三阴乳腺癌中C—myc和Skp2的表达及相关性研究

目的检测三阴乳腺癌（TNBC）组织中C．myc和Skp2的表达情况及其意义。方法选取2008年1月一2011年12月手术切除的TNBC标本56例,采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白．过氧化物酶连结法检测它们和30例癌旁正常乳腺组织中C．myc和sk02的表达情况。结果TNBC组织中C．myc和Skp2表达定位于细胞核,其表达率分别为57．14％（32／56）和58．93％（33／56）,明显高于癌旁正常组织（P〈0．05）;56例TNBC组织中,C-myc和skp2蛋白在组织学分级Ⅲ级表达率高于I＋Ⅱ级（P〈0．05）;C．myc和skp2的病理分期Ⅲ期的表达率高于I-Ⅱ期（P〈O．05）;表达率高低与腋窝有无淋巴结转移有关（P〈0．05）,而与病理组织类型无关（P〉O．05）;相关性分析显示,C．myc和Skp2二者之间呈正相关（P〈O．05）。结论C．myc和Skp2在TNBC中呈明显高表达,与TNBC的发生、发展和转移密切相关。     

p27在胃癌组织中表达及临床意义

目的观察p27在不同病理类型胃癌组织中表达情况及其在胃癌发生中的作用。方法应用SP法检测p27在135例胃癌组织及45例正常胃黏膜组织中表达情况,其中高、中分化腺癌55例,低分化腺癌53例,黏液癌27例。结果胃癌组p27阳性表达率（45．93％）低于对照组（84．44％）;胃高、中分化腺癌p27阳性表达率（65．45％）高于胃低分化腺癌（33．96％）和黏液癌（40．74％）（P均〈0．05）,胃低分化腺癌与黏液癌间p27阳性表达率差异无统计学意义（P〉0．05）;无淋巴结转移者胃癌组织中p27阳性表达率（48．00％）明显高于有淋巴结转移者（22．50％）（P〈0．05）;术后生存期≥5a者胃癌组织中p27阳性表达率（52．63％）高于术后生存期〈5a者（16．67％）（P〈0．05）。结论p27在胃癌中的低表达可能与胃癌的发生、恶性程度、淋巴结转移及生存期有关;检测胃癌组织中p27的表达有助于判断肿瘤进展及预后。     

鼻咽癌组织中细胞周期相关基因CDKN2B／p15的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌（NPC）组织中CDKN2B／p15蛋白、mRNA的表达与肿瘤微血管密度及其临床病理特征的关系。方法90例鼻咽癌组织（病例组）、45例慢性鼻咽炎组织（对照组）中应用免疫组织化学技术检测p15蛋白表达,应用实时荧光定量RT-PCR检测p15 mRNA的表达。结果p15蛋白阳性表达率鼻咽癌组织（病例组）（26．7％和35．0％）均低于于对照组（93．3％和93．2％）,P均〈0．01;p15的mRNA表达水平在肿瘤组中较正常组织明显降低（P〈0．001）;鼻咽癌组织中p15蛋白和mRNA阳性表达率Ⅲ-Ⅳ期（38．9％和44％）均低于Ⅰ-Ⅱ期（94．4％和79．2％）,P均〈0．05,颈部淋巴结转移者（70．4％和63％）均低于颈部淋巴结无转移者（88．9％和82．5％）,P均〈0．05;鼻咽癌组织中p15蛋白阳性表达组与阴性表达组MVD值无明显差异（P均〉0．05）。结论p15在鼻咽癌组织中呈低表达,它与鼻咽癌病期进展和颈部淋巴结转移有一定关系,在鼻咽癌发生发展中可能起一定作用。p15可作为反映鼻咽癌生物学行为和估计患者预后的客观指标。     

Skp2和p27kip1蛋白在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达、定位及意义

目的 探讨B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)组织中Skp2和p27kip1蛋白的表达、定位及意义.方法 用免疫组织化学方法检测72例B-NHL和14例反应性增生淋巴结组织Skp2、p27kip1蛋白及细胞增殖指标Ki-67的表达情况,结合病理资料进行统计分析;用免疫荧光双标记技术检测淋巴瘤Raji细胞株Skp2和p27kip1蛋白的定位情况.结果 Skp2蛋白在B-NHL组织中的表达高于反应性增生的淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达高于惰性组;p27kip1蛋白在B-NHL组织中的表达低于反应性增生淋巴结(不含生发中心),在侵袭性B-NHL组织中的表达低于惰性组;skp2蛋白主要在Raji细胞的胞浆中表达,p27kip1蛋白主要表达于胞核.结论 在B-NHL组织中,Skp2的高表达和p27kip1的低表达可能与其发生发展有关;skp2和p27kip1在Raji细胞中的亚细胞定位与其生物学功能一致.     

CD147和E—cadherin在甲状腺肿瘤中的表达及意义

目的探讨CD147和E—cadherin在甲状腺肿瘤中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测cCD147和E．cadherin在117例甲状腺病变组织（甲状腺癌82例,良性病变35例）和20例癌旁正常组织的表达情况。结果甲状腺癌CD117和E-cadherin的阳性表达率（分别为37．8％,68．3％）显著高于良性病变（分别为14．3％,82．9％）和癌旁正常组织（分别为0．00％,100％）,均P〈0．01。甲状腺癌中CD147和E-cadherin在不同的病理类型、各临床分期和淋巴结有无转移者中阳性表达程度不同,均P〈0．01。CD147和E—cadherin在甲状腺癌组织中的阳性表达呈显著负相关（r=0．604,P〈0．01）。结论CD147和E．cadherin在甲状腺癌组织中的阳性表达程度与甲状腺癌病理类型、临床分期和淋巴结转移密切相关。联合检测甲状腺癌组织中的CD147和E—cadherin表达情况,可预测甲状腺癌的浸润和转移,对指导临床治疗及预后评估有重要意义。     

采用组织芯片技术研究宫颈癌中HPV与细胞周期调控因子p27表达的关系

目的研究宫颈癌组织中HPV感染与细胞周期调控因子p27表达的关系及意义。方法采用组织芯片技术制作60例宫颈癌组织芯片，同时用S—P免疫组织化学和原位分子杂交方法检测宫颈癌组织芯片中HPV、p27、p27mRNA的表达。结果60例宫颈癌组织中HPV、p27、p27mRNA的阳性率分别为48．3％、38．3％、51．7％。淋巴结转移阳性宫颈癌中p27和p27mRNA阳性率明显低于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．01）。淋巴结转移阳性宫颈癌中HPV阳性率明显高于淋巴结转移阴性宫颈癌（P〈0．05）。宫颈癌和CINⅢ级宫颈上皮内瘤变组织中HPV阳性率明显高于CINⅠ级和CINⅡ级（P〈0．05）。而p27和p27mRNA阳性率明显低于CINⅠ级和CINⅡ级宫颈上皮内瘤变组织（P〈0．05）。宫颈癌中HPV与p27及p27mR—NA表达呈明显负相关（r=-0．574，P〈0．05；r=-0．612，P〈0．01）。结论HPV感染和细胞周期调控因子p27低表达与宫颈癌密切相关。HPV感染与p27低表达有关。HPV和p27可作为评估宫颈癌预后的参考指标。应用组织芯片大规模高效检测临床组织样本是可行的，具有快速、方便、经济、准确的特点。     

ARHI和环氧化酶-2蛋白在子宫颈腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨ARHI蛋白和环氧化酶-2（COX-2）蛋白在子宫颈腺癌发生中的作用及其相互关系。方法采用免疫组织化学法检测40例子宫颈腺癌及30例慢性子宫颈炎组织中。ARHI蛋白及COX-2蛋白的表达情况。结果ARHI在40例子宫颈腺癌组织阳性率为50．0％（20／40）,低于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率90．0％（27／30）,差异有统计学意义（X^2=12．43,P〈0．05）;COX-2在40例子宫颈腺癌组织阳性率82．5％（33／40）,高于慢性子宫颈炎患者子宫颈组织阳性率0（0／30）,差异有统计学意义（x^2=46．16,P〈0．05）;ARHI蛋白阳性表达率与子宫颈腺癌临床分期（x^2=3．96,P〈0．05）及组织分化程度高低有关（x^2=7．04,P〈0．05）。COX-2蛋白与子宫颈腺癌组织分化程度有关（x^2=7．04,P〈0．05）,与临床分期无关（P〉0．05）;ARHI蛋白和COX-2蛋白与淋巴结有无转移均无关（P均〉0．05）;ARHI蛋白和COX．2蛋白表达有关联（r=0．31,P〈0．05）。结论子宫颈腺癌的发生与ARHI基因失活和COX-2蛋白表达异常有关,两者可能协同作用参与子宫颈腺癌的发生。     

p57^kip2和Rb蛋白表达与大肠腺癌发生及预后

目的 探讨细胞周期调控抑制因于p57^kip2和视网膜母细胞瘤蛋白(Rb蛋白)在大肠腺癌发生发展中的作用。方法 采用免疫组化技术SP法，检测p57^kip2和Rb蛋白在37例大肠腺癌和26例正常大肠黏膜组织中的表达。结果 p57^kip2蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为40．5％，显著低于正常大肠腺癌组织(x^2＝5．039，P&;lt;0．05)，并与大肠腺癌组织分化程度和淋巴结转移均有关(x^2＝8．914，x^2＝4．416，P＜0．05)；Rb蛋白阳性表达率在大肠腺癌组织中为51．4％，显著低于正常大肠腺癌组织(x^2=4．234，P＜0．05)，并与大肠腺癌淋巴结转移有关(x^2=14．596，P＜0．05)，但与组织分化程度无关(P&;gt;0．05)；p57^kip2蛋白阳性表达组Rb蛋白阳性表达率高于p57^kip2蛋白明性表达组，但两者之间呈正相关(r=0．369，P&;lt;0．05)。结论 p57^kip2和／成Rb蛋白的低表达可随在大肠癌发生中发挥置要作用并可随预测其恶性程度及转移，对治疗有指导作用；p57^kip2和Rb蛋白在大肠癌细胞周期调控中可能存在着协同作用。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中Skp2表达的临床意义

目的探讨Skp2、p27及Ki-67在弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中表达的临床意义。方法应用免疫组化染色检测60例DLBCL及20例正常淋巴结中Skp2、p27和Ki-67的表达情况,并检测12例DLBCL和12例正常淋巴结中Skp2和p27 mRNA的水平,分析Skp2、p27及Ki-67的表达与DLBCL的关系。结果60例DLBCL中,Skp2、Ki-67表达阳性率均明显高于正常淋巴结（P〈0.01）;p27表达阳性率明显低于正常淋巴结（P〈0.01）;Skp2与p27表达呈明显负相关,与Ki-67表达呈明显正相关（P〈0.05）;Skp2的表达与Ann Arbor分期、疗效及预后显著相关,而与性别、年龄及结外病灶数均无明显相关性,即Ann Arbor分期为Ⅲ/Ⅳ期者以及疗效差者Skp2为高表达,Skp2低表达组生存率明显高于Skp2高表达组。p27和Ki-67的表达与上述临床指标无明显相关性。12例DLBCL的Skp2 mRNA表达水平相对量升高（P〈0.05）,而p27 mRNA表达水平相对量并无明显降低。结论Skp2的高表达可能在DLBCL的发生发展中起着重要的作用,且与病程的进展、疗效及预后密切相关,可以作为DLBCL极有价值的分子生物学预后指标。     

Survivin、p27在宫颈癌组织中的表达及其与侵袭、转移的关系

目的：探讨生存素（Survivin）、027蛋白在人宫颈癌中的表达水平与宫颈癌组织侵袭、转移能力的关系。方法：采用免疫组织化学S-P法和图像分析系统检测Survivin、p27在10例正常宫颈、10例宫颈原位癌、40例官颈鳞癌、11例宫颈腺癌组织中的表达，分析表达结果与临床病理特征的关系。结果：从正常宫颈上皮一原住癌一浸润癌，Survivin阳性表达量显著升高，p27表达量显著降低（P〈0．05）。官颈癌Survivin表达量与盆腔淋巴结转移、局部侵袭、组织学类型、患者年龄有关（P〈0．05），而与FIGO分期、组织学分级无关（P〉0．05）；宫颈癌p27阳性表达量与盆腔淋巴结转移、局部侵袭、组织学分级有关（P〈0．05），而与FIGO分期、组织学类型、患者年龄无关（P〉0．05）。有盆腔淋巴结转移、脉管和（或）间质侵袭患者的Survivin阳性表达量增多，而p27的表达量与之相反（P〈0．05）。结论：Survivin、p27蛋白异常表达在宫颈癌中的恶化、侵袭、转移中起重要作用，检测Survivin、027蛋白表达水平，对判断宫颈癌的恶性程度、侵袭转移潜能，评估患者预后度制定优化治疗方案有一定参考价值。     

p27和cyclin D1在甲状腺乳头状癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的:研究p27、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)在甲状腺乳头状癌中的表达及其与甲状腺乳头状癌淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学EnVision法检测60例甲状腺良性病变(其中结节性甲状腺肿30例,甲状腺腺瘤30例)和92例甲状腺乳头状癌(其中无淋巴结转移者50例,淋巴结转移者42例)组织中p27、cyclin D1的表达情况。结果:p27在甲状腺良性病变和甲状腺乳头状癌中的阳性表达率分别为91.7%、62.0%,而cyclin D1的阳性表达率分别为28.3%、63.0%,差异均有统计学意义(P0.01)。p27在无淋巴结转移和有淋巴结转移的甲状腺乳头状癌中的阳性表达率分别为76.0%、45.2%,而cyclin D1的阳性表达率分别为50.0%、78.6%,差异均有统计学意义(P0.01)。有淋巴结转移的甲状腺乳头状癌中p27和cyclin D1的表达呈负相关(r=-0.46,P0.01)。结论:甲状腺乳头状癌中p27低表达、cyclin D1高表达,且二者与甲状腺乳头状癌的淋巴结转移相关,并对预后判断有指导意义。     

应用shRNA抑制Skp2表达对喉癌化疗的增敏作用研究

目的探讨shRNA(small hairpin RNA)抑制S期激酶相关蛋白2(S-phase kinase associated protein 2,Skp2)基因表达对化疗后喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将喉癌细胞分为空质粒对照组、Skp2 shRNA组、Skp2 shRNA加化疗组、空质粒加化疗组及化疗组。应用脂质体将Skp2 shRNA转染到人喉癌Hep-2细胞,6 h后加入顺铂,培养48 h后流式细胞术检测Skp2、p27蛋白表达和细胞凋亡,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖变化,并进行比较。结果 Skp2 shRNA组与空质粒对照组比较,Skp2蛋白表达明显降低,p27蛋白表达明显增高,差异有统计学意义(P0.01,P0.05)。Skp2 shRNA加化疗组与空质粒加化疗组比较,各剂量顺铂(0 mg/L、1 mg/L、2 mg/L、3 mg/L)作用下细胞增殖抑制率均明显增高,差异均有统计学意义(P均0.01);与空质粒加化疗组(2 mg/L顺铂)比较,Skp2 shRNA加化疗组细胞凋亡率明显增加,差异有统计学意义(P0.01)。结论 Skp2 shRNA可选择性阻断细胞Skp2基因表达,联合化疗可能为喉癌的综合治疗提供新的途径。     

COX-2、MMP-9在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨COX-2、MMP-9在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法免疫组化法检测COX-2、MMP-9在甲状腺癌、甲状腺瘤、结节性甲状腺肿及及正常甲状腺组织的表达情况,并对临床病理特征及淋巴结转移进行对比分析。结果 COX-2、MMP-9在甲状腺癌中的表达明显高于甲状腺良性病变,与年龄、肿瘤大小、肿瘤包膜性、临床分期有密切关系（P〈0.05）,COX-2与淋巴结转移有显著相关（P〈0.05）。COX-2、MMP-9均与性别无明显关系（P〉0.05）。结论 COX-2和MMP-9可作为甲状腺癌重要的恶性生物学指标,检测COX-2和MMP-9有助于术前诊断甲状腺癌及判定淋巴结转移、肿瘤浸润情况,使患者得到及时有效治疗。     

甲状腺癌组织中p27和增殖细胞核抗原的表达及其相关性分析

目的探讨甲状腺癌组织中p27和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况及其相关性。方法用免疫组织化学法检测86例甲状腺癌(甲状腺癌组)、54例甲状腺腺瘤(腺瘤组)和瘤旁正常甲状腺组织(正常组)中p27和PCNA的表达情况。结果 p27在甲状腺癌组阳性表达率分别为37.21%,高于腺瘤组和正常组,差异有统计学意义(P<0.01)。PCNA在甲状腺癌组阳性表达率为66.27%,高于腺瘤组和正常组,差异有统计学意义(χ2=22.16,P<0.01)。p27在甲状腺乳头状癌、滤泡癌、髓样癌和未分化癌中的阳性表达率分别为48.94%、31.25%、14.29%和11.11%,差异有统计学意义(χ2=8.85,P<0.05);PCNA在乳头状癌、滤泡癌、髓样癌和未分化癌中的阳性表达率分别为53.19%、75%、85.71%和88.89%,差异有统计学意义(χ2=8.57,P<0.05)。甲状腺癌p27和PCNA表达呈负相关(r=-0.51,P<0.01)。结论 p27和PCNA在甲状腺癌中的阳性表达明显减少,并且随着分化程度降低减少更为明显;而PCNA在甲状腺癌中的阳性表达明显增加,并且随分化程度降低增加更为明显;并且p27和PCNA表达呈负相关。     

高迁移率族蛋白在肺癌转移中的作用

目的探讨高迁移率族蛋白1（high-mobilitygroupboxlprotein,HMGBl）在非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer,NSCLC）发生、发展和转移中的作用。方法采用免疫组织化学方法检测95例NSCLC和27例癌旁正常肺组织（对照组）中HMGBl的表达,并分析其与临床参数的关系。结果HMGBl在转移组的高表达（65．5％）显著高于非转移组（21．6％）,且差异有统计学意义（尸〈0．01）。HMGBl在不同组织学分型、分化程度、TNM分期患者中,其表达差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。HMGBl在NSCLC癌组织中的高表达（48．4％）明显高于癌旁正常肺组织（25．9％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。HMGBl在鳞癌组织间质高表达率为78_3％。腺癌组织间质高表达率为40．9％,二者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HMGBl高表达与NSCLC的转移有关,可作为肺癌患者转移、治疗和预后判断指标。     

骨桥蛋白在乳头状甲状腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨骨桥蛋白在乳头状甲状腺癌中的表达及意义,分析其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测70例乳头状甲状腺癌和20例结节性甲状腺肿中骨桥蛋白的表达。结果骨桥蛋白在乳头状甲状腺癌与结节性甲状腺肿中的阳性表达率分别为72．86％、10．00％,两者阳性表达率有显著性差异（P〈0．05）,有淋巴结转移与无淋巴结转移的乳头状甲状腺癌中骨桥蛋白阳性表达率分别为86．11％、58．82％,两者有显著性差异（P〈0．05）结论骨桥蛋白在乳头状甲状腺癌中为过表达,且与淋巴结转移密切相关。     

SHP-1在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨甲状腺癌组织中的SHP-1蛋白表达及其意义。方法取一定量的甲状腺癌组织、癌旁组织、结节性甲状腺肿组织、正常甲状腺组织,运用PicTureTM二步法免疫组织化学染色技术检测组织中SHP-1的表达情况。结果甲状腺癌组织中的SHP-1表达阳性率为100%,明显高于其他组织(P0.05),4种病理类型的甲状腺癌组织全部表达SHP-1蛋白,且与结节性甲状腺肿组织相比较,SHP-1阳性表达的敏感度为100%,特异度为27.78%。4种甲状腺组织中,甲状腺癌SHP-1强阳性表达率为68.97%,显著高于其他各组织(P0.01)。结论 SHP-1在甲状腺癌组织中呈异常高表达,特异性差,提示SHP-1蛋白的表达增高与甲状腺癌的发生关系密切,但尚不能作为甲状腺癌的标志分子,其强阳性表达可为甲状腺癌的诊断提供参考。     

CK-19在甲状腺乳头状癌及甲状腺乳头状增生患者外周血中的表达

目的检测细胞角蛋白（CK—19）在甲状腺乳头状癌（PTC）和结节性甲状腺冲并乳头状增生患者血清中的表达,筛选甲状腺乳头状癌的辅助诊断指标。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测结节性甲状腺肿并乳头状增生25例、乳头状癌25例及正常人25例血清中CK-19的表达。结果CK-19表达水平以甲状腺乳头状癌高,结节性甲状腺肿伴乳头状增生居中,正常人低,三者差异有显著性（F=8．371,P〈0．05）;CK-19表达水平在甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移比无伴淋巴结转移者更高,两者差异有显著性（t=5．371,P〈0．05）。结论甲状腺乳头状癌患者外周血中CK-19表达率增高;CK-19对于甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移的诊断具有一定的指导作用。