火炮打击兔应激防护模型心脏病理及p38表达的形态学研究

目的探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔心脏损伤病理变化及丝裂原活化蛋白激酶p38（p38-MAPK）表达。方法闽南山地团进攻演习,设置远离演习场的空白对照实验兔纽,火炮打击区域设置炮火覆盖山体反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组。火炮打击应激损伤后6h,各组存活兔取心脏,HE染色观察其病理损伤形态学,观察改进型SP法免疫组化染色检测心脏p38-MAPK表达。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组p38-MAPK表达强阳性,迎面角组心脏结构紊乱,细胞数减少,基质间充血,血管痉挛狭窄,微血栓形成。p38-MARK免疫反应强度亦高于反角隐蔽组。结论火炮打击后实验兔应激损伤反应强烈,反角掩体保护减轻心脏损伤,p38-MAPK参与心脏损伤病理过程。     

火炮打击兔应激防护模型卵巢病理及P38表达的形态学研究

目的探讨实弹演习火炮打击后,不同位置掩体保护下兔卵巢损伤病理变化及丝裂原活化蛋白激酶p38(p38-MAPK)的表达。方法闽南山地团进攻演习,设置远离演习场的空白对照实验兔组,火炮打击区域设置炮火覆盖山体反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组。火炮打击应激损伤后6 h,各组存活雌兔取卵巢,HE染色观察其病理损伤形态学,观察改进型SP法免疫组化染色检测卵巢p38-MAPK表达。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组p38-MAPK表达强阳性,迎面角组卵巢结构完整性破坏,基质及卵泡出血,p38-MARK免疫反应强度亦高于反角隐蔽组。结论火炮打击后实验兔应激损伤反应强烈,反角掩体保护减轻卵巢损伤,p38-MAPK参与卵巢损伤病理过程。     

山地团进攻制式火炮打击兔应激防护模型肾损伤实验研究

目的探讨战争条件下火炮打击后,不同位置掩体内兔肾脏损伤情况。方法闽南山地团进攻演习,于火炮覆盖区域设置实验兔远离演习场的空白对照组、炮火覆盖区反角近距隐蔽组和迎面角近距隐蔽组。火炮打击应激刺激后6 h,存活兔取肾,改进型SP法进行免疫组化染色检测肾脏肿瘤坏死因子-α(TNF-α),HE染色观察肾脏病理损伤情况。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组TNF-α表达显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义。与反角近距隐蔽组相比,迎面近距隐蔽组TNF-α表达显著升高(P<0.05),差异具有统计学意义。HE染色结果显示迎面角组、反角组较对照组出现明显镜下病理性改变,且迎面角组更为严重。结论火炮打击后实验兔应激反应强烈,不同位置掩体显著影响兔存活及肾脏损伤程度,反角隐蔽可在一定程度上减轻肾损伤。     

山地团进攻制式火炮打击兔应激防护模型血清自由基变化实验研究

目的探讨战场火炮覆盖应激后,不同位置掩体内兔血清自由基变化规律。方法闽南山地秋季团进攻演习中,根据隐蔽位置设置实验兔空白对照组、反角隐蔽组和迎面角隐蔽组。基数火炮覆盖应激刺激后6 h,存活兔检测血清氧自由基含量,进行统计学比较。结果与空白对照组比较,反角隐蔽组和迎面角隐蔽组一氧化氮(NO)与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量显著升高(P<0.01),总超氧化物歧化酶(TSOD)的含量明显降低(P<0.01),差异具有统计学意义。与反角近距隐蔽组相比,迎面近距隐蔽组NO显著升高(P<0.01),TSOD显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义。结论火炮打击后实验兔应激反应强烈,不同位置掩体对存活及血清自由基含量影响显著。     

化疗药物致兔耳缘静脉损伤防护措施的实验研究

观察热敷加生理盐水冲洗和单纯生理盐水冲洗两种防护措施对常用化疗药物环磷酰胺(CTX)、长春新碱(VCR)、阿糖胞苷(Ara-c)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、柔红霉素(DNR)、甲氨蝶呤(MTX)致兔耳缘静脉损伤的保护作用。结果显示两组防护措施对急性反应作用较明显,表现为炎症细胞减少、血管内皮细胞肿胀减轻等。对慢性损伤作用不明显。说明两组防护措施对化疗药物致兔耳缘静脉损伤均有保护作用。     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对脓毒症大鼠多器官损伤的保护作用研究

目的探讨脓毒症致多器官损伤的原因，以及p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂的保护作用和机制。方法采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备脓毒症大鼠模型，治疗组采用术前给予p38MAPK抑制剂SB203580灌胃。在不同时间点观察大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)以及生化指标如丙氨酸转氨酶(ALT)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸磷酸激酶-同工酶(CPK—MB)浓度的变化。结果CLP术后大鼠血清TNF—α、IL-1β显著升高，ALT、BUN、Cr、CPK—MB也进行性升高；血清ALT、BUN、Cr、CPK—MB变化与TNF—α、IL-1β呈显著正相关。应用SB203580后，血清TNF—α、IL-1浓度显著降低，同时ALT、BUN、Cr、CPK—MB也降低。结论TNF—α、IL-1β的大量释放是脓毒症致多器官损伤的原因之一，通过调控p38MAPK信号转导通路可对脓毒症所致多器官损伤起保护作用。     

实验兔胃扩张疼痛模型的建立及其机制

目的：用自制的胃扩张装置建立胃扩张疼痛模型，证实该模型的可靠性，并探讨其机制。方法：健康成年新西兰大白兔16只，随机均分为阻滞组（B）和非阻滞组（NB），在麻醉下B组用高强度聚焦超声阻滞腹腔神经节，NB组行假手术；7天后安置自制的胃扩张装置，14天后，清醒状态下采用容量梯度扩张胃，连续监测胃压力、心率、肌电图及胃容量等变化。结果：兔胃扩张至一定压力可引起拟痛行为反应，肌电图（EMG）电位募集相应地增加。兔胃扩张的压力和容积呈正相关；B组出现拟痛行为反应的容积和压力均高于NB组（P〈0．01）；在出现拟痛行为反应前相同的容积增加引起的压力增高值B组大于NB组（P〈0．01）。结论：本文建立的兔胃扩张疼痛模型是一种可靠的疼痛模型。     

络脉舒通对兔心肌梗死再灌流损伤保护作用的实验研究

目的探讨络脉舒通对兔急性心肌梗死（AMI）再灌流损伤心脏功能和氧自由基的影响。方法新西兰大白兔24只,随机分为络脉舒通组、对照组和假手术组,每组8只,制备AMI再灌流模型。观察各组血流动力学改变,检测丙二醛（MDA）、超氧化物岐化酶（SOD）和一氧化氮合酶（NOS）的变化,测量心肌梗死面积。结果（1）与对照组相比,络脉舒通组缺血-再灌流后2h左室收缩压（LVSP）和左心室内压最大收缩和舒张变化速率（±dp／dtmax）均显著升高（P〈0．05）,LVEDP则显著下降（P〈0．05）。（2）对照组MDA含量比假手术组显著增高（P〈0．05）,而SOD和NOS活性均显著降低（P〈0．05）;与对照组相比,络脉舒通组心肌梗死面积显著缩小（P〈0．05）,心肌MDA含量显著降低（P〈0．05）,心肌SOD和NOS活性均显著增高（P〈0．05）。结论络脉舒通具有清除氧自由基作用,可以减轻心肌再灌流损伤,改善心功能。     

重组腺病毒介导反义p38α基因抑制烧伤复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞凋亡的研究

目的 探讨烧伤血清复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)活化与细胞凋亡之间的关系.方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞,按照处理因素不同分为3组:正常对照组细胞自然生长;烧伤缺氧组细胞给予烧伤血清+缺氧刺激(含10%的40%总体表面积Ⅲ度烫伤大鼠伤后6 h血清的DMEM/F12培养液+1%O2、5%CO2和94%N2);反义阻断组在细胞转染反义p38α重组腺病毒(AD-ASp38α)后给予烧伤血清+缺氧刺激.细胞培养6 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测p38磷酸化水平;采用DNA片断和流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况.结果 与正常对照组比较,烧伤缺氧组p38磷酸化水平(灰度值)明显提高(8.68±0.14比3.21±0.05,P＜0.01),细胞凋亡率明显增高[(50.367±0.451)%比(2.063±0.111)%,P＜0.01];心肌细胞转染AD-ASp38α后,p38磷酸化水平(灰度值)明显下降(5.46±0.16比8.68±0.14,P＜0.01),细胞凋亡率明显降低[(13.200±0.121)%比(50.367±0.451)%,P＜0.01].结论 烧伤血清复合缺氧条件下通过促使p38MAPK活化导致心肌细胞凋亡增多;阻断p38MAPK信号转导通路可减轻严重烧伤早期心肌细胞的损伤.     

缺血预处理对兔脊髓缺血损伤后的保护作用及其机制

目的:探讨缺血预处理对兔脊髓缺血损伤的保护作用及机制。方法:24只雄性新西兰大白兔随机数字表法分3组(每组8只):即缺血组(IC组)、缺血预处理组(IPC组)及假手术组(S组)。IC组夹闭兔腹主动脉肾下段20min,制作兔脊髓缺血模型;IPC组预先使脊髓缺血6min,再灌注30min后再次阻闭兔腹主动脉肾下段20min;S组除不夹闭腹主动脉外,其余处理同IC组。再灌注后8,12,24和48h分别对动物神经功能评分;再灌注后48h,测定血浆血栓素B2(TXB2,TXA2的稳定代谢产物)的含量及6-酮前列素(6-keto-PGF1α,PGI2的稳定代谢产物)的含量,然后处死动物取脊髓,测定脊髓组织中TXB2及6-keto-PGF1α的含量。结果:IPC组神经功能评分各时间点均明显高于IC组。与IC组相比,IPC组血浆和脊髓中TXB2含量明显减少,分别为(108±20)mg/L,(733±64)ng/g(P<0.05,F=27.93,132.887),而IPC组血浆和脊髓中6-keto-PGF1α含量明显增多,分别为(75±14)mg/L,(502±37)ng/g(P<0.05,F=13.185,64.141)。IPC组血浆和脊髓中TXB2/6-keto-PGF1α分别为(1.45±0.17),(1.47±0.19),明显低于IC组(P<0.05,F=20.83,29.447)。结论:缺血预处理对脊髓缺血损伤有显著的保护作用,保护机制与缺血预处理改善脊髓缺血损伤后TXA2-PGI2平衡失调有关。     

p38 MAPK抑制剂对急性肺损伤的治疗作用

目的 观察p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580对LPS诱导的兔急性肺损伤(ALI)的保护作用及其机制.方法 用大肠杆菌内毒素(LPS)制备兔ALI模型;测定不同时间点的动脉血气分析、血清TNF-α和ICAM-1浓度;测量肺干/湿质量比值(肺D/W)及观察肺组织病理学改变.结果 动物注射内毒素1 h后P_(A-a)O_2、血浆TNF-α和ICAM-1水平、肺损伤评分均明显升高(P＜0.05),肺D/W下降(P＜0.05);应用SB203580治疗后,P_(A-a)O_2、血浆TNF-α和ICAM-1水平、肺损伤评分均明显下降(P＜0.05),肺D/W升高(P＜0.05).结论 本研究结果 表明,p38 MAPK抑制剂SB203580对内毒素诱导的ALI,可以明显减轻低氧血症、减轻肺水肿、改善组织病理学和减轻炎症反应.     

家兔挤压伤后应变率成像与心肌病理变化对照的实验研究

目的 研究家兔挤压伤后不同时间段心肌组织的病理情况,通过超声应变率成像技术评价家兔挤压伤后不同时间段的心肌应变率,以评估挤压伤后心脏继发受损的情况.方法 新西兰家兔42只,雌雄不拘,随机分为对照组（6只）和挤压伤组（36只）,挤压伤组应用自制挤压器具按标准制作挤压伤模型.挤压伤组又分为解压即刻、解压后6 h、12 h、24 h、48 h及72 h组,每组6只.分别用光镜和超声应变率成像检测对照组、挤压伤组挤压前及解压后不同时间段左室心肌组织病理变化,以及左室心肌应变和应变率等情况.结果 挤压伤组挤压前与对照组比较,左室心肌感兴趣区域的应变和应变率差异无统计学意（P〉0.05）.与对照组比较,挤压伤组挤压伤后心肌组织发生继发性受损,最明显的病理变化发生在解压后12～24 h;左室心肌感兴趣区域的应变和应变率在解除挤压后12～24 h降至最低（P＜0.01）.结论 挤压伤后心肌发生继发性损害,尤其在解除挤压后12～24 h是挤压伤后心肌继发损伤的达峰时间段.由于缺血再灌注等多种因素可导致心肌纤维正性变力及变时效应减低或丧失,心肌纤维收缩性能明显降低,超声应变率成像能够较为精准、客观地评价心肌收缩性能.     

家兔严重挤压伤后左室整体功能变化的实验研究

目的结合家兔肢体挤压伤后心肌组织超微病理改变情况,应用多功能复合心脏超声心动图技术评价家兔挤压伤后左心功能变化的情况。方法健康新西兰家兔42只,雌雄不拘,将其随机分为未被挤压组6只(对照组)和挤压伤组36只。挤压伤组应用自制挤压器具按标准制作挤压伤模型,依据解压时间不同将挤压伤组分为:解压即刻组、挤压伤后6 h、12 h、24 h、48 h和72 h,每组6只;应用多功能复合心脏超声测量各组心脏整体功能;透射电镜观察挤压伤前后心肌细胞超微结构改变。结果持续挤压6 h后解压,解压即刻组心脏整体收缩指标及舒张功能指标测值均降低,且与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);解压后6 h和12 h组左室收缩功能均较对照组显著下降(P<0.01);而左室舒张功能在解压后24 h下降最为明显(P<0.01)。电镜下观察可见挤压伤后心肌细胞线粒体水肿、嵴小梁断裂等改变。结论严重挤压伤后可致心肌组织继发损伤及心功能障碍,在解压后逐渐加重,至解压后12～24 h达到峰值,持续至伤后72 h后逐渐缓解;多功能复合心脏超声技术能够较精准、客观、快捷评估挤压伤后左室整体功能情况。     

EV71感染对小鼠脑组织p38MAPK信号通路影响的研究

目的研究肠道病毒71(EV71)感染对小鼠脑组织p38MAPK信号通路的影响。方法利用实验室筛选出的具有较强致病能力的EV71-GZCH43-3株,采用不同的病毒滴度(103PFU/ml,105PFU/ml,107PFU/ml)感染2周龄的ICR幼鼠,建立轻、中、重三种不同程度的幼鼠感染模型,病理切片观察其肺组织病理变化;利用流式细胞术检测感染模型幼鼠中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的变化情况;反转录酶-聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)方法检测p38MAPK信号途径基因的表达变化;酶联免疫分析法(ELISA)检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素(IFN-γ)水平的变化情况。结果成功建立轻、中、重三种不同感染滴度的EV71感染幼鼠模型,其肺组织明显充血;流式细胞术结果显示随着病毒感染滴度的增加,Treg细胞的数目明显增加;ELISA结果表明随病毒滴度增加IFN-γ表达量增加,高滴度组大约是对照组的30倍;TNF-α先随病毒滴度增加而略有降低,随后在高滴度组又明显升高。结论表明EV71感染可能通过影响p38MAPK信号途径基因的表达而间接调节TNF-α和IFN-γ体内表达,诱导宿主病理性免疫反应,引起宿主免疫功能的紊乱。     

血必净注射液对家兔大动脉病变所致缺血/再灌注损伤的作用研究

目的 探讨家兔缺血/再灌注(I/R)损伤模型建立后血液中丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1p)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酐(Cr)的变化,以及血必净注射液对急性I/R损伤的肝肾保护作用.方法 清洁级家兔60只,按随机数字表法分为6组:正常组,假手术组行同侧股动脉部位皮肤切开缝合,模型组以及血必净低、中、高剂量治疗组;建立I/R损伤模型(股动脉缺血4h后再通)后即刻及12、36、60h分别从耳缘静脉注射2ml/kg生理盐水或0.33、0.66、1.32 g/kg血必净注射液.各组于术后6、12、24及72h分别抽血检测血清中MDA、IL-1β、TNF-α、AST、Cr.结果 模型组术后各时问点MDA、IL-1 β、TNF-α及术后72 h AST、Cr均显著高于正常组和假手术组.与模型组比较,血必净各组随剂量增加各指标依次降低,血必净高剂量组6、12、24、72 h血清MDA( μmol/L)、IL-1 β(ng/L)和TNF-α(μg/L)均明显降低(MDA:9.74±3.71比12.35±4.64,11.26 ±4.14比12.82±3.85,9.72±2.25 比 13.30 ±2.83,9.12 ±2.72比13.10±2.72;IL-1β:83.49±12.79比100.09±17.53,85.10±11.75比102.64±19.64,75.97±11.29比99.24±14.62,81.96±14.81比99.59±12.05;TNF-α:8.95±1.13比9.94±1.29,8.79±1.80比9.56±0.89,8.27±1.83比9.51±1.32,7.23±1.39比9.23±1.05,P＜ 0.05或P＜0.01);24h、72 h时血必净低、中、高剂量组血清AST(U/L)和Cr( μmol/L)均显著降低(AST 24 h:24.00±1.27、23.80±1.11、22.90±1.65比39.50±1.73,72 h:32.15±1.95、32.90±1.77、32.25±2.25比52.86±2.43;Cr 24 h:273.78±17.04、267.07±19.59、265.25±15.59比347.60±18.83,72 h:437.38±18.48,343.77±16.79、351.48±20.22比437.50±19.86,均P＜0.01).结论 I/R损伤可导致明显的全身炎症反应和氧自由基损伤,高剂量血必净注射液可以显著减轻全身炎症反应,降低血清MDA水平,低、中、高剂最血必净注射液治疗均能减少肝肾损伤,具有保护肝肾功能的作用.     

家兔自体基质血管成分改善脂肪组织移植效果的实验研究

目的探讨自体基质血管成分对于提高脂肪组织移植后成活率的作用。方法选取健康家兔共6只,以各家免右侧耳朵移植区6个为研究组,左侧耳朵移植区6个为对照组,实验组采用脂肪组织2 ml复合基质血管成分0.2ml注射,对照组采用脂肪组织2 ml复合0.9%氯化钠溶液0.2 ml混合注射。结果 12例自体脂肪颗粒移植手术均获成功,受试部位未见血肿和感染发生,且移植脂肪组织内部未发现有变性坏死区域。两组受试部位术后当天的吸收率和存活率比较无显著差异(P>0.05)。术后1、3、6个月两组脂肪组织吸收率均逐渐升高,但研究组脂肪组织吸收率均明显低于对照组,差异具有显著性(P<0.05)。术后1、3、6个月两组存活率逐渐降低,但研究组存活率减少量较对照组小,两组术后各阶段存活率比较具有显著差异(P<0.05)。结论基质血管成分同脂肪组织同样具有治疗的安全性,且研究组脂肪组织成活率高,吸收率增长速度慢,可尝试作为新的治疗方法进行临床验证。