阳春砂的ITS序列分析

目的：用ITS全序列鉴别各地产阳春砂及常见伪品。方法：从各地产阳春砂及常见伪品绿壳砂和海南砂中提取总DNA，以核基因组通用引物ITS为引物进行扩增，扩增产物经纯化后，用PCR产物直接法进行测序。结果：各样品的ITS序列总长度均为626bp，其中ITS－1序列长度为248bp,5.8S序列长度为155bp，ITS－2序列长度为223bp；6个阳春砂和绿壳砂的ITS－2序列完全一致，各样品的5．8S序列完全一致，在ITS-1可各样品却有不同的碱基位点。结论：ITS－1序列可对阳春砂的道地性作出鉴别，明显区分其伪品。     

阳春砂与几种常见姜科伪充品的RAPD分析

本文采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术研究了姜科植物几种常见的中药材.结果显示,扩增结果具有良好的分辨性.阳春砂与海南砂、绿壳砂、缩砂、草果、益智仁、白豆蔻、草豆蔻等常见的姜科近缘伪充品之间呈现明显指纹差异,呈现多态性的引物占所选的12.17%,根据这些多态性可进行鉴别.不同产地的阳春砂RAPD指纹基本一致.用NJ方法构建了分子系统树,揭示阳春砂与绿壳砂、海南砂亲缘关系较近,而与草豆蔻、草果等关系较远,此结果与传统的分类方法基本一致.     

砂仁品种的鉴别研究

目的 对3种《中国药典》收载的砂仁（阳春砂、绿壳砂、海南砂）进行对比鉴别,为不同来源砂仁的准确鉴别提供依据。方法 前往栽培基地采集样品并对比3种砂仁原植物形态特征;采用性状鉴别法对比3种砂仁外观性状特征;利用显微鉴别法对比3种砂仁种子横切面显微特征;采用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术结合SIMCA-P软件寻找3种砂仁挥发油中的差异性成分。结果 原植物形态可通过穗状花序总花梗、膜质胞片长度,鲜果颜色,毛刺形状进行鉴别;性状可通过果壳颜色、厚度,毛刺形状,气味进行鉴别;显微方面可通过种皮表皮细胞壁外壁厚度,油细胞长度,色素层列数进行鉴别;3种砂仁挥发油中共鉴定出18种成分,阳春砂与绿壳砂对比,有5种差异成分,其中ɑ-蒎烯、莰烯是阳春砂特有成分,4-methyl-2,3,4,5,6,7-hexahydro-1H-indene、3-蒈烯、α-Copaene是绿壳砂特有成分;阳春砂和海南砂对比,只有石竹素为海南砂特有成分;绿壳砂与海南砂对比,有2个差异成分,其中α-Copaene是绿壳砂特有成分,石竹素是海南砂特有成分。结论 3种不同来源的砂仁在原植物形态、外观性状、种子横切面显微特征存在...     

蒲公英属植物rDNA ITS序列测定及分析

目的研究蒲公英属内4种植物的rDNA ITS序列遗传差异性,为探讨蒲公英属植物的系统演化关系、分类、品种鉴定提供DNA分子依据。方法提取不同产地的蒲公英总DNA,以核糖体基因组ITS通用引物为引物进行扩增,扩增产物经纯化后,用PCR产物直接测序法进行测序。结果蒲公英属植物ITS序列总长度约为641～642 bp,其中ITS-1长度为255～256 bp,5.8S长度为162 bp,ITS-2长度为224 bp。序列间共有23个变异位点。运用DNA Star软件进行系统分析得到蒲公英属内4种植物的系统进化树,这一分析结果与来自形态学的研究结果基本吻合。结论此法可用于蒲公英属植物种间及真伪品鉴别。     

应用位点特异性引物鉴定白花蛇舌草

目的:建立一种简便实用的白花蛇舌草药材的DNA分子鉴定方法.方法:收集目前市场上出现的白花蛇舌草及伪品共9种,分别提取总DNA,扩增rDNA ITS-2区序列,对比所有样品的该段核苷酸序列,并设计能专一性鉴别白花蛇舌草的位点特异性引物.结果:白花蛇舌草及其混淆品在ITS-2区的序列有显著差异.用位点特异性引物对所有样品DNA进行PCR扩增,只有白花蛇舌草有明显的约392 bp扩增产物,而其它8种植物在同等条件下无阳性产物.结论:所设计的鉴别引物对白花蛇舌草有高度的特异性.     

基于rbcL基因的阳春砂及其5种同属混淆品的鉴别

目的采用基于rbcL基因的DNA条形码鉴别阳春砂及其5种同属混淆品。方法从Gen Bank数据库获取阳春砂与5种同属混淆品的rbcL基因序列。采用Clustal X软件进行序列比对分析,用MEGA软件构建聚类树。结果 rbcL序列比对后有效序列为491bp,GC平均含量为42. 2%,阳春砂及其同属混淆品白豆蔻、云南豆蔻、长柄豆蔻、九翅豆蔻的rbcL序列共存在10处碱基差异,与草果的rbcL序列存在55处碱基差异,基于rbcL基因的聚类树能较好地区分阳春砂及其5种同属混淆品。结论 rbcL基因能有效地鉴别阳春砂及其5种同属混淆品。     

基于ISSR分析的阳春砂分子鉴别

目的 利用ISSR分子标记技术鉴别阳春砂不同栽培品种,并分析其亲缘关系.方法 利用ISSR-PCR方法 对阳春砂栽培品种长果、圆果和"春选"与海南砂进行基因组多态性分析;采用NTSYS-pc version 2.10e软件计算各供试材料间的遗传相似系数,分析其亲缘关系并构建聚类树状图.结果 10条引物共扩增出114条DNA片段,其中49条DNA片段呈现多态性,占总扩增片段的43.0%.长果阳春砂与圆果阳春砂的遗传相似系数最大,高达1.000;长果、圆果阳春砂与海南砂的遗传相似系数最小,为0.577;各材料间的平均遗传相似系数为0.748.UPGMA聚类分析表明,长果阳春砂和圆果阳春砂聚成一支,再与"春选"阳春砂聚成一支,而海南砂独成一支.结论 本研究结果 鉴别了"春选"和阳春砂的另外两个栽培品种,证明了"春选"与海南砂有着较近的亲缘关系,建立基于ISSR分析的阳春砂遗传分析方法 ,为阳春砂的品种鉴别和优良品种选育提供了依据.     

砂仁及其混淆品种子的鉴别研究

对砂仁（阳春砂、绿壳砂、海南砂、缩砂）及其混淆品（豆蔻、益智、草豆蔻）种子的显微特征、薄层层析进行比较研究，为砂仁种子的真伪鉴别提供参考。     

砂仁及其混伪品的紫外光谱鉴别

对四种正品砂仁(阳春砂、引种阳春砂、海南砂、绿壳砂)及四种混伪品(海南假砂仁、艳山姜、华山姜、福建土砂仁)进行紫外光谱鉴别分析,结果正品与混伪品原始及一阶导数光谱有明显差异,可作为鉴别的依据。     

基于ITS序列分析对紫花地丁的分子鉴别

目的:通过研究比较紫花地丁与其易混中药材ITS序列的差异和规律,建立紫花地丁与其易混药材之间的分子鉴别方法。方法:分别从紫花地丁和易混品中提取总DNA,用ITS序列通用引物扩增,扩增产物双向测序。结果:紫花地丁与其他易混品在ITS1和ITS2区段存在特异鉴别位点共8个。结论:根据ITS序列特征,能有效区分紫花地丁和其他易混中药材。ITS序列是紫花地丁鉴定的有效的分子标记。     

Identification of Amomum villosum, Amomum villosum var. xanthioides and Amomum longiligulare on ITS-1 sequence]

OBJECTIVE: To identify Amomum villosum Lour. and some their adulterants on molecular biology. METHOD: The DNA of Amomum villosum Lour. and some their adulterants were extracted, and amplified using ITS-1 primer. The amplificed DNA were purified and then sequenced by direct PCR sequencing method. RESULT: The ITS-sequence of all of the samples are 248 bp in size. But there are 7 bases in Amomum villosum Lour var. xanthioides (Wall.ex Bak) T.L. Wu et Senjen and 12 hases in Amomum longiligulare T.L. Wu. differing from Amomum villosum Lour. CONCLUSION: The ITS-1 sequence can be used to identify effectively Amomum villosum Lour. and their adulterants.     

云南引种阳春砂与阳春砂药理活性对比研究

 目的 探讨云南引种阳春砂与阳春砂主要成分挥发油的药理活性。方法 针对砂仁药材的功能主治,设计了砂仁主要药效成分挥发油止泻、镇痛和对离体兔空肠自发活动影响的药效学实验。建立10％番泻叶致诱导的小鼠腹泻模型、0.6％醋酸溶液致小鼠扭体等模型,观察云南引种阳春砂与阳春砂主要成分挥发油的药理作用。结果 云南引种阳春砂的挥发油均有剂量依赖性的止泻作用,其中剂量为270 mg·kg^-1作用较明显;镇痛作用与对照组相比差异不明显;两者对兔离体空肠自发活动均有明显的抑制作用。结论 云南引种阳春砂与阳春砂药理活性无明显差异,为评价引种阳春砂的质量提供一些科学的依据。     

阳春砂仁的酚性成分研究

目的:研究阳春砂仁的化学成分。方法:采用聚酰胺、硅胶、Sephadex LH-20、ODS开放柱层析等手段分离化合物,根据各种光谱数据及其理化性质鉴定化合物的结构。结果:从阳春砂仁中分离得到5个化合物,分别鉴定为:3-乙氧基对羟基苯甲酸(1)、香草酸-1-β-D-葡萄糖苷(2)、异鼠李素-3-β-D-葡萄糖苷(3)、黄烷香豆素(4)和异黄烷香豆素(5)。结论:化合物1～5均为首次从该植物中分离得到。     

砂仁与长序砂仁挥发油化学成分的研究

 目的比较了中药材砂仁及其常见混淆品长序砂仁挥发油化学成分。方法以水蒸汽蒸馏法提取挥发油,分别得到不同样品的挥发油,以气相色谱质谱联用(GC MS)联用技术对其化学成分进行分离和鉴定。通过标准图谱对照确定化合物成分,经色谱峰面积归一化法测定其百分含量。结果鉴定了48种化合物。结论砂仁及长序砂仁挥发油成分的种类基本相似,但其所含的主要成分醋酸龙脑酯和樟脑的比例完全不同,砂仁中醋酸龙脑酯的含量几乎是长序砂仁的3倍,而长序砂仁中樟脑的含量则几乎是砂仁的3倍,冰片的含量也远高于砂仁等,这些差异为分析长序砂仁可否代替砂仁药用提供了科学的依据。     

砂仁对血小板聚集功能的影响

砂仁Amcmum Villosum Lour灌服0.6g/kg或1.2g/kg,对由ADP诱发的家兔血小板聚集有明显的抑制作用,剂量增加,作用时间相应延长。砂仁对花生四烯酸或胶原与肾上腺素混合剂所诱发的小鼠急性死亡有明显的保护作用。     

砂仁产地与品种变迁的研究

目的：为弄清砂仁药材种植的历代和现状。方法：查阅历代文献,深入实施调查访问,综合分析,结果：历史所载砂仁,含国产品和进口品,国产品素来以广东阳春为主产区,后引种到阳春周边县市及广西、云南、福建等地。90年代末期,砂仁主要地由广东转至云南省。进口品产自东南亚的越南、缅甸、泰国、老挝等国。国产砂仁主要品种为姜科植物阳春砂Amomum villoum Lour.,后发现有绿壳砂A.villosum Lour.var.xanthioides(Wall.ex Bak.)T.L.Wu et Senjen和海南砂A.longiligulare T.L.Wu。云南省主流品种从广东阳春引种的阳春砂A.villosum Lour.进口品种特指绿壳砂A.villosum var xanthioides (Wall.ex Bak.)T.L.Wu et Senjen。结论古今所用砂仁产地与品种变化较大,国产品与进口并存,国产砂仁主为云南省,主流品种为从广东阳春引种的今用砂仁产地与品种变化较大,国产品与进口品并存,国产砂仁主要地云南省,主流品种从从广东阳春引种的阳春砂A.villosum。     

阳春砂果实脂溶性成分的GC-MS分析

目的:对阳春砂果实的脂溶性成分进行的定性定量分析。方法:采用索氏提取法分别提取阳春砂果皮和种子中的脂溶性成分,进行甲酯化处理后用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离和鉴定其组成和含量。结果:通过检测,在阳春砂果皮和种子中分别鉴定了25种和13种脂溶性成分,主要为脂肪酸及其酯类,以油酸和亚油酸等不饱和脂肪酸含量最高。结论:该研究结果表明,阳春砂果实在食用、医疗保健等方面具有较大的应用潜力和开发前景。     

砂仁复方挥发油提取工艺优选研究

目的优选砂仁复方挥发油提取工艺。方法以乙酸龙脑酯收率为指标，采用气相色谱仪，运用正交设计法优选砂仁复方挥发油提取工艺备件。结果优选出的砂仁复方挥发油提取工艺为：取砂仁捣破，其他药材切成饮片，加水浸泡0．5h，加水量为药材量的96倍，采用水蒸气蒸馏法提取4h。结论采用该提取工艺提取砂仁复方挥发油有效成分乙酸龙脑酯收率较高且稳定，说明该工艺合理可行。     

电感耦合等离子体质谱分析砂仁中微量元素的溶出特性及形态

目的 分析砂仁中微量元素的溶出特性及形态,探讨微量元素的生物活性.方法 采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定砂仁中13种元素含量及溶出率,分别用0.45 μm滤膜,正辛醇-水萃取体系,将砂仁水煎液中元素区分为可溶态与悬浮态、醇溶态与水溶态,并分析各形态.结果 所建立的分析方法 ,标准曲线的相关系数为0.999 8～1.0000,RSD为0.1%～5.0%,测定标准物质灌木枝叶中元素含量与参考值有良好的一致性.砂仁中Co溶出率最高,各元素溶出率并非按照元素在药材中总量高低排序.砂仁的元素溶出以悬浮态居多,仅Cr的可溶态/总溶出大于50%.水煎液中 Fe、Mo和Cd的Kow参数在胃、肠液酸度下均大于1,而Cr、 Ni的Kow参数均小于1,元素的Kow值受pH影响.结论 砂仁中微量元素的溶出特性及形态,与砂仁的生物活性与功效具有一定关系.