骨髓标本质量与骨髓液取材量相关性实验报告

骨髓涂片细胞形态学检查,是血液病诊断和治疗研究中最直接、最快速和最重要的手段之一。但是,检查结果与骨髓标本的取材质量关系极为密切,而其中以抽取骨髓液的量影响最大。所以,在做骨髓涂片细胞形态学检查时,对骨髓标本的取材量大多数要求在0.2ml左右[1,2],但在实际工作中,我们感到量太少除了不易控制外,大多数情况下抽取的骨髓液缺乏骨髓小粒或被组织液、血液稀释。为此,我们以骨髓标本质量(以骨髓小粒、骨髓有核细胞和巨核细胞数量为质量指标)与骨髓取材量为题,做了相关性实验,现报道如下,供同行参考。1材料出方法1.1标本来源2003年11月…     

判断骨髓有核细胞增生程度几种方法的比较

目的探讨和比较判断骨髓有核细胞增生程度几种方法的准确性。方法对临床206份抗凝骨髓标本采用直接定量计数法和涂片染色后高倍镜视野观察有核细胞数;比较低倍镜法、成熟红细胞与有核细胞比值法、高倍镜视野法和直接定量计数法,对骨髓有核细胞高、中、低值标本的测试精度。结果206份EDTA-K2抗凝的骨髓标本有核细胞直接定量计数,结果介于(5.0~770.0)×109/L之间,x-83.86×109/L;其中男性骨髓标本120例,有核细胞介于(5.0~388)×109/L之间,x-79.4×109/L,女性患者86例有核细胞介于(8.0~770)×109/L之间,x-94.2×109/L;高、中、低值骨髓标本有核细胞直接定量计数法,变异系数(CV)分别为0.061,0.061和0.096(平均CV 0.073)。4种方法,除方法1只能按五级增生法大体估计外,其它二种方法高、中、低值骨髓标本的平均CV分别为0.424,0.186。结论选用EDTA-K2抗凝骨髓并进行骨髓有核细胞直接定量计数是必要的也是可行的,该法较目前国内传统方法准确性高、重复性好、便于操作,能满足现代临床血液学诊断、治疗和预后的需要。     

骨髓标本质量与骨髓液抽取量相关性实验报告

目的探讨细胞形态学检查抽取骨髓液量多少与骨髓标本质量之间的关系。方法对抽取不同骨髓液量之间的骨髓标本,用骨髓有核细胞直接计数法计数有核细胞,定量骨髓涂片定量计数巨核细胞,同时记录骨髓小粒的有无,比较不同骨髓液间的差异。结果328份骨髓标本按抽取骨髓液量的多少分为:A(0.04~0.2m l)、B(>0.2~1.0m l)、C(>1.0~3.0m l)三组。A组129份,平均抽取的骨髓液为0.15 m l;B组167份,平均抽取的骨髓液为0.50 m l;C组32份,平均抽取的骨髓液为1.68 m l。有核细胞直接计数:A组与B组、A组与C组间,均值间差异均有显著意义;B组与C组均值间无显著性差异。巨核细胞定量计数:A组与B组间差异有显著意义;A组与C组间、B组与C组间差异无显著意义。统计了100例抽取骨髓液量在0.04~0.2 m l和95例>0.2~3.0 m l的骨髓标本,两组间有骨髓小粒的比例分别为0.580和0.747,差异非常显著。结论以骨髓有核细胞直接计数数量、巨核细胞定量计数和骨髓小粒的有无,作为骨髓涂片细胞形态学检查的质量要求是切实可行的,结果显示抽取量在0.04~0.2 m l组不如第二组好,说明抽取量应控制在>0.2m l~1.0m l(约0.5m l)为宜。     

不同方法和标本检测华氏巨球蛋白血症患者MYD88突变的初步探索北大核心CSCD

目的探索如何提高华氏巨球蛋白血症(WM)患者MYD88突变检测的阳性率和准确率。方法回顾性分析2017年6月至2021年6月上海交通大学医学院附属瑞金医院66例初诊WM患者MYD88突变检测结果, 分析不同方法和标本检测MYD88突变的阳性率和准确率。结果 66例WM患者中51例MYD88突变阳性, 整体阳性率77%。根据检测方法分类:二代测序(NGS)和等位基因特异性PCR(AS-PCR)检测突变阳性率显著高于一代测序Sanger法(84%对71%对46%, P<0.05)。根据标本取材部位分类:淋巴结和骨髓标本检测突变阳性率显著高于外周血标本(79%对84%对52%, P<0.05)。NGS检测淋巴结、骨髓和外周血MYD88突变阳性率分别为86%、90%和67%。AS-PCR检测淋巴结、骨髓和外周血MYD88突变阳性率分别为78%、81%和53%。39例WM患者进行≥2次MYD88突变检测, 以每例患者最终突变检测结果作为标准, 判断不同方法和标本的准确率。淋巴结(18例)和骨髓(13例)NGS检测准确率显著高于外周血(4例)标本(100%对100%对75%, P<0.05)。淋巴结(15例)、骨髓(11例)和外周血(16例)AS-PCR检测准确率的差异无统计学意义(93%对91%对88%, P>0.05)。结论在检测WM患者MYD88突变情况方面, NGS或AS-PCR法优于Sanger法, 淋巴结和骨髓标本优于外周血标本。     

髓外浆细胞瘤和骨孤立性浆细胞肿瘤

髓外浆细胞瘤(EMP)和孤立性骨浆细胞瘤(SOP)是罕见的肿瘤,两者的预后均较浆细胞瘤病(MM)为好,治疗的目标是痊愈.三音的诊断依据为:SOP:X线表现为孤立性骨病变,组织学为浆细胞肿瘤,在任选的胸骨和/或髂脊骨髓标本中没有浆细胞百分率增多.EMP:骨髓外单个浆细胞瘤伴正常骨髓和除邻近原发灶的骨侵蚀或损伤外的正常骨骼     

血液(骨髓)培养漏检因素探讨

血液细菌培养是诊断和治疗菌 (败 )血症的主要依据。我室采用生物梅里埃公司ｍｉｎｉＶＩＴＡＬ全自动荧光血培养仪 ,对 12 6 8份临床疑似菌 (败 )血症患者的血液 (骨髓 )标本同时进行需氧和厌氧培养 ,共检出带菌者 138份 ,报道如下。一、材料和方法1 标本来源 :12 6 8份标本均来自我院 1999年 1月～2 0 0 0年 10月的住院患者。血液标本 12 47份 ,骨髓 2 1份。其中 2例患者同时做了血液和骨髓培养。2 .仪器和试剂 :ｍｉｎｉＶＩＴＡＬ全自动荧光血培养仪和ＶＩＴＥＫ32全自动微生物分析系统、血液需氧和厌氧培养瓶、细菌鉴定卡均为生物梅里…     

25例白血病患者TES基因启动子区甲基化状态的研究

目的研究白血病患者骨髓中Testin蛋白(TES)基因启动子区甲基化状态,探讨TES基因与白血病的关系。方法以13例原发急性髓系白血病和12例急性淋巴系白血病患者的骨髓标本为研究对象,以15例健康者骨髓标本作对照,采用焦磷酸甲基化测序(BSP)方法检测骨髓中TES基因启动子的甲基化水平,分析健康者与白血病患者之间甲基化状态,以及不同类型白血病之间TES基因启动子区甲基化状态是否存在差异。结果 25例白血病患者骨髓标本中共有21例TES基因启动子区高甲基化,阳性率为84.0%。15例健康者骨髓标本均未检测到TES基因启动子区甲基化。12例急性淋巴系白血病患者骨髓标本中TES基因启动子区甲基化率为83.3%;13例原发急性髓系白血病患者骨髓标本中TES基因启动子区甲基化率为84.6%,二者差异无统计学意义(P0.05)。结论 TES基因启动子区甲基化检测可能成为白血病诊断的生物标志物之一。     

骨髓活检和骨髓涂片在白血病患者化疗中的应用

目的 观察急性白血病患者化疗后骨髓活检和骨髓涂片对判断白血病缓解和复发时的价值。方法 同时采集内蒙古科技大学第一附属医院血液科2001年1月～2003年11月住院患者的骨髓涂片和骨髓活检的标本，对比研究同一患者、同一时间的骨髓涂片和骨髓活检的标本，判断这两种方法在白血病患者缓解和复发时的临床价值。结果 骨髓活检和骨髓涂片在判断骨髓增生程度和幼稚细胞分布方面存在统计学差异。结论 骨髓活检在白血病的缓解和复发的判断上优于骨髓涂片，对白血病诱导治疗后和早期复发患者应常规检查骨髓活检。     

骨髓血小板相关抗体检测在ITP诊断中的价值

目的检测特发性血小板减少性紫癜(ITP)骨髓中血小板相关抗体水平,探讨骨髓中抗血小板抗体(PAIg)的临床价值。方法采用流式细胞术分别测定50例ITP患者及20例对照者骨髓及血液中血小板表面PAIgG、PAIgM、PAIgA水平,并分别进行配对比较。结果 ITP患者骨髓PAIgM、PAIgA水平与对应血液水平比较,差异无统计学意义(P0.05);而骨髓PAIgG与血液PAIgG比较,差异有统计学意义(P0.01),且骨髓标本总阳性率(100%)明显高于血液标本总阳性率(82%)。结论骨髓中PAIg检测对ITP诊断有一定的临床意义,可弥补部分血液标本PAIg阴性的不足。     

HHV8病毒和多发性骨髓瘤发病的关系

多发性骨髓瘤 (ＭＭ)发病原因一直不很清楚。 1997年Ｒｅｔｔｉｇ等[1] 和Ｓａｉｄ等[2 ] 用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)和原位杂交(ＩＳＨ)的方法 ,在ＭＭ患者长期培养的树突状细胞 (ＤＣ)及骨髓活检标本中检出了ＨＨＶ8病毒ＤＮＡ片段 ,尔后各家报道的结果很不一致。我们用以筑巢式ＰＣＲ为主的方法检测ＭＭ患者骨髓活检、骨髓穿刺和周围血标本 ,了解ＨＨＶ8病毒的存在情况 ,观察ＨＨＶ8病毒感染与ＭＭ临床表现之间的关系。材料和方法1　病例和细胞系　选择 35例临床确诊的ＭＭ患者 ,并以我院 1999年 2～ 6月收治的 5例其他血液病患者 [2例骨髓…     

骨髓穿刺失败原因初步分析

获得一份取材满意的骨髓标本极为重要。但骨髓穿刺失败者颇为常见,应引起重视。本文分析骨髓穿刺术失败的常见原因如下。材料与方法自1987年以来,本院各科(不包括血液科)进行首次骨髓穿刺共238例次,其中失败者共65例次(27.3%)。各科具体情况见附表。     

常规细菌需氧厌氧配对培养的临床价值

细菌自动培养监测系统的临床应用为菌血症的诊断提供了一种快速有效的检查手段,但是否需要把需氧和厌氧配对作为常规培养使用还存有争议。我们对近6年来11 320例次临床血(体)液标本的常规使用结果作了统计分析。一、材料和方法1.标本来源1999年1月至2004年7月到玉溪市人民医院就诊住院及门诊患者共11 320例次。其中血液(含骨髓液)标本10 228例次,胸腹水、脑脊液等其他体液标本1 092例次。全部均做了需氧厌氧配对双培养(简称双培养)。标本量血(体)液5~10 mL/瓶,骨髓液1~2 mL/瓶。2.仪器与试剂M in i VITAL自动荧光血培养仪、VITEK32自…     

血清,骨髓铁蛋白和骨髓细胞内外铁检测结果的对比分析

为探讨血清、骨髓铁蛋白和骨髓细胞内外铁的相互关系及意义，本文对７２例血液病患者血清、及骨髓细胞内外铁进行了检测，结果如下。１材料和方法１．１标本来源７２例标本来自我院１９９６年５月至１９９７年１１月期间的部分血液病初诊患者同时采集骨髓涂片、骨髓液及静...     

一种快速瑞—姬氏染色法

笔者参考近几年国外有关文献,配制出一种新的快速瑞氏—姬姆萨染液,此染液可存于染色缸中,急检单个标本或大批常规标本,均可在半分钟内染好。适用于血液、骨髓的细胞形态学检查。经我科三年多临床应用,效果满意,现介绍如下:     

多重巢式RT-PCR对骨髓增殖性肿瘤中PDGFRα融合基因的快速检测

本研究旨在探讨多重巢式RT-PCR在骨髓增殖性肿瘤(MPN)中快速检测血小板衍生生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor alpha,PDGFRα)融合基因的应用价值。利用多重巢式RT-PCR方法对146例MPN患者的骨髓或外周血标本进行PDGFRα融合基因的快速检测。结果表明,146例MPN患者的骨髓或外周血标本中,有6例出现PDGFRα融合基因,其阳性率为4.11%,其中4例患者服用酪氨酸激酶抑制剂伊马替尼治疗,均获疗效。结论:本研究建立的多重巢式RT-PCR方法具有灵敏度高、特异性好、检测快速等优点,可以准确快速确定MPN的分子类型,并为该病提供诊断和治疗的理论依据。     

骨髓液涂片结合骨髓组织印片及切片对血液病的诊断意义

本文比较骨髓液涂片，骨髓组织印片或切片３天标本在诊断２３１例血液病病人方面的价值。结果骨髓液涂片的诊断符合率８４．０％；结合骨髓印片可使诊断符合率提高到８９．２％；结合骨髓组织切片诊断符合率为９４．３％。骨髓组织印片较骨髓涂片更能准确反映髓增生程度，因其操作简便，与切片相比人有实用价值。应用活检行髓穿检查，可减少干抽的发生率，故本文介用骨髓活检检针行髓穿，１次取好３样标本，综合分析，可提高诊断符合     

骨髓抽吸-活检双标本一步法取材在骨髓转移癌诊断中的应用

本研究旨在探讨骨髓抽吸-活检双标本一步法取材在骨髓转移癌诊断中的价值。对我院46例骨髓转移癌患者采用骨髓抽吸-活检双标本一步法取材,同步分析骨髓穿刺涂片及骨髓活检组织切片结果。结果表明,骨髓抽吸-活检双标本一步法取材成功率95.7%。46例患者中45例(97.8%)骨髓活检组织切片中可观察到多少不等的成团、成簇的转移癌细胞,且可见形态异常改变。骨髓涂片中可观察到癌细胞团者占54.3%。转移癌患者骨髓活检中有不同程度的骨髓纤维组织增生,以轻中度增生为主。除食管癌中骨髓活检诊断阳性率为83.3%外,其余转移癌骨髓活检诊断阳性率为100%。骨髓涂片在卵巢肿瘤、胸椎肿瘤、肺癌、胃癌、乙状结肠癌、食管癌及不明原发灶转移癌中诊断阳性率分别为33.3%、50%、72.2%、60%、50%、33.3%和25%。骨髓活检诊断阳性率高于骨髓涂片。结论:骨髓抽吸-活检双标本一步法取材成功率高;骨髓活检在骨髓转移癌诊断方面优于骨髓涂片,将两者结合同步分析能提高诊断准确率。     

多参数流式细胞术在慢性粒单核细胞白血病、骨髓增生异常综合症及急性单核细胞白血病免疫表型鉴别中的应用及其意义

本研究应用多参数流式细胞术分析慢性粒单核细胞白血病(CMML),骨髓增生异常综合症(DMS)以及急性单核细胞白血病(AML-M5b)的免疫表型特点,探究其在诊断及鉴别诊断上述疾病中的意义和价值。应用多参数流式细胞术比较分析14例CMML患者、48例MDS患者、46例AML-M5b患者及18例正常人骨髓标本的免疫分型特点。结果表明,CMML患者单核细胞比例明显高于MDS、AML-M5b患者及正常人骨髓(P<0.05),后3者之间无显著差别。MDS患者骨髓原始细胞比例明显高于正常骨髓标本(P<0.05),但与CMML患者无明显差别。AML-M5b患者骨髓成熟粒细胞比例较CMML、MDS患者及正常骨髓标本明显减低(P<0.05)。MDS、AML-M5b及CMML患者骨髓CD45/SSC特点与正常骨髓标本均存在一定差异。CMML患者骨髓具有CD2、CD56异常表达及CD14拖尾现象,与MDS、AML-M5b及正常骨髓标本相比差异显著(P<0.05)。MDS与CMML患者骨髓单核细胞CD15表达缺失或减低现象较正常骨髓标本及AML-M 5b患者显著,且CMML患者异常率高于MDS患者(P<0.05),两者粒细胞群均有显著CD13/CD11b/CD16表达规律异常现象,但两者间无显著差异。其他抗原表达呈不同程度异常,无统计学差异。结论 MDS、CMML及AML-M5b骨髓细胞免疫表型均具有各自的特点及不同程度的相似处。多参数流式细胞术综合分析其免疫表型,对于区分CMML、MDS以及AML-M5b具有重要鉴别意义。其中单核细胞比例增高,伴有CD2、CD56异常表达,CD14拖尾现象,CD15缺失或减低及成熟粒细胞CD13-CD11b-CD16表达规律异常,对CMML诊断具有重要意义。     

CD45/SSC双参数设门分析法用于冻存细胞CD抗原检测

流式细胞仪检测CD抗原一般需新鲜标本 ,鉴于受检标本无法及时送检 ,有报道用联合开窗法检测液氮保存细胞的表面抗原表达 ,虽然结果与新鲜标本无明显差别 ,但方法较繁琐[1] 。为此 ,我们试用CD4 5 /SSC双参数设门法 ,研究了 - 80°C低温保存标本的细胞表面抗原表达。一、材料和方法1.病例资料　按照FAB标准 ,选择 39例初诊急性髓细胞白血病 (AML)患者的骨髓标本作为研究材料。受检者白细胞中位数为 11.8× 10 9/L、外周血和骨髓原始细胞比率分别为 4 3.8%和 6 8.9%。2 .方法　 (1)标本采集与处理 :取患者肝素抗凝骨髓液 5～ 8ml,按常规…     

再生障碍性贫血患者幼红巨噬细胞黏附蛋白基因表达的探讨

目的:探讨再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓和外周血标本单个核细胞中幼红巨噬细胞黏附蛋白(EMP)基因的表达。方法:抽取18例再生障碍性贫血患者治疗前后的骨髓和外周血标本,另选10例健康骨髓捐献者为正常对照组,均分离骨髓和外周血单个核细胞,分别提取细胞总RNA,用RT-PCR方法检测EMP mRNA。结果:再生障碍性贫血患者的骨髓和外周血中EMP表达水平分别显著低于正常对照组(P<0.05),而治疗后的表达显著增高(P<0.05)。结论:EMP mRNA可为再生障碍性贫血的诊断与治疗提供依据。