抗-HCV试剂性能的评价

抗-HCV抗体检测对丙型肝炎感染的诊断目前是非常重要的手段，并已列入采供血机构筛查献血者的常规项目中，各医疗单位也逐渐将其作为病毒性肝炎检测项目在临床中应用。但由于试剂的质量问题，经常造成对HCV感染的漏诊或错判。因此，要提高抗-HCV检出率和检出的准确性，需要各环节共同完成，其中使用高质量的体外诊断     

抗-HCV ELISA检测试剂质量抽检分析

<正>抗-HCV是献血者血液筛查的必检项目之一,ELISA法检测抗-HCV是目前血筛的主要手段,其检测结果的可靠性至关重要。尽管购买的抗-HCV试剂盒为经国家"批批检"合格产品,但由于各试剂厂家生产工艺及模式等不同,其灵敏     

上海地区抗-HCV反应性献血者随访研究

目的对抗-HCV反应性献血者进行随访以分析反应性献血者的归队途径。方法随机对上海地区52名抗-HCV单试剂反应性献血者献血间隔6个月后随访,使用4种采供血机构常用的抗-HCV ELISA试剂检测,对于抗-HCV反应性标本使用重组免疫印迹试验确证,同时使用罗氏cobas Taqscreen MPX核酸检测试剂(NAT)单人份检测;3～6个月后进行第2次随访,开展相同实验。结果 2次随访研究发现,52名献血者中,39名(75%)献血者4种抗-HCV试剂检测结果均为阴性,13名(25%)献血者4种抗-HCV试剂至少有1种试剂检测结果为反应性,与原抗-HCV试剂检测结果相同,且S/CO数值保持基本一致,13名抗-HCV反应性献血者中有1名免疫印迹检测结果为阳性;52名献血者NAT结果均为阴性。结论献血者抗-HCV单试剂反应性,经过至少6个月间隔,使用包含原抗-HCV在内的2种试剂检测结果阴性,同时NAT检测阴性者可恢复献血权利。     

增强化学发光法检测手术及输血感染标志物的临床应用

目的对增强化学发光法检测感染性标志物进行临床应用评价。方法采用美国强生增强化学发光技术检测系统及配套试剂对乙肝表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、抗人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、抗梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP)进行初筛检测,阳性标本立即重新复查一次,仍为阳性者判断为初筛试验阳性。对于HBsAg、抗-HCV初筛阳性标本采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)进行确证;抗-HIV初筛阳性者送HIV确诊实验室进行确诊、抗-TP初筛阳性者采用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确证。结果增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的阳性检出率分别是5.83%、0.75%、0.05%、2.73%,阳性检出率均高于各检测项目的复检确认方法的阳性率。41123例术前检查患者血清标本中,应用增强化学发光法共筛查出2399例HBsAg阳性标本、308例抗-HCV阳性标本、19例抗-HIV阳性标本、1123例抗-TP阳性标本。筛查的阳性标本经各项目的复检确认方法进行复检确认后,共确认出2325例HBsAg阳性标本、299例抗-HCV阳性标本、17例抗-HIV为阳性标本、1054例抗-TP阳性标本。应用增强化学发光法检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的S/CO值分别在5.71、9.24、15.9、10.82以上时,经复检后各检测项目均呈现100%的阳性。结论增强化学发光法HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的检测特异性大于99%,检测阳性预测值完全能够满足临床诊疗需求,检测过程和工作效率都优于常规免疫标记技术,值得临床推广应用。     

抗-HCV室内质控物的制备及室内质控的效果评价

血液抗-HCV的检测是献血者筛选常规项目,主要采用酶联免疫吸附法(ELISA),此法特异性好、灵敏度高、操作方便,但检测过程中影响因素较多。为保证血液质量,提高检测结果的可靠性、准确性,必须开展抗-HCV室内质控。本站为节约成本,减少血液的浪费,自行制备抗-HCV质控血清。现就本站制备抗-HCV质控品和开展抗-HCV的室内质控工作汇报如下。     

血站实验室室间质评使用试剂与检测符合率的分析

目的通过分析深圳市血液中心参与全国范围室间质评结果,了解不同室间质评项目与试剂、检测方法的关联性,便于在工作中查找存在的问题,提高检测质量。方法对澳大利亚国立血清学参比实验室(NRL)2013年第3次血清学酶联免疫检测(酶免)与核酸检测室间质评回报结果,及卫生部临检中心2013年全年血清学酶免检测室间质控评价进行汇总统计,分析与比较各检测项目试剂使用情况、各类试剂检测符合率及假阳或假阴性率。结果在NRL HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP血清学检测室间质评中,包括电化学发光技术在内的A公司试剂为使用最多的国外试剂,W公司试剂为使用最多的国产试剂;W公司试剂检测HBs Ag的符合率稍高于A公司,抗-HCV检测试剂符合率最好的为O公司和W公司,其次为A公司;而在抗-HIV方面,使用量最大的是B公司和A公司,但符合率却较低。在核酸检测方面,R公司试剂的假阳或假阴性率均高于N公司试剂。在卫生部2013年第3次室间质评数据可以看出,大部分实验室对HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP(特异性抗体)等项目的检测选用了X公司和W公司生产的试剂。回顾性分析检测全年HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV的数据,抗-HIV的检测假阳性率显著高于其他3个项目。结论通过本次全国室间质评回报结果分析,获得参评单位总体检测情况的重要数据,为提高检验质量及血液安全提供数据基础,室间质评值得进一步开展。     

京津冀血站实验室抗-HCV检测不合格情况分析

目的分析京津冀血液筛查实验室2018年的抗-HCV检测不合格率情况,探究各实验室抗-HCV检测能力差异及影响因素,为实现京津冀血站实验室同质化建设打下基础。方法通过问卷填报的形式,收集2018年京津冀地区15家血站实验室各月的抗-HCV检测相关质量监控指标,在各实验室间进行比较分析。结果 1) 2018年京津冀15家血站实验室的抗-HCV检测不合格率差异有统计学意义(P0.05);2)8种抗-HCV试剂的检测不合格率差异有统计学意义(P0.05);3)不同实验室在应用试剂R2, R8检测抗-HCV时不合格率无统计学差异(P0.05),其余6种试剂在不同实验室应用时,使用相同试剂的不同实验室间抗-HCV检测不合格率差异有统计学意义(P0.05);4)40%的实验室应用不同试剂检测的抗-HCV不合格率有统计学差异(P0.05);5)京津冀15家血站实验室的抗-HCV检测单试剂不合格率差异有统计学意义(P0.05)。结论 2018年京津冀地区15家血站实验室抗-HCV检测能力有很大差异,除试剂原因外,还有很多影响因素,有待进一步深入研究。     

血站抗-HCV试剂参考品的建立及应用

目的 通过建立抗-HCV试剂参考品以用于评价血站使用的抗-HCV批批鉴定试剂.方法 收集自2009年11月～2010年9月北京市红十字血液中心复检报废的抗-HCV阳性及阴性血浆各150份,所有样品均用确证试剂进行检测.根据确证结果挑选组成参考盘的阳性、阴性及精密度参考品,灵敏度参考品是通过用正常阴性血浆将阳性血浆倍比稀释后,挑选合适样品再用确证试剂检测后获得,以上样品组成该室内部抗-HCV参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂检测该室制备参考品后与国家标准参考品进行比较.结果 该室内部抗-HCV试剂参考品组成包括20份阳性参考品、20份阴性参考品、4份灵敏度参考品、1份精密度参考品.用A,B,C和D四种国产及进口试剂经ELISA检测后与国家参考品比较符合率100％.结论 本套参考品与国家参考品实验符合度高,灵敏度检测结果更适宜本实验室应用,稳定性良好,适合该血站内部使用.     

抗-HCV检测设置灰区的探讨

不同抗-HCV的检测试剂对丙型肝炎的检测结果有明显差异,设置抗-HCV检测灰区的必要性越来越引起各血液检测的重视。本站2004年开始设置抗-HCV的检测灰区，将抗-HCV检测值位于域值下30％的范围，落在灰区内的样本需重复检测。笔者对抗-HCV检测值落于灰区的24份样本的重复检结果进行分析，报告如下。     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎抗体的质量控制

酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎抗体（抗-HCV）是检验科常用的免疫检测方法，其操作步骤简单，特异性好，安全，广泛应用于临床诊断。该检测方法通常是手工操作，同时影响因素比较多，目前抗-HCV的定性诊断往往是各医院医患纠纷的焦点，了解抗-HCV检测的影响因素及质量控制，减少差错事故的发生是极为重要的。下面将工作中检测抗-HCV的体会报道如下。     

抗-HIV、抗-HCV和HBsAg检测在胃镜检查中的应用价值

目的 探讨胃镜检查前抗-HIV、抗-HCV和HBsAg检测的临床意义.方法 搜集2008年6月至2012年8月商丘市中心医院行胃镜检查前利用胶体金法进行抗-HIV、抗-HCV、HBsAg检测患者5540例,阳性标本行间接酶联免疫法复查.结果 5540例患者中抗-HIV阳性2例,抗-HCV阳性84例,HBsAg阳性572例,阳性率为11.88%.结论 胃镜检查前进行抗-HIV、抗-HCV和HBsAg检测对于防止院内感染、保障医疗安全具有重要意义.     

不同酶联试剂抗-HCV ELISA阳性标本的WB确认分析

目的通过分析抗-HCV酶联检测阳性结果与确证实验结果之间的关系,评价2种不同试剂检测抗-HCV不同片段的能力。方法使用2种酶联抗-HCV试剂检测献血者血浆标本,对于单独阳性和2种试剂检测都为阳性的标本,使用WB(Western Blot)法进行确证实验。结果 135例阳性标本中,70份2家酶联试剂都是阳性的标本WB试剂检测也为阳性,65例2家不一致标本中20例WB试剂为阳性;9份不确定,36例为阴性。真阳性标本中B品牌试剂有2例检测为阴性;不确定标本中单独NS4片段阳性的3例标本使用A品牌试剂检测为阳性,B品牌试剂检测为阴性;单独NS3-1或者NS3-2片段阳性的4例标本使用2种试剂检测各检出3例阳性;2例core片段+标本A品牌试剂检测阳性,B品牌试剂检测阴性。结论 2种不同品牌试剂在检测抗-HCV阳性标本中存在片段检出能力上的存在差异,A品牌试剂在core片段和NS4片段上检出能力强。     

不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELlSA检测的影响

目的 评价不同容量一次性加样针对全自动Addcare ELISA检测结果的影响,特别是加样量属微量的试验.方法分别用300μl和800μl的一次性加样针分配纯水10μl、50μl和100μl,称重并计算相对误差和精密度;各选一份HBsAg、抗-HBs、 抗-HCV、 抗-HEV IgM以及抗-HEV IgG室内定值弱阳性质控品,在全自动Addcare ELISA 600分析系统分别用300μl和800μl一次性加样针进行检测,计算该五个项目各孔间S/CO值和CV值,并进行统计学分析.结果两种容量加样针分配10μl、50μl和100μl纯水的相对误差E和精密度CV均达到移液器国家计量基准,使用300μl容量加10μl和50μl的准确度明显优于800μl(P<0.05),加100μl差异无统计学意义(P>0.05),使用300μl容量三种加样量的CV值均小于800μl;两种容量加样针检测抗-HBs、抗-HCV和抗-HEV IgM的S/CO值有显著差异(P<0.05),HBsAg和抗-HEV IgG无显著差异(P>0.05),使用300μl容量加10μl项目各孔间S/CO值的CV值明显小于800μl.结论不同容量一次性加样针对加样量10μl和50μl的检测项目影响较为明显,在使用全自动Addcare ELISA检测时,应当选择适当容量的加样针以满足微量样本分配准确度和精密度的要求.     

抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检测分析

目的探讨抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检测状况。方法采用HCV核酸扩增酶免检测技术对76名抗-HCV阳性反应献血者血清做HCV核酸检测。结果76例抗-HCV阳性反应血清中,2种酶免试剂检测抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检出率48.0%,1种试剂检测抗-HCV阳性反应血清的HCV核酸检出率9.80%。结论抗-HCV阳性、HCV核酸检测也呈阳性者为HCV感染者无疑;但抗-HCV阳性而HCV核酸检测阴性者,可能与抗-HCV检测试剂的特异性、HCV核酸检测的灵敏度、病毒血症消退或病毒基因变异等多项因素有关。     

五种抗-HCV试剂比较

丙型肝炎病毒(HCV)主要通过血液传播,近几年来,我国献血者,尤其是献浆者中,发生HCV感染时有存在.目前,国内的采供血机构都使用ELISA试剂作献血者的抗-HCV检测,为提高抗-HCV的检出率,需尽可能地选择灵敏度高、特异性强、稳定性好的试剂.我库1999年1月～2000年9月,已使用过五种国内不同厂家生产的抗-HCV ELISA试剂,现将这五种试剂的质量信息情况报道如下:     

110例丙肝患者HCV-RNA载量及抗-HCV与肝功能指标的相关性研究

目的 研究丙型病毒性肝炎(简称丙肝)患者血清HCV-RNA含量及抗-HCV与ALT、AST浓度的关系.方法 采用实时荧光定量PCR法检测110例患者的血清HCV-RNA,ELISA法检测抗-HCV,全自动生化分析仪检测ALT、AST.结果 丙肝患者抗-HCV滴度显著高于健康对照组,大部分患者的ALT、AST水平均有显著性上升;HCV-RNA含量与ALT、AST水平有显著相关性,而与抗-HCV的S/CO值无显著相关性.结论 HCV-RNA和抗-HCV检测与肝功能指标各有利弊,三者结合起来在早期准确诊断及监测疗效中具有重要意义和价值.     

丙型肝炎患者血清中HCV抗体、HCV-RNA、ALT联合检测及临床意义

目的 探讨抗-HCV和HCV-RNA、ALT的联合检测在丙型肝炎诊断的应用价值.方法 采用ELISA法检测抗-HCV,FQ-RT-PCR法检测HCV-RNA,全自动生化分析仪测定ALT.结果 174例丙肝病毒感染的样本中抗-HCV和HCV-RNA同时阳性在急性丙型肝炎组中所占百分率(30.09％)显著低于慢性丙型肝炎患...     

HBsAg和抗HCV EIA检测试剂质量监控的简易方法

一、材料①EIA抗-HCV和HBsAg检测试剂盒．②2NCU／ml抗-HCV或1ng／ml和1万ng／mlHBsAg参考血清（卫生部临床检验中心）．③抗-HCV和HBsAg阴性血清各10份（自留）．④伯乐450型酶标仪．二、方法1.将EIA抗-HCV或HBsAg检测试剂量室温平衡．2．用2NCU／ml抗-HCV或1ng／ml和1万ng／mlHBsAg参考血清，以及留取的抗-HCV或HBsAg阴性血清代替检测标本，按试剂说明进行操作．3．比色读取吸光度，计算阳性阈值（Cutoff，CO）．然后计算出各检测标本的S／CO比值（S为检测标本吸光度）．S／CO比值≥1．0者为阳性，反之，S／CO比…     

丙型肝炎病毒抗体干式荧光发光检测方法的建立及临床评价

目的 建立1种丙型肝炎病毒(HCV)抗体(抗-HCV)干式荧光发光检测方法并评价其临床应用性能.方法 1)干式荧光发光抗-HCV检测方法建立:利用高活性优势表位嵌合HCV抗原,采用基于双抗原夹心原理的干式荧光发光法检测抗-HCV;2)方法评价:以所建立的干式荧光发光抗-HCV检测方法检测抗-HCV快速检测试剂国家阳性及...     

糖尿病患者中丙型肝炎病毒感染的高流行率

目的:评估糖尿病患者中丙型肝炎病毒感染的流行率和调查几种流行病学的和临床的因素对HCV感染的影响。设计及方法:作者将176例持续糖尿病患者与6172名供血者作比较,以公认的获得HCV感染的危险因素进行配对。使用第二代酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗-HCV。对于抗-HCV阳性标本,使用免疫印迹试验确证HCV的特异性。将这些糖尿病患者根据抗-HCV状况分成两组并分析以下各变量:年龄、性