黄芪多糖促进顺铂抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究

目的:研究黄芪多糖(APS)对卵巢癌细胞顺铂(DDP)化疗的影响及其机制.方法:不同浓度APS联合DDP处理体外培养的卵巢癌SKOV3细胞,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,PCR和Western Blot检测Caspase-3、Bax、Bcl-2基因及蛋白表达变化.结果:药物作用24 h时,随着APS浓度增加,SKOV3细胞增殖受到抑制,凋亡率逐渐增加,并呈浓度依赖性(均P<0.05).药物作用时间为48 h、72 h时,APS对SKOV3细胞增殖有抑制作用,但不同浓度间抑制率无明显差异(P>0.05).联合用药组的Bax、Caspase-3的蛋白和基因表达随着A PS浓度的增高逐渐增加,Bcl-2的蛋白和基因表达逐渐减少(均P<0.05).结论:APS有潜在抗卵巢癌作用,可提高卵巢癌细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是通过上调凋亡相关因子而促进卵巢癌细胞凋亡.     

PDGFR在裸鼠肾癌模型中表达的意义

目的在VHL-HIF-EPO信号通路中基础上,探讨酪氨酸激酶类靶向药物对透明细胞型肾细胞癌早期干预的可行性及必要性。方法在肾细胞癌模型,按照不同的药物干预时间,分为模拟早期给药组、中期给药组、晚期给药组及对照组四组,并在每一次穿刺后,即开始下一组给药。获得四次穿刺组织,通过免疫组织化学方法连续四次检测HIF、VEGF、VEGFR、PDGFR,并测量肿瘤大小。结果给药后,各组之间PDGFR阳性表达率对比,差异具有统计学意义(χ2=12.468,P=0.004);经相关分析,PDGFR阳性表达率、终期肿瘤大小与药物干预时间呈正相关(P0.05),提示随着给药时间的延长,PDGFR阳性表达率降低,肿瘤体积大小减小。结论靶向药物的早期干预,可以降低PDGFR表达,通过抑制肿瘤细胞的增殖,降低肿瘤生长速度、甚至使肿瘤减小。肾细胞癌在治疗过程中存在早期干预的可能性和必要性。     

姜黄素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响及机制探讨

目的研究姜黄素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响以及机制,为临床实践提供参考和借鉴。方法选用人宫颈癌Hela细胞进行体外培养,利用不同浓度姜黄素(配伍顺铂方案)干预人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测药物对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制率;采用RT-PCR和Western blot法检测p53蛋白的表达情况,探讨姜黄素联合顺铂方案对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性的影响以及机制。结果实验组对宫颈癌Hela细胞增殖的抑制率、诱导凋亡率明显高于对照组及姜黄素组(P<0.05);实验组COX-2、Caspase-3、Maspin的表达情况明显优于对照组及姜黄素组(P<0.05);不同浓度姜黄素作用24小时后,p53蛋白的表达随姜黄素浓度的增加而增加,差异具有显著性(P<0.05)。结论姜黄素联合顺铂对宫颈癌Hela细胞化疗敏感性具有重要影响,可以抑制宫颈癌Hela细胞的增殖并诱导细胞凋亡,能够增加其敏感性,这可能是通过增加p53基因的表达而实现的。     

洛铂对人肺腺癌A549、A549/DDP细胞株抑制作用的研究

目的观察洛铂对体外培养人肺腺癌A549细胞株和耐顺铂的A549/DDP细胞株作用,初步探讨洛铂的抗肿瘤作用机制。方法采用caspase酶抑制剂、MTT法等研究不同浓度、时间的洛铂对A549细胞株和A549/DDP细胞株的作用,分析洛铂的作用机制。结果随洛铂浓度升高、作用时间延长,细胞毒作用增强;耐顺铂细胞株存在同样的规律;加入caspase-3、8抑制剂组存活率高。结论洛铂具有剂量-时间依赖性,可作为耐顺铂肿瘤的备选药物;洛铂诱导A549和A549/DDP细胞凋亡,可能涉及caspase-3、8的活化。     

α7烟碱型乙酰胆碱受体调控胆管癌细胞增殖及侵袭的研究

目的探讨在胆管癌细胞增殖和侵袭进程中α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-n ACh R)的调控作用。方法采用尼古丁及α-银环蛇毒素(α-BTX)处理胆管癌QBC939细胞,分为尼古丁组、α-BTX组、尼古丁+α-BTX联合组、空白对照组,采用MTT法观察α7-n ACh R在胆管癌QBC939细胞增殖中产生的影响,采用Transwell小室法观察α7-n ACh R对胆管癌QBC939细胞侵袭力的调节作用。结果在48小时和72小时时胆管癌QBC939细胞增殖能力随尼古丁浓度的升高而增强(48小时:F=80.86,P<0.05;72小时:F=61.49,P<0.05),并且其对胆管癌QBC939细胞增殖的促进作用具有一定的时间依赖性,即在24小时时,不同浓度的尼古丁对胆管癌QBC939细胞增殖的影响无显著差异(P>0.05),但在48小时和72小时时其对胆管癌QBC939细胞增殖的促进作用比较明显。同时Transwell侵袭实验显示,经单纯尼古丁刺激后胆管癌QBC939细胞穿透上室内基质胶到达下室的数量明显增多,尼古丁组和其余各组之间比较存在显著差异(P<0.05)。α-BTX能够明显阻断尼古丁对胆管癌QBC939细胞增殖和侵袭的促进效应。结论尼古丁在胆管癌细胞增殖和侵袭进程中具有显著的增强效应,且可能通过α7-n ACh R发挥这一效应。     

从三七渣和三七废液中提取的三种成分在不同浓度下的体外细胞抗肿瘤活性筛选

目的:考察从三七渣和三七废液中提取的3种成分在不同浓度下对人肝癌细胞HepG2、人皮肤黑色素瘤细胞A375、人结肠癌细胞HCT-116、人胃癌细胞SGC-7901、人肺癌细胞A549的体外抗肿瘤活性。方法:采用改良MTT法对5种人源性肿瘤细胞进行体外抑瘤药理活性筛选。结果:对于HepG2,脂溶性提取物为2 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长,差异有统计学意义(P<0.05)。对于HCT-116,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;500、200 μg/ml的给药组OD值高于空白组,可促进细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于SGC-7901,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;500、200 μg/ml的给药组OD值高于空白组,能促进细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于A375,脂溶性提取物为2、1 mg/ml的给药组OD值低于空白组,能抑制细胞生长;差异有统计学意义(P<0.05)。对于A549,脂溶性提取物为2 mg/ml的给药组OD值低于空白组...     

IL-21基因对宫颈癌HeLa细胞抑制作用的体外试验研究

目的探讨白介素-21(interleukin-21,IL-21)基因对宫颈癌细胞(HeLa细胞)的作用。方法构建人源性IL-21质粒并电转染至体外培养的宫颈癌细胞(HeLa细胞),选择性培养获得表达IL-21的HeLa细胞(HeLa-IL-21)。将96只重症联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency,SCID)小鼠随机分为免疫重建组与非免疫重建组,每组各48只。采用人外周血淋巴细胞重建免疫重建组小鼠的免疫功能。再分别将两组小鼠随机均分为A、B、C 3个亚组,每组各16只。其中A组小鼠接种HeLa细胞,B组小鼠接种HeLa-空载体细胞,C组小鼠接种HeLa-IL-21细胞。比较各组小鼠肿瘤生长情况、小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时干扰素-γ(IFN-γ)表达水平及脾细胞毒性,以探究IL-21基因抗肿瘤的作用机制。结果接种后第20、30、40天,非免疫重建A组小鼠肿瘤体积分别为(28.4±3.7)mm~3、(95.7±13.0)mm~3、(232.4±21.6)mm~3,均明显大于免疫重建A组小鼠[(19.7±2.9)mm~3、(65.7±12.7)mm~3、(154.7±16.9)mm~3](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积分别为(16.4±2.7)mm~3、(48.5±11.0)mm~3、(53.4±10.7)mm~3,均明显大于免疫重建C组小鼠[(12.4±2.1)mm~3、(22.7±5.6)mm~3、(37.4±10.3)mm~3,](P<0.05),免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于免疫重建A组小鼠(P<0.05),非免疫重建C组小鼠肿瘤体积均明显小于非免疫重建A组小鼠(P<0.05)。检测不同来源小鼠脾细胞与不同靶细胞作用时IFN-γ表达水平发现,HeLa细胞作为靶细胞时,各组小鼠IFN-γ高表达(P<0.05);较非免疫重建组小鼠,免疫重建组小鼠对不同靶细胞IFN-γ高表达(P<0.05);较免疫重建A、B组小鼠,免疫重建C组IFN-γ高表达(P<0.05)。小鼠脾细胞毒性实验发现,转染IL-21质粒能增加小鼠脾细胞对HeLa细胞的杀伤毒性。结论细胞因子IL-21有一定的抗肿瘤作用,可能与其增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用有关,为宫颈癌患者的免疫治疗奠定了一定的研究基础。     

MDCK-MDR1细胞药物体外吸收模型的建立及验证

目的 构建MDCK-MDR1细胞体外吸收模型并进行验证,以用于口服药物吸收和转运机制的研究。方法 将不同浓度组(1.0×10⁸/L的L组、2.5×10⁸/L的M组、5.0×10⁸/L的H组)MDCK-MDR1细胞接种于24孔Transwell培养板上,培养1～7 d,通过吸光度值绘制MDCK-MDR1细胞生长曲线,观察不同培养时间点细胞的形态,测定不同时间点的跨膜电阻(TEER)值,确定形成单层膜结构的最佳细胞接种浓度和培养时间。通过荧光黄转运实验对不同浓度和时间点形成的单细胞膜结构进行验证。结果 L组、M组和H组分别在接种后第5、3、1天形成单层膜结构,分别在第5、4、3天时吸光度值达到峰值。L组在接种第5天时TEER值达到300Ω·cm²,第5～7天趋于稳定,故确定形成单层膜结构的最佳细胞接种浓度为1.0×10⁸/L,最佳培养时间为5 d。荧光黄转运实验验证显示,该单层膜结构的荧光黄表观渗透系数为4.27×10^-7 cm/s,低于通透性试验规定的5.0...     

不同能量体外冲击波对大鼠软骨细胞的增殖及代谢的影响

目的研究体外冲击波(extracorporeal shock wave,ESW)对大鼠软骨细胞的作用与影响。方法选取健康3周龄SD大鼠膝关节、股骨头软骨细胞进行原代培养,传至第2代时随机分为4组,待细胞贴壁1天后分别以能量为0、0.2、0.4、0.6 bar的ESW进行干预,干预后2天行CCK-8及Ⅱ型胶原蛋白蛋白质印迹法(Western blotting)检测。结果 CCK-8显示细胞活性逐渐增高,且有能量强度依赖性,在0.6 bar时作用最强(P<0.01)。0.2~0.6 bar能量的ESW同样可促进大鼠软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达,且该作用在0.6 bar时最为显著(P<0.01)。结论 0.2~0.6 bar能量的ESW可在一定程度上促进软骨细胞的增殖,增强软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的合成能力,且在0.6 bar时作用最显著。     

情绪因素及抗焦虑药物对肿瘤休眠及复发的影响

目的探讨情绪因素与抗焦虑药物对肿瘤休眠与复发的影响。方法采用肿瘤休眠模型,并附加小鼠慢性情绪应激模型,焦虑情绪控制经灌胃给予其地西泮,以分析抗焦虑药物对肿瘤休眠状态的维持与防复发作用,分为单纯给药组、休眠对照组、外伤刺激组、焦虑诱导组以及焦虑给药组5组,小鼠左腿肌肉均接种乳腺癌细胞Ca761-03(500个),单纯给药组、休眠对照组、外伤刺激组均行常规饲养,焦虑诱导组、焦虑给药组为单笼饲养且不定时刺激使其产生应激情绪,对小鼠焦虑情绪观察2个月,进而观察肿瘤发生或转移情况。结果肿瘤休眠率为40%、90%、60%、100%以及70%,成瘤率为60%、10%、40%、0%、30%,肺转移率为60%、0%、30%、0%、20%。结论长期负面情绪会加速肿瘤发生、生长、转移速度,给予其抗焦虑药物有利于维持肿瘤休眠状态,降低复发率。     

一种查尔酮衍生物对H1792细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨查尔酮衍生物(4’-甲基-2,4-二羟基查尔酮)对体外培养的肺癌细胞H 1 792增殖的影响。方法体外培养H 1 792细胞,以不同浓度(10、20及40μmol/L)的4’-甲基-2,4-二羟基查尔酮处理细胞,作用不同时间。经瑞氏染色进行细胞形态学观察,以MTT法检测细胞存活率,并以流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果与对照组相比,各剂量组的4’-甲基-2,4-羟基查尔酮均能有效抑制H 1 792肺癌细胞的增殖,P0.05,差异具有统计学意义,且呈现出时间浓度依赖性;用药后,细胞形态出现凋亡特征,且随药物浓度增加,细胞凋亡率增加,P0.05,差异具有统计学意义。结论此查尔酮衍生物能有效抑制H 1 792肺癌细胞的增殖,其作用机制可能与细胞凋亡有关,为临床非小细胞肺癌细胞的治疗提供了研究基础。     

肿瘤代谢重编程与药物耐药性

代谢重编程是肿瘤细胞的重要特征之一。为了满足快速增殖对于物质、能量以及氧化还原力的需求,肿瘤细胞对其代谢通路进行重编程。代谢重编程使细胞内外特定代谢物的水平或种类发生变化,这一变化通过影响基因表达、细胞状态以及肿瘤微环境而促进肿瘤生长。葡萄糖代谢、谷氨酰胺代谢及脂质代谢是肿瘤细胞中变化最显著的代谢通路,靶向代谢重编程可以显著抑制肿瘤生长并促进凋亡。肿瘤耐药是目前肿瘤治疗中的热点和难点,代谢重编程与肿瘤耐药密切相关,靶向耐药肿瘤相关代谢过程可以逆转肿瘤对药物的抗性。     

对躁狂症患者实施心理干预效果研究

目的研究分析躁狂症患者接受心理干预的临床效果。方法根据2008~2011年我院接收的200例躁狂症患者来进行研究分析,将这些患者分成干预组和药物组,干预组使用心理干预和药物治疗,共有100例患者,药物组仅使用药物治疗,共100例。对患者进行精神状态检查,社会功能缺陷检查,在干预前后进行评定。结果干预组患者的临床药物依从性比药物组优秀,干预组复发率16.7%,药物组37.8%,结果存在统计学差异性。结论心理干预可以提升躁狂症患者的临床药物治疗依从性,降低复发率,对患者的治疗和恢复起到了促进作用。     

分析干预管理对抗菌药物临床应用的效果

目的分析干预管理对抗菌药物临床应用的效果。方法选取我院2012年1月~2014年1月收治的200例采用抗菌药物治疗的患者作为研究对象,随机分为观察组与对照组,各100例,对照组患者为非干预管理组,观察组患者为干预管理组。结果对照组未经干预管理,抗菌药物使用率为45.00%,合理用药率为85.00%,送检率为43.00%。观察组采用干预管理后抗菌药物的使用率为60.00%,合理用药率为62.00%,送检率为15.00%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论干预管理用于抗菌药物临床应用中后,有显著的效果,值得在临床范围内进行推广。     

抗菌药物合理应用药学干预措施及临床价值

目的研究抗菌药物合理应用的药学干预措施及其临床价值,为临床提供指导。方法选择2016年11月—2017年11月未实施药学干预的100张抗菌处方纳入此次研究工作并作为对照组,选择2017年12月—2018年12月实施药学干预的100张抗菌处方作为实验组,对比两组抗菌药物使用不合理情况、抗菌药物联用情况、药物费用、应用疗程。结果经比较,实验组使用不合理率比对照组低,抗菌药物联用率高于对照组,药物费用与应用疗程均优于对照组,差异具有统计学研究意义(P 0.05)。结论将药学干预措施应用于抗菌药物应用中,一定程度上优化了抗菌药物应用的合理性,同样减少了药物费用,且应用疗程明显缩短。     

s腺苷蛋氨基酸通过抑制P13K/AKT/mTOR通路调控HepG2肝癌细胞自噬作用研究

目的探讨s腺苷蛋氨基酸通过抑制P13K/AKT/mTOR通路调控HepG2肝癌细胞自噬作用。方法选取上海生命科学研究院细胞资源中心的HepG2肝癌细胞作为研究标本,随机分为阴性对照组、阳性对照组和观察组,并比较三组间HepG2肝癌细胞的增殖、凋亡情况以及HepG2肝癌细胞自噬相关标记物记LC3B和Bclin1表达水平。结果 s腺苷蛋氨基酸作用24 h、48 h和72 h时抑制HepG2细胞增殖的IC_(50)分别为24.34μmol/L、10.26μmol/L、6.24μmol/L,与阴性对照组和阳性对照组比较,差异均具有统计学意义(P0.05);10μmol/L、30μmol/L和100μmol/L不同浓度s腺苷蛋氨基酸作用于HepG2细胞48 h后出现的凋亡率分别为(26.28±1.34)%、(22.34±1.82)%和(11.18±0.60)%,而阴性对照组其HepG2细胞48 h后的凋亡率为(6.28±0.02)%,即观察组凋亡率随着药物浓度的增高而降低,且与阴性对照组比较,观察组各浓度s腺苷蛋氨基酸作用于HepG2细胞48h后出现的凋亡率均明显较高,即s腺苷蛋氨基酸具有诱导HepG2细胞凋亡的作用(P0.05);经流式细胞仪结果显示,不同浓度s腺苷蛋氨基酸作用于HepG2细胞48 h后其LC3B和Bclin1水平均呈逐渐降低(P0.05)。结论 s腺苷蛋氨基酸可通过抑制P13K/AKT/mTOR通路调控进一步增强HepG2肝癌细胞自噬作用。     

OPN基因抑制对宫颈癌Hela细胞生长侵袭影响与VEGF和MMP-2关系

目的研究骨桥蛋白OPN基因抑制对宫颈癌细胞VEGF和MMP-2合成以及生长侵袭能力的影响。方法通过已构建好的OPN抑制的宫颈癌Hela细胞模型,以转染重组质粒(OPN基因抑制组OPN-1和OPN-2)与两个对照组转染空质粒cp DNA3.1(+)组和不转染质粒(Hela细胞组)。细胞水平上,用MTT法和Boyden小室肿瘤侵袭实检测各组Hela细胞增殖、侵袭能力的情况;在分子水平上,用ELISA、RT-PCR和Wester-bloting法测定各组细胞VEGF和MMP-2的表达。结果 OPN基因抑制组与对照组比,OPN基因抑制组增殖能力明显降低、凋亡率增加,VEGF和MMP-2表达显著减少,差异均有统计学意义(P0.05)。结论宫颈癌Hela细胞OPN基因抑制,可降低VEGF和MMP-2合成,抑制宫颈癌细胞增殖,提示OPN基因可能通过调节VEGF与MMP-2的途径控制宫颈癌细胞的侵袭和增殖。     

预防妊娠滋养细胞肿瘤化疗性静脉炎方法的对比研究

目的探讨妊娠滋养细胞肿瘤患者静脉保护的有效方法。方法 82例妊娠滋养细胞肿瘤化疗患者分为三个试验组,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,每日从滴注化疗药物开始至睡前分别用新鲜马铃薯片、复方醋酸地塞米松乳膏及两者联合外敷;92例未采用预防方法的妊娠滋养细胞肿瘤化疗患者作为空白对照组。观察各组静脉炎发生情况。结果三个试验组与空白对照组相比有差异有统计学意义(P0.05);三个试验组相互比较差异无统计学意义(P0.05)。结论新鲜马铃薯片和复方地塞米松乳膏无论是单一外敷还是联合外敷对预防妊娠滋养细胞肿瘤化疗性静脉炎都有较好的疗效,且两者都有取材方便、经济实用、操作简单的优点,由于联合外敷比单一外敷更繁杂,建议根据患者具体情况选择单一外敷。     

参麦注射液和多巴酚丁胺对肺心病合并急性心衰的效果

目的探讨联用参麦注射液和多巴酚丁胺对肺心病合并急性心衰的患者进行治疗的效果。方法对象共48例均为本院2016年9月—2017年12月所接收的肺心病合并急性心衰的患者,随机分为两组,对照组患者采用常规药物治疗,治疗组患者则是在常规治疗的基础上再联用参麦注射液和多巴酚丁胺进行治疗,对比两组治疗效果。结果患者在接受治疗后,其疾病临床症状出现了不同程度的改善,治疗组总有效率为91.67%,对照组为70.83%,治疗组与对照组差异有统计学意义(P0.05)。结论在肺心病合并急性心衰疾病的临床治疗工作中,联用参麦注射液和多巴酚丁胺这一治疗方法是具有较高应用价值。     

肿瘤患者全脊柱磁共振增强检查的护理体会

目的探讨肿瘤患者全脊柱磁共振增强检查的护理干预.方法对120例怀疑肿瘤转移患者进行全脊柱磁共振增强检查,检查前排除磁共振禁忌证,其中60例给予常规护理作为对照组,另60例给予优质全程护理干预作为观察组,记录两组检查结果,并对两组护理前后的焦虑自评量表评分(SAS)以及护理满意度进行观察。结果 120例患者顺利完成检查,图像显示良好,符合诊断要求,无药物外渗;1例患者无法长时间平卧经中途休息后分2次进行,最后完成检查。护理前,两组SAS评分差异无统计学意义,P 0.05;采取相应护理措施后,观察组SAS评分明显低于对照组,差异有统计学意义,P 0.05。观察组护理满意度为96.67%明显高于对照组的83.33%,差异有统计学意义,P 0.05。结论优质全程护理干预不仅能提高患者对检查的依从性,保证扫描顺利完成,减少伪影提高图像质量,而且可确保患者安全,改善其焦虑情绪,提高其满意度。