眼镜蛇毒对大鼠弓状核c-fos和c-jun表达的影响

目的:探讨眼镜蛇毒对大鼠下丘脑弓状核(ARC)c-fos和c-jun表达的影响。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,每组9只。采用免疫组织化学方法,观察并比较c-fos和c-jun阳性神经元在上述各组大鼠弓状核中的表达。结果:眼镜蛇毒组大鼠弓状核c-fos和c-jun阳性神经元显著多于正常对照组和生理盐水组(P<0.01),其细胞平均灰度值显著低于正常对照组和生理盐水组(P<0.01)。结论:眼镜蛇毒对大鼠弓状核c-fos和c-jun的表达具有上调作用。     

眼镜蛇毒对成年大鼠脊神经节BDNF和c-jun表达的影响

目的:探讨眼镜蛇毒对成年大鼠脊神经节脑源性神经营养因子(BDNF)和c-jun表达的影响。方法:大鼠24只随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,每组8只。用免疫组织化学的方法,观察在各组大鼠脊神经节BDNF和c-jun的表达。结果:大鼠脊神经节BDNF和c-jun眼镜蛇毒组细胞平均灰度值低于正常对照组和生理盐水组(P<0.01),且阳性神经元眼镜蛇毒组多于正常对照组和生理盐水组(P<0.01)。结论:眼镜蛇毒能上调脊神经节BDNF和c-jun的表达,这种表达增加可能与脊神经节损伤的代偿性修复有关。     

眼镜蛇毒对大鼠丘脑腹后外侧核c-fos、c-jun蛋白表达的影响

目的探讨眼镜蛇毒对大鼠丘脑腹后外侧核(VPL)c-fos、c-jun蛋白表达的影响。方法将24只SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,每组8只。眼镜蛇毒按0.5μl/kg注入大鼠左后肢外侧复制蛇伤模型,观察30min后处死,采用免疫组织化学方法 ,检测VPL的c-fos、c-jun的表达。结果眼镜蛇毒组大鼠VPL区c-fos、c-jun免疫阳性细胞数量及表达强度与正常对照组和生理盐水组比较均显著增高(P<0.05)。结论眼镜蛇毒组大鼠VPL区的c-fos和c-jun表达显著增加,可能参与了眼镜蛇毒神经毒性的病理过程。     

眼镜蛇毒对大鼠丘脑网状核c-jun表达的影响

目的:观察眼镜蛇毒对大鼠丘脑网状核(thalamicreticular nucleus,TRN)c-jun表达的影响。方法:大鼠随机分为正常组、生理盐水组和眼镜蛇毒组,每组各6只。灌注固定、取脑包埋、石蜡切片。运用免疫组织化学染色法,观察并比较c-jun在各组大鼠TRN的分布情况。结果:眼睛蛇毒组大鼠TRN c-jun阳性细胞数及表达强度较正常组、生理盐水组均显著增高(P<0.01)。结论:眼镜蛇毒对大鼠TRN c-jun的表达有上调作用。     

异丙酚麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响

目的观察不同浓度异丙酚静脉全身麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(A组)、小剂量异丙酚组(50 mg/kg,B组)、中等剂量异丙酚组(100 mg/kg,C组)和大剂量异丙酚组(150 mg/kg,D组)。采用反转录-聚合酶联反应和蛋白印迹方法检测大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白的表达水平。结果 A组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.32±0.06,0.27±0.05;0.37±0.07,0.28±0.07),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.47±0.12,0.41±0.10;0.51±0.14,0.44±0.09);B组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.54±0.11,0.41±0.10;0.61±0.12,0.44±0.12),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.75±0.24,0.72±0.21;0.82±0.27,0.68±0.17);C组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.87±0.23,0.75±0.18;0.92±0.27,0.72±0.21),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.07±0.37,1.01±0.32;1.12±0.38,0.97±0.25);D组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(1.22±0.30,0.96±0.24;1.31±0.34,0.95±0.28),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.43±0.41,1.38±0.39;1.46±0.41,1.31±0.33)。大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因和蛋白的表达水平随着异丙酚麻醉药物作用浓度的增加显著性升高(P<0.05);海马CA3区未发现异丙酚对c-fos、c-jun基因和蛋白表达水平的影响。结论异丙酚可能通过影响c-fos、c-jun基因及蛋白的表达,从而发挥抑制中枢神经系统的作用,且此作用部位存在明显的差异性。     

眼镜蛇毒对大鼠丘脑腹内侧核c-jun表达的影响

目的:探讨眼镜蛇毒对大鼠丘脑腹内侧核(VM)c-jun表达的影响。方法:将18只SD大鼠随机分为正常对照组、生理盐水组、眼镜蛇毒组,每组6只。采用免疫组织化学方法观察VM的c-jun表达。结果:与正常对照组和生理盐水组相比,眼镜蛇毒组大鼠VM的c-jun表达增加(P<0.01)。结论:眼镜蛇毒对大鼠VM的c-jun表达有上调作用。     

急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响

目的：研究急性低压缺氧对大鼠海马CA1区nNOS表达的影响。方法：用免疫组化ABC法检测在低压舱模拟升空6．5km停留1h和2h后，大鼠海马CA1区内nNOS的表达的变化，并通过计算机图像分析系统进行定量分析。结果：缺氧2h组的nNOS阳性反应细胞面数密度（numerical density on area,NA)和积分光密度值（IOD）均显低于缺氧1h组的和对照组（P＜0．01）；缺氧1h组的NA与对照组无显差异（P＞0．05），但其IOD值显低于对照组（P＜0．01）。结论：急性缺氧条件下，大鼠海马CA1区nNOS表达下降。     

大鼠发育过程中海马CA1区nNOS的表达

目的 :研究出生后不同发育阶段大鼠海马CA1区nNOS的表达及形态学变化 ,分析nNOS的表达与海马神经元的发育、突触的形成及海马学习记忆功能的关系 .方法 :用免疫组织化学方法和图像分析对生后 1,2 ,3,4wk和 3mo龄及老龄 (2 4～ 2 8mo)大鼠海马CA1区nNOS的表达进行定位和定量分析 ,并进行光、电镜形态学检查 .结果 :大鼠海马CA1区nNOS免疫阳性细胞面数密度 :2wk (36 .2± 4 .2 )mm-2 和 3wk (33.1± 4 .1)mm-2 组高于 1wk (2 4 .9± 4 .8)mm-2 ,4wk(2 4 .6± 5 .9)mm-2 ,3mo (2 5 .4± 5 .6 )mm-2 和老龄组 (2 4 .3± 8.3)mm-2 (P <0 .0 1) ,而前两组之间及后 4组之间均无显著差异 (P >0 .0 5 ) .nNOS免疫阳性细胞积分吸光度值 :以 2wk(8.5± 2 .2 )和 3wk (8.1± 1.9)组为最高 ,其次为 4wk (4.9± 0 .5 )和 3mo (5 .2± 0 .9)组 ,1wk(3.3±0 .8)和老龄组 (3.2± 0 .7)最低 (P <0 .0 1) ;2wk和 3wk组之间、4wk与 3mo组之间、1wk和老龄组之间均无显著差异(P >0 .0 5 ) .结论 :NO与海马的发育、突触的形成和成熟以及学习记忆具有密切关系 .     

催产素对低氧大鼠海马脑片CA1区LTP的影响

突触传递的长时程增强 (Ｌｏｎｇ ｔｅｒｍｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ,ＬＴＰ)作为学习记忆的电生理指标已被广泛应用。由于海马ＣＡ1区的锥体细胞对低氧敏感 ,因此海马脑片常用于脑缺氧损伤的研究[1 ] 。本室以往实验证实背海马注射催产素 (Ｏｘｙｔｏｃｉｎ ,ＯＸＴ)后可损害大鼠穿梭箱条件回避行为的习得并加速其消退 ,提示ＯＸＴ对条件回避行为的影响 ,至少部分通过海马起作用[2 ] 。本实验研究ＯＸＴ对低氧条件下海马脑片ＣＡ1区ＬＴＰ的影响 ,旨在了解ＯＸＴ在低氧脑损伤学习记忆机制中的作用。1　材料和方法1.1　实验动物和药品　　…     

中华眼镜蛇（Naja naja atra）毒细胞毒素对动物急性及长期毒性研究

目的探讨中华眼镜蛇毒中分离纯化的细胞毒素（ＣｈｉｎｅｓｅＣｏｂｒｏＶｅｎｏｍ－Ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ，ＣＶ－ＣＴＸ）对动物急性及长期毒性的作用。方法急性毒性：小鼠５０只，尾静脉一次注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ注射液，观察７ｄ内死亡率。犬５只，戊巴比妥钠静脉麻醉后，分别静脉恒速注入不同剂量的ＣＶ－ＣＴＸ，观察５ｈ内血压、心电图及呼吸的变化。长期毒性：大鼠１６０只分别腹腔注射生理盐水２０ｍｌ、ＣＶ－ＣＴＸ２５０，５００，１０００μｇ／ｋｇ·ｄ－１，连续４０ｄ。结果（１）小鼠急性ＬＤ５０及其９５％可信限为１１５８．７（１０７０～１２５４．６）μｇ／ｋｇ，中毒症状呈匍伏、毛松、懒动直到心跳停止，解剖未见重要脏器（心、肺、肝、脾、肾）明显变化。（２）犬静脉恒速注入１００μｇ／ｋｇ间隔１ｈ，共５次，呼吸、血压、心电图未见明显变化，一次超过５００μｇ／ｋｇ，可使心律不齐而停搏，呼吸停止。（３）大鼠长期毒性实验，３个剂量组，连续用药４０ｄ，无一死亡，肝、肾功能及血液生化均无明显影响。病理检查高剂量组部分动物肝脏中度浊肿及水样变性和散在点状坏死，肺有散在性出血；中剂量组肝脏轻度浊肿，偶伴有水样变性，个别动物有小点状坏死，肺有点状出     

眼镜蛇毒神经生长因子对成年猫坐骨神经损伤后的作用

目的　探讨从眼镜蛇毒分离纯化出的神经生长因子 (nerve growth factor,NGF)对成年猫坐骨神经损伤后的影响。方法　制成成年猫坐骨神经损伤模型 ,损伤局部注射蛇毒 NGF 2μg/ (kg· d) ,分别治疗 10 d和 30d,并与对照组 (损伤坐骨神经 ,不给药物 )比较。结果　术后 10 d,对照组术侧远端神经纤维数量比治疗组明显减少(P<0 .0 1) ,治疗组术侧足底刺激出现早 ,肢体活动恢复快。术后 30 d,治疗组术侧远端神经纤维大量再生 ,再生神经纤维数量已明显超过对照组和术后 10 d组水平 (P<0 .0 1) ,但结构紊乱 ,轴突和郎氏结消失。术侧肢体在连续注射 NGF 16 d左右出现足底刺激反应消失 ,肢体瘫痪等改变。结论　眼镜蛇毒 NGF在神经损伤早期应用能减轻神经纤维发生的溃变 ,促进受损神经的再生与功能恢复 ;而损伤局部长时间注射蛇毒 NGF则会导致神经纤维增生过度 ,丧失传导功能     

广东产眼镜蛇毒及其组份C对小鼠的抑瘤作用研究

本文进行了体内和体外实验，体内实验通过腹腔注射及灌胃给药，发现广东产眼镜蛇毒及其组份C对小鼠实验性肝癌及S-180肉瘤均有明显抑瘤作用，但口服给药剂量须达到腹腔注射给药剂量的50倍，才能产生相似的药效;体外实验中原毒及其组份C的抑癌作用量效关系明显，剂量增大肿瘤生长缓慢甚至完全不生长;在一定剂量范围内，组份C的抑瘤作用较原毒强。结果表明，广东产眼镜蛇毒及其组份C有抗实验性肝癌及S-180的作用。     

孕激素对MG-63细胞株孕激素受体和c-fos、c-jun的影响

目的观察18-甲左炔诺孕酮对人成骨肉瘤MG-63细胞株增殖、孕激素受体和c-fos、c-jun表达的影响。方法用不同浓度18-甲左炔诺孕酮干预MG-63细胞株,以不含左炔诺孕酮的MEM培养液作对照,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR测定孕激素受体(PR)、c-fos、c-jun mRNA表达,Western Blot和免疫组化法测定PR、c-fos、c-jun蛋白质的表达。结果与对照组比较,10-10mol/L、10-8mol/L和10-6mol/L左炔诺孕酮分别增加MG-63细胞增殖达7.72%、24.36%和36.54%(P<0.01或P<0.05)。干预24h后,MG-63细胞中PRA、PRB mRNA和蛋白质表达无明显变化(P>0.05)。干预2h后,左炔诺孕酮增加MG-63细胞中c-fos、c-jun mRNA和蛋白质表达(P<0.01或P<0.05),呈剂量依赖性。结论孕激素可能通过增加c-fos、c-jun的表达来促进MG-63细胞增殖。     

中华眼镜蛇毒纤溶组份的纤溶活性及其机制研究

目的：研究中华眼镜蛇（NajaNajaatra）蛇毒中单一纤溶活性组份对人纤维蛋白和纤维蛋白原的降解作用及其机制。方法：使用剩余可凝纤维蛋白原测定法和酶联纤维蛋白原溶解试验研究该纤溶活性组份对人纤维蛋白原的降解作用；使用纤维蛋白平板法和酶联纤维蛋白溶解试验研究它对人纤维蛋白的降解作用；对它的纤溶机制研究使用的是纤维蛋白溶解酶原激活物活性测定法。结果：该活性组分对人纤维蛋白和纤维蛋白原有直接的降解作用。其活性大约是粗毒的10倍。该活性组份仅降解纤维蛋白原的Aa链，对它的印链和了链没有作用。该组分对人纤维蛋白溶解酶原没有激活作用。结论：从中华眼镜蛇毒中提取的单一纤溶活性组分是一种新的能够直接降解人纤维蛋白和纤维蛋白原的酶类。     

舟山眼镜蛇毒及其有效组分体内外抑瘤的作用

目的：观察蛇毒（SV）及其有效组分体内外的抗癌活性,为SV抗肿瘤新药的开发提供实验依据。方法：采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）筛查不同浓度（5—20mg／mL）SV及其7种分离组分对人结肠癌细胞株（HCT-8）、人肝癌细胞株（Bel-7402）、人口腔上皮癌细胞株（KB）、人乳腺癌细胞株（MCF-7）的影响;并用小鼠肝癌（H22）动物移植瘤作为实验动物模型,进一步观察SV及其组分Ⅳ（0．01-0．03mg／kg）对瘤重、脾重、外周血白细胞和体质量的影响。结果：SV、Ⅲ2和Ⅳ的肿瘤抑制作用较为明显,三者的浓度在20μg／mL时,对HCT-8、Bel-7402、KB以及MCF-7具有非常显著的抑制作用,对HCT-8的抑制率分别为84．37％、79．39％和85．78％;对Bel-7402的抑制率分别为89．64％、88．13％和92．08％;对KB的抑制率分别为90．08％、91．30％和93．93％;对MCF-7的抑制率分别为89．88％、89．49％和92．33％。腹腔注射10d后,组分Ⅳ对H22有明显的抑制作用,SV组分Ⅳ3个浓度组的瘤重分别为（0．81±0．20）g、（0．70±0．18）g、（0．61±0．17）g,均明显低于对照组瘤重[（1．19±0．21）g,P〈0．05],肿瘤生长抑制率（IR）分别为31．93％、41．17％和48．73％。Ⅳ各剂量组小鼠脾脏指数较对照组增加,白细胞数与对照组相比无明显变化。结论：SV及其7种分离组分均能有效抑制4种人肿瘤细胞株（HCT-8、Bel-7402、KB及MCF-7）的生长,不同的SV分离组分对同一肿瘤细胞抑制作用有差异;不同肿瘤细胞对同一SV分离组分的反应性也不同。SV分离组分Ⅳ对动物移植性肿瘤小鼠肝癌H22有良好的实验疗效。