HPLC-ELSD测定六味地黄胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：用高效液相色谱-蒸发光散射检测法（HPLC-ELSD）同时测定六味地黄胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：采用Agilent TC-C18 色谱柱（250 mm× 4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.5%醋酸的水溶液（84∶16）;柱温为30 ℃;体积流量为1.0 mL·min-1;ELSD检测器的漂移管温度为40 ℃,氮气为载气,载气流量为2.0 L·min-1。结果：熊果酸在0.176～1.584 mg·mL-1与峰面积积分值成良好的对数线性关系,r＝0.999 1,平均加样回收率为101%,RSD值为1.4%（n=6）;齐墩果酸在0.079～0.709 mg·mL-1与峰面积积分值成良好的对数线性关系,r＝0.999 6,平均加样回收率为98.1%,RSD值为1.2%（n=6）。结论：本法准确、简单,重复性好,可用于同时测定六味地黄胶囊中熊果酸和齐墩果酸的含量。     

高效液相色谱法同时测定鼠曲草中槲皮素与木犀草素的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鼠曲草中槲皮素与木犀草素的含量。方法：采用Diamonsil C18(2)色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）,以甲醇-0.4%磷酸（42∶58）为流动相,检测波长为360 nm,柱温为30℃,流速为1 mL·min-1,进样量为20 μL。结果：槲皮素、木犀草素浓度分别在3.588-35.880 μg·mL-1（R2=0.9996）,1.294-12.940 μg·mL-1（R2=0.9994）范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均回收率（n=6）分别为99.51% （RSD=0.31%）、99.74%（RSD=2.28%）。不同产地的鼠曲草中槲皮素和木犀草素的含有量范围分别为0.39- 0.58 mg·g-1、0.17-0.27 mg·g-1。结论：该方法操作简便,结果准确,重复性良好,可作为鼠曲草中槲皮素和木犀草素含量的测定方法,对鼠曲草的质量控制有一定的参考价值。     

HPLC法测定青蒿素哌喹片中哌喹的含量及相关物质

目的：建立青蒿素哌喹片中哌喹的含量测定及有关物质的检测方法,并建立哌喹有关物质限度。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为SHISEIDO CAPCELL PAK C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,以乙腈∶0.1%三氯乙酸溶液∶三乙胺（18∶82∶0.2,磷酸调节pH至2.5）为流动相,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为216 nm（有关物质测定）和237 nm（含量测定）。结果：哌喹与各主要杂质及强制破坏产生的降解产物的杂质峰均分离良好,哌喹在0.01-0.2 mg·mL-1范围内与峰面积线性关系良好,R2=0.999 9,回收率为98.14%（RSD=0.77%,n=9）,最低检出限为0.06 μg·mL-1,供试品溶液在12 h内稳定。结论：该方法专属性强,准确、灵敏,可用于青蒿素哌喹片中哌喹含量测定和有关物质检测。     

扎来普隆含量测定方法的研究

 目的 建立测定原料及胶囊中扎来普隆含量的方法。方法 用高效液相色谱法，色谱柱为Waters Spherisorb S5 ODS2(5 μm,4.6 mm×250 mm)分析柱，流动相为甲醇-0.01 mol·L^-1磷酸溶液（57∶43），流速1.0mL·min^-1，柱温为25℃，检测波长为231 nm。结果 方法的精密度和稳定性均良好；扎来普隆浓度在0.011?3～0.067 5 mg·mL^-1内，峰面积与浓度呈良好的线性关系（r=0.999?8），平均回收率为99.7%；扎来普隆与其相邻杂质峰的分离度符合要求。结论 方法简便、专属、重现性好，可用于扎来普隆原料及其它制剂的含量测定。     

三种鸡菌属真菌核苷及嘌呤碱基类成分含量测定

目的：以高效液相色谱法测定鸡、灰鸡和黄鸡3种鸡菌子实体中核苷及嘌呤碱基类成分的组成和含量,建立鸡类真菌核苷及嘌呤碱基类成分的控制指标。方法：采用Waters Xbridge C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,流速为0.8 mL·min-1,柱温为30 ℃,检测波长为260 nm。结果：3种鸡菌子实体中均检出次黄嘌呤、黄嘌呤、胞苷、腺苷、鸟苷、尿苷、肌苷等成分,且在质量浓度分别在7.51～120.12、4.99～79.84、25.13～402.00、12.61～201.80、5.03～80.48、5.00～80.00、10.00～160.00 μg·mL-1与峰面积呈良好线性关系（r≥0.999 6）;平均回收率为95.83%～103.01%,RSD≤3.98%（n=6）。鸡中2种嘌呤碱基、5种核苷类成分含量分别为：0.36、3.13、2.20、3.63、1.11、1.87、1.50 mg·g-1;灰鸡含量为：0.10、0.78、1.86、3.07、1.48、1.70、0.62 mg·g-1;黄鸡含量为：0.22、2.53、1.86、2.35、0.78、0.84、0.83 mg·g-1。结论：本实验建立的HPLC测定鸡类真菌中5种核苷及2种嘌呤碱基类成分含量的分析方法简单、重复性好、准确度高,可以为鸡类真菌的质量控制提供参考,3种鸡菌子实体在医疗和营养保健上都有较高的研究价值。     

HPLC测定感冒清热颗粒中升麻苷和5—0—甲基维斯阿米醇苷

目的建立反相高效液相色谱法测定感冒清热颗粒中的升麻苷及5-O-甲基维斯阿米醇苷含量;方法采用APEXODS色谱柱,分别以醋酸钠水溶液(40 mmol·L-1,pH 6.9)-甲醇(6535)和水-甲醇-四氢呋喃(62381)为流动相,检测波长为254nm,流速为0.8mL·min-1;结果升麻苷与5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.72～6.5μg·mL-1与0.92～16.5μg·mL-1范围内峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9999);加样回收率分别为100.3%和94.7%.测得感冒清热颗粒中含有升麻苷0.133mg·g-1和5-O-甲基维斯阿米醇苷0.167mg·g-1.结论该法简便、快速、专属性强.     

HPLC法同时测定金归洗液中绿原酸和蛇床子素的含量

目的 建立同时测定金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 采用HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相为乙腈-0.2 %磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速为1.0 mL·min-1;检测波长为324 nm;柱温为30 ℃。结果 金归洗液中绿原酸和蛇床子素分别在15.23~152.27 μg·mL-1（r=0.9999）,4.35~43.52 μg·mL-1（r=0.9999）范围内浓度与峰面积呈良好线性关系,其平均加样回收率分别为98.13 %,RSD=1.51 %;98.69 %,RSD=0.92 %（n=6）。结论 该方法简单、准确、重复性好,可用于金归洗液中绿原酸和蛇床子素含量的同时测定。     

RP-HPLC测定野菊花中槲皮素、木犀草素、芹菜素和刺槐素

目的：建立HPLC同时测定野菊花中槲皮素、木犀草素、芹菜素和刺槐素含量的方法。方法：Eclipse XDB-C₁₈柱（4.6 mm×250 mm, 5 μm）;流动相A为甲醇,B为0.2%磷酸溶液,线性梯度洗脱;检测波长350 nm;柱温25 ℃;流速1.0 mL·min^-1;进样量20 μL。结果：槲皮素、木犀草素、芹菜素和刺槐素的浓度与峰面积,分别在1.02～20.48 mg·L^-1（r=0.999 4）,1.03～20.54 mg·L^-1 （r=0.999 2）,1.12～22.40 mg·L^-1（r=0.999 5）,1.01～20.22 mg·L^-1 （r=0.999 8）呈良好的线性关系;平均加样回收率依次为101.3%,100.6%,98.4%,99.02%,RSD为1.3%,1.4%,1.7%,0.83%。不同来源的药材间4种测定的黄酮组分及总黄酮含量差异均极显著。结论：该方法快速,简便,重现性好,适合于同时测定野菊花样品中槲皮素、木犀草素、芹菜素和刺槐素的含量。     

2014年1~6月份中药商品进出口分析

目的：建立蒲黄提取物中总黄酮醇苷的UPLC含量测定方法。方法：蒲黄提取物经25%盐酸水解后,应用WATERS UPLC超高效液相色谱仪,BEH C18色谱柱,PDA检测器进行测定。以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相,流速为0.6 mL·min-1,检测波长为370 nm,柱温为35 ℃。结果：槲皮素、山柰酚和异鼠李素浓度分别在1.00～12.0 μg·mL-1、1.10～13.2 μg·mL-1和3.00～36.0 μg·mL-1与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.4%（RSD=1.8%）,98.9%（RSD=2.0%）和99.2%（RSD=2.1%）。蒲黄提取物中总黄酮醇苷按照槲皮素、山柰酚和异鼠李素含量加和折算成总黄酮醇苷含量。结论：建立的蒲黄提取物中总黄酮醇苷的UPLC含量测定方法操作简便、灵敏度高、重现性好,样品处理简便易行,为蒲黄提取物的质量控制提供了有效的手段。     

舒普深、哌拉西林钠的胶束电动毛细管色谱分析

 目的 建立精密、快速简便地测定舒普深 (内含头孢哌酮和舒巴坦)及注射用哌拉西林含量的方法。方法 采用胶束电动毛细管色谱法（MECC）,测定运行液采用pH=7.5的0. 02 mol·L^-1磷酸盐缓冲液,其中含十二烷基硫酸钠(SDS)11 g·L^-1, 正丁醇22 mL·L^-1,正庚烷4 mL·L^-1。分离电压18 kV(运行电流85～95 μA)。结果 3种成分在10～20 min内得到完全分离,选择苯巴比妥作内标,各组分浓度在0.1～2 g·L^-1范围内浓度对内标峰面积之比呈良好线性关系。可准确测定3种成分的含量,批内RSD均小于1%(n=8),3种成分的加样回收率均在94.92%～105.3%之间,RSD均小于3.4%(n=8)。结论 用MECC同时测定头孢哌酮、舒巴坦、哌拉西林钠的含量,方便易行,结果准确可靠。     

薯蓣皂苷片对类风湿性关节炎大鼠血清OPG/RANKL水平表达的干预作用

目的观察薯蓣皂苷片对类风湿性关节炎模型大鼠血清骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达水平的影响。方法 SD大鼠,随机分为6组,每组10只,其中选取10只作为正常组,其余大鼠采用弗氏完全佐剂复制类风湿性关节炎动物模型,并将造模成功的类风湿性关节炎大鼠随机分为模型组、阳性组(甲氨蝶呤组,3.8mg·kg~(-1))、薯蓣皂苷片高、中、低剂量组(10 mg·mL~(-1)、20 mg·mL~(-1)、30mg·mL~(-1)),连续灌胃给药治疗24 d后处死,采用ELISA法检测血清OPG、RANKL水平。结果薯蓣皂苷片各剂量组大鼠血清OPG、RANKL水平分别为(95.27±4.24)、(76.44±4.09)、(69.26±5.63)pmol·L~(-1)和(96.07±4.94)、(85.41±3.75)、(67.53±2.23)pmol·L~(-1),与模型组((53.92±2.83)pmol·L~(-1)和(116.18±3.02)pmol·L~(-1))相比均有显著性差异(P0.05);OPG/RANKL比值显著高于模型组。结论薯蓣皂苷片可能通过调整OPG/RANKL动态平衡而对破骨细胞功能产生影响,从而防止骨破坏。     

HPLC同时测定参附汤中人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量的研究

目的:建立参附汤中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法。方法:采用Inertsil ODS–SP(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,柱温25℃,流动相为乙腈:水,梯度洗脱,流速:1.0mL.min-1,检测波长203nm。结果:人参皂苷Rg1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.86%,RSD为2.32%;人参皂苷Re在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.09%,RSD为2.22%;人参皂苷Rb1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.53%,RSD为1.68%;结论:该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量,为参附汤的质量控制提供依据。     

建立一种测定细胞色素P450 3A4活性的方法

 目的建立一种细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,CYP3A4)活性定量的新方法。方法将CYP3A4底物硝苯地平与人肝微粒体进行体外温孵,以高效液相色谱法测定硝苯地平及其氧化产物,以甲醇-水(64∶36)为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,检测波长为254 nm。结果在所建立的HPLC条件下,硝苯地平及其氧化产物的出峰时间分别在8.44和6.15 min,能够完全分离,且无其他生物基质峰干扰;氧化硝苯地平在人肝微粒体的最低检测限为25μg·L^-1(S/N=3),线性范围是0.25～32 mg·L^-1(r=0.999 4),符合检测要求;在0.5,4.0,20.0 mg·L^-1时的萃取率分别为(67.05±3.49)%,(66.63±3.60)%,(67.08±2.78)%(n=5);方法回收率分别为(100.17±6.97)%,(91.96±3.71)%,(96.55±3.98)%(n=5);日内及日间RSD均小于7%。结论本实验所建立的HPLC能够准确、快速检测出硝苯地平及其在人肝微粒体中的氧化产物,能够对CYP 3A4活性进行快速评价,适合于体外药物代谢动力学研究和第三代多药抗药性逆转剂的筛选。     

RP-HPLC测定巴洛沙星的人体血药浓度及生物等效性研究

 目的建立人血浆中巴洛沙星的HPLC测定法,研究巴洛沙星胶囊健康人体相对生物利用度。方法采用双周期自身交叉对照试验设计,20名健康志愿者口服受试巴洛沙星胶囊和参比巴洛沙星片各200 mg后采用HPLC测定血浆药物浓度。色谱柱为Lichmspher ODS(4.6 mm×25 cm,5μm)柱,流动相为水-乙腈-三乙胺-冰醋酸(78:22:1:1),紫外检测波长295 nm。结果巴洛沙星在0.03～4.0 mg·L^-1内线性关系良好(r=0.9997),提取回收率为85.37%～88.34%,相对回收率为98.45%～103.63%。受试、参比制剂的主要药动学参数如下:t_1/2(8.59±1.48)和(8.79±1.43)h,t_max (1.0±0.5)和(1.1±0.5)h,ρ_max(2.09±0.76)和(1.95±0.56)mg·L^-1,AUC_0-36h(15.15±2.98)和(16.77±11.36)mg·h·L^-1,AUC_0-∞(16.00±3.13)和(18.64±11.72)mg·h·L^-1,经对数转换根据两种制剂血药浓度-时间曲线下面积计算国产巴洛沙星胶囊剂相对生物利用度为(99.1±14.0)%。经方差分析及双单侧t检验,显示两制剂无显著性差异,具有生物等效性。结论此法简便、灵敏、准确、稳定,可用于体内药物分析,巴洛沙星胶囊和巴洛沙星片具有生物等效性。     

左氧氟沙星注射液及口服片剂在健康人体内的药动学研究

 目的 研究左氧氟沙星注射液及口服片剂单次给药的药动学。方法 选18名男性健康受试者,分别随机交叉给予左氧氟沙星注射液200 mg（注射时间60 min）及200 mg口服片剂;另选18名健康受试者,分别随机交叉给予左氧氟沙星注射液300 mg, 注射时间分别为60及90 min。采用反相高效液相色谱法测定血及尿药浓度。结果 左氧氟沙星200 mg注射液与200 mg口服片剂的主要药动学参数c_max分别为（3.06±0.32）,(2.50±0.39) mg·L^-1;AUC分别为(17.79±1.62),(17.02±1.79) mg·h·L^-1;t_1/2β分别为(5.60±0.31),(5.73±0.48) h;48 h尿药累积排泄百分率分别为(72.58±8.66)%和（71.50±6.75）%。经计算口服片剂的绝对生物利用度为（96.03±9.35）%。左氧氟沙星注射液300 mg, 注射时间分别为60及90 min的主要药动学参数c_max分别为（4.63±0.59）,（4.21±0.66）mg·L^-1;AUC分别为（29.17±2.66）,（29.04±3.76） mg·h·L^-1;t_1/2β分别为（6.05±0.30）,（5.96±0.48）h;48 h尿药累积排泄百分率分别为（74.50±9.32）%和（77.68±8.86）%。两组中的主要参数经配对t检验除c_max有显著性差异(P＜0.05)外,其余均无显著性差异(P＜0.05)。结论 200 mg左氧氟沙星片剂的口服吸收良好,绝对生物利用度为(96.03±9.35)%;给予相同剂量左氧氟沙星300 mg而注射时间不同（60及90min）的药动学过程基本一致,因此临床可根据具体情况调整给药时间。     

高效液相色谱衍生化法同时测人血清中阿莫西林和克拉维酸浓度

 目的 建立同时测定人血清中阿莫西林和克拉维酸农度的高效液相色谱法。方法 血清样品经笨甲醛衍生，荧光检测,波长λex=386mm，λem=460nm，采用Discovery C₁₈柱，流动相甲醇-水=55:45,流速为1.0 mL·min^-1，柱温为29℃。结果 克拉维酸和阿莫西林的保留时间分别为5.10,6.20 min左右。克拉維酸在0.062~4.968mg·L^-1内线性良好（r=0.999 9);阿莫西林在0.089~35.718 mg·L^-1内线性良好（r=0.999 9)。加样回收率均在90.0%~105.0%范围内，日内和日间RSD均小于15.0%(n=5)。结论 本法灵敏度和精密度高、重复性好，适于阿莫西林克拉维酸钾复方制剂的药动学研究。     

HPLC同时测定参附汤中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1含量的研究

目的：建立参附汤中人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法。方法：采用Inertsil ODS–SP（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱,柱温25℃,流动相为乙腈：水,梯度洗脱,流速：1.0mL.min-1,检测波长203nm。结果：人参皂苷Rg1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率98.86%,RSD为2.32%;人参皂苷Re在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.09%,RSD为2.22%;人参皂苷Rb1在12.5～500μg.mL-1线性关系良好,r=0.9999,平均回收率99.53%,RSD为1.68%;结论：该方法学考察符合定量要求,结果准确,可用于同时测定参附汤中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的含量,为参附汤的质量控制提供依据。     

黄芪甲苷包合体的药动学和绝对生物利用度研究

 目的 应用完整大鼠间断连续取血模型研究黄芪甲苷包合体的药动学和绝对生物利用度。方法 30只雄性SD大鼠分为5组,每组6只,分别给予黄芪甲苷水剂(20 mg·kg-1、黄芪甲苷包合体(5.0, 10.0和20.0 mg·kg-1灌胃,以及黄芪甲苷水剂(2.0 mg·kg-1注射。每只大鼠间断连续取血,所有的血样以地高辛为内标,用液质联用仪(HPLC-MS测定。结果 黄芪甲苷和地高辛m/z比分别为 807.5和803.5。黄芪甲苷包合体(5.0, 10.0和20.0 mg·kg-1的t_1/2β分别为(10.73±3.34,(11.47±3.28和(12.88±2.03 h, CL分别为(0.88±0.09,(0.90±0.63和(0.85±0.04 L·h-1, V_c分别为(6.73±1.78,(5.66±2.23和(5.72±2.41 L·kg-1,AUC_0-t分别为(1 099.09±84.32,(2 174.68±232.98和(4 800.24±214.86 ng·h·mL-1。黄芪甲苷包合体的绝对生物利用度为10.2％～11.2％,而黄芪甲苷水剂的绝对生物利用度只有3.2％。结论 包合体是提高黄芪甲苷绝对生物利用度的有效剂型,值得深入研究。     

反相高效液相色谱法对不同来源西红花药材中西红花苷-1、苷-2的定量分析

 目的：测定西红花药材中西红花苷_-1、苷-2的含量。方法：采用反相高效液相色谱，以Nova-Pak C₁₈(4 μm,150 mm×3.9 mm)柱为色谱柱，甲醇-水（55∶45）为流动相，测定波长为(440±1）nm。结果：西红花苷_-1的平均回收率为99.53%，日内、日间RSD分别为1.0%，1.6%；西红花苷-2的平均回收率为99.43%，日内、日间RSD分别为1.3%，1.8%。进口西红花商品药材中有2种未测出或只有痕量，3种含量较低（西红花苷_-1为80.9～102.0 mg·g_-1生药，西红花苷-2为44.5～62.3 mg·g_-1生药），而国产西红花商品药材中含量最高（西红花苷_-1为176.2 mg·g_-1生药，西红花苷-2为108.5 mg·g_-1生药）。结论：建立的RP-HPLC法测定不同来源西红花药材中西红花苷_-1、苷-2的含量，操作简便，结果准确。     

维生素E微囊片的研制及其质量考察

 目的：研制Vit E微囊片，以延缓Vit E释放，提高制剂稳定性。方法：以明胶、阿拉伯胶为囊材，聚丙烯酸树脂Ⅳ为致密剂，复凝聚法得Vit E微囊后，加入微晶纤维素压制成片。用气相色谱法进行含量测定，进而研究其载药量、包封率、溶出度、稳定性等质量指标。结果：Vit E在0.01～4 g·L^-1浓度范围内线性回归方程为：Y=0.5827C+5.552×10^-3，r=0.9999，低、中、高3种浓度回收率分别为（99.2±0.6）%，（100.70±0.28）%，（98.60±0.17）%。微囊平均载药量为66.5%（n=3)，RSD%=1.8，平均包封率为83.4%（n=3)，RSD%=0.75。微囊片体外缓释特征符合Higuchi方程。与市售Vit E软胶囊相比对湿、光、热稳定性显著提高。结论：Vit E微囊片制备工艺简单，质量易控，延缓了Vit E的释放，并提高了其稳定性，应进一步研究。