姜黄素对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元作用的研究

目的探讨姜黄素（Curcumin,Cur）对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）制备的帕金森病（PD）模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法将C57BL6雄性小鼠随机分为正常对照组、MPTP模型组及姜黄素预处理组。用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测黑质酪氨酸羟化酶（TH）及多巴胺转运体（DAT）基因的表达水平。应用高效液相色谱法检测纹状体（Str）内DA及其代谢物二羟基苯乙酸（DOPAC）含量。结果MPTP模型组黑质TH和DAT基因的表达较正常对照组明显降低,姜黄素预处理组可逆转上述改变（P〈0.01）。MPTP模型组Str内DA及其代谢产物DOPAC的含量较对照组明显减少,应用姜黄素后可逆转上述改变（P〈0.01）。结论姜黄素对MPTP制备的PD模型小鼠黑质纹状体DA能神经元有明显的保护作用。     

人参皂苷Rg1拮抗MPTP诱导小鼠黑质中铁增高的作用

目的研究人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1,Rg1)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)致帕金森病(Parkinson’s disease,PD)小鼠黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元变性的保护作用及其可能机制。方法 C57BL6小鼠随机分为正常对照组(NS,i.p.)、MPTP组(30 mg/kg×5 d,i.p.)及Rg1(5 mg/kg×8 d,i.p.)预处理组。应用免疫组织化学法、Perls’铁染色、逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以及图像分析等技术观察黑质内多巴胺转运蛋白(dopamine transporter,DAT)免疫反应活性变化、铁染色阳性细胞数的变化和DAT mRNA的表达水平的变化,用高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠纹状体内DA及其代谢物二羟基苯乙酸(dihydroxyphenylacetic acid,DOPAC)和高香草酸(homovanillic acid,HVA)含量。结果与正常对照组相比,MPTP组黑质内铁染色阳性细胞数增高以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显减少;与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内铁染色阳性细胞数降低以及纹状体内DA及其代谢产物DOPAC和HVA的含量明显增加(P<0.01)。与正常对照组相比,MPTP组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达明显降低(P<0.01);与MPTP组相比,Rg1预处理组黑质内DAT免疫反应活性和DAT mRNA的表达有所增高(P<0.05)。结论 Rg1对MPTP致PD小鼠黑质DA能神经元的损伤具有一定的保护作用,其机制可能与Rg1能通过降低MPTP诱导的铁过多聚积从而拮抗氧化应激反应有关。     

PD小鼠模型的多巴胺转运蛋白mRNA转录

目的分析帕金森病(PD)小鼠模型中脑黑质多巴胺转运蛋白(DAT)基因转录状况.方法用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射C57BL小鼠,制作PD鼠模型,分10、18d两组;用相同体积生理盐水腹腔注射作为正常对照.以Dot-Blot方法检测小鼠中脑黑质部位DAT基因转录.结果与正常对照相比,MPTP组小鼠行为异常,中脑黑质部位TH(+)细胞减少,DATmRNA转录降低(P＜0.05).正常对照组中小脑部位DAT mRNA转录低于黑质部位(P＜0.05).结论多巴胺能神经元及其DAT mRNA转录量随PD的发生而减少或降低.DAT mRNA转录量可反映残存多巴胺神经元量或功能状况,反映PD的状况,高DAT mRNA转录的细胞对MPTP毒物敏感性增强.     

乌鸡白凤丸有效成分对帕金森病模型小鼠的神经保护作用

目的探讨乌鸡白凤丸有效成分（BFP）对1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）诱致C57BL小鼠黑质神经元凋亡的保护作用及其可能机制。方法C57BL小鼠连续5d皮下注射MPTP（30mg／kg）制备帕金森病小鼠模型。给予BFP预处理后，用酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学法观察黑质神经元的变化；同时应用免疫组织化学法检测Bax蛋白表达; 应用高效液相-电化学方法检测纹状体（Str）多巴胺（DA）及其代谢产物二羟基苯乙酸（DOPAC）和高香草酸（HVA）的含量变化。结果BFP预处理能使黑质致密带（SNc）TH免疫阳性神经元数目较MPTP组明显增多，而Bax蛋白表达较MPTP组明显减少；可使Str区DA及其代谢产物DOPAC、HVA含量明显增加。结论BFP有效成分可以拮抗神经毒性物质MPTP对C57BL小鼠黑质多巴胺能神经元的损伤，其作用机制可能与其抗凋亡作用有关，Bax表达的降低可能是BFP抗凋亡作用的途径之一。     

平帕汤对PD模型小鼠多巴胺能神经元保护作用的研究

目的:探讨平帕汤对帕金森病(PD)模型小鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法:在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD小鼠模型基础上,随机分为正常组,模型组和平帕汤组,采用爬杆测试法观察平帕汤对PD小鼠行为特征的影响;采用高效液相电化学法(HPLC-ECD)检测各组小鼠纹状体内多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)和高香草酸(HVA)的含量;采用免疫组化染色法观察各组小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞表达的变化。结果:末次注射MPTP后,与正常组相比,模型组爬杆时间和评分明显增加(P0.05),平帕汤组显著增加(P0.01);与模型组相比,平帕汤组DA、DOPAC值有上升趋势,DA/HVA值则明显增加(P0.01,P0.05);平帕汤组黑质TH阳性细胞的表达程度明显提高(P0.05或P0.01)。结论:平帕汤能保护帕金森病模型小鼠脑黑质多巴胺能神经元,挖掘其功能潜力,振奋其分泌能力,从而提高脑内黑质纹状体系统多巴胺的浓度,最终达到防治PD的作用。     

烟碱对帕金森病模型小鼠多巴胺释放的影响及机制探讨

目的：研究烟碱对帕金森病（Parkinson’s disease,PD）模型小鼠不同脑区多巴胺（dopamine,DA）的影响及其机制。方法:应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP）制备PD小鼠模型,应用爬杆实验检测小鼠运动功能,应用酪氨酸羟化酶免疫组化观察小鼠中脑黑质致密部（substantia nigra pars compacta, SNpc）多巴胺能神经元数目,应用高效液相色谱法检测小鼠不同脑区（纹状体、海马、皮质）DA的含量,应用蛋白质免疫印迹检测小鼠纹状体多巴胺转运体（dopamine transporter,DAT）的变化。结果：①烟碱可显著改善MPTP导致的野生型小鼠运动功能障碍;②烟碱可显著改善MPTP诱导的野生型小鼠中脑SNpc多巴胺能神经元的丢失;③烟碱可显著减轻MPTP所致的野生型小鼠纹状体DA含量的减少,烟碱对α7-烟碱型乙酰胆碱受体（nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs）敲除型（knockout,KO）小鼠MPTP模型中纹状体DA含量的减少无明显恢复作用,烟碱对野生型小鼠或α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中海马和皮质中的DA含量无明显影响。④烟碱可显著增加野生型小鼠MPTP模型中纹状体DAT的含量,烟碱对α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中的纹状体DAT的减少无逆转作用。结论：烟碱可以激活α7-nAChRs抑制PD模型小鼠SNpc区多巴胺能神经元的死亡,提高纹状体DAT水平;促进纹状体DA含量增加,从而在PD模型小鼠中发挥神经保护作用。     

淫羊藿总黄酮对帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元保护作用

目的探讨淫羊藿总黄酮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(PD)模型小鼠黑质纹状体系统多巴胺(DA)能神经元的保护作用。方法 C57BL/6去卵巢小鼠随机分为对照组、MPTP组及淫羊藿总黄酮25mg/kg+MPTP给药组、淫羊藿总黄酮50mg/kg+MPTP给药组和淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组,应用高效液相色谱法检测各组纹状体内DA的含量,免疫印记法检测纹状体内Bcl-2蛋白的表达情况。结果 MPTP组小鼠纹状体内DA含量较对照组明显降低(F=31.92,q=14.16,P<0.001),淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组纹状体DA含量较MPTP组明显增加(q=5.48,P<0.01)。MPTP组纹状体内Bcl-2蛋白的表达较对照组明显降低(F=10.73,q=3.99,P<0.05),淫羊藿总黄酮100mg/kg+MPTP给药组可逆转上述改变(q=6.49,P<0.001)。结论淫羊藿总黄酮具有神经保护作用,能够对抗神经毒素MPTP对黑质纹状体系统DA能神经元的损伤,其机制可能与抗凋亡有关。     

不同帕金森病模型小鼠空间参考记忆及脑内多巴胺水平的比较研究

目的 比较1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致的急性、亚急性和慢性帕金森病(PD)模型小鼠空间参考记忆和脑内多巴胺(DA)水平的差异.方法 用相同的MPTP使用总量不同的注射间隔分别制作急性、亚急性和慢性PD小鼠模型.Morris水迷宫检测小鼠空间参考记忆,高效液相(HPLC)检测纹状体、海马和前额叶皮层的DA含量,免疫组化染色检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量.结果 慢性PD小鼠的逃避潜伏期较对照组有明显延长(P＜0.05),而急性和亚急性PD小鼠则无明显变化.3组实验组纹状体DA含量[(1180.1±293.0)ng/ml,(1177.4±450.5)ng/ml,(1149.6±353.0)ng/ml]均较对照组[(225.6±79.7)ng/ml,(273.6±64.9)ng/ml,(327.1±126.2)ng/ml]有显著减少(P＜0.01),急性PD小鼠前额叶皮层DA含量[(65.3±23.9)ng/ml]较对照组[(41.2±18.8)ng/ml]有显著减少(P＜0.05),3组实验组海马DA含量无明显变化.3组实验组黑质TH阳性神经元数量均较对照组有显著减少(P＜0.05).结论 3种PD模型小鼠空间参考记忆差异可能不是由其脑内DA水平差异所致.     

甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠多巴胺能神经元的影响

目的 观察甘草黄酮对MPTP帕金森病（PD）小鼠多巴胺（DA）能神经元的影响. 方法 制作MPTP小鼠PD模型,随机分为3组：模型组（每日一次腹腔注射给予25 mg/kg MPTP,连续5次）、空白组（每日一次腹腔注射给予等量生理盐水）和甘草黄酮处理组（除给予MPTP外,每日一次灌胃给予30 mg/kg甘草黄酮,连续7次）.采用行为学观察、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察模型小鼠的行为学表现、DA能神经元数量和腹侧中脑酪氨酸羟化酶（TH）蛋白表达水平.并观察甘草黄酮处理后对上述指标的影响. 结果 模型组小鼠出现PD典型行为学表现,黑质致密部DA能神经元数量（56.2 ±3.5vs152.4±8.6）和腹侧中脑TH含量（3.1 ±0.5 vs14.7±0.9）较对照组显著下降（P＜0.01）.甘草黄酮处理组小鼠行为表现较轻.与模型组相比,黑质致密部DA能神经元的丢失和腹侧中脑TH含量下降均明显改善（P＜0.01）. 结论 甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应.     

香青兰总黄酮对帕金森病模型小鼠黑质DAT和VMAT2蛋白表达的影响

目的:探讨香青兰总黄酮(total flavones of Dracocephalum moldavica L.,TFDM)对帕金森病(Parkinson’s disease, PD)模型小鼠中脑黑质内多巴胺转运蛋白表达的效果。方法:C517BL/6J小鼠腹腔注射1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine, MPTP)制备PD动物模型,多种行为学实验方法评价动物运动功能;尼氏染色观测黑质区多巴胺能神经元的数量;RT-PCR和Western blot检测黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)、囊泡单胺转运蛋白2(Vesicular monoamine transporter 2,VMAT2)和多巴胺转运蛋白(Dopamine transporter, DAT)的表达情况。结果:行为学检测表明,TFDM组显著增加小鼠的运动距离(P<0.05),显著增加小鼠的下落潜伏期(P<0.05),明显减少小鼠的爬杆时间(P<0.05);MPTP腹腔注射明显减少了黑质内多巴胺能神经元的数量,TFDM显著的提高了PD模型小鼠黑质内多巴胺能神经元数量;RT-PCR结果显示,TFDM组的TH、VMAT2和DAT的mRNA表达均显著增高(P<0.05);TFDM组TH、VMAT2和DAT蛋白表达均明显上调(P<0.05)。结论:TFDM可能通过上调VMAT2和DAT蛋白的表达,减少DA能神经元丢失,进而改善PD模型小鼠运动功能障碍。     

甘草的镇静催眠作用

甘草浸膏小鼠腹腔注射(ip)的LD_(50)为2.2g/kg。注入甘草浸膏50mg/kg可显著减少小鼠的自发活动和明显加强戊巴比妥钠对小鼠的催眠作用;注入甘草浸膏250mg/kg可明显延长小鼠戊巴比妥钠的睡眠时间。结果提示甘草具有镇静催眠作用。     

1,6-二磷酸果糖对阿霉素心肌损伤防治作用的实验研究

将Wistar雄性大鼠随机分为2组，每组10只，阿霉素（ADR）组：经腹腔注射ADR每次2．5mg／kg，3次／周，用药2周；ADR＋1，6-二磷酸果糖（FDP）组：ADR用药方法同ADR组，并经腹腔注射FDP每次600mg／kg，3次／周，用药6周，实验的最初两周FDP在ADR前20min投药。6周实验结束后，分别测定两组大鼠血清丙二醛（MDA）、肌酸磷酸激酶（CK）及其同工酶（CK－MB）和谷草转氨酶（GOT）的含量，进行心肌的病理形态学观察。结果显示，ADR＋FDP组的心肌病变程度明显轻于ADR组，ADR＋FDP组的血清CK－MB、GOT和MDA均较ADR组明显降低，表明FDP对大鼠阿霉素心肌损伤具有防治作用。     

B-7601对大鼠脑区乙酰胆碱含量的影响

M受体阻断剂B—7601 0.1mg/kg,ip对大鼠大脑皮层、纹状体及脑干Ach含量无明显影响。15mg/kg,ip则明显地降低大脑皮层及纹状体的Ach含量。同时可降低脑干的Ach含量,但统计学处理无明显差异。二个剂量组相比,三个脑区的Ach含量变化都存在着显著性差异。     

铅对胎鼠甲状腺功能及仔鼠行为发育影响的研究

本文以醋酸铅作为受试物,将受孕大鼠随机分为20mg/kg、40mg/kg、60mg/kg3个剂量组和对照组;将受孕小鼠随机分为试验组(60mg/kg)、阴性对照组和甲基硫氧嘧啶组(25mg/只/次)。从大鼠受孕第13天,小鼠受孕第10天腹腔注射染毒,隔两天1次,共3次。甲基硫氧嘧啶组灌胃,共3次。实验结果表明,试验组胎鼠血清和羊水T_3、T_4水平及仔鼠平均体重明显下降,试验组和甲基硫氧嘧啶组仔鼠多种神经行为发育明显延迟于对照组仔鼠。说明,铅对胎鼠甲状腺功能、仔鼠体重增长以及多种神经行为发育有明显的抑制作用。铅对胎鼠甲状腺功能的影响可能是仔鼠神经行为和智力发育迟缓的重要原因。     

不同剂量四氧嘧啶与禁食对制作小鼠糖尿病模型的影响

目的　研究不同剂量四氧嘧啶 (ALX)与禁食对小鼠糖尿病模型的影响。方法　给予小鼠腹腔注射不同剂量ALX ,分别按 2 0 0mg/kg体重、15 0mg/kg体重、10 0mg/kg体重 (qd× 2d) ,每个剂量组又分为禁食与不禁食两个对照小组 ,禁食是指于造模前禁食 12h ,各组均不禁水 ;采用断尾取血检测血糖 ,用析因设计方差分析法 ,比较ALX剂量因素和禁食因素对糖尿病模型动物血糖水平的影响。结果　ALX的三个剂量 ,按 2 0 0mg/kg体重、15 0mg/kg体重、10 0mg/kg体重 (qd× 2d)对小鼠血糖水平的影响无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,禁食与否对小鼠血糖的影响也无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　ALX三种剂量因素与禁食因素对制作小鼠糖尿病模型的影响无差异性。     

百草枯中毒致大鼠急性肺损伤时NF-κB抑制剂对中性粒细胞凋亡的影响

目的:探讨在百草枯(PQ)中毒所致大鼠急性肺损伤时NF-κB抑制剂(PDTC)对中性粒细胞凋亡的影响。方法:120只大鼠随机分为4组:1正常对照组(C组):腹腔注射生理盐水3ml/kg;2PDTC对照组(PC组):腹腔注射PDTC120mg/kg,半小时后腹腔注射生理盐水3ml/kg;3急性肺损伤组(L组):大鼠腹腔注射2%PQ(25mg/kg);4急性肺损伤+PDTC干预组(L+P组):腹腔注射PDTC(120mg/kg),半小时后腹腔注射2%PQ。后两组分别以腹腔注射PQ后的1d、3d、5d作为观测点,处死动物、取材,每个时间点16只大鼠。取肺组织HE染色来评价肺组织损伤情况;检测血清中TNF-α水平、肺泡灌洗液中PMN的NF-κBp65表达、PMN中胞浆蛋白IκBα的含量和中性粒细胞凋亡率。结果:肺组织病理结果显示,C组和PC组大鼠的肺组织结构基本完整。L组炎性细胞浸润明显增多,肺组织损伤程度加重。P+L组肺组织损伤程度较轻。L组血清TNF-α水平较C组显著增加,P+L组降低。L组3d时PMN的凋亡率最低(3.52±0.34)%,P+L干预组与相应时间点L各组相比凋亡率均增加。结论:百草枯中毒导致了大鼠急性肺损伤,在预先应用NF-κB抑制剂(PDTC)后,使延缓的中性粒细胞凋亡恢复正常,从而有效地减轻了百草枯中毒所致的κB大鼠急性肺损伤。     

苯妥英对局灶性脑缺血-再灌注后脑组织NO水平的影响

目的:本实验通过观察大鼠局灶性脑缺血-再灌注后脑组织一氧化氮(NO)水平的变化以及苯妥英(PHT)对其影响,以进一步探讨局灶性脑缺血-再灌注损伤机制及PHT对缺血-再灌注损伤后保护作用的机制。方法:将雄性成年Wistar大鼠随机分为4组:即假手术组、缺血-再灌注组、PHT低剂量治疗组和PHT高剂量治疗组。每组均观察手术后6h、12h、24h三个时间点的改变。采用线栓法制成大脑中动脉闭塞模型。测定手术后不同时点缺血脑组织NO的水平。结果:缺血-再灌注组各时点NO水平与假手术组相应时点比较明显升高,具有显著性差异(P<0.05),PHT低剂量治疗组和高剂量治疗组NO水平明显低于缺血-再灌注组各相应时间点(P<0.05),PHT高剂量治疗组各时点NO水平与PHT低剂量治疗组各相应时间点比较明显降低(P<0.05)。结论:脑缺血-再灌注后,缺血大鼠脑组织内的NO水平升高,说明NO参与了脑缺血-再灌注损伤的病理生理过程;PHT可降低NO水平,从而对脑缺血-再灌注损伤可能具有保护作用。     

尼卡地平抗癫痫作用研究

目的　探讨二氢吡啶类钙拮抗剂尼卡地平的抗癫痫作用。②方法　制备大鼠戊四唑 (PTZ)化学性点燃模型 ,通过PTZ点燃发作实验、小鼠最大电休克实验和小鼠急性PTZ惊厥实验 ,观察尼卡地平的抗癫痫作用。③结果　腹腔注射尼卡地平 2～ 2 0mg/kg体质量显著抑制PTZ点燃发作 ,并呈量效关系 (t=2 .5 0 0～ 4.34 2 ,P <0 .0 5 ,0 .0 1) ;腹腔注射尼卡地平 2 0mg/kg体质量显著减少小鼠最大电休克强直发作时间 (F =5 .32 7,t=3.92 4,P <0 .0 1) ;腹腔注射尼卡地平 10 ,2 0mg/kg体质量对小鼠PTZ惊厥有保护作用 (F =7.30 0 ,t=3.436～ 4.45 7,P <0 .0 1)。④结论　尼卡地平有抗癫痫作用。     

昆布多糖和猴头多糖对实验性高血糖的防治作用

糖尿病患病率和死亡率逐年增高,高血糖还可诱发冠心病和动脉粥样硬化,它已严重地危害了人们的生命健康。本文探讨了猴头多糖(Hericium erinacaus Polysaccharide,简称HP),褐藻淀粉(Laminarin,LA)和褐藻酸钠(Sodium alginate,SA)对实验性高血糖的防治作用。     

人参茎叶皂甙和人参根皂甙及赛庚啶对大鼠主动回避反应的影响

本文研究了人参茎叶皂甙（ＧＳＬＳ）和人参根皂甙（ＧＲＳ）及赛庚啶（ＣＹＤ）对大鼠穿梭箱主动回避反应的影响学习和记忆成绩用回避反应率（ＡＲ）和回避潜伏期（ＡＬ）评价．多次用药后，ＧＳＬＳ３０ｍｇ／ｋｇ通过显著增加ＡＲ和显著缩短ＡＬ而易化了１０月龄雄性Ｗｉｓｔａｒ种鼠单路回避反应的学习和记忆获得，但损害了雄性大鼠双路回避反应的学习获得．多次腹腔注射ＧＳＬＳ３０ｍｇ／ｋｇ和ＧＲＳ４０ｍｇ／ｋｇ均相似显著改善了由东莨菪碱（０．８ｍｇ／ｋｇ）损害的Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠单路回避反应的学习和记忆获得．此处，单次腹腔注射ＣＹＤ０．５ｍｇ／ｋｇ通过显著减少ＡＲ和显著延长ＡＬ而损害了雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠双路回避反应的学习的记忆获得．