HBV血清标志物与HBV-LP及HBV-DNA联合检测的临床意义初探

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染的不同模式与乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)及乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)载量之间的相互关系,为临床上乙型肝炎的诊断及治疗提供重要的理论指导与参考依据。方法:对1210例临床采集的血清标本同时检测其乙肝标志物、HBV-LP以及HBV-DNA载量。结果:I(大三阳)模式组,即HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性的患者,HBV-LP阳性率显著高于其余各个血清模式组(P<0.05);同时I(大三阳)模式组HBV-DNA阳性率也高于其余各个血清模式组(P<0.05)。I(大三阳)组的HBV-DNA载量显著高于II(小三阳)组(P<0.05);II(小三阳)模式组与III(HBsAg、HBcAb阳性)模式组相比,HBV-DNA水平无显著性差异(P>0.05)。不同感染模式中,血清HBV-LP与HBV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HBV-LP能较准确地反映HBV复制水平,是监测HBV感染者体内病毒复制疾病进展与疗效的较好指标;HBV血清标志物、HBV-LP和HBV-DNA载量三者联合检测有利于全面监测乙肝病情和提高乙肝疗效。     

不同临床类型乙型肝炎患者HBV血清标志物与HBV DNA含量关系的研究

目的探讨不同临床类型乙型肝炎患者HBV血清标志物及HBV DNA含量关系,为乙肝防治提供依据。方法 306例乙肝患者中,慢性肝炎104例、肝硬化126例、肝癌76例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清HBV标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc),用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA,分析两者的关系。结果 306例患者小三阳(HBsAg阳性、抗-HBe阳性、抗-HBc阳性)检出率为47.06%(144/306),大三阳(HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性)检出率为20.26%(62/306);慢性肝炎组大三阳检出率、HBV DNA含量均高于肝硬化组、肝癌组(P均0.01);慢性肝炎组小三阳检出率均低于肝硬化组、肝癌组(P均0.01)。62例大三阳组患者HBV DNA含量高于144例小三阳组患者(P0.05)。结论慢性肝炎患者HBV血清标志物以大三阳表现为主,肝硬化、肝癌患者以小三阳表现为主,慢性肝炎患者HBV DNA含量高于肝硬化、肝癌患者,HBV血清标志物及HBV DNA联合检测对乙型肝炎患者的临床诊断及治疗具有重要意义。     

乙型肝炎病毒DNA与血清免疫标志物的关系分析

目的 探讨乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)与血清免疫标志物的关系.方法 荧光定量聚合酶链反应法 (FQ-PCR) 检测血清样本中HBV DNA含量;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物.结果 A组(HBsAg和HBeAg阳性)、B组(大三阳)、C组(HBsAg 、HBcAb阳性)和D组(小三阳)的HBV DNA阳性率分别为96.7%、87.6%、52.2%和38.2%,各组之间均有显著性差异(P＜0.05); A组中阳性样本的HBV DNA量显著高于其它组别(P＜0.05); 315份HBV DNA阳性标本全部携带有HBsAg;HBsAg( )HBeAg( )和HBsAg( )HBeAg(-)中HBV DNA阳性率分别为89.1%和44.0%,有显著性差异(P＜0.05).结论 HBsAg是HBV感染灵敏的血清标志物;FQ-PCR定量检测HBV DNA作为血清学方法的补充对乙肝的临床诊断具有重要意义.     

前S1抗原检测在乙型肝炎临床诊断中的应用价值

目的 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)与乙肝病毒五项(HBsAg﹑HBsAb﹑HBeAg﹑HBeAb﹑HBcAb)及HBV DNA相关性,探讨Pre-S1Ag检测的临床应用价值.方法 从2014年1月-2015年6月期间在徐州医学院第二附属医院感染科住院的乙型肝炎患者中筛出HBsAg阳性病例159例,采用ELISA法检测乙肝血清标志物和Pre-S1Ag,荧光定量PCR法检测标本HBV DNA.结果 血清中HBeAg﹑Pre-S1Ag和HBV DNA的阳性率分别为59.2%﹑81.7%和83.1%,Pre-S1Ag阳性率明显高于HBeAg阳性率,HBeAg抗原阳性组Pre-S1Ag的阳性率为97.8%.而HBeAg抗原阴性组Pre-S1Ag阳性率为58.5%,HBeAg阳性患者血清的Pre-S1Ag的阳性率明显高于HBeAg阴性患者,差异有统计学意义(P<0.05).Pre-S1Ag阳性率与HBV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 Pre-S1Ag与HBV DNA符合率较高,对无条件检测HBV DNA而HBeAg阴性的血清,Pre-S1Ag可作为HBV存在复制和传染性的重要检测指标.     

6种常见的乙肝病毒感染模式与其DNA相关性分析

目的:探讨6种常见的乙肝病毒(HBV)感染模式与乙肝病毒DNA(HBV-DNA)病毒载量之间的关系.方法:运用酶联免疫吸附法(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对1022例乙肝患者进行血清标志物(两对半)及HBV-DNA含量检测.结果:血清学检测乙肝表面抗原(HBsAg)+乙肝病毒e抗原(HBeAg)+乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性(大三阳)患者HBV-DNA阳性率为94.1%,明显高于其他模式,且其病毒载量显著高于其他组.HBsAg+乙肝病毒e抗体(HBeAb)+HBcAb(小三阳)阳性检出率也较高(阳性率54.3%).结论:HBeAg是反映HBV复制活跃的可靠指标,HBV-DNA与HBeAg的存在明显正相关;HBV-DNA病毒载量可真实反映HBV感染、复制及病程变化,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义.     

Study on the Relationship between Hepatitis B Virus Serum Markers and Content of HBV-DNA in Patients with Hepatitis B of Various Clinical Types

目的 探讨不同临床类型乙型肝炎患者HBV血清标志物及HBV DNA含量关系,为乙肝防治提供依据.方法 306例乙肝患者中,慢性肝炎104例、肝硬化126例、肝癌76例,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清HBV标志物(HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc),用荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA,分析两者的关系.结果 306例患者小三阳(HBsAg阳性、抗-HBe阳性、抗-HBc阳性)检出率为47.06%(144/306),大三阳(HBsAg阳性、HBeAg阳性、抗-HBc阳性)检出率为20.26%(62/306);慢性肝炎组大三阳检出率、HBV DNA含量均高于肝硬化组、肝癌组(P均＜0.01);慢性肝炎组小三阳检出率均低于肝硬化组、肝癌组(P均＜0.01).62例大三阳组患者HBV DNA含量高于144例小三阳组患者(P＜0.05).结论 慢性肝炎患者HBV血清标志物以大三阳表现为主,肝硬化、肝癌患者以小三阳表现为主,慢性肝炎患者HBV DNA含量高于肝硬化、肝癌患者,HBV血清标志物及HBV DNA联合检测对乙型肝炎患者的临床诊断及治疗具有重要意义.     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测的临床价值探讨

目的 探讨乙肝病毒前S1抗原(Pre-S1Ag)与乙肝病毒复制的相关性.方法 采用酶联免疫(ELISA)法对980例乙肝患者血清进行检测前S1抗原与乙肝标志物五项(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb),及用FQ-PCR法检测HBVDNA,对检测结果作分析.结果 980例乙肝患者中Pre-S1Ag阳性率是40.9%,HBV DNA阳性率是40%,两者有很高的一致性,特别是在大三阳模式中Pre-S1阳性率高达80%,在小三阳模式中也有39%的阳性率.结论 前S1抗原阳性是HBV在体内存在和复制的重要相关标志.     

乙肝五项测定结果与HBV DNA的关系及其临床意义

目的探讨乙型肝炎(乙肝)五项结果和HBV DNA检出情况间的关系和临床意义。方法运用聚合酶链反应法检测300例乙肝血清的HBV DNA,并用酶联免疫吸附实验法进行乙肝五项的测定,对结果进行比较分析。结果 300例乙肝门诊的患者中乙肝五项的结果为110例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)(大三阳),其HBV DNA的阳性率为99.1%,85例HBsAg(+)、HBe-Ab(+)、HBcAb(+)(小三阳),其HBV DNA的阳性率为69.4%,39例HBsAg(+)、HBcAb(+),其HBV DNA的阳性率为53.8%,53例HBeAb(+)、HBcAb(+),其HBV DNA的阳性率为35.8%。大三阳和小三阳的HBV DNA阳性率比较差异有统计学意义(χ2=35.406,P<0.05)。结论乙肝五项的结果与HBV DNA的结果有着密切的联系,并且都具备各自的临床意义,因此两者必须结合才能正确地对乙肝患者的病情作出正确分析和判断。     

FQ-PCR检测HBV DNA效果分析

目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA拷贝数,分析乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)与血清免疫标志物的关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清样本中HBV-DNA含量;同时酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBV血清标志物(HBVM),并对检测结果进行分析。结果在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)组(大三阳组)和HBsAg(+) HBeAg(+)组HBV-DNA阳性率分别为96.1%（298/310）和96.6%（28/29）,病毒含量为：1.85×108copies/ml;HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)组(小三阳组)和HBsAg(+)HBcAb(+)组患者血清HBV-DNA阳性率分别为44.2%(80/181)和82.9%（31/41）,病毒含量为：4.8×106copies/ml。血清中HBeAg与HBVDNA含量密切相关。结论荧光定量PCR在乙肝的诊断、判断传染性强弱及评价抗病毒治疗效果方面具有较大的临床应用价值。     

联合检测血清标志物、ALT和HBV-DNA对乙型肝炎患者诊疗的临床意义

目的 通过联合检测乙型肝炎血清标志物、ALT和HBV-DNA,分析三者之间的相关性.方法 分别采用ELISA、实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和IFCC双试剂酶法对682例乙型肝炎患者HBV血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)、HBV-DNA载量和ALT水平进行测定.结果 682例乙型肝炎患者中,有373例检测出HBV-DNA阳性,阳性率为54.69%;以模式Ⅰ组(HBsAg+HBeAg+HBcAb阳性)和模式Ⅱ组(HBsAg+HBeAg阳性)HBV-DNA阳性率和平均载量为最高,且明显高于模式Ⅲ(HBsAg+HBcAb阳性)、模式Ⅳ组(HBsAg+HBeAb+HBcAb阳性)和模式Ⅴ组(HBcAb阳性)(P＜0.05);模式Ⅰ组ALT阳性率、平均含量明显高于其它组(P＜0.01).在HBV-DNA阳性患者中,HBV-DNA载量与ALT水平呈正相关.结论 HBV-DNA载量与血清标志物以及ALT水平之间存在着一定的关系,但三者反映的是疾病的不同方面.在HBV感染的诊疗过程中,联合检测血清标志物、HBV-DNA载量和ALT水平,在判断病情转归、抗病毒疗效观察等方面具有重要意义.     

HBV M和HBV DNA的关系探讨

目的:研究乙肝病毒血清学标志物(HBV M)与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)之间的关系。方法:对497例患者同时检测HBV M和HBV DNA,HBV M检测用ELISA法,HBV DAN检测用PCR法。结果:HBV M的检测结果分为6组,每组HBV M组合都有一定的HBV DNA检出率。结论:说明HBV M只能作为乙肝病毒有无感染的一般性检测,而HBV DNA能检出复制病毒,但难以表达非复制状态的感染,所以两者关系值得进一步探讨。     

HBV拉米呋啶耐药相关基因及HBV基因分型的初步研究

目的：利用基因测序技术，根据HBV S基因序列和HBV P基因区YMDD基因序列的特征，建立一种既可以诊断HBV基因型，又能检测拉米呋啶耐药突变的简便、可靠的方法。方法：采用特异的引物对待检标本进行PCR扩增后作基因序列检测，利用Chromas2．23软件对测序结果进行分析有无突变产生，测序结果用软件DNASIS进行基因分型分析。结果：61例经拉米呋啶治疗的慢性乙肝患者B型11例（18％），C型50例（82％）。发生YMDD变异47例，变异检出率为77．0％。结论：该方法能同时检测HBV基因型和YMDD变异，可以通过准确的P基因序列测定区分YMDD变异的类型，并可根据需要监测其他的伴随突变，进一步进行核苷酸多态性分析，对临床治疗和病情监控均有指导意义。     

乙肝DNA聚合酶在187例乙型肝炎病毒感染的各类肝病中的检测

采用免疫沉淀法对187例乙肝病毒感染患者作了DNA聚合酶(DNA--P)的测定。在各类肝炎中DNA—P的阳性检出率以慢活肝最高为66.6％,依次为急性肝炎45％,携带者33.5％,慢迁肝31.5％。本文分析了乙肝的抗原抗体系统与DNA—P检出率的关系。经统计学处理,DNA—P检出率与HBsAg滴度增高呈正相关γs=0.99,P<0.01。HBeAg阳性组DNA—P检出率为62.4％,抗—HBe阳性组DNA—P检出率为29.5％,抗—HBs阳性8例、DNA—P均为阴性。抗—HBc—IgM强阳性组DNA—P检出率为86.4％。作者认为1/3无症状携带者DNA—P活力增高表明病毒在复制,因此携带者在流行病学上的意义不可忽视。又鉴于18例抗—HBe阳性血清DNA—P活力增高,因此在判断HBeAg~-/抗—HBe~+患者病毒复制情况时,应予慎重。     

孕妇乙肝大小三阳与血清HBVDNA浓度关系

目的探讨乙肝大小三阳传染性。以指导孕妇孕期保健。方法选择经孕期乙肝血清学五项检测诊断为乙肝大小三阳孕妇41例，其中大三阳组18例，小三阳组23例。采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术对两组孕妇血清HBVDNA进行检测，以HBVDNA≥500copies／ml作为传染性标准。记录并分析各组孕妇血清HBVDNA浓度与大小三阳的关系。结果血清HBVDNA〈500copies／ml时，大三阳组1例，小三阳组17例，P〈0．01；血清HBVDNA浓度为500～1e％opies／ml时，大三阳组3例，小三阳组5例，P〉0．05；血清HBVDNA浓度为≥le6copies／ml时，大三阳组14例，小三阳组2例，P〈0．01。大三阳组17例传染性，占94．4％，小三阳组7例有传染性，占30．4％，P〈0．01。结论大三阳孕妇94．4％有传染性，且传染性强；小三阳孕妇30．4％有传染性，且传染性弱。     

乙肝病毒携带者羊水穿刺后羊水中HBV-DNA拷贝数分析

目的 研究乙肝病毒携带者外周血HBV-DNA阳性与羊水HBV-DNA阳性的关系,以及是否经过胎盘穿刺对羊水HBV-DNA拷贝数的影响.方法 2011年10月~2012年10月有产前诊断指征需要进行羊水穿刺的乙肝病毒携带者孕妇,在离心取细胞沉淀培养后的羊水上清,测量羊水上清的HBV-DNA拷贝数;并与其外周血乙肝DNA拷贝数做统计学对比.以及比较是否经过胎盘对羊水乙肝DNA拷贝数的影响.结果 外周血HBV-DNA阳性的孕妇,其羊水HBV-DNA阳性率明显高于外周血HBV-DNA阴性的孕妇.结论 经过胎盘穿刺对羊水HBV-DNA阳性率的影响无统计学意义.     

实时荧光定量PCR检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系

目的:探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV DNA与ELISA检测HBV M结果的关系.方法:采用实时FQ-PCR和ELISA方法分别对240例乙肝患者进行HBV DNA定量测定和HBV M检测.结果:240例HBsAg阳性血清中HBV DNA阳性率为74.58%.HbsAg、HbeAg、HBcAb和HbsAg、HbeAg阳性组的HBVDNA含量及HBV DNA阳性率均明显高于HbsAg、HbeAb、HBcAb和HbsAg、HBcAb组(P＜0.05,P＜0.01).122例HBeAg阳性的血清中97.54%的HBV DNA阳性;118例HBBeAg阴性的血清中有50.85%HBV DNA阳性.结论:实时FQ-PCR检测HBV DNA准确灵敏,是HBV感染及复制的直接证据.HBV M和HBV DNA的检测各有其独特的临床检测意义,在乙型肝炎的诊断治疗中均具有重要的临床价值.     

HBV Pre-S1蛋白及HBV-DNA含量检测在诊断乙肝病毒复制中的临床意义

目的:探讨乙肝患者不同血清学标志物模式(HBV-M)与乙肝病毒DNA含量及乙肝病毒前S1蛋白的关系,为预测乙型肝炎病毒的传染程度、预防、诊断及治疗提供实验室依据。方法:采用ELISA法对1385例携带不同血清学标志物的乙肝患者进行HBVPre-S1和乙肝5项指标检测,并用聚合酶链反应定量检测血清HBV-DNA含量。结果:不同HBV免疫模式中HBsAg、HBeAg和HBcAb同时阳性,其HBV-DNA和HBVPre-S1的检出率分别为90.7%和71.1%;HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组的检出率分别为35.8%和27.3%;其他不同血清学模式组也有不同的阳性率。结论:HBV-DNA、乙肝病毒5项标志和HBVPre-S1联合检测,对HBV感染早期诊断,了解病毒的复制情况,疗效观察和预后判断均具有重要意义。     

无症状乙型肝炎病毒携带状态的形成机制

HBV感染后可呈现多种临床表现，本文分别从高危因素、病毒变异、基因整合及宿主免疫状态、遗传背景等方面探讨感染HBV后发展成AsC的机制，从而有助于发现预防、治疗AsC的有效措施。     

乙肝病毒在转染细胞（z7－4）中复制的探讨

用ＨＢＶ　ＤＮＡ二聚体转染高度分化的人肝癌细胞株（ＨｅｐＧ２），筛选出具有分泌病毒抗原、核酸以及释放４２ｎｍ　Ｄａｎｅ颗粒能力的ｚ７－４细胞株。本实验结果支持３．５ＫｂｍＲＮＡ是前病毒基因，以它作模板可逆转录成１．６Ｋｂ（－）ｓｓＤＮＡ，再合成（＋）ｓｓＤＮＡ，最后装配成４．０Ｋｂ和３．２ＫｂｄｓＤＮＡ。在ＤＮＡ印迹法中位于４．０Ｋｂ（Ｄ１）和３．２Ｋｂ（Ｄ２）处是病毒的松驰环状双股ＤＮＡ（ＲＣＤＮＡ），而１．６Ｋｂ和１．２Ｋｂ处的２条ＤＮＡ带（Ｓ１和Ｓ２）均为单股ＤＮＡ，这些不同位置的ＤＮＡ带与病毒复制过程中ＤＮＡ的构型和片断大小不同有关。本实验未能发现２．０ＫｂｃｃｃＤＮＡ，但提示了负股ＤＮＡ５’端连接有蛋白质引物。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBVDNA定量检测相关性分析及临床应用价值

目的探讨乙型肝炎（乙肝）患者前S1（Pre S1）抗原检测和乙型肝炎病毒（HBV）DNA检测以及乙肝病毒血清标志物（＂乙肝五项＂）之间的关系,同时研究Pre S1抗原和HBV DNA在乙型肝炎诊断中的重要性。方法对537例乙肝患者血清用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定Pre S1抗原和HBV血清学标志物,用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法进行HBV DNA检测,并对检测数据采用χ2检验进行比较分析。结果 537例乙肝患者血清中,HBV DNA总阳性率为52.70%;前S1抗原总阳性率为49.35%,两者间比较差异无统计学意义（χ2=1.21,P〉0.05）,而且Pre S1抗原和HBV DNA检测的符合率为93.62%。在HBV DNA阳性乙肝患者中Pre S1抗原检测阳性率为89.05%,HBeAg检测阳性率为37.46%,两者间差异有统计学意义（χ2=30.79,P〈0.01）。结论 Pre S1抗原与HBV DNA具有高度相关性,并且能够比HBeAg更敏感地反映乙肝病毒的复制情况,Pre S1抗原可作为血清标志物检测的重要补充,更适合在无条件进行HBV DNA检测的基层医院开展。