A-LAK,CD3AK细胞体外细胞毒的实验研究

为了研究ＬＡＫ,Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ细胞上对人肝癌细胞株ＢＥＬ－７４０２的杀伤活性,我们采用脐带血制备ＬＡＫ,Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ细胞,观察其增殖,细胞表面ＩＬ－２Ｒ表达,细胞表型改变及对ＢＥＬ－７４０２细胞的细胞毒作用,结果表明Ａ－ＬＡＫ,ＣＤ３ＡＫ比ＬＡＫ细胞具有更强的增殖能力和抗瘤活性,临床应用潜力较大。     

活化骨髓和LAK细胞双重净化在白血病自体骨髓移植中的应用

活化骨髓和ＬＡＫ细胞双重净化在白血病自体骨髓移植中的应用刘晓力，刘启发，周淑芸，伍柏松，陈琪活化骨髓（ＡＢＭ）是一类在体外用ＩＬ＿２（白细胞介素＿２）激活具有杀伤多种肿瘤细胞能力的骨髓细胞，它不同于ＬＡＫ细胞，其杀瘤细胞活性比ＬＡＫ细胞强、而且保留造...     

淋巴因子激活的杀伤细胞与自发性高血压大鼠的一氧化氮样内…

目的 探讨淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）与一氧化氮样内皮依赖性舒血管因子（ＥＤＲＦ）作用的相关性。方法动态观察自发性高血压大鼠（ＳＨＲ，ｎ＝５）ＬＡＫ细胞地增殖、活性及其所表达的ＳＯＤ样物质活性当时、自由基清除效应。同时观察胸主动脉环对胆碱（Ａｃｈ）的舒张反应以及上述ＬＡＫ细胞与ＳＯＤ标准品对主动脉环（ｎ＝３０）的Ａｃｈ舒张反应的影响，与等量ＷＫＹ大鼠比较。结果 与ＷＫＹ比，ＳＨＲ的ＬＡＫ细     

脐血LAK细胞对白血病细胞杀伤作用的研究

将脐血单个核细胞用１０００Ｕ／ｍｌＩＬ一２培养３～４天。诱导ＬＡＫ细胞（简称ＬＡＫ）活性，用４小时ＬＤＨ释放法测定其对细胞株ＨＬ一６０和新鲜白血病细胞的杀伤活性，同时与成人外周血ＬＡＫ进行比较。结果：效靶比２０：１时，脐血ＬＡＫ对二者的杀伤率分别为３５．８±１０．３％和２３．９±２０．２％；成人血ＬＡＫ则分别为２４．５±１２．４％和１１．５±１０．８％。脐血ＬＡＫ活性显著高于成人，提示脐血ＬＡＫ有较好的应用前景。     

LAK细胞对不同靶细胞的杀伤作用及其意义

我们研究了重组白细胞介素２（ｒＩＬ２）活化的杀伤细胞（ＬＡＫ）对Ｋ５６２细胞、Ｒａｊｉ细胞、ＨｅｐＧ２细胞和２．２．１５细胞的杀伤活性。结果表明：ＬＡＫ细胞对不同靶细胞，其杀伤活性不同。在诱导早期（３小时），对Ｋ５６２细胞有明显的杀伤活性；在诱导晚期（３天和７天），对Ｒａｊｉ、ＨｅｐＧ２和２．２．１５细胞则有杀伤活性。揭示ｒＩＬ２诱生的ＬＡＫ细胞可能由不同的免疫杀伤细胞组成，在不同的诱导时期，活化不同的杀伤细胞。我们还建立ＨｅｐＧ２、２．２．１５细胞的靶细胞系统，可以在体外测定ＬＡＫ细胞对ＨＢＶ感染细胞的杀伤活性，亦可在体外筛选增强免疫杀伤细胞杀伤ＨＢＶ感染细胞活性的药物。     

细胞因子对树突状细胞抗肝癌作用的影响

目的研究人血树突状细胞（ＤＣ）和细胞因子ＴＮＦ,ＧＭＣＳＦ或ＩＦＮγ联合ＤＣ对淋巴因子和ＰＨＡ激活的杀伤细胞（ＬＰＡＫ细胞）体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ７４０２的影响．方法实验分为Ｌ组（ＬＰＡＫ）,Ｄ组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ）,Ｔ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５０００ｋＵ／Ｌ）,Ｔ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＴＮＦ５００ｋＵ／Ｌ）,Ｇ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ５００ｋＵ／Ｌ）,Ｇ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＧＭ－ＣＳＦ１００ｋＵ／Ｌ）,Ｉ１组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ５００ｋＵ／Ｌ）和Ｉ２组（ＬＰＡＫ＋ＤＣ＋ＩＦＮγ１００ｋＵ／Ｌ）．每组效靶细胞比分别采用５∶１和１０∶１两种．培养４８ｈ后用中性红比色法检测细胞毒活性．结果Ｌ,Ｄ,Ｔ２和Ｔ１组的细胞毒活性依次增强,各组间差异有显著性（Ｐ＜００１）．Ｇ１和Ｇ２组均高于Ｄ组（Ｐ＜００１）,但Ｇ１,Ｇ２组间差异无显著性．Ｉ１,Ｉ２组与Ｄ组相比,也无显著性差异．随效靶比增加,各组细胞毒活性均相应增强．结论ＤＣ能增强ＬＰＡＫ细胞对肝癌细胞ＢＥＬ７４０２的细胞毒活性;ＴＮＦ或ＧＭＣＳＦ与ＤＣ联用,两者有协同作用;但与ＩＦＮγ联用,则无进一步增强作用     

胎脾,脐血及成人外周血LAK细胞诱导的研究

用白细胞介素－２（ＩＬ－２）在体外诱导胎儿脾脏、新生儿脐血及成人外周血单个核细胞形成ＬＡＫ细胞，并行免疫标记和杀伤活性测定，发现胎脾、脐血ＬＡＫ细胞对ＨＬ－６０细胞的杀伤活性高于成人外周血ＬＡＫ细胞。     

CD3AK细胞液联合化疗治疗消化系统恶性肿瘤的护理

CD3AK细胞是抗CD3抗体激活的杀伤细胞，CD3AK系通过对靶细胞的直接杀伤而发挥抗瘤作用。因其具有高效激活与扩增、长期存活、体内外较强的抗肿瘤细胞活性以及低毒副反应等特征．广泛用于临床肿瘤治疗。近6年来，我们用CD3AK细胞液联合化疗治疗消化系统肿瘤34例，效果满意。现将护理体会总结如下。     

胃癌浸润性淋巴细胞的细胞表型及杀伤活性

目的和方法：本实验用９例胃癌患者ＴＩＬ和ＩＬ２在体外共同孵育后，用流式细胞仪分析胃癌ＴＩＬ的细胞表型特征。结果：ＴＩＬ细胞表型特征是以ＣＤ３为主，ＣＤ４／ＣＤ８为０８３，ＮＫ细胞１６３±３６％。经白细胞介素２（ＩＬ２）激活２０天后，ＣＤ３减少，ＣＤ４／ＣＤ８为１８５，ＮＫ细胞数量增至４１３±１３７％，Ｐ＜００１。ＬＤＨ释放法测定激活后的ＴＩＬ对自体胃癌细胞杀伤率比培养初期高３７４倍，变比对同时培养的７９０１胃癌细胞杀伤率高１７５倍。对自体和异体胃癌细胞杀伤作用均显著高于ＬＡＫ细胞，且具有靶细胞特异性。结论：结果表明胃癌ＴＩＬ对胃癌细胞杀伤作用，可能与ＮＫ细胞数量增多，导致胃癌细胞凋亡有关     

CD3AK细胞体外对SMMC—7721人肝癌细胞株杀伤作用的实验研究

ＣＤ＿３ＡＫ细胞体外对ＳＭＭＣ－７７２１人肝癌细胞株杀伤作用的实验研究赵志泉，沈斌，吕秀珍，徐顺福，孙宏训细胞过继免疫疗法是治疗肿瘤的主要方法之一。淋巴因子激活的杀伤细胞（Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓ，ＬＡＫ）及肿瘤浸润...     

CD3AK细胞联合IL—2脂质体抗鼠肝转移瘤的实验研究

目的 观察ＩＬ－２脂质体对ＣＤ３ＡＫ体内抗肿瘤的增强作用。方法：利用Ｇ５７ＢＬ／６小鼠脾细胞与抗ＣＤ３单克隆抗体和白细胞介素－－－２（ＩＬ－２）共同培养制备ＣＤ３ＡＫ细胞（ＣＤ３ＭｃＡｂ ａｃｔｉｖａｔｅｃｄ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ）；从脾内注射Ｂ１６黑色素瘤细胞制备鼠肝转移瘤模型：用ＰＣ和ＣＨ合成ＩＬ－２复合脂质体；ＣＤ３ＡＫ细胞联合ＩＬ－２脂质体用于体内抗Ｂ１６黑色素瘤肝转移。结果：共同培养     

树突状细胞对不同诱导时间LPAK抗肝癌作用的影响

目的　比较ＤＣ对诱导４ ｄ（Ｌ４） 和诱导７ ｄ（Ｌ７） 的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤人肝癌细胞株ＢＥＬ－ ７４０２（Ｂ） 的杀伤力和杀伤模式的影响．方法　Ｌ４ 组为Ｂ＋ Ｌ４ ,ＬＤ４ 组为Ｌ４ 组＋ ＤＣ;Ｌ７ 组为Ｂ＋ Ｌ７ ,ＬＤ７ 组为Ｌ７ 组＋ ＤＣ．Ｌ４ 和Ｌ７ 与Ｂ的效靶比均为５∶１ 和１０∶１两种． 采用杀伤细胞检测技术及电镜技术,比较各组的杀伤效应和杀伤模式．结果　各组的细胞毒活性为ＬＤ４ ＞ Ｌ４（ Ｐ＜ ０－０１） ,ＬＤ７ ＞ Ｌ７（ Ｐ＜ ０－０１） ．Ｌ４ 组和ＬＤ４ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞呈现不同程度的变性坏死,Ｌ７ 组和ＬＤ７ 组的ＢＥＬ７４０２ 细胞则呈现不同程度的凋亡改变．结论　ＤＣ对不同诱导时间的ＬＰＡＫ 细胞体外杀伤肿瘤细胞都有明显的促进作用,但并不改变ＬＰＡＫ 细胞对肿瘤细胞的杀伤模式．     

人肝癌细胞与LAK细胞凋亡的超微结构比较

目的比较观察人肝癌细胞株ＢＥＬ７４０２细胞与ＬＡＫ细胞体外凋亡的超微结构．方法将ＢＥＬ７４０２细胞、人血树突状细胞和人ＬＡＫ细胞（淋巴因子和ＰＨＡ激活的杀伤细胞）共同置于含１００ｍＬ／Ｌ新生牛血清的１６４０培养液内，在３７℃，５０ｍＬ／Ｌ，ＣＯ２，饱湿条件下培养６ｈ．另将ＬＡＫ细胞单独置于含有环磷酰胺的上述培养液内，在同样条件下培养６ｈ．收集沉淀细胞制备电镜样本．细胞经２５ｇ／Ｌ戊二醛和２０ｇ／Ｌ锇酸双固定，ＰＤＡＰ包埋，超薄切片，常规染色，透射电镜观察．结果凋亡的ＢＥＬ７４０２细胞与ＬＡＫ细胞，其细胞核染色质浓缩、边集，核碎裂，离散的碎片外包以双层膜，一些线粒体也变得致密．然而，在有些凋亡的ＢＥＬ７４０２细胞内，可见浓缩的细胞碎片向细胞外出芽隆起，形成膜包的凋亡小体；其线粒体和粗面内质网的变化也较为复杂．结论凋亡的ＢＥＬ７４０２细胞与ＬＡＫ细胞均具有凋亡细胞的基本特征，但是两种凋亡细胞具体的形态表现不尽一致．表明细胞内的主要细胞器主动参与了凋亡过程．     

CIK细胞体内外抗肝癌细胞的实验研究

观察肝癌患者ＣＩＫ(ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ)细胞的体外杀伤自体肝癌原代细胞的细胞毒活性以及正常人ＣＩＫ细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用。分别分离获得肝癌患者和正常人的外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ) ,通过加入不同的细胞因子 ,体外诱导培养成ＣＩＫ细胞 ,用流式细胞仪对培养的细胞作动态表型分析 ,并与正常人的ＣＩＫ细胞作对比。用51Ｃｒ释放法 ,测定肝癌患者的ＣＩＫ细胞体外杀伤自体肿瘤细胞的细胞毒活性。在Ｂａｌｂ/ｃ裸鼠皮下接种肝癌细胞ＢＥＬ 74 0 2 ,观察ＣＩＫ细胞对荷瘤鼠的抑瘤作用 ,并与ＬＡＫ细胞和…     

经内镜LAK／IL－2治疗消化道肿瘤

本文使用白细胞介素Ⅱ（ＩＬ─２）和淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）联合经内镜和全身注射免疫治疗８例晚期消化道恶性肿瘤。每例病人予ＩＬ─２５×１０３Ｕ～２×１０５Ｕ，肌注１／日，内镜下及静脉滴注ＬＡＫ细胞交替进行，每次ＬＡＫ细胞１×１０８～２×１０９，１次／２日。ＬＡＫ细胞治疗一般疗程５次，ＩＬ─２疗程２０天。结果表明，局部病灶ＣＲ１例，ＰＲ５例，ＭＲ１例，ＮＲ１例。     

IL-1与IL-2联合激活的骨髓对白血病细胞的净化作用

目的：体外观察白细胞介素－１（ＩＬ－１）对白细胞介素－２（ＩＬ－２）激活骨髓自然杀伤细胞（ＮＫ）和淋巴因子－激活杀伤细胞（ＬＡＫ）活性的影响及两者联合激活的骨髓对白血病细胞的净化作用。方法：标准４ｈ＾５１Ｃｒ释放实验测定激活骨髓的细胞毒作用;集落培养法观察激活骨髓对ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的净化作用。结果：１０～２００μｇ／ＬＩＬ－１对正常骨髓的ＮＫ和ＬＡＫ活性无明显影响;ＩＬ－２能够增强骨髓的ＮＫ活性和诱导ＬＡＫ细胞的产生,呈浓度递增趋势;１００μｇ／ＬＩＬ－１能增强１万～１００万Ｕ／ＬＩＬ－２诱导的骨髓ＮＫ及ＬＡＫ活性。在体外净化实验中,１００μｇ／Ｌ ＩＬ－１或１００万Ｕ／Ｌ ＩＬ－２对Ｋ５６２和（或）ＨＬ－６０细胞无直接杀伤,而在掺入１％Ｋ５６２或ＨＬ－６０的正常骨髓中,加入ＩＬ－１和（或）ＩＬ－２,对     

淋巴因子激活的异体杀伤细胞联合干扰素治疗慢性乙型肝炎

淋巴因子激活的异体杀伤细胞联合干扰素治疗慢性乙型肝炎梁伟峰，赵年丰，马亦林浙江医科大学附属第一医院传染科，３１０００３为了评价淋巴因子激活的异体杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）联合基因工程干扰素ａ－２ｂ（ｒＩＦＮａ－２ｂ）在治疗慢性乙型肝炎的疗效，我们自１９９...     

树突状细胞体外诱导抗肝癌免疫

目的应用树突状细胞（ＤＣ）在体外诱导高效而特异抗肝癌免疫．方法自肝癌患者外周血中分离ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ４）联合刺激ＤＣ;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖、分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２肿瘤细胞、ＬＯＶＯ肿瘤细胞及ＨＯＳ８６０３肿瘤细胞的细胞毒作用．结果经人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的ＴＡＡ激活并经ＧＭＣＳＦ及ＩＬ４联合刺激后,肝癌患者外周血ＤＣ能够诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖分化为ＣＴＬ,该ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２肿瘤细胞均有高效而特异性的杀伤作用（杀伤率分别为９２％±１０５％和４１％±８９％）．结论肝癌患者外周血ＤＣ体外能够诱导高效而特异抗肝癌免疫．提示ＤＣ作为一新概念上的抗肿瘤疫苗可能在肿瘤治疗及预防中发挥重要作用．     

淋巴因子激活的杀伤细胞与自发性高血压大鼠的一氧化氮样内皮依赖性舒血管因子

目的探讨淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）与一氧化氮样内皮依赖性舒血管因子（ＥＤＲＦ）作用的相关性。方法动态观察自发性高血压大鼠（ＳＨＲ，ｎ＝５）ＬＡＫ细胞的增殖、活性及其所表达的ＳＯＤ样物质活性当量、自由基清除效应。同时观察胸主动脉环对乙酰胆碱（Ａｃｈ）的舒张反应，以及上述ＬＡＫ细胞与ＳＯＤ标准品对主动脉环（ｎ＝３０）的Ａｃｈ舒张反应的影响，与等量ＷＫＹ大鼠比较。结果与ＷＫＹ比，ＳＨＲ的ＬＡＫ细胞增殖、活性及其所表达的ＳＯＤ样物质和其自由基清除效应均明显降低（Ｐ＜０．０５），经ＬＡＫ细胞（无论来自ＷＫＹ还是ＳＨＲ）孵育后的主动脉环对Ａｃｈ的舒张反应均有不同程度增加。标准ＳＯＤ与ＬＡＫ细胞有相同效应。结论ＬＡＫ细胞可能通过表达ＳＯＤ样物质来减少ＮＯ氧化分解从而增强主动脉环的ＮＯ样舒血管作用。     

同种LAK细胞、5－FU等抗癌剂腹腔注入治疗原发性肝癌腹水的临床观察

本文采用同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２腹腔注入（ＩＰ），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ腹腔注入，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２静脉输入以及放腹水、利尿、补充白蛋白等方法，分别治疗晚期ＰＨＣ腹水患者共４０例，结果表明，同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２经ＩＰ（１０例），５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ经ＩＰ（１０例），均使４例（４０％）腹水减少或消失、症状明显改善；同种ＬＡＫ细胞联合ＩＬ－２全身治疗（１０例），以及放腹水、利尿、补充白蛋白等一般治疗（１０例），均仅使１例（１０％）腹水减少，疗效欠佳；结果提示，腹腔内ＬＡＫ联合ＩＬ－２治疗及腹腔内５－ＦＵ联合ＭＭＣ、ＣＢＤＣＡ化疗，是值得推荐的治疗晚期肝癌腹水的手段之一。