新药发现与高通量药物筛选

为了发现更为有效的药物 ,医药学科技工作者进行了长期艰苦的努力 ,积累了丰富的经验 ,创造了大量新的发现新药的方法 ,特别是随着科学技术的不断进步 ,技术手段也不断改进 ,新方法、新技术不断出现。本文根据药物发现的基本规律 ,介绍新药发现的过程及高通量药物筛选 (ＨＴＳ)的基本原理和方法。1　药物研究的基本过程。根据药物研究中采用的方法和技术特点 ,药物研究的全过程大概可以分为三个主要阶段 :药物发现 ;药物的临床前研究 ;药物的临床研究。只有完成临床研究并通过国家新药审批的药物才能正式用于临床。1.1　药物的发现　药物的…     

创新药物研究与高通量筛选

根据新药研究的资料,讨论了创新药物的特点和开发研究的规律。总结了创新药物的类型,论述了创新药物的发现,研究的关键技术问题和思路,根据实际工作内容,介绍了高通量药物筛选的概念、原理、方法和步骤,分析了高通量药物筛选技术在创新药物研究中的优势和不足,论述了高通量药物筛选技术在创新药物研究中的地位和应用前景。     

创新药物研究与高通量筛选

根据新药研究的资料,讨论了创新药物的特点和开发研究的规律,总结了创新药物的类型,论述了创新药物的发现、研究的关键技术问题和思路.根据实际工作内容,介绍了高通量药物筛选的概念、原理、方法和步骤,分析了高通量药物筛选技术在创新药物研究中的优势和不足,论述了高通量药物筛选技术在创新药物研究中的地位和应用前景.     

高通量筛选与药物创新

药物研究是关系人类健康的事业，开发新药可以产生巨大的经济和社会效益，创新药物的研究和开发已经成为医药领域长期的重要课题。新药研究不仅需要依赖坚实的基础研究成果，其自身也具有独特的规律和要求，掌握这些规律和要求，有助于促进创新药物的发现和研究。本文根据相关文献，讨论了创新药物的类型和特点，在此基础上论述了创新药物研究的理论和高通量药物筛选在创新药物研究中的应用。     

高通量药物筛选技术进展与新药开发策略

高通量药物筛选技术的快速发展,促进了高新技术和科学研究成果在医药科学研究中的广泛应用。生命科学技术、化学以及计算机技术的快速发展,在新药研究与开发中提出了大量新的课题,极大地促进医药研究的进程。但新技术的应用,必须及时调整研究策略,才能真正发挥新技术的作用。本文讨论了计算机技术、生物芯片技术、组合化学合成技术、组合生物合成技术以及高通量筛选技术在药物发现中的作用和特点,探讨了新的药物发现的规律和特点,提出新技术应用条件下药物发现的基本策略。     

药物创新与高通量筛选

药物研究是关系人类健康的事业，开发新药可以产生巨大的经济和社会效益，创新药物的研究和开发已经成为医药领域长期的重要课题。新药研究不仅需要依赖坚实的基础研究成果，其自身也具有独特的规律和要求，掌握这些规律和要求，有助于促进创新药物的发现和研究。笔者根据相关文献，讨论了创新药物的类型和特点，在此基础上论述了创新药物研究的理论和高通量药物筛选在创新药物研究中的应用。     

高通量药物筛选模型

介绍了可用于药物筛选的3种新的快速高通量筛选方法，包括基于反酵母双杂交的筛选系统；细胞平台伤的高通量筛选系统以及动物水平的筛选系统。并对其应用原理，应用情况和优缺点进行了阐述。     

靶向G蛋白偶联受体高通量药物筛选技术研究进展

G蛋白偶联受体(GPCR)是临床广泛应用药物的主要靶点之一。靶向GPCR的高通量药物筛选新技术不断涌现,为发现高效、高选择性、低毒的药物提供可能,并使选择合理的GPCR药物筛选策略显得尤为重要。本文综述了靶向GPCR药物高通量筛选相关技术及策略的研究进展,主要包括基于GPCR受体配体结合、第二信使、β-arrestin、调控元件报告基因、内化、聚合体及变构调节剂等方面的高通量药物筛选技术,以及相关技术的代表性商品化产品以供参考。     

药物高通量筛选分析技术

高通量筛选分析技术在药物研究中已有大量应用， 除化合物的药理活性，还涉及药代动力学性质、不良反应等的检测分析。本文分类列述了一些近年来在药物研究中应用的高通量筛选分析方法，对大多数方法的原理进行了简述。认为自动化 技术、“同质”技术和报告基因技术等对实现高通量筛选分析具有重要意义。另外，对高通量筛选算法研究也进行了介绍。     

高通量药物代谢与毒性筛选平台研究进展

现代药物研发是一个多阶段的过程，需要多学科的参与，包括基于疾病的药物作用靶点的发现、应用高通量技术对化合物和／或天然产物库进行筛选、对先导化合物的进行结构优化并进行体内外药物代谢动力学、毒理学以及生物利用度的研究，最后进入临床前研究和临床研究。     

极化荧光在高通量药物筛选中的应用

1　前言基于荧光技术的检测分析方法是近年来被应用于药物高通量筛选 (high throughputscreening,HTS)的重要方法之一,荧光检测方法具有灵敏度高、方法简便的优点,目前应用于HTS的荧光技术包括均相时间分辨荧光分析法 (homogeneoustimeresolvedfluorescence,HTRF),荧光共振能量     

谷胱甘肽转移酶抑制剂的高通量筛选

谷胱甘肽转移酶(glutathione Stransferase,GST)是一组具有多种生理功能的同工酶家族,广泛分布于动植物体内,作为机体的II相解毒酶,参与机体的解毒作用[1].研究表明,GST的酶活性水平与肿瘤的耐药性密切相关[2～4].因此,GST可能是治疗耐药肿瘤的潜在药物作用靶点. 目前已知的GST抑制剂大多因毒性较大,限制了临床应用.研究发现,一些动植物体内含有对GST有抑制剂作用的成分[5～8].为了广泛寻找GST特异性抑制剂,本研究旨在建立一种快速、高效、稳定、经济的高通量筛选方法,以GST为靶点,通过高通量筛选技术,对自然界广泛存在着的抑制GST活性的物质进行筛选,以期为开发安全有效的、提高耐药肿瘤临床化疗敏感性的药物提供新的技术方法.     

细胞间粘附分子-1抑制剂的高通量筛选

目的建立细胞间粘附分子-1（ICAM-1）抑制剂的高通量筛选方法。方法用脂多糖（LPS）激活原代培养的人脐带内皮细胞，用酶联免疫法（ELISA）测定内皮细胞激活后粘附分子ICAM-1的表达。用MTT法检测所筛化合物的毒性作用。结果LPS时间和剂量依赖性地激活内皮细胞表达ICAM-1, 以质量浓度为1 mg·Ｌ^-1和刺激时间为24 h为佳。在对2 000个化合物的初筛中，发现30个化合物可抑制ICAM-1的表达，入围率为1.5%，其中24个化合物有细胞毒作用。结论ELISA方法成本低、重复性好，效率高，适合ICAM-1抑制剂的高通量筛选。     

Yeast: bridging the gap between phenotypic and biochemical assays for high-throughput screening

ABSTRACT

Introduction: Both in vitro biochemical and phenotypic assay platforms have clear limitations in high throughput screening (HTS) for drug discovery. The use of genetically tractable model yeast as a vehicle for target-based HTS overcomes many of these by allowing the identification of on-target compounds that function within a eukaryotic cellular context.

Areas covered: In this special report, the use of yeast-based assays in HTS is discussed with reference to the various platforms that have been utilized over the past 20 years. The specific issues considered are the necessity to employ counter and secondary screening approaches to ensure the on-target activity of hits, and the recent developments in detection systems that have facilitated miniaturization and ultra-HTS.

Expert opinion: It is difficult at present to predict the future. That being said, the demonstrable possibilities of optimizing yeast-based HTS, coupled with the demonstration of utility in an industrial setting, shows that these platforms have the potential to bridge the gap between phenotypic and biochemical assays for HTS.     

糖原磷酸化酶抑制剂高通量筛选模型的建立*

目的:建立糖原磷酸化酶(GPa)抑制剂的体外高通量筛选模型。方法:用梯度离心方法提取大鼠肝脏GPa,以葡萄糖-1-磷酸作为底物,通过测定反应中磷酸根的释放量,间接反映肝脏GPa的活性。通过对反应体系的优化,调整反应条件,建立96孔微孔板的高通量筛选模型,用咖啡因对此模型进行验证,并评价高通量技术参数[Z′-因子(Z-′factor),信号本底比(signal to background,S/B),信噪比(signal to noise,S/N)]。用此模型对5 000个样品(包括合成化合物、天然提取物)组成的随机库进行体外筛选,考察这些样品对GPa的抑制作用。结果:确定反应体系条件是:反应温度25℃,反应时间30 m in,底物浓度0.5 mmol.L-1,大鼠肝脏GPa的用量为250 ng。用此条件测定咖啡因对GPa的抑制曲线,计算其半数抑制浓度(IC50)为(285.3±39.6)μmol.L-1,与文献报道(IC50=240μmol.L-1)基本一致;本模型技术参数Z′-因子=0.79,S/B=0.45,S/N=11.32,表明此模型可以用于高通量筛选。应用此模型筛选得到有活性的化合物9个,其IC50在3.56~45.75μmol.L-1。结论:建立的体外GPa抑制剂高通量筛选模型具有快速、微量、准确的特点,可以作为研究降糖药的工具。     

毒蕈胆碱M_1受体激动剂的高通量筛选模型

目的　建立毒蕈碱样胆碱M1 受体激动剂的高通量筛选模型 ,以此模型进行M1 受体激动剂筛选。方法　将M1 受体基因质粒 (M1 /pCDNA3 1 )与报告基因质粒 (3×CRE/ 3×MRE/SRE LUC)按 1∶5的比例共转染HEK2 93 ,建立了一个稳定的M1 受体激动剂报告基因筛选细胞株。配体与细胞表面M1 受体结合后 ,激活相应的信号通路 ,调节报告基因的表达 ,通过测定荧光酶素报告基因表达水平的变化 ,评估配体激活M1 受体的生物活性。结果　通过对筛选条件 ,如细胞数目、荧光素酶表达时间、底物浓度的优化 ,建立了可靠的筛选方法 ,并对多种抗衰老中药水提物进行了筛选 ,找到 3种对M1 受体有活性的中药。结论　该系统能准确、稳定、有效地应用于M1 受体激动剂的高通量筛选     

钾通道调节剂的高通量筛选模型

目的建立钾通道调节剂高通量筛选的细胞模型。方法96孔板上细胞负载荧光染料DiBAC₄(3),测定不同化合物对荧光强度的影响,反映细胞膜电位的变化,间接反映化合物对钾通道的作用。结果高钾去极化和钾通道阻断剂4-AP,TEA,E-4031,glibenclamide,quinidine和nifedipine均能增强细胞的荧光强度,钾通道开放剂cromakalim能减弱细胞的荧光强度,上述化合物在一定剂量范围内均有剂量效应关系。利用该模型筛选76个化合物,发现9个化合物的荧光强度变化值有较好的剂量效应关系,有待膜片钳技术的进一步验证和筛选。结论此方法简单,易于操作,重现性好,适用于钾通道调节剂的高通量筛选。     

药物高通量筛选的设计与实施

本文在简要介绍药物高通量筛选体系的基础上,就组建高效能的高通量筛选体系需要关注的因素,如作用靶点、测试方法、检测方法与作用靶点的匹配、关键参数、效能评价等进行了重点阐述,为高通量筛选体系的设计和实施提供了有益的借鉴。     

高内涵药物筛选方法的研究及应用

高通量药物筛选 (high throughputscreening,HTS)是 20世纪 80年代中期产生的为寻找先导物针对大量样品进行药理活性评价分析的一种技术手段,在创新药物的研究和开发中发挥了重要作用。本室于 1998年在国内率先将其用于创新药物的研究,已发现一批具有潜在研究价值的化合物 [1, 2]。近年来在药物发现领域又出现了一个新概念———高内涵药物筛选 (high contentscreening,HCS)。本文就高内涵药物筛选目前的研究和应用情况作一讨论。1　高通量药物筛选与高内涵药物筛选高通量药物筛选是以药物发现的基本规律为基础,应用药理学、生物化学…     

P-gp蛋白功能抑制剂高通量筛选模型的建立与应用

目的建立高通量筛选模型,寻找疗效好、毒副作用小的肿瘤多药耐药逆转剂。方法以罗丹明123荧光染料胞内积累实验为基础,建立基于细胞水平的高通量筛选模型,对480个中药样品进行了高通量筛选,并采用剂量—活性依赖实验和抗性增敏实验验证阳性样品。结果模型Z′因子为0.72,筛选得到2个中药样品。结论建立的P-gp蛋白功能抑制剂高通量筛选模型稳定性好,灵敏度高,筛选得到的2种中药样品具有较好的P-gp蛋白功能抑制活性。