抗SSA和SSB在干燥综合征 (SS)、抗Scl 70抗体在系统性硬化病 (PSS)、抗Jo 1抗体在多发性肌炎 /皮肤炎 (PM/DM)患者中的水平和阳性率都明显升高 (P <0 .0 1 )。结论　定量检测CTD患者血清中各种ENA抗体滴度 ,对CTD疾病的鉴别、诊断和分型具有重要价值     

自身抗体临界值质控血清的制备及评价

目的探讨自身抗体临界值质控血清的制备并对其进行评价。方法将献血员血清置于56℃30min灭活,离心去除沉淀后,按1∶2、1∶4、1∶6稀释比例检测试剂盒中多批号的阳性对照质控物。结果抗RNP/Sm抗体（＋＋＋）：1∶2稀释后,显色程度均为＋＋＋;1∶4、1∶6稀释后,显色程度均为＋＋。抗SS-A抗体（＋＋~＋＋＋）：1∶2稀释后,显色程度均为＋＋;1∶4、1∶6稀释后,显色程度为＋~＋＋。抗RO-52抗体（＋＋~＋＋＋）：1∶2稀释后,显色为＋~＋＋;1∶4、1∶6稀释后,显色程度为＋。抗核小体抗体：1∶1、1∶2稀释后可出现阳性;1∶4、1∶6稀释后,显色均为阴性。结论自身抗体质控血清制备方便,质量可靠,可满足临床检测室内质控需要。