细粒棘球蚴囊液对HepG2肝癌细胞系细胞周期的影响

目的探讨细粒棘球蚴(Eg)囊液(HCF)在感染急性期对宿主肝细胞MAPK信号通路及细胞周期的影响。方法常规方法培养HepG2细胞,以HCF为刺激物,于不同时间点用Western blot检测p-ERK、增殖细胞核抗原PC-NA、细胞周期蛋白cyclin-D1、A、B1和E的表达水平,并与无FCS组比较。结果 Western blot检测显示,15%、30%HCF组p-ERK分别在换液培养3h和30min高表达(P<0.05),PCNA分别在3h和12h高表达(P<0.05),cyclin-D1在3h高表达(P<0.05),cyclin-A分别在3h和12h高表达(P<0.05),15%HCF组cyclin-E在3h高表达(P<0.05),15%、30%HCF组cyclin-B1在各时间点表达量微弱(P<0.05)。结论 HCF对体外培养的HepG2细胞无毒害,且对其增殖有一定的促进作用。     

let-7c对HCCLM3细胞增殖的影响

目的 用瞬时转染的方法 研究let-7c对人肝癌细胞HCCLM3增殖的影响并探讨其机制.方法 用脂质体2000将miRNA转染人人肝癌细胞HCCLM3,设let-7c组转染let-7c,设对照组转染阴性对照miRNA,设空白组不做任何转染.用细胞计数试剂盒CCK-8检测转染后细胞生长增殖的变化,用流式细胞术检测各组细胞周期分布的差异.用Western blot和实时荧光PCR检测转染后细胞周期蛋白(cyclin) D1及其mRNA表达的变化.多组数据的两两比较采用LSD法.结果 let-7c组细胞在转染后48、72h时的吸光度值分别为0.70±0.05、0.77±0.09,低于空白组的0.97±0.10、1.21±0.12和对照组的0.91±0.07、1.12±0.09,各组比较,F值分别为14.431、21.146,P值均＜0.01,差异均有统计学意义.转染后72h,let-7c使癌细胞处在G1期的细胞比例增加.空白组、对照组、let-7c组G1期的细胞比例分别为43.53％±0.86％、44.82％±0.77％、54.52％％±0.13％,各组比较,F=240.739,P＜0.01,差异有统计学意义.let-7c能抑制cyclin D1及其mRNA的表达,空白组、对照组、let-7c组cyclin D1的表达水平分别为0.48±0.09、0.47±0.06、0.23±0.06,各组比较,F=11.316,P＜0.01,差异有统计学意义; mRNA的相对表达量分别为1.03％±0.29％、1.01％±0.11％、0.63％±0.14％,各组比较,F=6.315,P＜0.05,差异有统计学意义.结论 let-7c能抑制HCCLM3细胞的增殖,并使细胞停留在G1期的细胞比例增加.导致这种现象的机制可能为let-7c抑制cyclin Dl及其mRNA的表达.     

腺病毒介导的野生型PTEN抑制活化肝星状细胞系HSC-T6增殖的机制

目的 通过检测腺病毒介导的野生型第10号染色体缺失的磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)对体外活化肝星状细胞(HSC)细胞周期的影响,探讨过表达的野生型PTEN抑制活化HSC增殖的可能机制. 方法 体外培养肝星状细胞系HSC-T6,以腺病毒为载体将野生型PTEN基因瞬时转染活化HSC,实验分为空白对照组、Ad-GFP组和Ad-PTEN组.流式细胞术测定HSC细胞周期时相,Western blot及实时定量PCR检测HSC的PTEN表达量,Western blot检测HSC的细胞周期素D1 (cyclin D1)和细胞周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平.多组间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Tukey检验. 结果 携带野生型PTEN基因的腺病毒(AD-PTEN)成功转染HSC,Ad-PTEN组G0/G1期HSC细胞数(67.68％±2.75％)较对照组(53.01％±2.37％)及Ad-GFP组(53.85％±3.0％)明显增高(F=38.59,P＜0.01);S期HSC细胞数(14.42％±1.81％)较对照组(22.17％±1.99％)及Ad-GFP组(21.54％±1.74％)明显降低(F=18.85,P＜ 0.01);G2/M期HSC细胞数(17.90％±2.70％)较对照组(24.82％±3.81％)及Ad-GFP组(24.62％±3.15％)明显降低(F=7.17,P＜0.01).腺病毒感染HSC后72h,Ad-PTEN组cyclin D1的相对表达量(1.12±0.07)较对照组(1.45±0.05)及Ad-GFP组(1.47±0.08)明显降低(F=42.86,P＜0.01),CDK4相对表达量(1.05±0.07)较对照组(1.41±0.03)及Ad-GFP组(1.43±0.06)也明显降低(F=67.01,P＜ 0.01).结论 过表达的野生型PTEN通过下凋cyclin D1和CDK4的表达,明显抑制体外活化HSC细胞周期的G1/S期转化,阻滞HSC细胞周期时相于G0/G1期,进而抑制其增殖.     

微小RNA-221对HepG2细胞增殖及其凋亡的影响

目的 探讨微小RNA-221(miR-221)对肝癌细胞株HepG2细胞增殖与凋亡的影响.方法 将miR-221阻遏物及模拟物转染至HepG2后,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-221的表达水平;用细胞增殖试剂盒、Hoechst 33342及碘化丙啶(PI)双重染色、流式细胞仪及caspase3/7活性试剂盒检测HepG2细胞增殖与凋亡情况.对数据进行多样本的单因素方差分析,两两比较采用LSD法;相关性比较用Pearson检验.结果 RT-PCR结果显示,转染miR-221阻遏物后其表达受到抑制,而转染miR-221模拟物可促进其表达.细胞增殖试剂盒及Hoechst 33342/PI染色结果显示,48 h后miR-221阻遏物明显抑制HepG2细胞增殖(P＜0.05),而miR-221模拟物促进HepG2细胞增殖(P＜0.05),两种方法结果呈正相关(r=0.993,P＜0.01).流式细胞仪检测细胞周期显示,miR-221模拟物组G1期细胞比例(47.6%±1.53%)明显低于空白对照组(59.00%±1.00%)及阴性对照组(58.00%±1.00%,F=81.77,P＜0.01); S期细胞比例(20.33%±1.15%)明显高于空白对照组(11.00%±1.00%)及阴性对照组(12.00%±1.00%,F=70.90,P＜0.01).Hoechst 33342/PI染色、流式细胞仪膜联蛋白V凋亡试剂盒检测均显示,转染miR-221阻遏物48 h后,细胞凋亡和坏死增加(P＜0.05),差异有统计学意义.Caspase-3/7试剂盒检测caspase-3/7活性变化结果显示,转染miR-221阻遏物24 h后,细胞caspase3/7活性明显增高(P＜0.05),差异有统计学意义.结论 miR-221可促进肝癌细胞生长增殖,抑制miR-221表达可诱导细胞凋亡.miR-221有望成为治疗肝癌新的分子靶点之一.     

辛伐他汀抑制HepG2细胞增殖作用的机制

目的 体外观察辛伐他汀对人肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p21蛋白表达的影响.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察辛伐他汀对HepG2细胞增殖的影响,用流式细胞仪检测辛伐他汀对细胞周期的作用,用免疫细胞化学法观察辛伐他汀对细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p2l蛋白表达的影响.对数据进行析因设计与单因素方差分析.结果 体外辛伐他汀可抑制HepG2细胞的增殖(F浓度=1264,P＜0.001 ;F时间=17.466,P＜0.001;F浓度*时间=35.053,P＜0.001).辛伐他汀处理组G0/G1期细胞增多,但细胞凋亡不明显;体外辛伐他汀可增强HepG2细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p21蛋白的表达(F=512.133,P＜0.001).结论 体外辛伐他汀对HepG2细胞增殖有抑制作用,该作用可能与其使细胞生长阻滞于G0/G1期及增强细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子p21蛋白表达有关.     

七叶皂苷钠抑制人甲状腺未分化癌HTh74细胞株增殖作用的研究

目的 研究七叶皂苷钠对人甲状腺未分化癌HTh74细胞株增殖的潜在抑制作用及其分子机制.方法 以不同浓度的七叶皂苷钠(0,20,40,60,80 μmol/L)处理HTh74细胞48 h后,观察细胞形态变化;以不同浓度的七叶皂苷钠(0,20,40,60,80 μmol/L)处理HTh74细胞24h、48 h和72 h后,噻唑蓝比色(MTT)法检测七叶皂苷钠对HTh74细胞株增殖的抑制效应并计算细胞增殖率及半数抑制率(IC50);以不同浓度的七叶皂苷钠(0,5,10,15,20,25 μmol/L)处理HTh74细胞48 h后,Western印迹检测七叶皂苷钠引起的蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)以及细胞周期相关蛋白的表达.结果 七叶皂苷钠作用后,细胞发生明显皱缩,且作用浓度越高细胞皱缩越明显;MTT法结果显示,七叶皂苷钠对HTh74细胞有显著的生长抑制作用,呈现典型的时间与剂量依赖性,80 μmol/L七叶皂苷钠作用24 h,对细胞的生长抑制作用有统计学意义(F=111.4,P＜0.01),而40 μmol/L作用48 h及72 h时,细胞生长均受到抑制(F=543.6,722.1,P＜0.01),并且48 h的IC50为69.4μmol/L,72 h的IC50为32.5μmol/L;七叶皂苷钠作用48 h后Akt、p-Akt和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2的表达显著降低,并呈现剂量依赖效应.与未经处理的细胞相比,低浓度(5 μmol/L和10 μmol/L)七叶皂苷钠处理时Akt和p-Akt的表达水平已开始降低(F=613.9,P＜0.05),而从15 μmol/L开始,CDK2表达的降低有统计学意义(F=208.9,208.3,P＜0.05).CDK1、CDK6、细胞周期蛋白D以及细胞周期蛋白E的表达在各处理组间差异无统计学意义(P均＞0.05).结论 七叶皂苷钠可抑制人甲状腺未分化癌HTh74细胞的增殖,可能是通过调节Akt、p-Akt以及CDK2等蛋白的表达实现的.     

邻苯二甲酸二(2-乙基已)酯对胰岛MIN6β细胞毒性作用的研究

目的 观察邻苯二甲酸二(2-乙基已)酯(DEHP)对胰岛MIN6 β细胞生长活力、细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 选用小鼠胰岛MIN6 β细胞作为研究对象,并将其分为DEHP组和对照组,DEHP组分别用0.25、0.5、1、2 mmol/L DEHP作用16、48、72 h.对照组用0.1％二甲基亚砜(DMSO)作用16、48、72 h.通过MTT实验检测细胞生长活力,流式细胞技术测定细胞凋亡率及细胞周期.结果 与对照组相比,在16、48及72 h随着DEHP浓度的增加,MIN6 β细胞生长活力受到抑制,细胞存活率明显下降(F=112.25、91.06、589.25,P均＜0.01);0.25、0.5、1 mmol/L DEHP组MIN6 β细胞凋亡率明显升高[(5.00±0.22)％、(8.33±0.09)％、(19.62±0.44)％,F=3 006.09,P＜0.01];0.5、1 mmol/L DEHP组受到MIN6 β细胞周期进程受到干扰,G0/G1期细胞比例[(68.50±0.89)％、(73.63±0.96)％,F=242.46,P＜0.01]明显升高,S期细胞[(17.57±1.15)％、(14.40％±0.91)％,F=49.28,P＜0.01]与G2/M期[(13.93±0.42)％、(11.97±1.85)％,F=72.70,P＜0.01]比例明显降低.结论 DEHP可抑制胰岛MIN6 β细胞增殖、诱导细胞凋亡、导致细胞周期停滞在细胞间期.     

shRNA干扰SMYD3对肝癌细胞c-Myc表达及凋亡的影响

目的:观察SMYD3(SET and MYND-domain containing 3)基因沉默后c-Myc的表达及对HepG2细胞凋亡的影响.方法:构建针对SMYD3的shRNA干扰质粒Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2和阴性对照质粒Pgenesil-1-hk,同时设空白对照组,采用Lipofectamine2000脂质体介导转染法转染质粒.转染后24、48、72 h,RT-PCR检测HepG2细胞SMYD3和c-Myc的表达情况.流式细胞术法检测各组细胞的凋亡.结果:SMYD3、c-Myc基因在HepG2细胞中强表达.RT-PCR显示Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组与阴性对照质粒转染组Pgenesil-1-hk转染24、48、72 h后相比,SMYD3基因表达均明显受到抑制 (F=67.46,P<0.01:F=176.79,P<0.01;F=175.28,P<0.01),同时c-Myc表达下调(三组之间:F=11.58,P=0.009; F=126.41,P<0.01;F=261.25,P<0.01).Pgenesil-1-s1、Pgenesil-1-s2转染组细胞早期凋亡率与Pgenesil-1-hk转染组 (LSD-t=-13.58,-12.62,均P<0.01)、空白组(LSD-t=-18.62,-17.67,均P<0.01)相比有显著性差异.结论:RNA干扰技术特异性沉默HepG2细胞SMYD3基因后,抑制了c-Myc的表达,促进了HepG2细胞的凋亡.     

肝癌细胞中Wnt/β-连环素信号通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白和葡萄糖调节蛋白78的表达

目的 研究肝细胞癌中Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、葡萄糖调节蛋白78(Grp-78)、热休克蛋白(HSP)27的关系及其意义.方法 用RNAi技术将针对β-连环素的siRNA转染入肝癌HepG2细胞中沉默β-连环素基因表达,于72、96h提取蛋白质,用Western blot法检测β-连环素、caspase-3、XIAP、Grp-78、HSP27蛋白质的表达.用方差分析的方法进行统计学分析.结果 对照组、转染72h组、转染96h组β-连环素蛋白质表达的灰度值分别为18.9、1.5和3.2 ; β-肌动蛋白表达的灰度值分别为41.1、45.6和47.8 ;caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为49.8、5.2和45.1 ; p-caspase-3蛋白质表达的灰度值分别为16.0、67.7和16.3 ; XIAP蛋白质表达的灰度值分别为28.2、21.9和49.9 ; Grp-78蛋白质表达的灰度值分别为23.3、49.9和26.8 ; HSP27蛋白质表达的灰度值分别为29.6、34.8和35.6 ; β-肌动蛋白表达的灰度值分别为32.1、33.6和34.2.针对β-连环素的siRNA转染肝癌HepG2细胞72h和96h均可抑制β-连环素蛋白质的表达(F=160.72,P＜0.01),而96h比72h的表达略有增加,差异有统计学意义.caspase-3的蛋白质表达于72 h被抑制,96h升高恢复至原有水平(F=136.10,P＜0.01);而p-caspase-3的蛋白质表达于72h增加,96h减少至原有水平(F=98.65,P＜0.01).XIAP的蛋白质表达于72 h被抑制,96h表达升高(F=37.29,P＜0.01).Grp-78的蛋白质表达于72 h增加,96h减少至原有水平(F=58.72,P＜0.01).HSP27的蛋白质表达转染前后一致,差异无统计学意义.结论 HepG2细胞中,Wnt/β-连环素信号传导通路与caspase-3、XIAP、Grp-78蛋白质的表达有关,而与HSP27的蛋白质表达无关.Wnt/β-连环素信号传导通路正是通过调节这些因子参与HepG2细胞凋亡及增殖、分化等调节.     

肾上腺髓质素对大鼠肝星状细胞表达细胞周期蛋白的影响

目的探讨肾上腺髓质素(ADM)对活化肝星状细胞(HSC)表达细胞周期蛋白的影响。方法采用不同浓度的ADM对HSC-T6细胞进行干预12h、24h和48h。采用MTT法检测HSC-T6细胞增殖;采用SABC法检测细胞增殖核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期素依赖性激酶抑制因子P21waf1的表达。结果在ADM10-7mol/L浓度下作用12h,24h,48h,细胞生长抑制率逐渐增加(分别是7.88%,17.58%,18.79%);在ADM10-7mol/L作用24h时,HSC的PCNA、cyclin D1和P21waf1表达的平均光密度分别为0.387±0.023、0.454±0.029和0.508±0.011,而对照组分别为0.246±0.030、0.209±0.014和0.401±0.033(t值分别为5.149、5.752和5.299,P<0.05),差异有显著性。相关性分析表明,PCNA和cyclinD1的变化呈正相关趋势(r=0.834,P<0.05),而PCNA和P21waf1呈负相关趋势(r=-0.770,P<0.05),cyclinD1和P21waf1呈负相关趋势(r=-0.796,P<0.05)。结论肾上腺髓质素可抑制HSC-T6细胞增殖。ADM作用HSC可能通过调控HSC的细胞周期,抑制PCNA和cyclinD1表达,促进P21waf1表达,从而发挥抑制HSC增殖作用。     

尼古丁对人A549细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 观察烟草烟雾中的主要有害成分尼古丁对人A549细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,探讨尼古丁致病的可能机制.方法 以一定浓度尼古丁刺激体外培养的人A549细胞,应用CCK-8法、Transwell法和细胞划痕实验分别检测A549细胞的增殖、侵袭及迁移能力.Western blot检测α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白的表达.结果 与空白对照组比较,10-6 mol/L尼古丁处理A549细胞后,促进人A549细胞增殖(t=7.920,P<0.05);使穿过基质胶的细胞数增多,侵袭能力增强(t=5.298,P<0.05);使细胞迁移率增加,迁移能力增强(P<0.05).与空白对照组比较,10-6 M尼古丁处理A549细胞24 h后,α7 nAChR、VEGF和MMP-2蛋白表达上调,差异有统计学意义(t值分别为5.800、4.074、6.851,P值均<0.05).结论 尼古丁通过其特异性受体α7 nAChR可增强人A549细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制可能与VEGF和MMP-2蛋白表达上调有关.     

神经母细胞瘤体外细胞系的构建方法

目的 对神经母细胞瘤(NB)进行体外培养，探讨神经母细胞瘤(NB)体外建系的方法。方法 NB患儿新鲜手术标本，采用组织块培养法、酶消化培养法建立原代细胞系；用选择性酶消化法和机械刮除法进行细胞纯化；从细胞形态学、神经特异性烯醇化酶染色、软琼脂克隆形成实验三方面对细胞进行初步鉴定，证实所培养细胞是否为NB细胞。结果 两种细胞培养法均可培养出NB细胞，纯化后可得形态均一的细胞系。结论 可采用适当的细胞培养方法建立神经母细胞瘤的体外细胞系。     

趋化因子配体16对人胰腺癌细胞株PANC1生物学行为的影响

目的探讨趋化因子配体16（CXCL16）对人胰腺癌细胞PANC1生物学行为的影响。方法取对数生长期的人胰腺癌细胞PANC1,分别加入50、1013、200ng／ml的重组人CXCL16（rhCXCL16）和抗CXCL16抗体处理4h,以不加rhCLCL16作为对照。采用MTT法检测细胞增殖,采用Mqrtigel基质检测细胞的黏附率,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力。结果100ng／ml rhCXCL16处理PANC1细胞后,细胞增殖、对基质的黏附率、侵袭和迁移能力分别为0．264±0．021、（91．4±8．6）％、1．246±0．216、1．361±0．276,其中细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力均显著高于对照组的（20．6±3．2）％、0．259±0．013、0．199±0．008（P〈0．01）,对细胞的增殖不影响;2130ng/ml rhCXCL16处理后,细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力进一步提高到（92．1±6．3）％、1．511±0．174、1．600±0．208（P〈0．05）。结论CXCL16可诱导人胰腺癌细胞PANC1增强对基质的黏附性、侵袭性和迁移性。     

趋化因子配体16对人胰腺癌细胞株PANC1生物学行为的影响

目的 探讨趋化因子配体16(CXCL16)对人胰腺癌细胞PANC1生物学行为的影响.方法 取对数生长期的人胰腺癌细胞PANC1,分别加人50、100、200 ng/ml的重组人CXCL16(rhCXCL16)和抗CXCL16 抗体处理4 h,以不加rhCLCL16作为对照.采用MTT法检测细胞增殖,采用Mqrtigel基质检测细胞的黏附率,采用Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力.结果 100 ng/ml rhCXCL16处理PANC1细胞后,细胞增殖、对基质的黏附率、侵袭和迁移能力分别为0.264±0.021、(91.4±8.6)%、1.246±0.216、1.361±0.276,其中细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力均显著高于对照组的(20.6±3.2)%、0.259±0.013、0.199±0.1308(P<0.01),对细胞的增殖不影响;200ng/ml rhCXCL16处理后,细胞对基质的黏附率、侵袭和迁移能力进一步提高到(92.1±6.3)%、1.511±0.174、1.600±0.20s(P<0.05).结论 CXCL16可诱导人胰腺癌细胞PANC1增强对基质的黏附性、侵袭性和迁移性.     

膀胱癌细胞凋亡和细胞增殖的表达及意义

目的 观察膀胱癌细胞凋亡与细胞增殖的表达,探讨细胞凋亡指数和细胞增殖指数的比值(AI/PI)与膀胱癌病理分级、分期及预后的关系。方法 利用原位末端标记技术(TUNEL),增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学染色,观察48例膀胱癌患者细胞凋亡与细胞增殖的表达。结果AI/PI随肿瘤病理分级和分期升高而增高,各分级和分期的AI/PI比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AI/PI>0.01者的生存时间比AI/PI<0.01者明显延长,差异有显著性意义(P<0.01)。结论AI/PI可作为判断肿瘤恶性程度及预后的重要指标。     

普罗布考对糖尿病小鼠脂肪间充质干细胞功能的影响

目的探讨普罗布考对糖尿病鼠脂肪来源的间充质干细胞（ADSC）功能的影响。方法体外分离培养ADSC,应用流式细胞术对3～5代细胞表面抗原CD34、CD45、CD90、CD105进行表型鉴定。将ADSC分为：①正常ADSC对照组;②正常ADSC+普罗布考组;③糖尿病ADSC对照组;④糖尿病ADSC+普罗布考组;⑤正常ADSC+高糖（30mmol/L）组;⑥正常ADSC+高糖+普罗布考组。应用WST法和Transwell迁移实验检测各组细胞增殖和迁移情况。应用ELISA和实时定量PCR检测各组细胞分泌血管内皮生长因子（VEGF）、肝细胞生长因子（HGF）、胰岛素样生长因子1（IGF-1）蛋白和mRNA表达水平。应用二氯醋酸荧光素探针检测各组细胞活性氧（ROS）含量。结果ADSC表达CD90和CD105,不表达CD34和CD45;与正常ADSC对照组相比,糖尿病ADSC增殖能力和迁移能力下降,VEGF、HGF、IGF-1蛋白和mRNA表达水平降低。与糖尿病ADSC对照组相比,糖尿病ADSC+普罗布考组增殖能力和迁移能力增加,VEGF、HGF、IGF-1蛋白和mRNA表达水平上升。结论糖尿病能损伤ADSC的生物学特性。普罗布考对糖尿病鼠ADSC增殖、迁移和分泌能力具有保护作用。     

Determination of growth fraction and cell density to evaluate the potential growth of human oligodendroglial and astrocytic tumours

The object of this work was Purpose: to develop a methodology that enables net tumour growth, a balance between actual tumour growth and tumour cell loss, to be approximately evaluated. Methods: The methodology proposed relies on detecting the growth fraction immunohistochemically by means of MIB-1 antibody labelling combined with cell density determination, carried out on 5-μm-thick Feulgen-stained histological sections with computer-assisted microscopy. The series investigated included 25 oligodendrogliomas (OLG-II), 9 anaplastic oligodendrogliomas (OLG-III), 13 astrocytomas (AST), 14 anaplastic astrocytomas (ANA) and 8 mixed oligoastrocytomas (OLG-AST). Results: The results show that the biological characteristics of some cases were in total accordance with their histopathological diagnoses. This was the case for the “weakly proliferating weakly dense” OLG-II and AST-II tumours, and for the “highly proliferating highly dense” OLG-III and AST-III ones. In contrast, the biological characteristics of some cases seemed to contradict the histopathological case labels. This was the case for the “highly proliferating highly dense” OLG-II and AST-II tumours, the biological aggressiveness of which would be undervalued on the basis of the morphology-based grading system alone, and also for the “weakly proliferating weakly dense” OLG-III and AST-III tumours, the aggressiveness of which would be overvalued. Conclusions: Combining the determinations of the MIB-1 and the cell density variables appears to be satisfactory in terms of the cell kinetic characterization of glial tumours as a complement to the prognostic information given by a morphology-based grading system alone. Received: 6 January 1998 / Accepted: 3 April 1998     

槐耳清膏对结肠癌细胞生长和迁移的影响及其作用机制

目的中药槐耳清膏具有抗肿瘤效应,但其对结肠癌的作用及机制尚不清楚。本研究旨在探讨槐耳清膏对人结肠癌细胞生长和迁移的影响及作用机制。 方法体外培养人结肠癌细胞系HCT116,采用MTT法检测槐耳清膏对肿瘤细胞生长的抑制作用;采用Boyden趋化小室检测槐耳清膏对肿瘤细胞迁移能力的影响;采用荧光定量PCR法检测药物对MMP-9表达的影响;应用流式细胞技术检测药物对细胞凋亡和细胞周期的影响。 结果槐耳清膏对HCT116细胞生长有明显的抑制作用,该抑制作用具有药物剂量和时间依赖性。与细胞共培养96小时后,槐耳淸膏的抑制作用最强;与对照组相比,10 mg/mL、20 mg/mL和30 mg/mL槐耳淸膏对肿瘤细胞的抑制作用分别为25%(P＝0.025),42%(P＝0.032)和67%(P＝0.018)。槐耳清膏能明显抑制肿瘤细胞的迁移,11 mg/mL药物的抑制率为63%(P＝0.01);槐耳清膏(8mg/mL和11mg/mL)处理后的肿瘤细胞中MMP-9的表达量下降(2.73±0.32 vs 4.8±0.36,P＝0.02;1.46±0.25 vs 4.8±0.36,P＝0.004);槐耳清膏可阻滞细胞停留在S期,但对细胞凋亡无明显影响。 结论体外试验证实槐耳清膏对结肠癌细胞的生长及迁移能力具有抑制作用,其作用机制可能是阻滞细胞停留在S期和下调MMP-9的表达。     

改良的乳猪肝细胞微载体粘附培养方法

目的改进常用的肝细胞手工震荡微载体粘附培养技术,提高肝细胞粘附率.方法用磁力悬浮培养容器使肝细胞轻度聚集,然后加入微载体Cytodex-3培养,在控制低转速的情况下使肝细胞更易粘附在微载体上.结果磁力搅拌粘附培养的肝细胞粘附率高(90.3%±7.7%)且较稳定(变异系数8.6%),明显优于手工震荡粘附培养(粘附率69.5%±18.3%,变异系数26.4%,P＜0.005);前2周内的白蛋白合成功能亦强于手工震荡粘附培养(P＜0.05).结论磁力搅拌粘附培养肝细胞粘附率高、重复性强、稳定性好、操作方便,且减少了肝细胞受污染的机会.     

A comprehensive meta‐analysis of stem cell therapy for chronic angina

Background

A substantial proportion of patients with coronary artery disease do not achieve complete revascularization and continue to experience refractory angina despite optimal medical therapy. Recently, stem cell therapy has emerged as a potential therapeutic option for these patients. However, findings of individual trials have been scrutinized because of their small sample sizes and lack of statistical power. Therefore, we conducted an updated comprehensive meta‐analysis of available randomized controlled trials (RCTs) with the largest sample size ever reported on this subject.

Hypothesis

In patients with chronic angina stem cell therapy improves clinical outcomes.

Methods

Scientific databases and websites were searched for RCTs. Data were independently collected by 2 investigators, and disagreements were resolved by consensus. Data from 10 trials including 658 patients were analyzed.

Results

Stem cell therapy improved Canadian Cardiovascular Society angina class (risk ratio: 1.53, 95% CI: 1.09 to 2.15, P = 0.013), exercise capacity (standardized mean difference [SMD]: 0.56, 95% CI: 0.23 to 0.88, P = 0.001), and left ventricular ejection fraction (SMD: 0.63, 95% CI: 0.27 to 1.00, P = 0.001) compared with placebo. It also decreased anginal episodes (SMD: –1.21, 95% CI: –2.40 to ?0.02, P = 0.045) and myocardial perfusion defects (SMD: –0.70, 95% CI: –1.11 to ?0.29, P = 0.001). However, no improvements in all‐cause mortality were observed after a relatively short follow‐up.

Conclusions

In patients with chronic angina on optimal medical therapy, stem cell therapy improves symptoms, exercise capacity, and left ventricular ejection fraction. These findings warrant confirmation using larger trials.