透骨草体外抑制肺癌A549细胞增殖有效部位研究

目的：筛选透骨草抑制肺癌A549细胞增殖的有效部位,为透骨草药效物质基础研究阐明并提供依据。方法：将透骨草分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,萃取后各部位分别在体外用MTT法检测透骨草对肺癌A。细胞的增殖影响,并根据实验结果确定透骨草的有效部位。结果：透骨草的各部位均有抑制肺癌A549细胞增长的作用,其中乙酸乙酯层提取物抑制肺癌A549细胞增殖的作用最为明显;而石油醚提取物的抑制作用最弱。结论：透骨草具有确切的抑制肺癌A549细胞增殖的作用,其乙酸乙酯层提取物为其有效成分集中部位。     

蛞蝓有效提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响

目的:筛选蛞蝓有效提取物,并观察蛞蝓有效提取物EL-3对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:体外培养人肺癌A549细胞和中国仓鼠肺上皮CHL细胞;MTT比色法测定细胞活性;软琼脂集落形成法检测细胞锚定非依赖性生长能力。结果:以不同提取方式获得的6种蛞蝓提取物对人肺癌A549细胞增殖活性具有抑制作用,其中以EL-3抑制作用最强,其IC50值为9.4μg/mL,可作为蛞蝓有效提取物;EL-3选择性抑制A549细胞活性,其选择指数是43.6;EL-3能有效抑制A549细胞锚定非依赖性生长,呈浓度依赖性。结论:EL-3具有选择性抑制A549细胞增殖作用。     

基于炎症细胞模型的草珊瑚抗炎活性部位筛选

目的 探讨草珊瑚不同萃取部位的抗炎作用.方法 采用系统溶剂法按极性由低到高分离得到草珊瑚石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水提取物4个部位,建立RAW264.7细胞炎症模型,对各部位抑制细胞炎症因子NO表达进行研究,通过MTT法测定各部位对RAW264.7细胞增殖的影响及评价细胞毒性分极.结果 通过RAW264.7炎症模型的筛选,草珊瑚乙酸乙酯部位(100～200μg/mL)和多搪部位(100～400 μg/mL)均可显著抑制模型细胞NO的表达(P＜0.01),并可显著抑制RAW264.7细胞增殖水平,且其细胞毒性分级均为1级或以下.结论 草珊瑚多糖和乙酸乙酯部位是草珊瑚抗炎作用的主要活性部位.     

野菊花抗肿瘤活性部位筛选研究

目的 筛选野菊花的抗肿瘤活性部位并初步探讨其机制。方法利用形态观察、CCK-8、Hoechst染色和划痕实验评价野菊花总提取物(CIE)及其石油醚部位(PEE)、乙酸乙酯部位(EAE)、正丁醇部位提取物(NAE)对人肺癌细胞A549、人慢性骨髓性白血病细胞K562、人乳腺癌细胞MCF-7和人肝癌细胞HepG2的抗肿瘤活性。结果CIE及PEE、EAE、NAE>150 μg/mL对A549、K562和MCF-7细胞形态影响明显且CIE及PEE、EAE、NAE(150~250 μg/mL)对上述三种细胞增殖抑制作用呈量效相关性,PEE对MCF-7细胞抑制效果最显著;EAE对MCF-7细胞的诱导凋亡作用和迁移抑制作用相对较好。结论野菊花具有抗肿瘤活性,抗肿瘤活性较强的部位为石油醚和乙酸乙酯部位,其抗肿瘤机制可能与抑制细胞增殖、迁移和诱导细胞凋亡有关,这为进一步研究开发野菊花提供基础。     

芭蕉花活性成分提取及其体外生物活性研究

目的 研究芭蕉花的活性成分及其体外生物活性.方法 通过硅胶柱色谱、大孔树脂、TLC分离等对芭蕉花提取物进行分离,并用高效液相色谱,结合质谱分析等方法,进行成分鉴定;采用体外MTT法进行芭蕉花活性组分对抑制肝癌BEL-7402细胞增殖作用的筛选,对抑制AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖作用进行活性筛选.结果 通过液-质分析,从芭蕉花乙酸乙酯提取物和石油醚提取物中发现其中有一种化合物可能为豆甾醇.MTT筛选发现芭蕉花石油醚提取物的4种萃取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用(P<0.01),且呈一定的剂量和时间依赖性;芭蕉花的3种提取物组分中,乙酸乙酯相和石油醚相对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),且其抑制作用呈一定的剂量和时间依赖性.结论 芭蕉花石油醚提取物的石油醚萃取部位和乙酸乙酯萃取部位对肝癌BEL-7402细胞具有显著的增殖抑制作用,72 h的IC50分别为67.4μg/mL和34.5μg/mL,且石油醚提取物和乙酸乙酯提取物对AngⅡ诱导的A7r5平滑肌细胞增殖有抑制作用,72 h的IC50为55.5μg/mL.从芭蕉花提取物中分离出单体豆甾醇,为芭蕉花活性成分的深入研究提供了参考.     

天花粉降糖作用有效部位的研究

目的:观察天花粉的降糖作用并筛选其有效部位。方法:天花粉乙醇提取物用水分散后分别用石油醚、乙酸乙酯,正丁醇萃取得到3个提取物;天花粉水提物用硫酸铵沉淀,蒸馏水透析得到凝集素粗品。检测天花粉4种提取物对人肝癌细胞HepG2的葡萄糖消耗量的影响;建立四氧嘧啶糖尿病小鼠模型,对各提取物进行降血糖研究,确定天花粉降糖有效部位。结果:乙酸乙酯部位和凝集素粗品具有较强的降糖作用,其中以凝集素部位为佳。结论:凝集素为天花粉降糖的主要有效部位。为进一步开发天花粉降糖有效成分提供了理论依据。     

槐耳醇提物抑制人胃癌细胞MKN-45增殖的实验研究

目的观察槐耳不同提取部位对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响,并筛选其有效部位。方法用系统溶剂法将槐耳提取为石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇、水五个部位后,用CCK-8显色法,检测不同部位不同浓度的槐耳醇提取物对MKN-45增殖的作用。结果槐耳石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、乙醇部位为抗肿瘤有效部位,其中以正丁醇部位效果最佳,其对MKN-45细胞半数抑制率(IC50)为56.142μg·m L-1。结论槐耳醇提物能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖,其最有效部位为槐耳正丁醇部位。     

黄花败酱草提取物镇静活性部位的研究

目的建立黄花败酱草各部位的分离方法,并确定黄花败酱草镇静作用的活性部位。方法黄花败酱全草先用70%的乙醇提取,得到的提取物进一步用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到极性由小到大的3个提取部位。活性筛选采用常规的镇静催眠实验,观察黄花败酱3个不同极性提取物在戊巴比妥钠协同下对小鼠睡眠时间的影响。结果 3个不同极性的提取物中,以正丁醇萃取部分的镇静作用最明显。结论黄花败酱的正丁醇萃取部分是镇静作用的主要有效部位。     

转录因子Nrf3调节肺癌A549细胞增殖的作用

目的探究转录因子Nrf3对肺癌A549细胞增殖的作用。方法利用慢病毒技术构建Nrf3敲降的肺癌A549细胞,嘌呤霉素筛选并通过RT-qPCR和Western Blot实验验证构建的细胞。采用CCK8、平板克隆形成和Ed U实验分析敲降Nrf3对A549细胞增殖能力的影响。结果 RT-qPCR和Western blot实验结果证实成功获得稳定干扰Nrf3的A549细胞。CCK8、平板克隆形成、Ed U实验均表明干扰Nrf3抑制A549细胞增殖。结论转录因子Nrf3在调节肺癌A549细胞的增殖行为中发挥重要作用,敲降Nrf3抑制其增殖。     

克瘤丸组成药物提取物对人肺癌细胞的抑制作用

目的 研究克瘤丸组成药物提取物对人肺癌细胞A549的抑制作用,优化精简克瘤丸的处方组成。方法 采用MTT法考察黄芪总皂苷、斑蝥超临界萃取物、虫类药乙醇提取物、山豆根总生物碱和黄芪、山豆根水提物等克瘤丸5个提取物对A549细胞增殖的抑制作用;选用五因素二水平正交实验设计,分析克瘤丸5个提取物对A549细胞增殖的不同效应,判断其是否存在交互作用。结果 细胞毒实验结果表明克瘤丸中的斑蝥萃取物、虫类药醇提物、黄芪总皂苷和山豆根总生物碱等4种提取物对A549的IC50值分别是0.330、1.041、1.961、2.015 mg/mL。其中斑蝥萃取物和虫类药醇提物的抑制作用48 h达到峰值,存在量效和时效关系。正交实验结果显示,虫类药醇提物在抑制A549细胞增殖中起主要作用,斑蝥萃取物和黄芪总皂苷次之。方差分析表明黄芪总皂苷和虫类药醇提物、斑蝥萃取物和虫类药醇提物存在交互作用。结论 虫类药醇提物、斑蝥萃取物和黄芪总皂苷是克瘤丸发挥作用的必要成分,可精简为3者的配伍方。      

肺癌组织热休克蛋白70提取物对A549细胞增殖的影响

目的:观察肺癌组织热休克蛋白70(HSP70)提取物对A549细胞增殖的影响。方法:从肺癌组织中提取、纯化HSP70多肽复合物,分别以0.1、0.5、1.0、2.5及5.0mg/L作用于A549细胞,采用MTT法检测作用24、48及72h后细胞的增殖。结果:HSP70多肽复合物可促进A549细胞增殖,其作用随浓度和时间的增加呈增强的趋势(F浓度=171.826,F时间=35.933,P<0.001)。结论:HSP70多肽复合物可以促进A549细胞的增殖。     

丹酚酸A调控PTEN_PI3K/AKT信号通路对人肺癌细胞增殖的影响

目的 通过研究丹酚酸A(Salvianolic acid A,SalA)对人肺癌A549细胞PTEN_PI3K/AKT信号通路的影响,探讨SalA抑制肺癌细胞增殖的作用机制.方法 以人肺癌A549细胞为靶细胞,运用高内涵细胞成像分析系统,检测SalA对A549细胞增殖的影响;MTT法观察SalA对A549细胞增殖影响的量效关系;通过Western Blotting实验,检测SalA用于人肺癌A549细胞,对PTEN蛋白、磷酸化AKT(P-AKT)蛋白、非磷酸化AKT(T-AKT)蛋白的影响.结果 SalA对A549细胞增殖有抑制作用,并呈现剂量依赖性,而SalA可以促进PTEN蛋白及T-AKT蛋白的表达,抑制P-AKT蛋白的表达.结论 SalA具有抑制肺癌A549细胞增殖的作用,人肺癌A549细胞中存在有活性的PTEN_PI3K/AKT信号通路,SalA可能通过抑制PTEN_PI3K/AKT信号通路中P-AKT蛋白的表达,促进PTEN蛋白及T-AKT蛋白的表达,来抑制肺癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡.     

刺山柑果实醇提物及不同萃取部位的抗炎与镇痛活性研究

目的：对刺山柑果实乙醇提取物及不同萃取部位的抗炎与镇痛活性部位进行筛选。方法：采用乙醇对刺山柑进行提取制备总提取物,用水溶解后分别用石油醚、乙酸乙酯进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位和水溶性部位。以阿斯匹林为阳性对照药,分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验、小鼠腹腔毛细血管通透性实验、热板法镇痛实验和醋酸扭体镇痛实验进行抗炎镇痛活性部位进行筛选。结果：结果显示乙酸乙酯部位和水溶性部位对二甲苯致小鼠耳肿胀有明显抑制作用;乙酸乙酯部位对小鼠毛细血管通透性有明显抑制作用;乙酸乙酯部位和石油醚部位可显著提高小鼠热板痛阈值,而乙酸乙酯部位和水溶性部位则能明显减少醋酸所致小鼠扭体次数。结论：刺山柑果实具有潜在的抗炎和镇痛作用。     

金银花体外抗流感病毒有效部位研究

目的:筛选金银花抗流感病毒的有效部位,为金银花药效物质基础阐明提供依据。方法:通过观察金银花不同提取部位对流感病毒(甲型和乙型)侵染的宿主MDCK(狗肾细胞系,为流感病毒宿主细胞株)细胞的保护作用,以MDCK细胞病变(CPE)百分率为指标,经Reed-Muench方法测定各半数有效浓度(EC50)及治疗指数(TI),从而筛选出金银花抗流感有效部位。结果:金银花的石油醚提取物、丙酮提取物、乙醇提取物、水提取物以及粗提取物均有抑制流感病毒的作用,而三氯甲烷提取物与乙酸乙酯提取物均无抑毒效果;其中石油醚提取物及乙醇提取物的EC50较利巴韦林还要小,抑菌活性强。结论:金银花具有确切的抗流感病毒作用,其石油醚提取物及乙醇提取物是抗流感病毒有效成分最为集中的部位,其效果较利巴韦林更好。     

千斤拔不同萃取部位对小鼠免疫功能的影响

目的研究千斤拔不同萃取部位对小鼠免疫功能的影响。方法对小鼠连续灌胃10d,给予千斤拔水提物、石油醚部位、氯仿部位和乙酸乙酯部位提取物。进行脏器/体重比值测定、乳酸脱氢酶法测定NK细胞活性、ConA诱导的淋巴细胞转化率实验和小鼠碳廓清实验。结果与对照组相比,千斤拔水提物组、乙酸乙酯萃取部位组小鼠的胸腺指数与脾脏指数升高、NK细胞活性增强、淋巴细胞增殖能力提高,而小鼠单核-巨噬细胞吞噬功能没有明显变化。结论千斤拔水提物、乙酸乙酯萃取部位有增强小鼠免疫功能的作用。     

雪菊不同极性萃取物对小鼠脾脏CD4+T细胞体外增殖的影响

目的: 观察不同极性雪菊萃取物对小鼠CD4+ T细胞体外增殖的影响。方法: 用95%乙醇和不同极性溶剂萃取分别获得雪菊石油醚萃取物（X 1）、乙酸乙酯萃取物（X-2）、正丁醇萃取物（X-3）和奥卡宁（X-2-1）。免疫磁珠法分离小鼠脾脏CD4+ T细胞,并以5×105 个/孔的密度接种于96 孔板,在加入刀豆蛋白A（ConA）的基础上分别给予不同浓度的萃取物和奥卡宁,共育48 h后采用MTT 法检测细胞的增殖情况。与此同时,进行细胞毒性实验,在不加入ConA的基础上分别给予不同浓度的萃取物和奥卡宁,共育48 h后采用MTT 法检测细胞的存活率。结果： 雪菊乙酸乙酯萃取物（X 2）能显著抑制CD4+ T细胞的增殖,且呈剂量依赖性;X-2中的主要成分奥卡宁（X-2-1）同样表现为对CD4+ T细胞增殖的明显抑制,浓度为10 μmol/L时细胞增殖率为(19.23±0.57)%,且在起效浓度下对正常细胞未表现出显著毒性。结论： 雪菊乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物及其含有的主要成分奥卡宁能显著抑制ConA介导的小鼠脾脏CD4+T细胞的增殖。     

COX-2抑制剂Nimesulide抗肺癌作用及其机制研究

目的：流行病学资料显示,非甾体类抗炎药物阿司匹林能降低肺癌的发病率。我们的目的是探讨Nimesulide-一种选择性COX-2抑制剂对肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法：采用MTT比色法观察Nimesulide对A549细胞生长的影响,采用放射免疫法（ELISA）测定Nimesulide对肺癌A549细胞上清液中前列腺E2（PGE2）释放的影响,免疫细胞化学法测定肺癌A549细胞中COX-2、PCNA、bcl-2基因蛋白表达水平。结果：Nimesulide呈时间、剂量依赖性抑制A549细胞增殖,抑制率最低22.73%,最高72.04%;以剂量依赖性方式抑制A549细胞PGE2释放;Nimesulide可抑制A549细胞PCNA、bcl-2的蛋白表达,而对COX-2蛋白表达无影响。结论：Nimesulide以时间、剂量依赖性方式抑制肺癌A549细胞增殖,其机制可能与抑制肺癌A549细胞PGE2释放,并下调A549细胞PCNA、bcl-2的蛋白表达有关,而对COX-2的蛋白表达无影响。选择性COX-2抑制剂Nimesulide有可能在肺癌防治中发挥重要作用。     

藤梨根提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的抑制作用

目的研究藤梨根乙酸乙酯提取物对肺癌A549细胞裸鼠移植瘤的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其作用机制。方法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,观察藤梨根乙酸乙酯提取物的作用,设置对照组、治疗组(低剂量组、高剂量组)。通过测量移植瘤体积变化绘制生长曲线,根据终末瘤质量比较计算抑制率,采用TUNEL法检测移植瘤凋亡指数,采用免疫组化法检测移植瘤Survivin蛋白表达、增殖指数,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测移植瘤Survivin mRNA变化。结果各治疗组经藤梨根乙酸乙酯提取物治疗后移植瘤生长缓慢,治疗结束时治疗组移植瘤质量及瘤体积明显低于对照组,高、低剂量组的瘤质量抑制率分别为69.00%和45.09%。各治疗组移植瘤组织凋亡指数则明显高于对照组,而Survivin mRNA及蛋白表达较对照组明显减少,高剂量组尤其明显,各组间上述指标比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论藤梨根乙酸乙酯提取物在体内对肺癌A549细胞生长有抑制作用,可以诱导移植瘤细胞发生凋亡,促进癌细胞凋亡并下调瘤细胞Survivin蛋白和mRNA表达。     

ERK1/2在姜黄素对肺癌A549细胞增殖抑制中的作用

目的: 探讨姜黄素在抑制肺癌A549细胞增殖过程中,对ERK1/2丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的影响。方法: 不同浓度的姜黄素作用于A549细胞24 h后,采用MTT法检测姜黄素对A549肺癌细胞增殖的抑制作用;应用Westernblot分别检测ERK/2、p-ERK/2蛋白及其下游相关基因基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)的表达。结果: 姜黄素对A549细胞增殖有明显的抑制作用,且具有剂量依赖性(P<0.01)。姜黄素抑制A549细胞p-ERK蛋白的表达(P<0.05),但不影响总ERK1/2蛋白的表达;姜黄素可促进TIMP-1蛋白表达(P<0.05),但抑制MMP-9的表达(P<0.01)。结论: 姜黄素影响ERK1/2MAPK信号转导通路,调节凋亡相关蛋白表达是其抑制A549细胞细胞增殖的作用之一。     

麦门冬汤合千金苇茎汤正丁醇萃取部位抑制A549细胞增殖作用的研究

目的;探讨麦门冬汤合千金苇茎汤正丁醇萃取部位对人肺腺癌细胞系A549增殖和凋亡的影响。方法;血清饥饿处理的A549细胞分别加入不同浓度的正丁醇萃取部位(0、1、10、100 μg/mL),作用不同的时间(24、48、72 h)。噻唑蓝法检测各组细胞的增殖情况;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率;Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态学特征。结果;正丁醇萃取部位能明显抑制A549细胞的增殖,呈时间和剂量依赖性;并能显著地降低其单个细胞克隆形成率;且荧光显微镜下可见凋亡形态学特征。结论;麦门冬汤合千金苇茎汤正丁醇萃取部位能显著抑制A549细胞的增殖并诱导细胞发生凋亡。