藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的　研究藻酸双酯钠 (PSS)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳记录技术。结果　PSS明显缩短动作电位时程 (APD) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使APD90 缩短 2 4 9% (P <0 0 5 ,n=6 )、37 7%和 4 7 7% (P <0 0 1,n =6 ) ,使APD50 缩短2 1 1% (P <0 0 5 ,n =6 )、4 5 0 %和 6 3 2 % (P <0 0 1,n =6 ) ,呈明显的剂量依赖关系。PSS浓度依赖性减小L 型钙电流 (Ica L) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使其峰值降低34 3% (P <0 0 5 ,n =6 )、5 8 4 %和 74 9% (P <0 0 1,n =6 )。随着PSS浓度的增加 ,L 型钙电流的I U曲线逐渐上移 ,但其最大激活电压保持为 0mV不变。结论　PSS明显缩短APD ,抑制Ica L,且呈浓度依赖关系     

壬基苯酚对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和动作电位的影响

目的：观察环境内分泌干扰物质——壬基苯酚（Nonylphenol,NP）对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和动作电位的影响。方法：应用酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞,用全细胞膜片钳方法记录不同浓度NP作用下单个心室肌细胞L-型钙电流（如。）和动作电位（AP）的变化。结果：1）NP（10^-5、10^-7、10^-6、10^-5mol．L^-1）使ICa-l峰值电流密度分别从-3．72&#177;1．5pA／pF减少到-2．44&#177;0．4pA／pF（P〈0．05）,-2．34&#177;0．6pA／pF（P〈0．05）,-1．79&#177;0．8pA／pF（P〈0．01）,以及-1．66&#177;0．7pA／pF（P〈0．01）;2）NP使ICa-l的I—V曲线上移,但其形状和峰值电压无明显变化;3）NP对ICa-l稳态激活曲线无明显影响;4）NP可缩短动作电位复极50％和90％的时程（APD50,APD50）,但对静息电位（RP）和动作电位幅值（APA）无明显影响。结论：NP能剂量依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞ICa-l,并能够缩短动作电位时程。     

绞股蓝总皂甙对单个豚鼠心室肌细胞的钙、钠、钾电流及动作电位的影响

目的研究绞股蓝总皂甙（ＧＰ）对成年豚鼠单个心室肌细胞的动作电位（ＡＰ）、Ｌ－型钙通道电流（ＩＣａ）、快钠通道电流（ＩＮａ）以及内向整流钾通道电流（ＩＫ１）的影响。方法膜片钳全细胞记录。结果５０ｍｇＬ－１ＧＰ能使动作电位时程（ＡＰＤ９０）由给药前的（７０８±２４）ｍｓ缩短到给药后的（３９６±１６）ｍｓ（Ｐ＜０．０１），抑制率５８．１％，动作电位幅值（ＡＰＡ）由给药前的（１２１±７．２）ｍＶ降到给药后的（８６±８．６）ｍＶ（Ｐ＜０．０１），抑制率２４．１％，静息膜电位无明显影响；５～５０ｍｇＬ－１的ＧＰ能浓度依赖性阻滞ＩＣａ和ＩＮａ，但对ＩＫ１无明显影响。结论ＧＰ对缺血心肌的保护作用在于减少“钙超载”和抑制异常兴奋性的产生。     

丹参酮Ⅱ-A抑制豚鼠单个心肌细胞L型钙电流和缩短动作电位时程效应的相关性分析

目的旨在探讨药物阻断L型钙电流与其缩短心肌细胞动作电位时程（APD）效应之间的相互关系。方法采用膜片钳全细胞式记录方法，同时观察了丹参酮Ⅱ-A（DST）对豚鼠同一个心室肌细胞跨膜电位和L型钙电流的影响，并对药物的有关效应作相关分析。结果DST显著缩短豚鼠心肌单细胞的动作电位时程（APD），呈剂量依赖关系（r=-0.987）;10、20、和40μmol·L-1DST可使L型钙内向峰电流分别减少35.2％、57.7％和74.7％，亦呈浓度依赖方式（r=-0.948）。经相关性分析证实，在本实验采用的DST相应浓度作用下，APDS50、APD90和APD50～10的缩短与L型钙电流峰值的减少之间呈高度正相关（r分别为0.9870、0.9867和0.9896）。结论DST缩短心肌细胞APD和阻断L型钙电流的效应是高度一致的，且以APD50～10表示平台期的长短更合理。     

银杏叶提取物对豚鼠心室肌细胞动作电位及L型钙离子通道的影响

目的 :观察银杏叶提取物 (EGB)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙通道的影响。方法 :采用全细胞膜片钳技术的电流钳记录动作电位和电压钳记录L 型钙离子通道电流 (ICa L)。结果 :银杏叶提取物 (原液含银杏黄酮甙 0 .80 4g·L-1,银杏内酯0 .0 6g·L-1)明显缩短心室肌细胞动作电位时程(APD) ,1 80 0稀释液致APD90 缩短 13% (P <0 .0 5 ) ,1 2 0 0稀释液致APD90 缩短 2 3% (P <0 .0 5 ) ;银杏叶提取物对心肌细胞L 型钙离子通道的开放有抑制作用 ,在 1 80 0时ICa L 峰值降低 15 % (P <0 .0 5 ) ,1 2 0 0时ICa L峰值降低 4 2 % (P <0 .0 5 ) ,均呈浓度依赖性 ,随着药物浓度的增加 ,I V关系曲线逐渐上移 ,但出现电流峰值的电压不变。结论 :银杏叶提取物能明显缩短APD ,抑制心肌细胞钙离子通道的开放 ,具有明显的浓度依赖关系 ,可能是其抗心律失常的分子基础。     

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞L-钙电流的影响

目的:观察双苯氟嗪(Dip)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(I_(Ca-L))的影响。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。应用全细胞膜片箝技术记录豚鼠单个心室肌细胞钙电流。结果:在0.3-30μmol/L范围内,Dip可浓度依赖性地降低电压依赖性激活I_(Ca-L)峰值,被Dip 3μmol/L所抑制的I_(Ca-L)在冲洗5min后可得到部份恢复。但Dip对I_(Ca-L)的电压依赖特征,最大激活电压,以及I_(Ca-L)稳态激活无明显影响。在Dip3μmol/L存在下,半数激活电压(V_(0.5))和斜率参数(к)与对照组相比,差异均无显著性。V_(0.5)分别为(-12.8±1.7)mV和(-13.2±2.4)mV,к分别为(7.1±0.4)mV和(7.5±0.5)mV(P>0.05)。Dip3μmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活。V_(0.5)分别为(-19.7±2.4)mV和(-31±6)mV,к分别为(3.6±0.3)mV和(1.8±0.2)mV(P<0.05).Dip 3μmol/L还使I_(Ca-L)从失活状态下的恢复明显减慢。结论:Dip主要作用于L-型钙通道的失活状态,加速钙通道失活,并使其从失活状态下恢复减慢,从而抑制I_(Ca-L)。     

赛庚啶对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了赛庚啶(Cyp)对豚鼠心室肌细胞慢钙电流(I_(Ca))的影响,Cyp 3和8μmol·L~1对I_(Ca)的电流-电压关系曲线(I-V曲线)之各电流均有降低作用,使I-V曲线上抬;在指令电位0 mV时,I_(Ca)为次最大值,Cyp 0.3～10μmol·L~1使该I_(Ca)呈浓度依赖性降低,IC_(50)值为1.98μmol·L~1,还观察到Cyp 1μmol·L~1明显增加外向电流(I_(out)),且四乙基铵(TEA)1 mmol·L~1对其有显著的拮抗作用,但对控制电位从80 mV跃升至-40 mV时所出现的瞬时快内向电流,无明显影响.以上结果直接证明了Cyp对心室肌细胞钙跨膜转运有明显降低作用,还可能增加钾外流。     

大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的研究大黄素(emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果在静息状态下,1～100 μmol·L^-1大黄素对［Ca²⁺］i均无影响;对60 mmol·L^-1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响,1 μmol·L^-1表现为促进作用;10 μmol·L^-1无作用;100 μmol·L^-1则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明,1 μmol·L^-1大黄素可明显促进L-型钙电流,10 μmol·L^-1对L-型钙电流无影响;100 μmol·L^-1明显抑制L-型钙电流。结论大黄素对心肌细胞内钙及L-型钙电流具有双向调节作用。     

乙醇对豚鼠心室肌细胞钙钠离子通道电流的影响

目的：观察乙醇对豚鼠心室肌细胞L-型钙离子通道电流（IGLL）和电压依赖性钠离子通道电流（INa）的影响，并探讨两者在乙醇致心肌损伤中的意义。方法：采用蛋白酶消化的成年豚鼠单个心室肌细胞及膜片钳全细胞技术，记录不同浓度乙醇对ICal.和INa的作用。结果：（1）乙醇抑制ICaL峰值，24mmol/L和240mmol/L乙醇抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）24、80、240mmol／L乙醇使ICaL的电流-电压（I-V）曲线上移，在各测试电压下，电流均减小，但不影响曲线形状，用乙醇后最大激活电压仍在0mV左右。（3）24mmol／L乙醇基本不影响I、峰值，80、240mm01]L乙醇抑制I。峰值，与24mmol／L乙醇的抑制率差异有统计学意义（P〈0．05）。（4）24mmol／L乙醇对INa的I-V曲线无明显影响。80、240mmol／L乙醇使INa的I-V曲线上移，在各测试电压下，电流均减小，曲线形状无明显改变，用药后最大激活电压仍在-30mV左右。结论：致毒浓度（24mmol／L）的乙醇对ICal.具有明显抑制作用，可导致心肌产生负性肌力作用，动作电位时程缩短，诱发心律失常。但致毒浓度（24mmol／L）的乙醇不影响INa，而致死浓度（80mmol／L）对INa有明显抑制作用。     

苄基四氢巴马汀对心室肌动作电位和延迟整流钾电流的频率依赖性作用

目的　研究BTHP对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流影响的频率依赖性。方法　用标准微电极方法在不同基础周长 (BCL)时测定动作电位 ;采用全细胞膜片钳技术测定延迟整流钾电流 (IK:IKr、IKs)。结果　 10 0 μmol·L-1BTHP在BCL为 :2 0 0 0、2 5 0ms时 ,使APD2 0 分别延长 11 35 %和 2 5 5 5 % ;使APD90 分别延长15 97%和 32 5 6 %。 30 μmol·L-1BTHP在刺激频率为 :0 2 5和 2 0Hz时分别使Ikr,tial从 (0 94± 0 .44 ) pA·pF-1和(0 92± 0 31) pA·pF-1降至 (0 6 0± 0 32 ) pA·pF-1和 (0 43± 0 18)pA·pF-1。在刺激频率为 :0 1和 2 0Hz时分别使Iks,tial从 (4 2 2± 0 5 6 ) pA·pF-1和 (5 14± 0 2 8)降至 (2 5 8±0 41)pA·pF-1和 (2 6 2± 0 37)pA·pF-1。结论　BTHP可频率依赖性地阻滞IKr、IKs,其延长动作电位也呈频率依赖性     

灯盏花素对豚鼠单一心室肌细胞ICa的抑制作用

目的：观察灯盏花素对豚鼠单一心室肌细胞钙离子电流（ＩＣａ）的影响。方法：应用全细胞膜片钳制技术。结果：灯盏花素能明显抑制心室肌细胞的Ｃａ＾２＋通道,使ＩＣａ减小。此作用有明显的电压依赖性。在峰电流电压下作用最明显,而对其反转电位无明显影响。在指令电位０ｍＶ时,０．５ｍｇ％灯盏花素使ＩＣａ减小５．４％,１ｍｇ％灯盏花素使ＩＣａ减小２２．９％（Ｐ〈０．０１）,２ｍｇ％灯盏花素使ＩＣａ减小４５．０％（Ｐ     

N-甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ATP敏感钾电流的影响

目的　研究Ｎ 甲基小檗胺对豚鼠单一心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流的作用。方法　膜片钳制技术全细胞记录模式。结果　Ｎ 甲基小檗胺抑制心室肌细胞ＡＴＰ敏感钾电流（ＩＫＡＴＰ）且具浓度依赖关系。指令电位为０ｍＶ时,３种浓度Ｎ 甲基小檗胺（０－１,１,１０μｍｏｌ·Ｌ－１）可使ＩＫＡＴＰ分别由给药前的（０－４６±０－０９）ｎＡ,（０－４３±０－１５）ｎＡ和（０－４７±０－１０）ｎＡ减少至给药后的（０－３７±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）,（０－２９±０－１８）ｎＡ（ｎ＝５,Ｐ＜０－０５）和（０－２１±０－０７）ｎＡ（ｎ＝４,Ｐ＜０－０５）。其抑制率分别为１８－８１％±６－１６％（Ｐ＜０－０５）,４１－４７％±２４－０５％（Ｐ＜０－０５）和５５－００％±１２－９４％（Ｐ＜０－０５）。其它指令电位下的ＩＫＡＴＰ的改变也符合此趋势。结论　Ｎ 甲基小檗胺阻断豚鼠心肌细胞ＡＴＰ敏感Ｋ＋钾通道。     

红花黄色素对老龄小鼠肝线粒体保护作用的实验研究

目的:探讨老龄小鼠肝线粒体结构和功能的增龄性改变和红花黄色素(safflower yellow pigment,SYP)对肝线粒体膜抗衰老的保护作用。方法:采用高效液相色谱法测定老、中、青不同年龄组小鼠肝线粒体匀浆中磷脂主要成分磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇氨(PE)、心磷脂(CL)的相对含量,来研究不同剂量SYP对上述各指标的影响。结果:肝线粒体磷脂PC、PE和CL 的相对含量老年组低于青、中年组,大剂量SYP可使老龄组磷脂含量恢复至中年组状态。结论:红花黄色素通过抑制肝线粒体磷脂的脂质过氧化起到抗衰老的作用。     

杜鹃花总黄酮对豚鼠心室肌细胞生物电的影响

目的观察杜鹃花总黄酮(total flavones of rhododen-dron,TFR)对离体豚鼠右心室乳头肌细胞生物电的影响,以探讨其抗心肌缺血的作用机制。方法采用标准玻璃微电极技术记录心肌细胞的静息电位以及动作电位。结果25、50mg·L-1的TFR可明显缩短动作电位复极50%、90%时程(APD50、APD90),但100、200、400mg·L-1却可明显延长APD50和APD90,200、400mg·L-1的TFR可明显降低0期的动作电位峰值(APA)及动作电位去极化最大速率(Vmax),400mg·L-1的TFR使静息电位减小,200mg·L-1TFR能延长心室肌细胞有效不应期(ERP)。结论低浓度的TFR可能有钙阻滞作用,高浓度的TFR可能对钾通道有一定的阻断作用,200mg·L-1TFR能延长心室肌细胞有效不应期。     

Ionic basis for OPC-8212-induced increase in action potential duration in isolated rabbit, guinea pig and human ventricular myocytes

Changes in transmembrane ionic currents induced by OPC-8212 (3,4-dihydro-6-[4-(3,4-dimethoxybenzoyl)-1-piperazinyl]- 2(1H)-quinoline), a recently introduced positive inotropic agent which lengthens cardiac action potential duration, were examined using whole-cell voltage-clamp techniques in single rabbit, guinea pig and human ventricular myocytes. In rabbit, OPC-8212 (12 μmol/l) significantly increased membrane action potential duration measured at 90% of repolarization by an average of 88 ms (from 462 ± 25 to 550 ± 35 ms, n = 4; P < 0.05). In rabbit this increase in duration was not associated with significant changes in either the inward rectifier or transient outward K⁺ currents. The magnitude of the secondary inward current evoked from a holding potential of −50 mV was significantly increased by 97 ± 8% (n = 6; P < 0.01) while a demonstrable delayed rectifier outward current could not be identified in the rabbit myocytes examined at room temperature. In guinea pig ventricular myocytes, where the delayed rectifier was large, 12 μmol/l OPC-8212 significantly depressed the current by 58 ± 10% (n = 6; P < 0.01). The effects of OPC-8212 in human ventricular myocytes obtained from the explanted heart of a single patient having an idiopathic cardiomyopathy most closely resembled those observed in isolated rabbit ventricular myocytes. Thus, in rabbit and a few human ventricular myocytes examined at room temperature, OPC-8212 appeared to lengthen cardiac membrane action potential duration primarily by increasing the amplitude of the secondary inward current believed to primarily represent current through L-type Ca²⁺ channels. In guinea pig preparations, OPC-8212 also decreased the delayed rectifier outward K⁺ current which also would account for an increase in action potential duration. OPC-8212 could not be demonstrated to affect Na⁺ current inactivation in a manner similar to that produced by 1 mg/l veratrine, a recognized Na + channel agonist, which dramatically slowed this process.