“一肾一夹”高血压大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位的基因表达

目的:探讨"一肾一夹(1k1c)"高血压大鼠肾脏皮质钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法:分别应用RT-PCR及免疫组化技术,探讨1k1c高血压大鼠肾脏皮质钠泵α₁、α₂及α₃亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果: 正常大鼠肾脏皮质主要表达钠泵α₁亚单位,α₂与α₃亚单位表达较弱;在mRNA水平,1k1c高血压大鼠肾脏皮质钠泵α₁亚单位表达明显较强,α₂与α₃亚单位表达无改变,而在蛋白水平各亚单位基因表达与对照组比较均无明显差异。 结论: 1k1c高血压大鼠肾皮质钠泵α亚单位基因表达发生改变,这种改变可能参与该模型的血压升高机制。     

两肾一夹高血压大鼠左心室Apelin水平的变化

目的:探讨Apelin在肾性高血压左心室肥厚的病理生理过程中的意义.方法:清洁级雄性SD大鼠20只,随机均分为正常组、模型组.分别测定平均颈动脉压(mCAP)以及左心室舒张末期压(LVEDP),左心重与体重比值(LVM/BW)来评价高血压左心室肥厚模型.放免法测定血浆、左心室组织匀浆的Apdin水平.结果:①与正常组相比,模型组大鼠mCAP、LVEDP以及LVM/BW分别升高36.58%(P<0.05)、33.38%(P<0.01)和20.24%(P<0.01).②血浆及左心室组织Apelin浓度,正常组与模型组比较,分别为222.58±41.94 vs 263.88±24.3(pg/ml)和5.96±1.98 vs 18.32±13.89(pg/mg.pro),P均<0.05.结论:Apelin可能在高血压左心室肥厚的发生发展过程中扮演重要的角色.     

一肾一夹和两肾一夹高血压和血压逆转大鼠血浆、心房和心室心钠素水平的变化特征

利用一肾一夹容量型和两肾一夹压力型大鼠肾血管性高血压所敛心肌肥厚及高血压逆转肥厚逆转模型,测定血浆、心房和心审心钠素水平。发现两型高血压大鼠血浆及左室的心钠素水平明显增高,左室及血浆心钠素浓度与相对室重呈正相关,左房心钠素浓度在一肾一夹型明显降低;随着高血压的逆转,两型大鼠血浆及心房心钠素水平基本恢复,增高了的心室心钠素由高水平下降。结果提示。在高血压、容量扩张并伴有心肌肥厚的病理情况下,心室心钠素可能起重要的代偿调节作用。     

二肾一夹和肾下主动脉缩窄模型对高血压大鼠右室纤维化的影响

目的探讨二肾一夹（2K1C）及肾下主动脉缩窄（INAC）高血压模型大鼠右室功能与结构的改变及其Ang（1-7）的影响。方法建立2K1C及INAC模型，并采用微渗泵植入技术，用Ang（1-7）进行体内干预，采用无创及有创方法检测动物血压及右心功能；定性及定量分析这两种高血压模型右室心肌细胞及纤维化程度的变化。结果在血压增高的过程中，2K1C模型右室的功能和结构均发生明显的变化，术后14d时其右室收缩及舒张功能均已受损；其心肌细胞无明显变化，但其胶原已明显增多，CVF及PVCA均明显增加；应用Ang（1-7）干预可明显改善2K1C大鼠右室功能并减轻心肌纤维化的发生。在INAC动物模型，14d时其右心功能并无明显变化，无心肌细胞的改变及心肌纤维化的发生，Ang（1-7）对其亦无明显影响。结论在这两种动物模型，其右心功能的改变与其是否发生心肌纤维化有关，而心肌纤维化的发生是RAAS激活的结果。Ang（1-7）可抑制2K1C模型右室心肌纤维化进而改善右心功能，其机制可能与直接抑制RAAS有关。     

卡托普利对二肾一夹高血压大鼠血浆β－内啡肽浓度的抑制作用

卡托普利对二肾一夹高血压大鼠血浆β－内啡肽浓度的抑制作用湖南省肿瘤医院（长沙４１０００６）刘人树湖南中医学院科研处李钟文用放射免疫法（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，ＲＩＡ）测定二肾一夹高血压大鼠（Ｇ－２ＫＩＣｒｅｎａｌｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅｒａ...     

肾性高血压大鼠CGRP、ET及c-sis基因表达的研究

<正> 目的:为了探讨肾性高血压大鼠CGRP、ET及c-sis表达的特点以及它们对高血压的相互影响.方法:用双肾双夹法复制出高血压SD大鼠,14周后比较实验组与对照组的血浆CGRP、ET水平及c-sis基因表达量.结果:肾性高血压大鼠的血浆ET水平、c-sis基因表达量明显高于对照组(P<0.01),血浆CGRP明显低于对照组(P<0.01).结论:肾性高血压的产生不仅与肾素-血管紧张素水平有关,而且与ET、CGRP合成与分泌     

β萘黄酮对大鼠谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位基因表达的影响

目的 通过了解外界刺激因子β萘黄酮(β-NF)对大鼠谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位(GCLC)基因转录的影响,研究大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)基因转录的调节机制.方法 利用大鼠GCLC基因调控序列驱动的GCLC-PGL3-enhancer-Luciferase报道载体(GCLC-Luc)转染大鼠支气管上皮细胞(RTE)和肝癌细胞(H4ⅡE),分DMSO空白对照组和不同浓度的各刺激因子组,比较各组荧光素酶值的差异以筛选影响GCLC基因转录调控的刺激因子,并比较筛选到的刺激因子β-NF对GCLC-Luc在RTE和H4ⅡE细胞内表达影响的异同.2种转染后的细胞均分为β-NF实验组(10μmol/L)和DMSO空白对照组,以荧光定量PCR检测各组的细胞内源性γ-GCS转录水平变化.分别将构建的r系列缺失报道载体、GCLC-Luc和激活蛋白1(AP-1)、NF-κB定点突变报道载体转染2种细胞,分β-NF实验组(10 μmol/L)与DMSO空白对照组,比较各组荧光素酶值的变化,分析β-NF作用的调节位点和转录调控作用相关元件.结果 1、10、100μmol/L的β-NF均强烈抑制RTE中GCLC基因表达,荧光素酶值显著低于DMSO空白对照组(16 135±1456、2752±218、1579±294比25 971±1662,均P＜0.01).在H4ⅡE中,1、10、100 μmol/L的β-NF则促进其表达,荧光素酶值显著高于DMSO空白对照组(5686±441、13 601±746、13978±164比3645±367,均P＜0.01).荧光定量PCR显示10 μmol/L的β-NF作用下,RTE内源性γ-GCS的mRNA表达水平是DMSO空白对照组的0.73倍,在H4ⅡE细胞中则是1.98倍.GCLC-Luc、r系列缺失报道载体转染2种细胞后,RTE中各载体β-NF实验组荧光素酶值均低于DMSO空白对照组(P＜0.01),而H4ⅡE中则高于DMSO空白对照组(P＜0.05).β-NF作用的调节位点定位于转录起始位点上游-390～+2 bp范围内.用针对该区域的AP-1、NF-κB定点突变报道载体转染细胞后,转染GCLC-Luc载体的β-NF实验组RTE荧光素酶值较DMSO空白对照组下降(91.50±0.32)%,与之相比,转染AP-1、NF-κB定点突变报道载体的细胞下降幅度并没有减少(P＞0.05).在H4ⅡE,β-NF作用下转染GCLC-Luc载体的细胞荧光素酶值上升幅度则高于转染AP-1定点突变报道载体的细胞[(3.81±0.19)倍比(2.08±0.19)倍,P＜0.05],而与转染NF-κB定点突变报道载体的细胞荧光素酶值上升幅度[(4.1±1.01)倍]相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在大鼠RTE和H4ⅡE,β-NF影响GCLC基因的表达具有细胞特异性.在大鼠H4ⅡE,β-NF通过激活抗氧化应答元件(ARE)类似的AP-1调控GCLC基因表达.     

双肾双夹易卒中型肾血管性高血压大鼠重要靶器官ACE2表达研究

目的： 本实验观察在肾性高血压的发生发展过程中大鼠重要靶器官脑、心肌、肾、主动脉组织中血管紧张素I转化酶2（ACE2）的表达变化情况，探讨在高血压的发生发展过程中ACE2的变化规律，为防治高血压提供新的研究作用靶点。方法: 建立双肾双夹易卒中型肾血管性高血压大鼠动物模型，用Western blotting的方法研究在高血压发生发展过程中重要靶器官组织中ACE2的表达。 结果: 2周末高血压组血压明显升高，4周末高血压组心脏体重比明显升高，高血压组重要靶器官心、脑、肾、主动脉中ACE2的表达随高血压的时程发展明显减少。结论: 双肾双夹易卒中型肾血管性高血压大鼠重要靶器官组织中ACE2表达减少，提示ACE2参与高血压的发生发展，并与高血压靶器官的损害有关。     

过热对大鼠下丘脑肾上腺素α2受体的影响

本文用ＳＤ大鼠，清醒状态于热环境中引起过热（至直肠温度３９．５±０．５℃和４２．０±０．５℃，并维持３０ｍｉｎ），用放射配基结合分析方法（￣３Ｈ－ｄｏｎｉｄｉｎｅ）发现急性热暴露后，其４２℃组α＿２受体最大结合容量（Ｂｍａｘ）为４５．０±１７．７ｍｏｌ／ｍｇ蛋白，低于对照组（７５．５±２３．９ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白）和３９．５℃组（８１．１±２１，７ｆｍｏｌ／ｍｇ），而亲和力（Ｋｄ）无显著差别．结果表明，在过热状态下，α＿２受体数量明显下降，但其亲和力并不下降。由于α＿２受体密度的下降，可能使儿茶酚胺对体温调节中枢的作用下降。     

肾性高血压大鼠主动脉Gαq介导的信号转导通路的变化

目的 :探讨肾性高血压主动脉Ｇαｑ介导的细胞信号转导系统的动态变化及其在高血压中的发病学意义。方法 :制作两肾一夹肾性高血压大鼠模型 ,分别于术后周 1、2、4和 8测定颈动脉血压 ;血浆血管紧张素转换酶 (ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ -ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ,ＡＣＥ)活性 ;免疫印迹法测定主动脉Ｇαｑ蛋白含量 ;以 [3Ｈ]二磷酸磷脂酰肌醇为底物测定主动脉细胞膜蛋白ＰＬＣ活性磷脂酶Ｃ活性。结果 :高血压组大鼠于术后 2周血压开始升高 ;血浆ＡＣＥ活性于术后 1周至 4周显著升高 (Ｐ <0 0 1 ) ,8周时降至假手术组水平 ;主动脉Ｇ…     

电压门控钠通道α亚单位的研究

电压门控钠通道是可兴奋细胞产生电兴奋的基础结构,其α亚单位为基本功能单位,可单独发挥作用。在人类已有9个α亚单位被成功克隆。对钠通道α亚单位的基本结构与分类、选择性剪切、基因克隆与突变、钠通道与肿瘤发生的关系以及神经母细胞瘤钠通道的研究进行阐述。     

哌唑嗪对自发性高血压大鼠下丘脑nNOS表达的影响

目的研究哌唑嗪延缓自发性高血压大鼠(SHR)病理生理进程是否与调控下丘脑内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)的表达有关。方法 8周龄雄性SHR,持续给予哌唑嗪1个月后,检测平均动脉压(MAP)和心率(HR)以及进行肾脏组织化学染色,并应用免疫荧光染色结合显微图像分析及Western blot测定下丘脑nNOS的表达水平。结果与未给药同龄SHR相比,给药SHR组MAP和HR明显降低,肾脏纤维化损害程度减轻,下丘脑nNOS蛋白水平升高,室旁核和视上核内nNOS阳性神经元含量增加,但均未达到正常同龄Wistar大鼠水平。结论哌唑嗪可能通过调节下丘脑nNOS发挥中枢降压作用,进而部分逆转自发性高血压发病进程。     

两肾一夹型高血压大鼠胸主动脉碱性磷酸酶活性变化及其利血平治疗后的逆转性改变

高血压是心、脑血管病的主要危险因素之一。近来实验研究提示,不同类型高血压引起的血管结构性变化,经抗高血压治疗后这种血管结构性变化可产生逆转性改变。但是,对此种逆转性改变从细胞生化的     

去卵巢大鼠骨质疏松对下丘脑雌激素α受体的影响

目的 观察去卵巢雌性大鼠骨质疏松对下丘脑雌激素α受体(estrogen receptor alpha,ERa)及基基因表达的影响。方法 将45只SD大鼠随机分为对照组、假手术对照组和去卵巢组,用免疫组织化学方法和原位杂交方法检测下丘脑ERa及其mRNA表达。结果 去卵巢组ERa受体及其mRNA阳性细胞与对照组比较显著减少(P<0.01)。结论 下丘脑ERa受体及其mRNA阳性细胞的减少可能在绝经后骨质疏松发生起重要作用。     

自发性高血压大鼠FXYD5基因表达的时空分布

目的:研究大鼠FXYD5(FXYD domain-containing ion transport regulator 5)基因表达在自发性高血压大鼠（SHR）及正常血压大鼠（Wistar-Kyoto, WKY）的时间与空间分布差异。方法:取4周、8周、13周及21周龄SHR的肾脏、肝脏、肠系膜二、三级动脉分支、大脑和心脏组织，以同周龄WKY作对照，采用Northern blotting方法分析FXYD5mRNA表达丰度。结果:Northern blotting的结果显示：13周、21周龄SHR的肾脏组织FXYD5基因表达丰度较同周龄WKY低；在肺组织，除8周龄该基因的表达水平在SHR组略低于对照组外，其它周龄两组没有差别。结论:FXYD5基因在SHR中有着特异性的组织分布特点，并且在不同周龄的SHR， FXYD5基因在肾脏的表达水平不是恒定不变的，在时间上呈一钟形变化。提示FXYD5基因可能是一个高血压相关的基因，可能与高血压的发病有关。     

硝苯吡啶对肾性高血压大鼠心肌α_1受体的影响

8月龄肾性(2K,1C)高血压大鼠灌服钙拮抗剂硝苯吡啶10mg/kg/d,共30天,药物降压效果显著,与文献报道一致。同龄正常组(n=9),高血压组(n=6)和用药组(n=7)大鼠断头取出心脏,按常规匀浆离心制得心肌膜标本。用~3H-Prazcsin进行放射配基受体结合分析,数据经计算机软件Scatchard作图计算,结果如下;正常组Bmax=43.31±5.42fmol/mg蛋白,Kd=0.11±0.03nM。高血压组Bmax=54.46±6.16     

自发性高血压大鼠高血压形成前后肾内小动脉的重建

目的 探讨肾内小动脉形态学重建与高血压发生的关系。方法 ４周龄和１６周龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）,使肾内小动脉处于最大舒张状态后,用光镜和电镜配合计算机分析法在发片上测量肾内小动脉的几何形态、中膜平滑肌及其间隙的宽度。结果 与同龄ＷＫＹ相比,４周ＳＨＲ肾内小动脉未发生明显的形态学改变,１６周ＳＨＲ外径在２０～６０μｍ之间者３项都显著增加,肾内小动脉中膜平滑肌细胞和平滑肌细胞间隙都显著增加。结论Ｓ     

GABA_A受体α亚单位在糖尿病性神经病理性痛大鼠背根神经节中的表达

目的:研究γ-氨基丁酸A型受体(GABA_A)在糖尿病致神经病理性疼痛(PDN)大鼠模型背根神经节(DRG)中的表达和功能。方法:正常健康雌性大鼠随机分为对照组(Control)和链脲佐菌素干预组(STZ),利用腹腔注射STZ的方法制备PDN模型,采集尾静脉血测量大鼠的血糖含量;应用热板实验检测热刺激缩足反射潜伏期;应用全细胞膜片钳技术检测PDN大鼠的L_4-L_6DRG神经元GABA受体介导的电流变化;应用Western Blot技术检测模型GABA_A受体α亚基表达情况。结果:与对照组相比,PDN的血糖浓度上调(P 0. 05);热刺激缩足反射潜伏期缩短(P 0. 05); DRG神经元GABA受体介导的内向电流明显减小(P 0. 01); DRG神经元GABA_A受体α亚基的表达量明显下调(P 0. 01),磷酸化的GABA_A受体α亚基表达量明显上调(P 0. 01)。结论:糖尿病致神经病理性疼痛时,GABA_A受体α亚基发生磷酸化,GABA介导的突触前抑制作用减弱。