蜈蚣提取物诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及其机制的研究

目的研究蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制及其作用机制。方法观察不同浓度的不同蜈蚣提取物对宫颈癌HeLa细胞的生长抑制情况:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的蜈蚣提取物以及阳性对照药顺铂作用于培养的HeLa细胞48h,采用MTT法测定细胞代谢率,以流式细胞术观察DNA含量和凋亡的变化情况,DNA片断化分析和western Blot测定Bax,Caspase 3蛋白水平的表达。结果HeLa细胞用4,8,16mg/ml的乙醚、乙醇蜈蚣提取物处理48h后,细胞存活率显著降低;DNA周期改变明显,亚G1峰与对照组有显著性差异;DNA-Ladder典型;Western Blot提示蜈蚣提取物作用HeLa细胞后Bax,caspase 3蛋白表达,凋亡率显著增高。结论中药蜈蚣乙醚、乙醇提取物在体外对宫颈癌HeLa细胞的生长有明显地抑制作用,机制与改变细胞DNA周期,促进凋亡有关。     

乳浆大戟的化学成分

目的：研究乳浆大戟（Euphorbia esula）地上部分的化学成分。方法：利用反复硅胶和凝胶LH-20柱层析进行分离和纯化,通过理化性质和波谱数据分析鉴定化合物结构。结果：分离并鉴定出3个二萜化合物,分别为3,20-dibenzoyloxyingenol（1）,3,16-dibenzoyloxy-20-deoxyingenol（2）和3,13,16-tribenzoyloxy-20-deoxyingenol（3）。结论：化合物1为新二萜化合物,3为本植物中首次报道,2和3对Namalwa细胞显示弱的细胞毒活性。     

土荆皮酸诱导宫颈癌细胞系HeLa凋亡的实验研究

目的研究土荆皮酸(PAB)对体外培养的HeLa细胞的生物学效应和作用机制。方法用MTT法、流式细胞术、透射电镜检测体外培养的HeLa细胞在PAB作用下的增殖抑制及凋亡程度,用RT-PCR法检测p53/bcl-2/bax的表达水平。结果(1)PAB对HeLa细胞的增殖抑制作用随浓度升高而明显增强,其IC_(50)约10μmol/L。(2)流式细胞术证实10μmol/L PAB呈时间依赖性改变细胞周期分布,一方面降低G_0/G_1期的细胞比例,另一方面增高G_2/M期细胞的比例。(3)RT-PCR法显示HeLa细胞在10μmol/L PAB作用12、24、48 h均显示bax上调和bcl-2的下调,p53则未检测到表达。结论在体外PAB能抑制HeLa细胞增殖,诱导其凋亡,其诱导凋亡机制可能与bax的上调和bcl-2的下调相关。     

土槿皮乙酸体外诱导HeLa细胞凋亡

 目的研究土槿皮乙酸(Pseudolaric acid B)诱导HeLa细胞凋亡的作用,探讨其抗癌作用机制。方法采用噻唑蓝(MTT 法)、形态学观察、DNA凝胶电泳及Western blot检测法。结果土槿皮乙酸可剂量-时间依赖性的诱导HeLa细胞凋亡,5μmol·L-1土槿皮乙酸处理24 h的细胞,Hoechst 33258荧光染色后有明显的凋亡小体出现;处理36 h的细胞,有明显的DNA ladder出现。Bcl-2蛋白表达量-时间依赖性地减少,Bcl-x_L蛋白表达无明显变化,而Bax和p53蛋白表达量-时间依赖性地增加。结论土槿皮乙酸对HeLa细胞的杀伤作用主要通过诱导细胞凋亡,降低Bcl-2蛋白的表达和增加Bax,p53蛋白表达为其诱发HeLa 细胞凋亡的机制之一。     

中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡作用机制的实验研究近况

目的了解中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡作用机制的实验研究近况。方法复习国内外相关文献,综述中药活性成分诱导HeLa细胞凋亡的作用机制。结果中药活性成分不仅能够通过阻断细胞周期来诱导细胞凋亡、还能通过影响Fas/Fasl系统、p53基因蛋白、Bcl-2基因家族、caspase家族的表达等来实现这一过程。结论中药活性成分在诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡中起重要作用,其作为宫颈癌的一种辅助治疗手段,有着广阔的临床应用前景。     

续断水提液诱导HeLa细胞的凋亡

目的研究续断水提液诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制及药效成分。方法采用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)染色检测线粒体膜电位变化;采用原位末端标记法(TUNEL)及Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡;采用线粒体膜蛋白TOM20免疫荧光染色观测线粒体形态改变;采用二氯荧光素(DCF)流式细胞仪检测细胞内活性氧水平;采用溶解氧测定仪测定细胞耗氧量;采用蛋白印迹检测凋亡相关蛋白的表达。结果续断水提液在30 min内以质量浓度依赖方式显著降低HeLa细胞线粒体膜电位;显著升高TUNEL阳性染色、Annexin V单阳性及Annexin V、PI双阳性细胞数;使线粒体膜蛋白TOM20表达明显下降;使细胞耗氧量下降;使细胞浆细胞色素C、Endo G、Caspase-8含有量升高。续断单体成分续断皂苷B和木通皂苷D(续断皂苷VI)在25、50μmol/L均不能使HeLa细胞膜电位下降,对细胞增殖及形态没有影响。结论续断水提液能损伤线粒体,引起HeLa细胞凋亡,其成分续断皂苷B和木通皂苷D不是续断水提液该作用的药效成分。     

三氧化二砷与刺五加合用诱导HeLa细胞凋亡的实验研究

目的探讨三氧化二砷与刺五加合用对癌细胞生长的抑制作用及其机理。方法以HeLa细胞的生长抑制情况,流式细胞仪PI单染法检测药物诱导细胞的凋亡状况。结果两药合用24 h组细胞变小变圆,脱落情况都较其他组明显,该组细胞生长抑制率明显高于单用组,合用24 h组细胞的凋亡率明显高于合用16 h和8 h组(P<0.01)。结论刺五加可以作为三氧化二砷的抗癌增效剂,两药合用有很强的抗癌活性,其作用机理与抑制癌细胞生长、诱导其凋亡有关。     

云南琵琶甲提取物抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的:研究云南琵琶甲粗提物对人子宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,并进一步探讨其提取物抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法:用水提反复冻融法得到云南琵琶甲提取物,倒置显微镜观察、MTT法检测琵琶甲提取物对HeLa细胞的抑制作用,荧光染色观察、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳法检测药物诱导细胞凋亡的作用。结果:云南琵琶甲粗提物对HeLa细胞有明显的增殖抑制作用,IC50为413μg/mL,荧光染色可见细胞皱缩,染色质凝集并边缘化,琼脂糖凝胶电泳可以看到梯状条带,流式细胞术发现S期细胞增多。结论:确定云南琵琶甲提取物可抑制HeLa细胞增殖,并初步推测云南琵琶甲粗提物能够诱导HeLa细胞凋亡。     

斑蝥提取物诱导宫颈癌细胞凋亡机制的实验研究

目的研究斑蝥提取物(cantharis extract,CTE)诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡作用及其分子机制。方法体外培养人宫颈癌细胞系Hela,利用CCK-8法检测CTE对Hela细胞增殖抑制作用;光学显微镜及荧光显微镜下观察不同浓度CTE诱导细胞凋亡的形态学改变;AnnexinⅤ/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测细胞增殖和凋亡相关蛋白表达变化。结果 CTE显著抑制Hela细胞增殖,呈浓度及时间依赖型,处理48 h的IC50为3.94μg/mL。经光学显微镜下观察可见随着药物浓度增加细胞出现明显离巢凋亡。Hoechst 33258染色后发现,随着药物浓度的增加,核固缩、核碎裂等典型凋亡改变的细胞数目逐渐增多,呈浓度依赖型。AnnexinⅤ/PI双染流式凋亡检测示,随着药物浓度的增加凋亡细胞数量逐渐增加,药物处理组(1.25、2.5、5.0μg/mL)的凋亡率分别为14.73%、29.75%、53.33%;与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。Western blot检测显示,与对照组比较,药物处理组细胞增殖相关蛋白PCNA蛋白表达降低(P0.05);促凋亡蛋白Bax、Bak、Bid表达增加,2、5、5.0μg/mL组Bax表达及1.25、2.5、5.0μg/mL组Bid表达有效期异有统计学意义(P0.05)。而抗凋亡蛋白Bcl-2、Mcl-1、Survivin表达降低(P0.05),Bcl-XL表达无显著改变;凋亡蛋白激酶Caspase-3蛋白表达下降(P0.05),而Caspase-3底物凋亡相关蛋白PARP出现明显切割带,Cleaved-PARP蛋白表达增加(P0.05)。结论 CTE显著抑制Hela细胞增殖,诱导Hela细胞凋亡,其可能机制与下调抗凋亡蛋白、上调促凋亡相关蛋白表达相关。     

越橘提取物抑制宫颈癌HeLa细胞增殖及诱导其凋亡的实验研究

目的 探讨越橘提取物抑制HeLa细胞增殖和诱导凋亡作用及其可能机制.方法 用浓度为0、0.025、0.25、2.5、25μg/mL的越橘提取物处理HeLa细胞24 h后.采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测越橘提取物对HeLa细胞增殖的抑制作用,采用Hoechst 33342/PI染色和DNA ladder方法观察越橘提取物对HeLa细胞凋亡的诱导作用,并采用Western blotring法检测caspase-3和caspase-8蛋白表达.结果 0.025、0.25、2.5和25μg/L的越橘提取物对HeLa细胞增殖的抑制率分别为22.81%、36.75%、42.62%和45.22%;0.25～25 μg/L的越橘提取物处理组细胞呈现明显的凋亡改变;Western blotring结果显示越橘提取物处理组细胞中caspase-8和caspase-3酶原蛋白激活,出现裂解片断.结论 越橘提取物可通过诱导HeLa细胞凋亡而抑制其增殖.     

茜草提取物对宫颈癌HeLa细胞杀伤动力学研究

目的:研究茜草提取物对宫颈癌HeLa细胞的杀伤动力学.方法:采用体外细胞培养方法,观察茜草提取物对HeLa细胞的杀伤作用.结果:观察结果表明,茜草提取物对HeLa细胞生长有明显的抑制作用,IC50为23.5μg/ml,其作用表现出时间依赖性.结论:茜草提取物有直接细胞毒作用,可用于恶性肿瘤的治疗.     

茜草提取物对宫颈癌HeLa细胞杀伤动力学研究

目的：研究茜草提取物对宫颈癌HeLa细胞的杀伤动力学。方法：采用体外细胞培养方法，观察茜草提取物对HeLa细胞的杀伤作用。结果：观察结果表明，茜草提取物对HeLa细胞生长有明显的抑制作用，IC50为23．5μg／ml，其作用表现出时间依赖性。结论：茜草提取物有直接细胞毒作用，可用于恶性肿瘤的治疗。     

蟾毒灵诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的蛋白组学研究

目的:该文通过考察蟾毒灵(bufalin)处理人宫颈癌HeLa细胞株后对细胞蛋白质表达谱的影响,寻找蟾毒灵在HeLa细胞中的可能作用靶点。方法:通过MTT检测细胞活性确定蟾毒灵的IC50,并通过流式细胞术和Hoechst 33342染色检测蟾毒灵诱导细胞凋亡。应用蛋白质组学技术寻找差异表达蛋白点并进行鉴定,用Western blotting试验进行确认。结果:蟾毒灵具有较强的细胞毒作用,IC50(154±21.5)nmol.L-1,可以诱导HeLa细胞发生凋亡。蛋白组学的结果显示蟾毒灵处理组与对照组相比有11个差异表达蛋白,其中9个蛋白点发生了下调;2个蛋白发生了上调。这些蛋白可能是蟾毒灵在HeLa细胞中的作用靶点。Western blotting分析显示heat shock protein 27,vimentin,HNRPK在蟾毒灵处理后的表达调节结果与双向电泳的结果吻合。结论:蟾毒灵可以诱导人宫颈癌HeLa细胞发生凋亡,其凋亡诱导作用可能是多个靶点蛋白共同参与的结果。     

牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用

目的 研究牡荆素诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡和细胞周期阻滞的作用.方法 HeLa细胞培养至对数生长期,分为对照组和牡荆素低、中、高剂量组;通过MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期,Western blot检测Bcl-2、Bax、caspase-3、p-P53、cyclin B1、cyclin E...     

槲皮素诱导HeLa细胞凋亡及caspase-3、caspase-8活化对凋亡影响的研究

 目的 研究槲皮素(quercetin诱导HeLa细胞(人宫颈癌细胞凋亡的作用,以及caspase-3、caspase-8活化对凋亡的影响。方法 采用噻唑蓝(MTT法观察槲皮素对HeLa细胞(人宫颈癌细胞和L-02细胞(正常人肝细胞的生长抑制作用;DAPI染色后荧光显微镜观察细胞的形态学变化;通过DNA琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化分析,FITC-Annexin V/PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;比色法测定槲皮素诱导HeLa细胞凋亡过程中caspase-3、caspase-8活性变化。结果 MTT结果显示,槲皮素可选择性抑制HeLa细胞的生长,并呈剂量、时间依赖性,而正常人肝细胞L-02不出现生长抑制(P>0.05。160.0 μmol·L-1槲皮素处理HeLa细胞72 h,DAPI染色也可见核浓缩及边缘现象,DNA电泳出现特征性的凋亡条带。160.0 μmol·L-1槲皮素处理HeLa细胞24、48和72 h的凋亡率分别为（9.4±2.1%、（30.1±6.5%和（59.8±9.5%,caspase-3活性在48 h达最高（1.68±0.07U·μg -1,而caspase-8活性则在24 h达最高（1.83±0.06U·μg-1,两者与对照组相比均具有显著性差异（P＜0.05。结论 槲皮素可特异性地诱导人HeLa细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能与caspase-3、caspase-8活化有关。     

白藜芦醇诱导鼻咽癌CNE-1细胞凋亡及其分子机制

目的 探讨白藜芦醇诱导鼻咽癌CNE-1细胞凋亡及其分子机制。方法 噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力;活细胞染色法(PI)流式细胞仪分析细胞周期和PI-AnnexinV双染色法流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫印迹检测蛋白表达水平。结果 MTT结果表明白藜芦醇呈浓度和时间依赖性抑制鼻咽癌CNE-1细胞活力,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P < 0.01);PI单染流式细胞仪分析表明白藜芦醇引起S期的CNE-1比例明显增多,相应免疫印迹结果显示细胞周期蛋白Cyclin E和Cyclin A显著下调,呈药物浓度依赖;PI-Annexin V双染流式细胞仪分析表明白藜芦醇呈药物浓度依赖诱导CNE-1细胞凋亡;免疫印迹分析显示抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,而促凋亡蛋白Bax表达上调。结论 白藜芦醇能抑制鼻咽癌CNE-1细胞的增殖,使其阻滞在S期,并可能通过线粒体介导的凋亡通路诱导其凋亡。     

去甲斑蝥素通过超氧阴离子调控对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的 研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)诱导的超氧阴离子(superoxide anion)对人宫颈癌HeLa细胞毒性及作用机制.方法 甲基噻唑蓝(MTT)法检测60 μmol/LNCTD作用后对HeLa的细胞生长抑制作用,采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率和细胞周期,蛋白印迹法检测细胞周期相关...     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

三氧化二砷诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及其部分机制探讨

目的探讨三氧化二砷(AS_2 O3)诱导人胃癌 SGC-7901细胞凋亡的可能机制。方法光学及电子显微镜观察细胞形态学变化,流式细胞术(flow cytometry,FCM)及末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿嘧啶缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidy transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)判定细胞凋亡;免疫组织化学 SABC 法检测凋亡相关基因蛋白 Bcl-2、Bax、c-Myc 及 P53的表述;流式细胞术检测Caspase-3蛋白表达;以二硫代苏糖醇(Dithiothreitol,DTT)为二硫键还原剂,观察其对 As_2O_3所致的 SGC-7901细胞凋亡的影响。结果 As_2O_3作用后光镜及电镜下观察到典型凋亡细胞的形态学特征;FCM 检测在细胞周期 G_1期前出现亚二倍体凋亡峰,同时见不同程度的 G_2/M 期阻滞;TUNEL 标记发现 DNA 链的断裂;As_2O_3 作用后 Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase-3蛋白表达明显升高,c-Myc 蛋白在 As_2O_3处理12、24 h 后表...