谷胱甘肽过氧化物酶4介导的铁死亡在非小细胞肺癌顺铂耐药中的作用

目的 明确谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)介导的铁死亡在非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂(DDP)耐药中的作用.方法 采用蛋白质印迹技术检测GPX4在人NSCLC细胞株(A549)和人NSCLC DDP耐药株(A549/DDP)中的表达差异;在A549细胞中过表达GPX4,在A549/DDP细胞中用铁死亡抑制剂RSL-3...     

谷胱甘肽过氧化物酶4介导的铁死亡参与阿霉素对乳腺癌细胞抑制作用研究

目的:探讨谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)介导的铁死亡是否参与阿霉素对乳腺癌的抑制过程,并探讨其增加阿霉素敏感性的可能机制。方法:通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)实验和免疫蛋白印迹法(Western Blot),检测正常乳腺细胞MCF10A、HCC1937细胞和乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231细胞中GPX4的表达水平;通过慢病毒转染技术构建稳定敲低GPX4的乳腺癌细胞MCF-7,并通过qRT-PCR和Western Blot实验检测敲低效率;通过CCK8实验检测阿霉素对乳腺癌细胞的细胞毒性;通过谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、铁离子(Fe²⁺)浓度检测试剂盒检测敲低GPX4后乳腺癌细胞的铁死亡水平。结果:乳腺癌细胞中GPX4的蛋白水平及mRNA水平高于正常乳腺细胞(P<0.05);与对照组细胞相比,敲低GPX4表达的乳腺癌细胞中GSH水平降低(P<0.05),MDA和Fe²⁺水平升高(P<0.05),阿霉素作用后细胞增殖能力下降(P<0.05),而铁死亡抑制剂fe...     

过氧化物酶体激活受体在卵巢中的作用

过氧化物酶体激活受体（PPAR）组成核激素受体家族，属于类固醇受体大家族，参与多种生理活动，如类固醇合成，血管的生长，组织的重新塑造，细胞周期，凋亡，脂代谢等。PPAR的激活或抑制对上述生理活动有调控作用，同时，许多因子都能激活或抑制PPAR。因此研究PPAR的生物学功能很重要，研究PPAR的配体（激活剂）有广阔的临床应用前景。PPAR在生殖生物学中的作用也引起了高度重视，但PPAR在卵巢中的生物学功能却很少有研究。为此，现将PPAR的生物学特性以及在卵巢细胞中的作用综述如下。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在COPD患者中的作用

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种气道炎症性疾病,其特征是进行性气流受限,巨噬细胞和中性粒细胞浸润增加,炎症介质分泌过多,氧化和抗氧化失调。COPD作为呼吸系统常见病,仍是现代医学的一项重大挑战,目前的各种治疗方法均未能满足临床需求,故需要寻求新兴的治疗靶点。过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂除用于代谢性疾病的治疗外,还具有强大的抗炎、免疫调节作用,并可改善COPD患者骨骼肌功能障碍、逆转糖皮质激素敏感性的降低、抗细菌感染等,可能成为COPD的新兴治疗靶点。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在血脂调节中的作用

过氧化物酶体增殖物活化受体（peroxisome proliferator activated receptors,PPARs）属于核受体超家族成员,可被脂肪酸样化合物过氧化物酶体增殖物活化。近年研究发现在脂蛋白和脂质代谢、炎症反应、葡萄糖自我调节和细胞分化方面有重要作用。脂代谢紊乱是2型糖尿病的重要发病机制之一。PPARa是调节脂代谢的关键蛋白,与脂代谢紊乱的发生相关。PPAR7也参与了脂代谢的调节,现在将PPAR家族在血脂调节中的作用综述如下。     

过氧化物酶体增生物激活受体在人肺癌细胞中的表达

目的 检测过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR-γ)在人非癌肺组织和肺癌组织中的表达，探讨PPAR-γ表达与肺癌临床病理之间的关系。方法 采用免疫组化的方法分别检测15例非癌肺组织和64例肺癌组织中PPAR-γ的表达，并通过图像分析系统检测各组的平均吸光度值。结果 PPAR-γ在肺癌和非癌肺组织中均有表达，且肺癌组织的吸光度值较非癌肺组织为高；各型肺癌中PPAR-γ表达从高到低依次为小细胞肺癌、鳞癌、大细胞肺癌、腺癌；PPAR-γ的表达与肿瘤的分化程度、术后TNM分期有关，而与肺癌淋巴结转移无关。结论 PPAR-γ在肺癌的发生及进展中起重要作用，该受体有望成为未来肺癌治疗的新靶点。     

雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用及其作用机制

目的　研究雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用机制。方法　用雷公藤内酯酮 2 0 0μg/ (kg· d)喂服Wistar大鼠 ,8周后取材。做大鼠睾丸精子计数、精子活动度、睾丸切片的形态学观察 ,精核蛋白提取以及基因 cyclinD1和 Cdk4m RNA的原位杂交实验。结果　实验组大鼠睾丸精子数量为 (2 6 .43± 3.90 )× 10 6 / g,比对照组大鼠的精子计数 (4 1.15± 5 .5 1)× 10 6 / g明显降低 (P<0 .0 1) ,精子活动度为 (6 6 .0± 6 .8) % ,较对照组 (88.0± 2 .0 ) %极显著降低 (P<0 .0 0 1) ;cyclin D1和 Cdk4基因表达在精子细胞中显著上升。结论　雷公藤内酯酮的雄性抗生育作用显著 ,作用机制可能主要是增加精子细胞 cyclin D1和 Cdk4基因的表达 ,抑制附睾精核蛋白的生物合成。     

配体活化的过氧化物酶体增殖物激活受体γ诱导结肠癌细胞凋亡

目的:探讨配体活化的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)抑制结肠癌细胞生长,及诱导细胞凋亡的作用。方法:逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫杂交(Western-blot)法测定PPARγ在SW480和LS174T结肠癌细胞中的表达。MTT法检测PPARγ激动剂15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)和吡格列酮(Pioglita-zone,PGZ)对结肠癌细胞生长的抑制作用。流式细胞术检测细胞凋亡率,电镜观察凋亡细胞形态。免疫细胞化学法检测凋亡相关分子Fas、bcl-XL蛋白表达的变化。结果:PPARγ在SW480和LS174T结肠癌细胞株中均有表达,15d-PGJ2和PGZ对两种细胞的生长均有抑制作用,并呈剂量依赖效应。15d-PGJ2和PGZ显著诱导结肠癌细胞凋亡率增加(P<0.05或P<0.01),电镜显示凋亡细胞特有的形态学改变。免疫细胞化学结果显示,PPARγ激动剂诱导Fas蛋白表达明显增多(P<0.01),bcl-XL蛋白表达显著降低(P<0.01),该改变与凋亡程度呈正相关。结论:PPARγ经配体活化后,通过诱导凋亡抑制结肠癌细胞增殖,该作用可能与促凋亡基因Fas抗原表达上调以及凋亡抑制基因bcl-XL表达下调相关。     

过氧化物酶增生物激活受体γ在ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞凋亡中的作用

目的探讨氧化修饰的低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的机制和过氧化物酶增生物激活受体（PPAR7）特异性激动剂对培养的VSMC凋亡的影响．评价PPAR7在动脉粥样硬化（AS）发生和发展中的作用。方法培养的鼠VSMC中加入不同浓度OX—LDI．和PPAR7的两种激动剂—环格列酮（ciglitazone）和15脱氧-前列腺素J2（15d—PGJ2）．孵育24h．用透射电镜观察细胞凋亡的特征性形态学改变；流式细胞仪测定细胞凋亡率。另外，在给予ox-LDL、cig／itazone和15d—PGJ2的同时．加入PPARγ的抑制剂PGF2α，比较未加和加入抑制剂PGF2α组之间VSMC的形态学改变、凋亡率。结果ox—LDL及ciglitazone、15d—PGJ2均可诱导VSMC凋亡，且凋亡率增加与3种物质的剂量变化有关；PGF2α能降低OX—LDL ciglitazone和15d—PGJ2诱导的VSMC凋亡率。结论PPAR7内源性的配体OX-LDL诱导VSMC凋亡的作用是通过激活PPAR7途径实现的；PPAR7内源性的配体和特异性激动剂过度激活PPAR7途径有促进细胞凋亡而导致AS斑块不稳定性增加的可能。     

过氧化物酶体增殖激活受体γ或α在改善HepG2细胞糖代谢中的作用

目的：探讨过氧化物酶体增殖激活受体γ（PPAR-γ）或α（PPAR-α）激动剂改善HepG2细胞胰岛素抵抗的机制。方法：体外培养人肝癌细胞系HepG2细胞并用棕榈酸处理造成胰岛素抵抗模型,分别给予或PPAR-γ激动剂吡格列酮或高选择性PPAR-α激动剂WY14643处理,酶法测定葡萄糖的消耗量和糖酵解产物;同时定量PCR测定PPAR-γ、PPAR-α及糖酵解基因的表达变化。结果：吡格列酮增加胰岛素抵抗的HepG2细胞葡萄糖消耗,诱导糖酵解糖相关基因表达上调,促进糖酵解产物生成。WY14643部分改善胰岛素抵抗,对糖酵解相关基因表达及糖酵解产物水平没有显著影响。结论：PPAR-γ激动剂可能通过促进糖酵解改善HepG2细胞的胰岛素抵抗。     

过氧化物酶增殖物激活受体γ在哮喘气道重构中的作用

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)在哮喘小鼠气道重构中的作用。方法40只小鼠随机分为对照组、哮喘组、PPARγ激动剂组和PPARγ拮抗剂组。后三组以卵蛋白致敏激发建立慢性哮喘模型并按组别分别给予不同药物。以免疫组织化学、RT-PCR和Western blot技术检测PPARγ的定位及其表达水平,比较各组小鼠的气道炎症和重构的程度及其与PPARγ含量的关系。结果哮喘组支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞计数和白细胞介素-4(IL-4)水平、肺组织中炎症细胞评分、杯状细胞百分数、气道平滑肌厚度和胶原纤维面积均较对照组明显提高。PPARγ激动剂能明显降低上述指标,而PPARγ拮抗剂则加重气道炎症反应,但对结构改变不明显。组织学发现实验组肺组织内有明显的PPARγ表达,主要分布于气道上皮细胞和炎症细胞。实验组PPARγ的转录水平较对照组明显增高(P<0.01);但各实验组间差异无统计学意义(F=0.609,P=0.551)。PPARγ激动剂能明显提高核内PPARγ的表达水平,而PPARγ拮抗剂则不影响其核内表达水平。在实验组内,核内PPARγ的表达水平与气道炎症评分、气道平滑肌厚度和胶原纤维面积呈负相关(r分别为-0.690、-0.726和-0.851,P均<0.01)。结论PPARγ激动剂能够抑制哮喘的气道炎症和气道重构。     

过氧化物酶体增殖物激活受体β在中枢神经系统疾病中的作用

过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator activated receptors,PPARs）是一类核受体超家族,其成员有PPARα、PPARβ（也称为PPARδ）和PPARγ 3种亚型。PPARs自被发现以来受到广泛关注并在各个领域展开研究,其中主要集中在PPARα和PPARγ的研究上,对其在体内的病理生理作用都有了比较深刻的了解,其部分配体也已广泛用于临床治疗,而对PPARβ的研究相对较少。近来有学者认为PPARβ是PPARα和PPARγ激活的连接枢纽,使得其地位更加重要,PPARβ在中枢神经系统疾病中的作用及其调控机制越来越引起人们的关注。但关于PPARβ在中枢神经系统疾病中的作用及机制的研究却远落后于其他2种亚型。本文就PPARβ在中枢神经系统疾病中的作用进行综述。     

去铁胺在甲基汞诱导细胞铁死亡中的作用及其机制

目的: 探讨去铁胺预处理对甲基汞毒性作用的影响及其潜在的机制。方法: 选用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞与大鼠肝BRL细胞,对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养0.5 h,甲基汞组用不同浓度甲基汞(1.0、2.5、5.0、10.0 μmol/L)处理0.5 h,MTT法检测细胞活力,免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)蛋白表达,筛选最适浓度甲基汞。另取PC12细胞与BRL细胞,对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养6.5 h,去铁胺+甲基汞组分别用0、50、100、200、400 μmol/L去铁胺预处理6 h,再用10.0 μmol/L甲基汞处理0.5 h,免疫印迹法检测GPx4及缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)蛋白表达,MTT法检测细胞活力。结果： 与对照组相比,10.0 μmol/L甲基汞组两种细胞活力降低最显著,以此浓度进行后续实验;随着甲基汞浓度逐渐增加,两种细胞中GPx4表达逐渐降低。与0 μmol/L去铁胺+甲基汞组比较,随着去铁胺浓度增加,两种细胞中GPx4和HIF-1α蛋白表达逐渐增加;400 μmol/L去铁胺+甲基汞组PC12细胞活力明显增加,200 μmol/L去铁胺+甲基汞组BRL细胞活力明显增加。结论： 去铁胺可拮抗甲基汞致细胞的铁死亡,可能与上调HIF-1α及铁死亡关键调控因子GPx4表达相关。     

过氧化物酶增殖物激活受体激动剂(罗格列酮)在大鼠急性坏死性胰腺炎中的防治作用

目的:研究PPAR-γ增殖物激动剂(罗格Yqm)对ANP及合并肺损伤大鼠是否有保护作用.方法:50只健康雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、假手术组、ANP组、罗格列酮预防组,罗格列酮治疗组.正常对照组,未做任何处理;假手术组,腹腔内注射同等剂量生理盐水;采用大剂量精氨酸腹腔注射诱导ANP模型,预防组于造模前60 min给予罗格列酮10ms/kg,2次,每次间隔30 min,治疗组于造模后60 min给予罗格列酮10 ms/kg,2次,每次间隔30 min.各组于造模后24 h处死大鼠,观察大鼠血清AMY、TNF-α和IL-1β水平变化,同时检测胰腺和肺的组织病理变化和肺组织髓过氧化物酶(MPO)的变化.结果:ANP组AMY、TNF-α、IL-1β和MPO均较对照组和假手术组明显升高(P<0.001);罗格列酮预防和治疗组血清AMY、TNF-α、IL-1β、肺组织中MPO水平较ANP组明显下降,且胰腺和肺的病理损伤也明显减轻(P<0.001)结论:罗格列酮能明显降低ANP的炎症,能明显减少TNF-α、IL-1β的产生,能降低肺组织中MPO含量,对ANP及合并的肺损伤具有保护和治疗作用.     

谷胱甘肽过氧化物酶在人膀胱癌组织中的表达及其意义

目的：通过测定人膀胱癌组织及癌旁组织中的谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）活性,探讨其在各组织中的分布差异,与膀胱分期、分级的关系及临床意义。方法：谷胱甘肽过氧化物酶活力测定采用ＵＩＮＢ直接法。其中Ｔ１期７例、Ｔ２期 １２例、Ｔ３期 ７例,细胞分级Ⅱ级 １９例、 Ⅲ级 ７例,并取 １２例非癌病人做正常对照。结果：①对照组、癌旁组、癌组组织中ＧＳＨ－ＰＸ活力（Ｕ／ｍｇ·ｐｒ）分别为３０．７８±１１．３９、３７．８５ ± ８．７８、６８．４８±１１．６８。对照组与癌组、癌旁组与癌组间均有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。而对照组与癌旁组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。②ＣＳＨ－ＰＸ活力与肿病分期（Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３分别为 ６１．ｌ１± １６．０４、７０．７５±９．４１、７１．９４±７．８７）及分级（ Ⅱ级、Ⅲ级分别为 ６６．８６± １２．４４、７２．８７±８．５７）无关。结论：ＧＳＨ－ＰＸ在正常膀胱粘膜组织中发挥一种抗癌作用,而在癌组织中重新表达则呈现高活性,升高的的ＧＳＨ－ＰＸ活性在肿瘤细胞中能减少氧毒素和死活抗癌药及其产生的代谢产物。与膀胱癌的内在抗药性有关。高活性的ＧＳＨ－ＰＸ亦可能是膀胱癌的一种标志酶。     

硒与谷胱甘肽过氧化物酶的关系及其在防治再灌注损伤中的作用

硒是人类和动物都必不可少的微量元素,目前关于硒的作用越来越受到人们的重视.已经证实了硒与克山病的关系,并且还发现硒具有清除氧自由基、抗衰老、增强免疫力、抗肿瘤、抑菌抗炎、拮抗有毒金属等作用[1].     

雷公藤甲素调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡

目的 探讨雷公藤甲素调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡的分子机制。方法 培养人结肠癌细胞系（HCT116）,采用CCK-8法检测细胞活力,EdU实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖与克隆能力;铁死亡相关检测试剂盒测定Fe2+离子、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量,流式细胞术检测活性氧自由基（ROS）水平;JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化;Western Blot 检测p53、SLC7A11蛋白表达水平。结果 CCK-8实验显示雷公藤甲素呈浓度梯度依赖性抑制结肠癌细胞活力,其IC50为47.82nmol/L;EdU实验和平板克隆形成实验证实雷公藤甲素可显著抑制结肠癌细胞增殖与克隆能力（P<0.05）;在雷公藤甲素干预后,铁死亡相关指标检测发现,HCT116细胞 Fe2+离子、MDA及ROS水平显著升高,GSH含量降低（P<0.05）;并在荧光显微镜下观察到HCT116细胞线粒体膜电位下降（P<0.05）。进一步通过Western Blot实验,发现HCT116细胞p53蛋白表达增加,SLC7A11蛋白表达下调（P<0.05）。结论 雷公藤甲素可通过调控p53/SLC7A11轴诱导结肠癌细胞铁死亡,抑制结肠癌细胞增殖与克隆。     

转酮醇酶1在人结肠癌细胞株LoVo增殖中的作用

目的 探讨转酮醇酶1(TKTL1)在体外培养的人类结肠癌细胞株(LoVo)生长增殖中的作用.方法 构建针对TKTL1 mRNA 的小干扰RNA(siRNA)质粒,将该质粒转染LoVo细胞;采用实时定量RT-PCR检测转染前后LoVo细胞转酮醇酶基因家族中转酮醇酶(TKT)、TKTL1、转酮醇酶2(TKTL2) mRNA表达水平的变化,通过流式细胞术和MTT法检测转染前后LoVo细胞周期和细胞增殖的改变.结果 转染组(携带有pEGFP-C1-U6/TKTL1)、质粒对照组(携带有pEGFP-C1-U6/UC)和未转染组(未转染细胞)中TKT和TKTL2 mRNA的表达水平差异无显著性意义(P>0.05).转染组细胞中TKTL1的表达水平与质粒对照组和未转染组相比,明显下调,且转染组LoVo细胞总转酮醇酶活性明显下降,细胞增殖明显被抑制,LoVo细胞被阻滞在G0/G1期.结论 TKTL1在人类结肠癌细胞(LoVo细胞系)的生长增殖中起重要作用,TKTL1可能成为肿瘤治疗的新靶点.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ在保护大鼠脑缺血中的作用

目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ peroXisome proliferator-activated receptor gamma,PPARγ）对大鼠脑缺血的保护作用及其机制。方法线栓法建立大鼠右侧大脑中动脉闭塞（ middle cerebral artery occlusion, MCAO）模型。实验分为假手术组、溶剂对照组、替米沙坦组、替米沙坦＋GW9662组。采用Western Blot和RT-PCR观察大鼠脑缺血后24h时PPARγ、色素上皮源性生长因子（ pigment epithelium-derived factor,PEDF）、基质金属蛋白酶9（matriX metalloproteinase-9,MMP-9）的基因和蛋白表达变化,采用干湿法测定各组脑组织含水量,采用TTG染色法测定患侧脑梗死体积,采用改良Longna分级法评价神经功能。结果 MCAO后24h,溶剂对照组PPARγ、PEDF表达明显减少,而MMP-9显著增加;替米沙坦组替米沙坦激活PPARγ能够上调PEDF、下调MMP-9,并明显改善神经功能缺失,减轻脑水肿,减小梗死体积,保护缺血脑组织;替米沙坦＋GW9662组合并应用PPARγ特异性阻断剂GW9662显著逆转上述保护作用。结论 PPARγ是调控脑缺血后炎症反应的关键性因子,激活PPARγ途径可能成为治疗脑缺血的新靶点。     

过氧化物酶体增殖物激活受体在人胎盘中的表达及其作用

妊娠期间胎盘高表达过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs）,但其生理作用尚不明确。本文从PPARs结构特点、作用机制、在人胎盘中的分布和功能,以及与病理性妊娠可能关系等方面进行综述,提示PPARs在人胎盘胎儿发育、妊娠维持和分娩启动等过程中的重要作用。