蒲公英提取物缓解小鼠体力疲劳实验研究

目的探讨蒲公英的提取物对小鼠是否具有缓解其体力疲劳的作用。方法将单一雄性性别的昆明种小鼠,随机分配至阴性空白组、3. 33 ml/(kg·bw)组、6. 67 ml/(kg·bw)组和10. 00 ml/(kg·bw)组。不间断灌胃30 d后,测定各组负重游泳的时间以及相关血液生化指标。结果与阴性对照组相比较,不负重运动后6. 67 ml/(kg·bw)组和10. 00ml/(kg·bw)组的小鼠血清尿素大幅降低,差异具有统计学意义(P0. 05);这两个剂量组肝组织中的糖原含量也明显升高,其差异具有统计学意义(P0. 05)。6. 67 ml/(kg·bw)组和10. 00 ml/(kg·bw)组小鼠负重的游泳时间也明显延长,其差异具有统计学意义(P0. 05)。各剂量组小鼠血乳酸的曲线下面积与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P0. 05)。结论蒲公英提取物具备缓解小鼠体力疲劳的功效。     

魔芋低聚甘露糖通便功能研究

[目的]研究魔芋低聚甘露糖对小鼠的通便作用。[方法]采用动物实验,选用雄性ICR小鼠,按体重随机分为空白对照组、便秘模型对照组和250 mg/kg.bw、500 mg/kg.bw、750 mg/kg.bw 3个实验组。进行小肠推进实验,测量小鼠体重,测量并计算小鼠小肠墨汁推进率;排便实验,记录首次排便时间、6 h排便粒数和重量。[结果]各组小鼠实验结束时体重差异无统计学意义(P﹥0.05)。与空白对照组比较,便秘模型对照组小鼠小肠墨汁推进率降低,首次排黑便时间延长,6 h排便粒数和6 h粪重均减少,差异均有统计学意义。500 mg/kg.bw和750 mg/kg.bw魔芋低聚甘露糖组小鼠小肠推进率高于便秘模型对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01);500 mg/kg.bw和750 mg/kg.bw魔芋低聚甘露糖组小鼠首次排黑便时间早于便秘模型对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01,P﹤0.05),250 mg/kg.bw魔芋低聚甘露糖组小鼠6 h排便粒数多于便秘模型对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。[结论]魔芋低聚甘露糖对小鼠具有通便作用。     

硝酸亚铈体内抗肿瘤作用机制

目的 探讨硝酸亚铈体内抗肿瘤作用机制.方法 采用小鼠肝癌腹水型细咆(H22)建立荷瘤小鼠动物模型.硝酸亚铈治疗2周后,计算抑瘤率、胸腺指数、脾指数、刺激指数(SI);测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平.结果 硝酸亚铈3个剂量组、环磷酰胺组的瘤重与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01);硝酸亚铈50,100mg/kg组胸腺指数与环磷酰胺组比较差异有统计学意义(P＜0.05);硝酸亚铈100mg/kg组脾指数与阴性对照组和环磷酰胺组比较差异有统计学意义(P＜0.05);硝酸亚铈50 mg/kg组刺激指数与阴性对照组(P＜0.01)和环磷酰胺组(P＜0.01)比较差异有统计学意义;硝酸亚铈50mg/kg组血清SOD水平与阴性对照组(P＜0.05)和环磷酰胺组(P＜0.01)比较差异有统计学意义;硝酸亚铈200mg/kg组血清GSH的水平与阴性对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硝酸亚铈具有明显的抗肿瘤作用,主要是通过提高机体的免疫力,来增强机体抗氧化能力.     

大蒜油对正己烷致大鼠周围神经病变影响

目的探讨大蒜油(garlic oil,GO)对正己烷(n-hexane)所致大鼠周围神经病变的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、大蒜油低、高剂量组,灌胃给予大蒜油40,80 mg/(kg.bw),1 h后灌胃给予正己烷2 500 mg/(kg.bw),模型组灌胃给予等量正己烷,每周5次,持续8周,测定神经行为学指标。结果模型组大鼠后肢撑力指数(9.58 cm)与对照组(7.28 cm)比较明显增加(P0.05),大蒜油低、高剂量组后肢撑力指数分别为7.94和6.99 cm,与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05);对照、模型、大蒜油低、高剂量组倒挂网格指数分别为10.0,3.0,6.0和8.0 s,大蒜油组倒挂网格指数低于对照组(P0.05),高于模型组(P0.05);大蒜油组步态明显优于模型组(P0.05)。结论大蒜油具有保护正己烷所致大鼠周围神经病变的作用。     

丙烯腈抗雄激素作用的体内筛检实验研究

目的研究丙烯腈(acrylonitrile,AN)的抗雄激素作用。方法采用美国经济合作与发展组织(OECD)推荐的内分泌干扰体内筛检实验方法(Hershberger test),对雄性去势大鼠皮下注射剂量为0.4 mg/(kg.bw)丙酸睾酮(testosterone propionate,TP),同时经口灌胃剂量分别为0,10,20,30,40,50 mg/(kg.bw)的受试物丙烯腈以及25mg/(kg.bw)的阳性参照物氟他胺(flutamide,FLU),每天1次,连续10 d。最后一次给药24 h后,将大鼠麻醉后取血并处死,观察受试动物前列腺、精囊腺、阴茎、肛提肌/球体海绵体肌、尿道球腺等附性腺组织(sex accessory tissue,SAT)重量和肝重、肾重等指标。结果结果丙烯腈各剂量组与阴性对照组[AN剂量为0 mg/(kg.bw)]相比,SAT重量差异无统计学意义(P>0.05),阳性对照组(FLH)与阴性对照组相比,SAT重量差异有统计学意义(P<0.05)。丙烯腈各剂量组肝、肾重量与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05),提示受试动物无明显系统毒性。结论采用Hershberger体内筛检试验未发现丙烯腈具有抗雄激素作用。     

双酚A对成年雄性小鼠食物利用率的影响

目的探讨双酚A对成年雄性小鼠食物利用率的影响。方法 100只成年雄性ICR小鼠随机分为阴性对照组、己烯雌酚对照组、双酚A 2、20、100 mg/(kg·d)组,各组每天给予相应剂量受试物灌胃2周,之后再观察6周。实验期间每周称量各组动物体质量1次,每天称量各组动物摄取生长繁殖颗粒饲料的重量。结果给予双酚A 8周后,各组动物体质量差异无统计学意义(P>0.05);给予双酚A的第2周,2,20,100 mg/(kg.d)双酚A组动物的食物利用率与阴性对照组比较明显升高(P<0.01);第4周,20,100 mg/(kg·d)双酚A组动物的食物利用率与阴性对照组比较明显升高(P<0.05);第6周,100 mg/(kg·d)双酚A组动物的食物利用率与阴性对照组比较明显升高(P<0.05);第8周,所有双酚A组动物的食物利用率与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 双酚A对于成年雄性ICR小鼠的食物利用率有增高作用。     

三氯生对昆明小鼠胸腺及脾脏等免疫器官的影响

目的探究三氯生(TCS)对小鼠的免疫功能的影响。方法选用40只雌雄昆明小鼠(25±2)g,根据体重比分为5组,每组8只,雌雄各半,分别对应为空白对照(生理盐水)组,二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide, DMSO)组,以及浓度分别为59.375mg/kg、118.75mg/kg、237.5mg/kg的三氯生溶液组,每日一次,连续灌胃两周,解剖取其脾脏、胸腺等组织,测定其与体重的相对比值,同时用摘眼球法取外周血,测定其半数溶血数值。结果脾脏指数显示,在雄性小鼠的中浓度组和高浓度组中,与阳性对照组相比,其脾脏比重增加较为显著(P0.05),高剂量组雌性小鼠对照组相比较,其脾脏指数差异有统计学意义(P0.05);雄性高剂量组小鼠与阳性对照组相比较,其脾脏指数差异有统计学意义(P0.05);而且雌性小鼠的高、中、低剂量组与对照组相比较差异均有统计学意义(P0.05);HC_(50)结果表明雌雄小鼠的HC_(50)均有所下降(P0.05或P0.01)。结论推测高浓度的三氯生对昆明小鼠的免疫功能存在抑制作用。     

不同剂量葡萄籽原花青素对砷致雄性小鼠肝脏毒性拮抗作用研究

目的观察不同剂量葡萄籽提取物原花青素对三氧化二砷(As2O3)所致雄性小鼠肝脏毒性干预效果,研究其抗氧化损伤作用机制及其干预效果的差异。方法按体重分层将50只雄性昆明种小鼠随机分为5组:对照组(生理盐水0.9%)、As2O3组(4 mg/kg·bw)、和As2O3(4 mg/kg·bw)+GSPE低(100 mg/kg·bw)、中(200 mg/kg·bw)、高(400 mg/kg·bw)剂量组,每组10只,连续灌胃5周;称量小鼠体重、肝重,并计算其肝脏系数;测定肝脏组织的天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、T-AOC等指标,采用单因素方差分析对比组间差异。结果 As2O3组体重、GSH含量、T-AOC水平均低于对照组,肝重、肝脏系数、ALT、AST活力、MDA含量均高于对照组(P均<0.05);As2O3+GSPE(200、400)mg/(kg·bw)剂量组体重均高于As2O3组(P均<0.05);As2O3+GSPE(100、200、400)mg/(kg·bw)剂量组肝重、肝脏系数、ALT、AST活力、MDA含量均低于As2O3组(P均<0.05);GSH含量、T-AOC水平均高于As2O3组(P均<0.05)。As2O3+GSPE低剂量组小鼠体重比As2O3+GSPE中剂量组低(P<0.05);As2O3+GSPE低、中、高剂量组GSH含量(137.17±34.70)μmol/g prot、(198.02±41.28)μmol/g prot、(272.06±35.85)μmol/g prot、T-AOC水平(5.33±0.76)U/mL、(7.07±0.83)U/mL、(11.54±1.86)U/mL依次增高(P<0.05)。结论 GSPE可能通过抗氧化损伤作用拮抗As2O3致雄性小鼠的肝脏毒性,高剂量GSPE干预效果较好。     

核桃改善小鼠睡眠功能及其作用机制研究

目的为探讨核桃膳食对小鼠睡眠功能的影响及其作用机制。方法采用BALB/C健康清洁级雄性小鼠,每天经口灌胃给予核桃仁去皮衣研磨膏状物[3.33、6.67、10.00g/(kg bw)],对小鼠睡眠功能进行评价,依据评价结果对高剂量组小鼠脑组织中褪黑激素含量进行分析。结果空白对照组及各剂量组在给予受试物60 min内,均未发生直接睡眠现象。经口给予小鼠去皮衣核桃仁30 d后,与0g/(kg bw)组比较,该受试物在6.67 g/(kg bw)组能缩短巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期(P0.05);10.00 g/(kg bw)组能延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间(P0.05),能缩短巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期(P0.01);高剂量组小鼠脑组织中褪黑激素显著增加。结论每日摄入核桃量6.67~10.0 g/kg bw具有改善小鼠睡眠功能的作用。     

甲基对硫磷对大鼠生殖毒性损伤作用

目的 研究甲基对硫磷对雄性大鼠的睾丸毒性作用,探讨其毒理作用机制.方法 选择雄性SD大鼠(220-240 g)20只,连续6周灌胃染毒,剂量为1.2,6,30 mg/(kg·bw)染毒结束次日处死大鼠.用流式细胞技术分析睾丸细胞周期和细胞凋亡,同时检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量.结果 1.2,6,30mg/(kg·bw)甲基对硫磷染毒后大鼠精子存活率分别为90.40%,82.99%,73.98%;精子畸形率分别为20.88%,23.91%,29.10%,与对照组相比较差异有统计学意义(P<0.05或(P<0.01).30 mg/kg染毒组的SOD活力185.33U(mg·pro),低于阴性对照组[344.61 U/(mg·pro)];MDA含量1.90 nmol/(mg·pro)高于其阴性对照组(0.71 nmol/mg·pro)(P<0.01).与对照组比较,中、高剂量染毒组GO/G1期细胞比例(73.43%,75.22%)显著降低,S期细胞(12.10%,9.35%)比例降低;高剂量甲基对硫磷组细胞凋亡率(32.77%)高于对照组(22.17%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 甲基对硫磷对大鼠具有明显的生殖毒性,其毒理作用机制可能是氧化应激导致细胞周期的改变和细胞凋亡的增加.     

无动物源性培养系统对人胚胎干细胞生长的支持作用

目的:建立完全非动物源性培养系统,为人胚胎干细胞定向诱导为各系统细胞应用于临床、消除动物源性污染打下基础。方法:分别采用人包皮成纤维细胞、胎儿肌肉细胞及人子宫内膜基质细胞为饲养层细胞,以血清替代品取代动物血清,支持人胚胎干细胞生长,观察其增殖和分化情况。结果:人包皮成纤维细胞、胎儿肌肉细胞均能很好支持人胚胎干细胞生长增殖,并保持90%左右未分化表型:AKP染色强阳性,SSEA-4、TRA-1-81表达强阳性,可见OCT-4 mRNA表达,核型正常。人子宫内膜基质细胞不能支持hESC的生长。结论:完全可以使用非动物源性培养系统支持人胚胎干细胞增殖,从而为胚胎干细胞定向诱导分化应用于临床打下坚实基础     

BRL-CM小鼠胚胎干细胞及体外诱导的研究

目的 探讨以Buffalo大鼠肝细胞培养上清(BRL-CM)替代含LIF培养液体外培养小鼠胚胎干细胞(ESC)的可行性；无血清体外诱导ESC为神经前体细胞(NPC)。方法 以BRL-CM维持ESC生长并抑制其分化，用含LIF的培养液作为对照，硝基四氮唑蓝／5-溴-4氯-3-吲哚基磷酸(NBT／BCIP)显色检测碱性磷酸酶。采用N2选择性无血清培养法获取NPC，免疫组化法检测巢蛋白(Nestin)鉴定。结果 BRL-CM与含LIP的培养液一样能维持ESC未分化状态，无血清培养基诱导。ESC后获得细胞的86％为NPC。结论 BRL-CM可替代LIF用于ESC培养，且经济、简便。采用N2选择性培养基可获得较高纯度的NPC。     

米非司酮对早孕小鼠促性腺激素细胞的形态学影响

研究米非司酮终止早孕时小鼠垂体促性腺激素细胞——FSH细胞、LH细胞的形态学变化。方法:应用免疫组织化学PAP方法,对FSH细胞与LH细胞的阳性细胞密度,细胞质内激素颗粒进行观察。结果:实验组与对照组比较,FSH细胞的阳性细胞密度,细胞质内FSH颗粒无显著性差异;LH细胞的阳性细胞密度,细胞质内LH颗粒均明显减少,有显著性差异(P<0.05)。结论:米非司酮对早孕小鼠的FSH细胞的功能无明显影响;对LH细胞的功能有显著的抑制作用。     

自体DC CIK NK αβT γδT细胞治疗乳腺组织细胞肉瘤的临床研究

目的观察细胞因子诱导的自体DC、CIK、NK、αβT、γδT细胞治疗组织细胞肉瘤疗效。方法抽取患者自体外周血60~100 m L,采用血细胞分离机收集其单核细胞,经细胞因子诱导并扩增C I K、N K、αβT、γδT细胞及DC细胞;用流式细胞仪检测其表型后,静脉回输CIK、NK、αβT、γδT细胞,皮下注射DC细胞,观察组织细胞肉瘤变化。结果患者左乳肿块缩小＞50%,生活质量明显改善。结论细胞免疫治疗是一种化疗后组织细胞肉瘤有效的治疗手段,具有广阔的临床应用前景。     

洛伐他汀对人粒系白血病细胞生长的影响

目的观察洛伐他汀(Lovastatin)对体外培养的人粒系白血病细胞株HL-60生长的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测、流式细胞仪分析等技术。结果洛伐他汀可显著抑制HL-60细胞的增殖．且呈剂量一效应关系。流式细胞仪分析结果显示：洛伐他汀不仅能影响该细胞周期进程而且可诱导该细胞凋亡。结论洛伐他汀可能通过影响细胞的生长周期和诱导细胞凋亡来抑制HL-60细胞的增殖。     

白藜芦醇对胃癌MGC-803细胞增殖抑制作用

目的 探讨白藜芦醇对人胃癌MGC-803细胞株细胞周期影响及其机制.方法 采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法和集落形成试验检测白藜芦醇对胃癌细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞周期的改变,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞凋亡抑制基因-2(bcl-2)、增殖基因c-myc的mRNA表达水平.结果 白藜芦醇可抑制胃癌细胞增殖和集落形成能力,低、高剂量组的抑制率分别为6.9%,17.6%和27.98%,63.39%,差异均有统计学意义(P＜0.05);白藜芦醇能使胃癌细胞周期阻滞于G_0/G_1期,明显下调胃癌细胞bcl-2、c-myc基因mRNA表达水平(P＜0.05);用药24 h后,白藜芦醇高剂量组bcl-2和c-myc基因相对表达量分别为(0.54±0.04),(0.58±0.05),与空白对照组(0.91±0.05),(0.85±0.03)比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 白藜芦醇可抑制胃癌MGC-803细胞增殖并使其细胞周期阻滞于G_0/G_1期,可能与下调bcl-2、c-myc基因表达有关.     

柴胡皂苷D对SGC-7901细胞生长及迁移抑制作用

目的探讨柴胡皂苷D对胃癌SGC-7901细胞生长、迁移抑制作用及机制。方法实验设对照组、低、中、高剂量柴胡皂苷组(5、10、20μmol/L柴胡皂苷D);采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞24、48和72 h细胞增殖情况;采用原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测各组细胞凋亡;Transwell检测各组细胞迁移能力;实时定量荧光PCR技术(real time PCR)检测各组细胞中norrin及livin表达;蛋白印迹法检测各组细胞norrin、livin、p57和cyclin E表达。结果 MTT结果显示,与对照组比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞增殖受到明显抑制,呈剂量效应关系(P<0.05);Transwell结果显示,与对照组[(190±7)个/视野]比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组细胞迁移数量[分别为(114±9)、(87±6)、(38±4)个/视野]均减少(均P<0.05);与对照组(4.94±1.14)比较,低、中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞凋亡指数[分别为(8.46±1.18)、(11.76±2.85)、(34.34±7.74)]均增加(均P<0.05);与对照组比较,中、高剂量柴胡皂苷组SGC-7901细胞中norrin、livin mRNA及蛋白表达均减少(均P<0.05),各剂量组SGC-7901细胞中cyclinE蛋白表达均明显减少,p57表达明显增加,且呈剂量效应关系(均P<0.05)。结论柴胡皂苷D对胃癌细胞生长、迁移具有抑制作用,其机制可能与柴胡皂苷D减少norrin、livin表达,延长细胞周期、促进细胞凋亡有关。     

机械剪切对脾、肝、肾细胞DNA损伤程度的比较

目的　探讨机械剪切对小鼠脾、肝、肾 3种细胞DNA的损伤程度是否存在差异以及机械剪切法是否适于 3种器官单细胞的分离。方法　以未经任何处理的小鼠为实验组 ,以 1 5 0mg kg环磷酰胺处理的小鼠为对照组 ,用机械剪切法分离 3种器官的单个细胞并制备单细胞悬液 ,然后用苔盼蓝排斥法检测细胞存活率 ,用单细胞凝胶电泳技术检测细胞DNA损伤程度。结果　机械剪切法能快速分离出彗星实验所需的足量的脾、肝、肾 3种器官的单个细胞 ;试验组脾、肝、肾细胞的拖尾率分别为 3 2 0 %、6 2 1 %和 9 2 2 % ,DNA迁移距离分别为 2 7 30 μm、2 8 4 5 μm和 4 7 1 0 μm ,且不同类细胞之间的拖尾细胞率以及脾细胞与肾细胞、肝细胞与肾细胞之间的DNA迁移距离均有显著差异 (P <0 0 5 )。试验组脾、肝、肾细胞的拖尾率和DNA迁移距离与阳性对照组的同类细胞比较都显著要低 (P <0 0 1 ,P <0 0 0 1 )。结论　机械剪切对小鼠脾、肝、肾 3种细胞DNA的损伤依次加重。机械剪切法对脾、肝细胞的分离尤为适合     

亚砷酸钠对HaCaT细胞增殖周期及ROS生成影响

目的探讨亚砷酸钠(NaAsO2)对人皮肤角质形成细胞(HaCaT)增殖、细胞周期及活性氧(ROS)生成影响。方法以0、25、50μmol/L NaAsO2作用于HaCaT细胞6 h后,以Alamar Blue还原法检测细胞增殖水平;以流式细胞仪检测细胞周期及ROS水平。结果 25、50μmol/L NaAsO2组细胞增殖水平分别为(93.5±1.18)%、(82.9±2.64)%,明显低于对照组(100±0.51)%(P<0.05);G2/M期细胞数分别为(19.15±0.29)%、(18.12±1.35)%,明显高于对照组(15.24±0.04)%(P<0.05);ROS水平分别为(128.61±6.23)%、(152.92±7.25)%,明显高于对照组(100.00±3.45)%(P<0.05)。结论 NaAsO2作用可引起HaCaT细胞ROS含量增高,同时G2/M期细胞数增多,但G2/M期细胞比例增高并不是由细胞增殖作用所引起。     

甲基丙烯酸环氧丙酯对人支气管上皮细胞周期及凋亡影响的研究

目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞(16HBE)经1~16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数(MI)。结果经1次染毒处理后,随着染毒剂量的增加,G0/G1期细胞显著减少(P<0.01),S期和G2/M期细胞显著增加,凋亡细胞数增多,细胞分裂指数下降;随着染毒次数的增加,各剂量组细胞周期均明显阻滞于G0/G1期,但高剂量组细胞仍表现出S期和G2/M期增多现象;经3次染毒后,高剂量组细胞出现凋亡率下降、分裂指数升高现象。结论经GMA染毒处理后,16HBE细胞周期由G0/G1期向S期和G2/M期移动而呈现增殖性改变。