α-干扰素治疗慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR4表达和血清Thl／Th2型细胞因子的变化。

目的探讨慢性乙型肝炎患者在α-干扰素治疗前后外周血单个核细胞Toll样受体4（TLR4）的表达及血清Thl/Th2型细胞因子水平的变化及其临床意义。方法 50例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者予以普通α-干扰素治疗。在治疗前及治疗后3月和6月,使用流式细胞仪检测外周血单个核细胞表面TLR4表达;采用ELISA法检测血清IFN-γ和IL-4水平,并同时检测ALT、HBV DNA水平。结果在治疗3个月和6个月时,早期应答组和无应答组患者血清IFN-γ水平均升高,IL-4水平均降低;两组TLR4水平较治疗前均下降,但应答组患者TLR4下降更明显,有显著性差异（P〈0.05）;IFN-γ和IL-4的变化与TLR4的变化无明显相关（P均〉0.05）,TLR4与ALT呈正相关（r=0.78,P〈0.01）,TLR4的变化与HBV DNA变化无相关（P〉0.05）。结论在干扰素-α治疗后,慢性乙型肝炎患者Thl/Th2型细胞因子的变化可能与TLR4表达的变化无相关,而对干扰素治疗的疗效可能与TLR4表达的变化有关.     

乙型肝炎患者外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染患者外周血单个核细胞中叉头状螺旋转录因子（Foxp3）mRNA表达及其与HBV感染后转归的关系。方法应用实时RT-PCR方法检测19例急性乙型肝炎、50例慢性乙型肝炎、21例乙型肝炎后肝硬化、15例慢性乙型重型肝炎和15例正常对照组外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达,应用ELISA法检测其血清中白细胞介素（IL）-10、转化生长因子β（TGF-β）含量,并观察它们与Foxp3 mRNA的相关性。结果急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于正常对照组（P〈0.05）,重型肝炎Foxp3 mRNA水平高于其他各组（P〈0.05）。HBV感染各组IL-10、TGF-β含量较正常组明显升高（P〈0.05）,急性乙型肝炎组IL-10含量较慢性乙型肝炎组明显升高（P〈0.05）;急性乙型肝炎组TGF-β含量与肝硬化组、重型肝炎组比较差异无统计学意义（P〉0.05）,其他各组两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。IL-10、TGF-β与Foxp3 mRNA表达水平无相关性。结论急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、肝硬化、慢性重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于正常人,重型肝炎患者Foxp3 mRNA水平高于其他各组HBV感染者,表明Foxp3参与了HBV发病过程,外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平可能与疾病预后密切相关。     

慢性HBV感染者CD8^＋ T细胞免疫反应的研究

目的观察不同慢性HBV感染者外周血CD8^＋ T细胞的细胞内毒性颗粒和细胞因子的表达水平。方法用rHBcAg作为刺激剂,采用免疫荧光染色结合流式细胞术分析慢性乙型肝炎中度、重度患者以及无症状HBV携带者外周血CD8^＋ T细胞的IFN-γ/IL-4和穿孔素/颗粒酶B表达水平。结果慢性乙型肝炎重度患者CD8^＋T细胞的穿孔素及颗粒酶B百分率显著高于正常对照（P〈0.01）和HBV携带者（P〈0.05,P〈0.01）,中度患者显著高于正常对照（P〈0.05）。2组慢性乙型肝炎IFN-γ＋/CD8^＋ T细胞（Tc1）百分率均高于正常对照和HBV携带者（P〈0.05）。HBV携带者CD8^＋T细胞的穿孔素和颗粒酶B表达以及Tc1百分率与健康对照差异无统计学意义。IL-4^＋/CD8^＋ T细（Tc2）表达各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CD8^＋ T细胞中穿孔素/颗粒酶B表达率的增加以及Tc1细胞增加与慢性HBV感染的肝损伤有关。     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血浆样树突状细胞Toll样受体9的表达和分泌功能

目的 探讨外周血浆样树突状细胞(pDC)Toll样受体(TLR)9的表达水平、pDC数量和分泌IFN-α能力的变化以及与慢性HBV感染状态的关系.方法 流式细胞分析技术检测69例慢性HBV感染患者(包括HBV携带者14例,慢性乙型肝炎患者30例,乙型肝炎肝硬化患者25例)和21例健康对照组外周血pDC频率和TLR9表达水平;用CpG ODN 2216刺激外周血单个核细胞(PBMC),并与PBMC共培养24 h,检测上清液中pDC产生IFN-α的能力;分析pDC数量、分泌IFN-α功能变化及其临床意义.应用SPSS 13.0进行统计学分析.结果 与健康对照组(62.6±10.7)相比,HBV携带者、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者pDC表达TLR9平均荧光强度均有不同程度下降(P＜0.05).与慢性乙型肝炎患者(54.3±16.9)比较,HBV携带者及乙型肝炎肝硬化患者pDC表达TLR9平均荧光强度分别为44.5±10.3和45.9±13.8,差异有统计学意义(P＜0.05).健康对照组外周血pDC细胞频率为(0.88±0.54)%,明显高于慢性乙型肝炎患者的(0.51±0.36)%和乙型肝炎肝硬化患者的(0.5±0.3)%(P＜0.05).慢性HBV感染患者外周血pDC频率与血清ALT水平呈明显负相关(r=-0.341,P＜0.05).HBV携带者、慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者PBMC中pDC分泌IFN-α的水平分别为(291.10±198.16)、(285.34±155.56)和(206.92±148.36)pg/mL,明显低于健康者的(600.23±344.91)pg/mL(P＜0.05).结论 慢性HBV感染患者外周血pDC TLR9表达低下,外周血pDC频率和分泌IFN-α的能力明显降低,这可能是HBV持续感染的重要机制.     

慢性HBV感染者血清IL-15和IL-16水平与HBV DNA载量的关系及临床意义探讨

目的探讨HBV感染者外周血IL-15和IL-16水平变化及其与HBV DNA载量的相关性。方法选择肝癌(HCC组)60例,肝硬化(LC组)60例,慢性乙型肝炎(CHB组)60例,乙型肝炎病毒携带者(ASC组)60例和健康人40例,采用酶联免疫法检测IL-15和IL-16水平,采用聚合酶链反应法检测HBV DNA载量。结果随着患者病情加重,血清IL-15和IL-16水平均呈逐渐升高的趋势,且在肝硬化患者中达到最大值,分别是(222.89±96.95)ng/ml和(109.77±11.96)ng/ml,显著高于其他各组(P0.01);与健康人比,各种HBV感染者血清细胞因子水平均显著升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);在CHB患者,外周血HBV DNA高载量组IL-15和IL-16水平最高,分别是(86.67±15.92)ng/ml和(41.64±7.30)ng/ml,显著高于低载量组(P0.05)。结论 IL-15和IL-16可能参与了乙型肝炎的肝脏炎性损伤过程。     

核苷类似物抗病毒治疗对乙型肝炎肝硬化患者血清Th1/Th2型细胞因子水平的影响及临床意义

目的：研究核苷类似物抗病毒治疗对乙型肝炎肝硬化患者血清Th1/Th2（辅助性T淋巴细胞1/辅助性T淋巴细胞2）型细胞因子水平的影响及临床意义。方法：选择乙型肝炎肝硬化患者35例,其中25例接受核苷类似物抗病毒治疗及普通护肝治疗,10例仅接受普通护肝治疗。应用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-4（白细胞介素-4）、IL-6、IL-8、IL-18、IFN-γ（γ干扰素）含量;同时检测患者肝功能及HBV DNA。结果：乙型肝炎肝硬化患者核苷类似物抗病毒治疗前后IL-4、IL-6、IL-8、IL-18、IFNγ-、ALT、A lb、TB il、HBV DNA含量之差异有显著性意义（P〈0.05,见表2）,且细胞因子IL-6、IFN-γ水平与HBV DNA水平有相关性（P〈0.05,见表5）。对照组予以普通护肝治疗前后IL-8、ALT、A lb之差异有显著性意义（P〈0.05,见表2）,而IL-4、IL-6、IL-18、IFN-γ、TB il、HBV DNA之差异无显著性意义（P〉0.05,见表2）;核苷类似物抗病毒治疗组不同肝脏贮备功能等及不同的患者之间细胞因子变化的差异无显著性意义（P〉0.05,见表3）,而不同核苷类似物治疗前后IL-4、IL-6、IFN-γ变化差异有显著性意义（P〈0.05,见表4）。结论：核苷类似物在抑制病毒复制的同时,能平衡乙型肝炎肝硬化患者细胞因子网络,调节机体的免疫功能。     

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达及其与TGF-β的关系

目的了解慢性乙型肝炎、肝硬化患者外周血单个核细胞（PBMC）中Toll样受体4（TLR4）的表达变化及其意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR方法分别检测28例慢性乙型肝炎、25例肝硬化及10例健康对照者PBMC中TLR4mRNA的表达;ELISA法检测上述患者血清转化生长因子p（TGF-β）;放射免疫法检测血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原蛋白（PCIH）及Ⅳ型胶原（CIV）的水平。结果各实验组TLR4mRNA的表达均明显高于健康对照组（P〈0．01）,且与患者血清TGF-β表达水平呈显著正相关（r值=0．875,P〈0．01）,与HA、LN、PCIn、CIV表达水平之间呈正相关（r值分别为0．647、0．525、0．556、0．682）。结论慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞TLR4的表达增高可能与肝纤维化的形成密切相关。     

肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA表达与HBV载量相关性

目的 探讨肝硬化患者血清IL-8含量、外周血单个核细胞（PBMCs）中IL-8 mRNA表达及其与HBV载量相关性。方法：以ELISA法检测65例肝硬化患者（代偿期36例,失代偿期29例）血清IL-8含量,定量PCR检测患者外周血IL-8 mRNA水平,设GAPDH为参照,以logcDNA/logGAPDH比值代表其最终mRNA水平。以Real-time PCR法检测患者外周血HBV载量。结果：肝硬化患者外周血IL-8及其mRNA表达量分别为（448.41±59.46）pg/ml、（1.4850±0.1801）logcDNA/logGAPDH,较正常组显著增高,差异有显著性（P<0.01）。其中,失代偿组IL-8及其mRNA分别为（488.19±49.44）pg/ml、（1.5453±0.1783）logcDNA/logGAPDH,较代偿组升高,差异有显著性（P<0.01, P<0.05）。病毒复制组外周血IL-8及其 mRNA水平分别为（472.21±52.44）pg/ml、(1.5676±0.1558) logcDNA/logGAPDH,与HBV载量相关系数分别为0.487、0.454,较非复制组显著升高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论：肝硬化外周血IL-8及其 mRNA表达升高,不仅与体内病毒复制水平密切相关,且与患者病情严重程度有关。IL-8在肝硬化的致炎细胞分子病理损伤过程中起重要作用。     

支气管哮喘患者CC16与气道炎症及Th1/Th2细胞因子的关系

目的探讨支气管哮喘（哮喘）患者CC16与气道炎症及Th1/Th2细胞因子的关系。方法采取病例对照研究,收集25例哮喘急性发作期患者和33例健康对照组。采外周静脉血分离血浆,提取外周血单个核细胞（PBMC）,用ELISA测定血浆中CC16、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）的水平;用RT-PCR法检测PBMC转录因子T-bet和Gata-3mRNA表达水平。结果 1.哮喘组CC16及IFN-γ分别为（21.96±7.31）ng/ml,（118.73±22.59）pg/ml,明显低于对照组[分别为（64.88±25.27）ng/ml和（145.53±29.50）pg/ml,（均P〈0.01）],哮喘组IL-4（425.22±4.37）pg/ml高于对照组（69.72±10.15）pg/ml,（P〈0.01）。2.哮喘组T-betmRNA、T-bet/GATA-3表达水平（0.12±0.01,0.25±0.04）显著低于对照组（0.48±0.12,1.894±0.65）（均P〈0.01）,GATA-3mRNA表达（0.45±0.05）较对照组明显升高（0.30±0.08）（P〈0.01）。3.CC16与T-betmRNA表达水平、T-bet/GATA-3呈正相关（r分别为0.792,0.761,均P〈0.01）;与GATA-3mRNA无明显相关性（r=-0.146,P=0.551）。结论 CC16参与哮喘气道炎症反应,并以Th1/Th2细胞因子失衡为特点。     

乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞内IL-2、IL-4和IFN-γ检测及意义

目的研究辅助性T淋巴细胞Th1/Th2细胞与乙型肝炎病毒（HBV）感染状态的关系。方法 25例慢性乙型肝炎患者（CHB组）、5例健康志愿者（健康对照组）、5例HBV感染后自然痊愈者（既往感染组）及5例CHB抗病毒治疗后完全应答者（完全应答组）的外周血单个核细胞（PBMC）经PMA诱导后,用流式细胞术检测其Th1和Th2细胞分泌IL-2、IL-4和IFN-γ的水平。结果慢性乙型肝炎患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1602±0.0657）、IL-2（0.1616±0.0639）,明显低于健康对照IFN-γ（0.4680±0.0377）、IL-2（0.5000±0.0625）和既往感染者IFN-γ（0.336±0.2908）、IL-2（0.256±0.17799）（P〈0.001）。CHB抗病毒治疗完全应答患者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.1620±0.0396）、IL-2（0.1940±0.0416）,亦明显低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（0.5096±0.1329）,明显高于健康对照IL-4（0.2820±0.0622）（P〈0.001）。既往感染者Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ（0.336±0.29082）、IL-2（0.256±0.17799）低于健康对照（P〈0.001）,Th2细胞分泌的细胞因子IL-4（1.29±0.16778）明显高于健康对照组、CHB患者组和HBV感染完全应答患者组（0.2820±0.0622、0.5096±0.1329、0.5740±0.06693）（P〈0.001）。结论 Th1/Th2细胞的功能与HBV感染的发展过程相关。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血IL-35和IL-17的表达及意义

目的观察慢性HBV感染者外周血IL-35和IL-17的表达和临床指标的相关性。方法采集30例慢性乙型肝炎（CHB）患者、79例乙型肝炎肝硬化（LC）患者、14例慢性乙型重型肝炎（CSHB）患者、20例健康对照者的外周血,ELISA法测定外周血IL-35、IL-6、IL-17的浓度,分离制备外周血单个核细胞（PBMC）,实时定量PCR检测PBMC中EBI3、FOXP3、IL-17 mRNA的表达,Western印迹观察PBMC中EBI3、FOXP3、IL-17蛋白表达情况。所有病例及健康对照均进行肝功能检测。结果 LC、CHB和CSHB患者中EBI3、IL-17、FOXP3 mRNA表达水平均显著高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01或0.05）;LC组Child-Pugh不同分级患者之间EBI3、IL-17、FOXP3 mRNA表达水平差异明显,EBI3、FOXP3 mRNA随着肝硬化Child-Pugh分级的加重而表达下调;IL-17 mRNA随着肝硬化Child-Pugh分级的加重而上调;蛋白表达和血清浓度的变化趋势与mRNA一致。血清IL-17浓度水平与Alb呈负相关,IL-17浓度水平与TBil、ALT和Child-Pugh分级呈正相关,差异有统计学意义（P〈0.01）,IL-35浓度水平与Alb、Child-Pugh分级负相关,与ALT、TBil无相关性。结论 IL-35和IL-17可能是影响乙型肝炎肝硬化发病的重要因素之一。     

乙型肝炎肝硬化患者外周血IFN-γ、IL-32和IL-6的临床相关性

目的探讨乙肝肝硬化患者外周血IFN-γ、IL-32和IL-6水平的临床相关性。方法收集42例乙型肝炎肝硬化患者和50例健康对照者空腹血清,采用ELISA法检测血清IFN-γ、IL-32和IL-6水平;采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量;采用全自动生化分析仪检测血清肝功能水平。结果健康对照者血清IFN-γ、IL-32和IL-6水平分别为(14.41±3.71)、(182.24±72.22)、(1.62±0.63)ng/mL,乙肝肝硬化患者分别为(182.12±41.37)、(1218.21±215.08)、(37.70±9.77)ng/mL。IFN-γ水平与ALb水平呈负相关(r=-0.342,P0.05),与HBV DNA水平呈正相关(r=0.319,P0.05);IL-6水平与ALT水平呈负相关(r=-0.314,P0.05)。结论 IFN-γ、IL-32和IL-6在慢性HBV感染过程中可能起重要作用,可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。     

慢性乙型肝炎患者外周血纤维化蛋白表达水平与肝纤维化的相关性分析

目的研究慢性乙型肝炎患者外周血纤维化蛋白（FBRS）的表达水平与肝纤维化的相关性。方法收集52例慢性乙型肝炎患者,全部进行肝脏穿刺活检,将肝穿刺标本肝组织胶原纤维采用Masson三重染色和常规病理HE染色,判定肝脏纤维化分期和炎症活动度分级;检测患者外周血的ALT、AST、TBil、白蛋白（Alb）、HBV DNA载量;分离患者外周血单个核细胞,提取RNA,Real-time PCR法检测FBRS的表达水平;分析FBRS表达水平与肝组织病理分级和炎症活动度等指标的相关性。结果按照肝组织纤维化程度（S）分组,外周血单个核细胞FBRS mRNA水平从S0至S4随着肝纤维化程度的加重表达水平增加,且均比前一期明显升高（P〈0.01）,S与FBRS mRNA水平呈正相关（P〈0.05）;按照肝脏炎症活动度（G）分组,随着炎症活动度的加重,FBRS mRNA表达水平有增高的趋势,G与FBRS mRNA水平呈正相关（P〈0.05）,G2与G1比较差异有明显的统计学意义（P〈0.01）,G3与G2,G4与G3比较,虽然有升高的趋势,但差异无统计学意义（P〉0.05）;ALT与FBRS mRNA表达水平呈正相关,Alb与FBRS mR-NA表达水平呈负相关（P〈0.05）。结论慢性乙型肝炎外周血FBRS的表达水平与肝组织纤维化程度呈正相关。     

HBV感染者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的表达水平及临床意义

目的比较CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋和CD4^＋CD25^＋CD127^-/low两种设门方法对CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）细胞的界定效果,并探讨HBV感染者外周血中Treg水平的表达及其临床意义。方法选择慢性乙型肝炎患者52例,HBV携带者24例,非活动性HBsAg携带者24例,正常对照者25例,采用CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法用流式细胞仪进行检测,其中正常对照组和21例慢性乙型肝炎患者同时采用CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门进行检测并分析。结果采用CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法检测外周血Treg与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门方法在正常组和患者组均呈正相关（r=0.506,P〈0.05;r=0.556,P〈0.01）。以CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门检测慢性乙型肝炎患者组、HBV携带者组、非活动性HBsAg携带者组和正常对照组外周血Treg的水平分别为（10.65±2.86）%、（8.56±2.01）%、（8.75±3.04）%和（7.33±1.17）%。慢性乙型肝炎患者组明显高于其他三组（P〈0.01）,慢性HBV携带者组明显高于对照组（P〈0.05）,非活动性HBsAg携带者组与对照组之间差异无统计学意义。慢性乙型肝炎患者及慢性HBV携带者Treg表达水平与HBV病毒载量之间均无相关,慢性乙型肝炎患者Treg表达水平与ALT之间无相关,HBeAg阳性患者组和HBeAg阴性患者组的Treg表达水平差异无统计学意义。结论 CD4^＋CD25^＋CD127^-/low设门方法检测外周血Treg与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋设门方法有较好的相关性,而前者更为简单、实用。Treg在慢性乙型肝炎患者、慢性HBV携带者中明显增高,提示Treg在乙型肝炎慢性化机制中发挥重要作用。     

辅助性T淋巴细胞1、2、17在慢性乙型肝炎病毒感染状态中的变化

目的 了解慢性HBV感染中辅助性T淋巴细胞(Th)1、Th2、Thl7产生的主要细胞因子的表达,以反映这3种细胞的功能状态.方法 ELISA测定34例慢性乙型肝炎、31例肝硬化、26例原发性肝癌、22例慢性重型乙型肝炎患者及15例健康对照者m清中的1FN-γ、IL-4和IL-17水平,对数据进行t检验和Pearson相关分析.结果 IFN-γ/IL-4在慢性乙型肝炎患者(1.08±0.66)比健康对照者(2.60±0.60)降低(P＜0.01),在慢性重型乙型肝炎患者(4.81±0.87)比健康对照者升高(P＜0.01);IFN-γ/IL-17在慢性乙型肝炎(1.13±0.85,P＜0.01)、肝硬化(1.69±0.92,P=0.010)、肝癌(1.76±0.84,P=0.011)患者比健康对照者(2.66±0.70)降低,在慢性重型乙型肝炎患者(3.68±0.42)比健康对照者升高(P=0.004);IL-4/IL-17在肝硬化(0.72±0.38,P=0.026)、肝癌(0.63±0.19,P＜0.01)患者比健康对照者(1.04±0.23)降低.结论 慢性乙型肝炎患者IL-4的表达占优势;肝硬化、肝癌患者IL-17的表达占优势;慢性重型乙型肝炎患者IFN-γ的表达占优势.     

Toll样受体4在慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的了解慢性乙型肝炎、肝硬化、重型肝炎患者外周血单个核细胞（PBMC）中Toll样受体4（TLR4）的作用。方法采用流式细胞术及反转录-PCR方法分别检测37例慢性乙型肝炎，28例肝硬化，31例慢性重型肝炎患者及27例健康对照者PBMCTLR4蛋白及mRNA的表达；同时检测患者肝功能、凝血酶原活动度（PTA）、血常规及HBVDNA滴度。结果各实验组TLR4蛋白及mRNA的表达均明显高于健康对照组（P〈0．05）；TLR4蛋白的表达水平与TLR4mRNA的表达量显著正相关（r=0．897，P〈0．01），且与患者的ALT、AST、TBil及中性粒细胞百分比之间呈正相关性（r值分别为0．475、0．558、0．924、0．443），而与Alb、PTA及HBVDNA之间呈负相关（r值分别为-0．927、-0．902、-0．272）。结论慢性HBV感染患者外周血TLR4蛋白及mRNA表达的增高与患者的肝脏损害密切相关。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清MIF、IL-17和IL-10水平变化

目的探讨HBV感染者外周血巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、IL-17和IL-10水平变化的临床意义。方法收集60例慢性无症状HBV携带者、60例慢性乙型肝炎患者、60例乙型肝炎肝硬化患者、60例肝癌患者和50例健康对照者空腹血清,采用ELISA法检测血清MIF、IL-17和IL-10水平;采用荧光定量PCR法检测血清HBV DNA载量;采用全自动生化分析仪检测血清肝功能指标。结果与健康对照组[(1.9±1.4)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血MIF水平均显著升高[分别为(5.7±2.8)ng/ml、(10.5±4.1)ng/ml、(17.7±7.4)ng/ml、(19.8±9.9)ng/ml,P0.01],其中HCC组最高,ASC组最低;与健康对照组[(4.4±2.2)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-17水平均显著升高[分别为(8.6±4.3)ng/ml、(20.7±6.6)ng/ml、(23.4±15.1)ng/ml、(16.0±8.7)ng/ml,P0.01或P0.05],其中LC组最高,ASC组最低;与健康对照组[(12.9±4.6)ng/ml]比,ASC组、CHB组、LC组和HCC组外周血IL-10水平均显著升高[分别为(237.2±72.9)ng/ml、(184.68±59.0)ng/ml、(356.6±150.8)ng/ml、(287.9±88.8)ng/ml,P0.01],其中LC组最高,CHB组最低。结论 MIF、IL-17和IL-10在慢性HBV感染过程中可能起重要作用,检测血清细胞因子水平可作为评估慢性乙型肝炎病情严重程度的重要指标。     

慢性乙型肝炎患者HBVDNA载量与PMBC分泌IFN-γ、IL-6水平相关性研究

目的探讨不同HBVDNA载量慢性乙型肝炎（CHB）患者经拉米夫定治疗前后外周血单核细胞（PM-BC）分泌IFN-γ、IL-6水平变化规律及其临床意义。方法血清HBVDNA载量采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）测定,PMBC分泌IL-6、IFN-γ水平采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（DAS-ELISA）测定。结果治疗前CHB患者IFN-γ水平显著低于正常对照组（P〈0.01）,IL-6水平显著高于正常对照组（P〈0.01）;拉米夫定治疗后HBV高、中载量组IFN-γ水平较治疗前显著升高（P〈0.01和P〈0.05）,IL-6水平较治疗前显著降低（P〈0.01和P〈0.05）,治疗后中、低载量组IFN-γ水平仍低于正常对照组（P〈0.01）,IL-6的水平高于正常对照组（P〈0.01）;患者INFγ水平变化与HBVDNA载量呈负相关（r=0.89,P〈0.001）,IL-6水平变化与HBVDNA载量和ALT呈正相关（分别为：r=0.92,P〈0.001;r=0.74,P〈0.001）。结论不同HBVDNA载量CHB患者经拉米夫定治疗应答与IFN-γ、IL-6水平程度有关,IFN-γ和IL-6的含量能较好的反映TH1/TH2的水平,且可以作为CHB疗效参考指标。     

HBV相关慢加急性肝衰竭前期外周血中Toll样受体3、4的表达

目的探讨HBV相关慢加急性肝衰竭前期(pre-ACLF)外周血单个核细胞中Toll样受体3(TLR3)和Toll样受体4(TLR4)表达水平的变化及其意义。方法采用流式细胞仪检测HBV相关的pre-ACLF患者30例、慢性乙型肝炎患者30例以及健康对照者15名外周血单个核细胞TLR3、TLR4的表达水平,绘制ROC曲线,评价TLR3和TLR4对pre-ACLF的诊断价值。结果 pre-ACLF组患者外周血中TLR3(20.81±5.15)明显升高,分别与慢性乙型肝炎组、健康对照组比较,均差异有统计学意义(均P0.05)。同时,pre-ACLF组患者外周血中TLR4(13.73±3.56)也明显上升,分别与慢性乙型肝炎组、健康对照组比较,也均差异有统计学意义(均P0.05)。根据TLR3和TLR4检测结果分别绘制ROC曲线,外周血TLR3诊断pre-ACLF的ROC曲线下的面积(AUC)为0.830(95%CI为0.728～0.932);外周血TLR4诊断pre-ACLF的ROC曲线下面积为0.977(95%CI为0.948～1.000)。结论通过对pre-ACLF患者TLR3和TLR4水平的检测,有助于对pre-ACLF的诊断。     

肝硬化患者小肠细菌过度生长及其外周血单个核细胞TLR4表达的变化

目的探讨肝硬化患者小肠细菌过度生长（SIBO）和外周血单个核细胞表面TLR4表达的变化。方法采用乳果糖-氢呼气试验（LHBT）检测40例肝硬化患者和16例正常人小肠细菌生长情况,使用流式细胞仪检测外周血单个核细胞表面TLR4表达。结果肝硬化患者SIBO检出率为42.5%（17/40）,显著高于正常人的6.3%（1/16,P<0.01）;肝硬化患者外周血单个核细胞表面TLR4相对表达量为（23.4±11.4）,显著高于正常人的【（14.4±5.2）,P<0.05】;17例肝硬化SIBO阳性患者外周血单个核细胞表面TLR4表达为（30.2±12.3）,显著高于23例肝硬化SIBO阴性患者【（19±8.6）,P<0.05】。结论肝硬化患者存在较高的SIBO发生率,外周血单个核细胞表面TLR4表达上调,SIBO可能通过与TLR4的作用在肝硬化病情进展中发挥作用。