VM-26对体外培养癌细胞BT325的抑制实验

目的：观察ＶＭ－２６对体外培养人多形性胶质母细胞瘤细胞株ＢＴ３２５的抑制。方法：通过细胞生长曲线、细胞死亡百分率、细胞生长抑制百分率、抑瘤率等方法研究有关抑制情况。结果：ＶＭ－２６可明显抑制体外培养人多形性胶质母细胞ＢＴ３２５生长，并有很好的剂量、时间反应。结论：小剂量ＶＭ－２６即对体外培养人多形性胶质母细胞ＢＴ３２５产生抑制作用。     

miR-181家族在胶质母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的探讨miR-181家族在人多形性脑胶质母细胞瘤（GBM）中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用茎环实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测40例胶质母细胞瘤中miR-181a、miR-181b、miR-181c、miR-181d的表达水平,并分析其与胶质母细胞瘤临床病理特征的关系。采用慢病毒转染上调胶质瘤细胞系U251miR-181a的表达,分析miR-181a对U251克隆形成、细胞增殖和凋亡的影响。结果miR-181a高表达的GBM患者生存预期明显延长（P＜0.05）;且miR-181a表达水平越高,GBM瘤周水肿越明显（P＜0.05）。O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）阳性组的GBMmiR-181a表达明显高于阴性组（P＜0.05）。上调miR-181a的表达后,U251胶质瘤细胞克隆形成数明显少于对照组（P＜0.05）,且细胞生长抑制在第5天最明显,差异有统计学意义（P＜0.01）;对细胞凋亡起促进作用（P＜0.05）。结论miR-181a表达水平与GBM患者的临床预后相关。miR-181a表达减少与GBM的发生密切相关。     

CCND1表达沉默促进胶质母细胞瘤细胞株对替莫唑胺的敏感性

目的 利用已构建的CCND1表达沉默及过表达的人源性胶质母细胞瘤细胞株SHG-44,筛选能够与CCND1协同抑制胶质母细胞瘤细胞增殖的化学治疗药物.方法 用蛋白质印迹法检测CCND1表达沉默及过表达的人源性胶质母细胞瘤细胞株SHG-44中多药耐药基因MDR1的表达产物P-糖蛋白(P-gp)及凋亡因子Bcl-2、Caspase-3的表达.使用卡莫司汀(BCNU)、洛莫司汀(CCNU)、替莫唑胺(TMZ)3种化学治疗药物分别处理CCND1过表达或表达沉默的SHG-44细胞,筛选能够与CCND1表达沉默协同抑制肿瘤细胞生长的化学治疗药物,并在人源性胶质母细胞瘤细胞株系U251中进一步验证.结果 蛋白质印迹结果示CCND1表达沉默能够下调P-gp、Bcl-2的表达,上调Caspase-3的表达(P均＜0.01).BCNU (0.05、0.25 μg/mL)、CCNU(20、80 μg/mL)处理CCND1过表达或表达沉默的SHG-44细胞的第2、3、4、5天时,细胞生长曲线的差异均无统计学意义;而在药物处理后细胞培养的第4、5天,CCND1表达沉默SHG-44细胞的生长受到TMZ(9.1μg/mL)的抑制作用较亲代SHG-44细胞强(P＜0.05).U251细胞实验证实CCND1表达沉默促进TMZ的化学治疗敏感性.结论 CCND1表达沉默联合TMZ较两者单独作用能更有效地抑制人源性胶质母细胞瘤细胞株SHG-44的增殖,提示CCND1可能参与TMZ化学治疗耐药机制.     

多形性胶质母细胞瘤放疗前后CXCL14和IGLV1-44的表达及其临床意义

目的探讨多形性胶质母细胞瘤（GBM）组织照射60Gy后基因表达谱中免疫相关基因表达差异的变化及意义。方法采用BioStarH-141S（2004）型含13 929条人类全长基因cDNA表达谱芯片,对2例多形性胶质母细胞瘤组织进行放疗前及放疗60Gy后检测,并分析它们之间的基因表达差异。结果多形性胶质母细胞瘤放疗60Gy后与放疗前比较,表达差异基因中改变最明显的功能群是免疫系统相关的基因,如CXCL14和IGLV1-44上调。细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、DNA修复系统也有部分基因发生明显变化,如MLL5上调、POLR2B下调等。结论提示对多形性胶质母细胞瘤组织照射60Gy后基因表达谱改变的研究可以更好地阐明放射敏感性差异机制,为放疗前或放疗早期寻找到预测放射敏感性分子标志提供理论依据。     

胶质母细胞瘤细胞系GL15生物学特性的实验研究

目的 明确GL15细胞系的生物学特征并探讨表皮生长因子(EGF)对GL15细胞系生物学特征的影响.方法 观察GL15细胞的形态和生长增殖特性,Giemsa染色分析核型,免疫细胞化学行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、增殖细胞核抗原(PCNA)染色,流式细胞仪分析细胞周期,Transwell、MTT法检测EGF对GL15细胞生物学特征的影响,与U251MG和U373MG细胞系进行比较.结果 GL15细胞为典型的胶质母细胞瘤形态,核型分析显示多条染色体均有扩增,其中EGF受体所在的7号染色体数目增加较为明显(4条7号染色体).GFAP和PCNA分别在胞浆和胞核呈阳性表达.EGF可双向调节细胞增殖活性、侵袭性及GFAP蛋白表达.结论 GL15细胞系保持了胶质母细胞瘤的生物学特征,是研究胶质母细胞瘤理想的细胞平台.该细胞系的生物学特性与EGF受体有紧密关系.     

IGKV基因在人多形性胶质母细胞瘤治疗前后的变化分析

目的研究多形性胶质母细胞瘤(GBM)组织放射治疗前后基因表达谱中相关基因表达差异的变化及意义。方法采用BioStarH-141s含13 929条人类全长基因cDNA表达谱芯片,对5例多形性胶质母细胞瘤组织进行放疗前及放疗60 Gy后检测,并分析它们之间免疫相关基因表达差异。结果多形性胶质母细胞瘤放疗60Gy后与放疗前比较,表达差异基因中改变最明显的功能群是免疫系统相关的基因,IGKV基因上调。细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、DNA修复系统也有部分基因发生明显变化。结论提示对多形性胶质母细胞瘤组织照射60Gy后基因表达谱改变的研究可以更好地阐明放射敏感性差异机理,为放疗前或放疗早期寻找到预测放射敏感性分子标志提供理论依据。     

CDK1在多形性胶质母细胞瘤中的表达及其相关性研究

目的 现代学者通过多种方法进行研究发现，细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)在当今已知的多种肿瘤组织中呈现出高表达现象，而且还可能与肿瘤发展密切相关。但如今对于CDK1基因在多形性胶质母细胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）中的作用尚不明晰。所以，研究主要是对CDK1基因在多形性胶质母细胞瘤的增殖调节中起到的影响进行初步探讨。方法 从GEPIA在线数据库与proteinatlas在线数据库中提取了CDK1在各种肿瘤中的表达。选取2019年8月至2021年9月期间赤峰学院附属医院收治的54例多形性胶质母细胞瘤患者，记录年龄、性别、部位、复发和IDH1变异等情况后进行相关性分析，并通过免疫组化染色比较CDK1在多形性胶质母细胞瘤和癌旁正常组织中的表达水平，并观察其差异，进而得出结论。结果 通过上述2个数据库中的资料发现，与正常组织相比，多形性胶质母细胞瘤中CDK1基因的表达水平上调。多形性胶质母细胞瘤临床病理特征中和复发有关（P=0.016），和年龄、性别、部位和IDH1变异情况无关。通过进一步的...     

免疫荧光染色检测不同组织细胞微管蛋白-β的表达

为了探讨体外培养的正常及肿瘤细胞微管蛋白 β的表达 ,将肺成纤维细胞 ( 3T3)、胃癌细胞 (BGC 82 3)、神经母细胞瘤株 (SH SY5Y)、大鼠胶质瘤细胞株 (C6)、多形性胶质母细胞瘤株 (BT32 5)体外培养 ,免疫荧光细胞染色检测微管蛋白 β的表达。发现 :所有细胞均为微管蛋白 β免疫反应阳性。结果提示 :微管蛋白 β阳性反应可发生在增生活跃的培养细胞     

3种胶质瘤细胞株(U87、U251及T98G)体外趋化组织细胞淋巴瘤细胞(U937)的实验研究

目的 观察胶质瘤细胞株U87(人脑星形胶质母细胞瘤细胞)、U251(人神经胶质细胞瘤细胞)及T98G(人胶质母细胞瘤细胞)对U937(组织细胞淋巴瘤细胞)的趋化活性.方法 体外传代培养U87、U251、T98G及U937细胞,应用Transwell法观察3种胶质瘤细胞株(U87、U251及T98G)对U937细胞的趋化活性.结果 Transwell小室下孔细胞离心浓缩后白血球计数板计数;3种胶质瘤细胞株对于U937细胞趋化活性明显高于正常对照组(P＜0.05);U87对于U937细胞趋化活性明显高于U251及T98G (P＜0.05);U251及T98G对于U937细胞趋化活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 3种胶质瘤细胞株(U87、U251及T98G)可促进U937细胞的趋化迁移,U87趋化活性更为明显.     

TLR2对胶质母细胞瘤的预后价值和体外作用

目的 探究TCGA数据库中TLR2基因在胶质母细胞瘤(GBM)中的预后价值,并明确该基因对胶质母细胞瘤细胞LN229的体外作用。方法 从TCGA数据库中获取169例胶质母细胞瘤患者的临床信息和肿瘤样本的转录组数据,通过Kaplan-Meier生存曲线分析评估TLR2基因在GBM患者中的预后作用。构建TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系,通过RT-qPCR和Western Blot验证。通过CCK8、克隆形成、细胞划痕、Transwell小室法,检测敲减TLR2对LN229细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭能力的影响。结果 与正常样本相比,TLR2在GBM患者样本中表达增高。生存分析结果显示,TLR2高表达组患者总生存期显著低于低表达组患者(总生存期中位值333 d vs.402 d,P<0.05)。RT-qPCR和Western Blot结果显示,TLR2敲减的人胶质母细胞瘤LN229细胞系成功构建。与转染si-control的LN229胶质瘤细胞相比,转染si-TLR2的LN229胶质瘤细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与转染si-control的LN229胶质...