TCF-4在肺癌中高表达并与肺癌的进展有关

背景与目的T细胞因子4(Tcellfactor4,TCF-4)是Wnt信号传导通路的重要分子,但其mRNA及蛋白在肺癌组织及细胞系中的表达情况和意义的相关研究较少。本研究的目的是检测TCF-4在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学(S-P法)检测120例肺鳞癌和肺腺癌患者及10例癌旁正常肺组织中TCF-4的表达;应用免疫荧光法检测肺癌细胞系及HBE(人正常支气管上皮)细胞系中TCF-4的表达水平及亚细胞定位;应用RT-PCR方法检测九种肺癌细胞系中TCF-4mRNA的表达水平。结果在120例肺鳞癌和肺腺癌组织标本中,96例为TCF-4高表达(80.0%),其中包括37例同时有细胞浆和核表达(30.8%)。TCF-4的高表达水平与患者的TNM分期正相关(P=0.022),10例癌旁正常肺组织无TCF-4表达。免疫荧光显示TCF-4蛋白在正常支气管上皮细胞系中表达极弱,而在肺癌细胞系中则出现明显的表达,主要定位于细胞核。TCF-4的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达并不一致,巨细胞癌细胞系中相对较高,而腺癌细胞系中表达较低。结论TCF-4的高表达与肺癌的进展密切相关,有效抑制TCF-4在肺癌中的高表达可能成为肺癌治疗的新途径。     

肺腺癌组织中VEGF mRNA的表达与外周血微转移的关系研究

目的探讨肺腺癌组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA的表达和外周血微转移的关系.方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,检测33例肺腺癌组织中VEGF mRNA的表达.以CK19为标志物,以RT PCR检测33例肺腺癌患者和10位正常人外周血的微转移.结果33例肺腺癌患者中,VEGF mRNA的阳性率为78.79%(26/33),外周血CK19的阳性率为57.58%(19/33),10位正常人外周血的CK19的阳性率为0.肺癌组织中,VEGF mRNA的表达和腺癌的淋巴结转移及病理分期密切相关,P值分别为0.002和0.008;VEGF mRNA阳性表达组和VEGF mRNA阴性表达组的CK19的阳性率差异有统计学意义,P=0.009.结论肺腺癌患者组织中的VEGF mRNA表达和淋巴结及血行转移关系密切,联合检测肺腺癌组织中的VEGFmRNA的表达和外周血微转移不仅能够评估肺癌侵袭转移的程度,而且对正确评价肺癌的病理分期、预后及制定合理的治疗方案有重要意义.     

肺腺癌组织CC趋化因子受体7和L-选择素表达及其临床意义的探讨

目的:探讨CC趋化因子受体7 (CCR7)和L-选择素(L-selectin)在肺腺癌组织中的表达及意义.方法:免疫组织化学法检测40例肺腺癌和20例癌旁正常肺组织中CCR7和L-选择素的表达.结果:40例肺腺癌组织中CCR7阳性表达37例(92.5%),L-选择素阳性表达27例(67.5%);20例癌旁正常肺组织中CCR7阳性表达3例(15.0%),L-选择素阳性表达0例.肺腺癌组织CCR7和L-选择素阳性率明显高于癌旁正常肺组织,X2值分别为36.04、24.55,P值均为0.000 0;并且CCR7表达与L-选择素表达有显著正相关性,X2=4.84,P=0.028 8.24例伴淋巴结转移的病例CCR7和L-选择素阳性率(分别为100.0%和83.3%)明显高于16倒不伴淋巴结转移的病例(分别为81.3%和43.8%),X2值分别为4.86、6.86,P值分别为0.028 4、0.009 1.Ⅰ、Ⅱ期肺腺癌病例中CCR7和L-选择素阳性率分别为83.3%(15/18)和50.0%(9/18);Ⅲ、Ⅳ期肺腺癌病例中CCR7和L-选择素阳性率分别为100.0%(22/22)和81.8%(18/22).CCR7和L-选择素表达均与TNM分期存在明显正相关性,X2值分别为3.96和4.56,P值分别为0.047 0、0.034 8.结论:肺腺癌组织中CCR7与L-选择素表达具有显著正相关性,两者可能共同参与了肺腺癌的发生及淋巴结转移过程,检测两者表达情况有利于判断肺腺癌患者的TNM分期和预后.     

HOXB7基因在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的 检测同源盒基因B7（HOXB7）在肺腺癌中的表达情况,并探讨其临床意义。方法 分别应用逆转录PCR（RT PCR）和Western blotting法检测人正常肺支气管上皮细胞系HBE及4株肺腺癌细胞系A549、H1975、H1650、H322中HOXB7的表达情况。应用免疫组织化学染色及Western blotting法检测HOXB7在75例肺腺癌及配对癌旁正常组织中的表达,并分析其表达与肺腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 4株肺腺癌细胞系中HOXB7 mRNA和蛋白的表达水平均显著高于正常肺支气管上皮细胞系（P＜0.05）。HOXB7蛋白在肺腺癌及对应癌旁正常组织中的高表达率分别为76.0％（57/75）和9.3％（7/75）,差异有统计学意义（P＜0.05）。HOXB7蛋白在肺腺癌组织中的表达水平与临床分期、病理分级及淋巴结转移有关（P＜0.05）,而与性别、年龄无关（P＞0.05）。HOXB7低表达者的中位生存期为68个月,高于高表达者的51个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论HOXB7在肺腺癌中高表达,且与肿瘤的侵袭转移和疾病进展相关,有可能作为肺腺癌早期诊断及评估预后的新靶标。     

LKB1蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义

目的:了解LKB1蛋白在肺腺癌组织中表达的临床意义。方法:应用免疫组化法检测62例肺腺癌组织中LKB1蛋白表达情况。结果:LKB1蛋白在肺腺癌细胞及正常肺支气管上皮均有表达,弥漫性分布于细胞质,细胞核亦有表达。肺腺癌组织中LKB1蛋白表达的阴性率为38.7%(24/62)。LKB1的表达与肺腺癌TNM分期中的淋巴结转移(N)及临床分期有显著的相关性,χ2=10.620,P=0.014;χ2=18.635,P=0.000。LKB1蛋白阴性组预后较差,中位生存期为15个月,而LKB1阳性组的中位生存时间为29个月,两者比较差异有统计学意义,χ2=15.350,P=0.000。结论:LKB1蛋白表达下降与肺腺癌发生淋巴结转移相关,是肺腺癌预后不良的风险因素之一。     

Twist在肺癌中高表达并与肺癌的分化有关

背景与目的 转录因子Twist是上皮-间质转变(EMT)过程中的重要调控因子,在肿瘤进展中发挥重要作用.本研究的目的是检测Twist在肺癌组织和细胞系中的表达情况,并探讨其与肺癌的临床病理因素和生物学行为的关系.方法 应用免疫组织化学方法检测68例肺癌及8例癌旁肺组织中Twist的表达;采用RT-PCR方法检测人支气管上皮细胞系(HBE)和8个肺癌细胞系Twist1和Twist2 mRNA的表达水平;应用免疫荧光方法检测HBE和8个肺癌细胞系中Twist蛋白的表达和亚细胞定位.结果 8例癌旁肺组织中Twist弱表达,在68例肺癌组织标本中,9例为Twist弱表达(13.24%),51例为Twist中高表达(75.00%),癌旁肺组织Twist弱表达.Twist高表达与肺癌分化程度(P=0.002)和患者年龄(P=0.012)有关.Twist1和Twist2的mRNA在不同组织学类型的肺癌细胞系中的表达水平均有差异(P＜0.05).免疫荧光显示Twist蛋白在HBE细胞系中弱表达,而在肺鳞癌和腺癌细胞系中高表达,主要定位于细胞浆.结论 Twist在正常肺组织中低表达,在肺癌中高表达,其表达水平与肺癌的分化有关,可作为肺癌进展的生物学标志.     

肺腺癌组织中VEGF mRNA的表达与外周血微转移的关系研究

目的：探讨肺腺癌组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）mRNA的表达和外周血微转移的关系.方法：应用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法,检测33例肺腺癌组织中VEGF mRNA的表达.以CK19为标志物,以RT PCR检测33例肺腺癌患者和10位正常人外周血的微转移.结果：33例肺腺癌患者中,VEGF mRNA的阳性率为78.79%（26/33）,外周血CK19的阳性率为57.58%（19/33）,10位正常人外周血的CK19的阳性率为0.肺癌组织中,VEGF mRNA的表达和腺癌的淋巴结转移及病理分期密切相关,P值分别为0.002和0.008;VEGF mRNA阳性表达组和VEGF mRNA阴性表达组的CK19的阳性率差异有统计学意义,P=0.009.结论：肺腺癌患者组织中的VEGF mRNA表达和淋巴结及血行转移关系密切,联合检测肺腺癌组织中的VEGFmRNA的表达和外周血微转移不仅能够评估肺癌侵袭转移的程度,而且对正确评价肺癌的病理分期、预后及制定合理的治疗方案有重要意义.     

UHRF1通过调控细胞自噬抑制肺腺癌细胞增殖的分子机制研究

目的 探讨泛素样含PHD和环指结构域1(Ubiquitin like with PHD and ring finger domains 1, UHRF1)在肺腺癌(Lung adenocarcinoma)细胞的增殖、自噬中的作用及其潜在机制。方法 通过生物信息学网站(TCGA)检测UHRF1在肺腺癌组织中的表达。qRT-PCR和Western blot检测肺腺癌细胞系(PC-9、A549和H1299)以及人支气管上皮细胞(16HBE)中UHRF1的表达。转染UHRF1-shRNA后, 采用CCK-8、克隆形成以及Ki-67检测肺腺癌A549细胞活性和增殖能力的改变;蛋白免疫印记检测自噬相关LC3-I/II、Beclin-1蛋白以及增殖相关蛋白CDK6、Rb和PCNA蛋白的变化;透射电镜观察敲除UHRF1后A549细胞中对于自噬小体的影响。结果 在肺腺癌患者组织中UHRF1表达明显高于癌旁组织, 而相对于正常的支气管上皮细胞16HBE, 肺腺癌细胞系A549与H1299中UHRF1的mRNA和蛋白水平均明显升高。此外, CCK-8法和克隆形成实验表明沉默UHRF1能够降低肺腺癌细胞系A549的生长效率。Ki-67免疫荧光法检测结果显示敲除UHRF1后A549细胞增殖能力相对于正常对照组明显降低。此外我们发现, 敲除UHRF1导致CKD6和PCNA蛋白水平相对于Control-siRNA组表达升高, 而Rb蛋白表达下调。我们同时还发现, 沉默UHRF1后能够提高LC3-II/LC3-I的比例, 诱导Beclin-1的表达上调。沉默UHRF1促进A549细胞中自噬小体的形成。结论 UHRF1在肺腺癌中高表达, 沉默UHRF1能够发挥抑制增殖的作用。而这种作用可能是通过促进细胞自噬产生的。     

黏蛋白1在肺腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨MUC1单抗4G10在肺腺癌中的染色情况及临床意义,为开发新的肺腺癌肿瘤免疫治疗方法提供理论依据.方法:以4G10作为一抗,C595作为对照,应用免疫组织化学方法检测342例肺腺癌和345例鳞癌中MUC1蛋白的表达情况.结果:肺腺癌组织中4G10染色多呈强阳性、弥漫性(2+~3+),阳性率为90.64%(310/342),明显高于C595的80.41%(275/342),而肺鳞癌组织中的阳性率为11.59%(40/345)(P<0.000 1),则低于C595的13.62%(47/345),且染色多呈阴性或弱阳性(0~1+)(P<0.000 1).342例肺腺癌中4G10的阳性率及染色强度与患者性别、年龄和有无吸烟史之间均不相关(P1=0.073 9,P2=0.160 3;P1=0.935 8,P2=0.936 6;P1=0.369 5,P2=0.618 4),但随着肿瘤恶性程度的增加、临床分期的递进及淋巴结的转移,4G10阳性率与染色强度增加,均分别呈现正相关趋势(P1=0.000 9,P2=0.000 3;P1=0.052 7,P2=0.039;P1=0.106 7,P2=0.037 4).结论:MUC1的异常表达与肺腺癌发生发展、侵袭、转移密切相关,可作为肺腺癌临床诊断的参考指标,对肺腺癌的恶性程度及预后判断有重要参考价值,并在肺腺癌的肿瘤免疫治疗中有望成为新的潜在靶点,发挥重要作用.     

miR-148b在肺腺癌中的表达及其功能分析

目的 探讨微小RNA-148b（miR-148b）在肺腺癌组织和细胞株中的表达及临床意义。方法 采用实时定量PCR检测13例肺腺癌及癌旁组织中miR-148b的表达,并检测其在肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B和正常人肺上皮细胞株HBE中的表达,选取肺腺癌细胞株miR-148b表达水平最低者分别转染miR-148b模拟物（mimics）和miR-148b control。通过MTT检测、低密度细胞集落形成实验、Transwell实验检测miR-148b对细胞增殖、集落形成和侵袭能力的影响。结果 miR-148b在肺腺癌和癌旁组织中的相对表达量分别为0.61±0.42和0.91±0.32（P＜0.05）;与正常肺上皮细胞株HBE（相对表达量设为1.00）比较,4种肺腺癌细胞株H1437、H1975、A549、PC14/B中miR-148b的表达量分别为0.42±0.08、0.38±0.02、0.29±0.03和0.21±0.04（P＜0.05）,选取PC14/B细胞株进行后续实验。MTT检测显示,实验第3天,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞吸光值明显低于转染miR-148b control组（P＜0.05）;低密度细胞集落形成实验中,与转染了miR-148b control的PC14/B细胞（相对克隆数设为100）相比,转染miR-148b mimics的PC14/B细胞的相对克隆数为47±8,差异有统计学意义（P＜0.05）;Transwell实验显示,转染miR-148b mimics后穿过基底膜的相对PC14/B细胞数为82±22,与miR-148b control组（200±34）相比,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 miR-148b在肺腺癌组织和细胞中表达下调,且可抑制肺腺癌PC14/B细胞株的增殖、集落形成和侵袭能力。     

仙人掌原液毒性的初步研究

背景与目的： 研究仙人掌原液的毒性。 材料与方法： 小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。 结果： 仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g/kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论： 在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

食管平滑肌瘤10例临床治疗体会

我院１９７５年６月～１９９０年７月共收治食管平滑肌瘤１０例，占同期食管肿瘤总数的０．１９２％（１０／１０９２）。位于食管上段２例，中段５例，下段３例。Ｘ线食管钡餐造影是诊断本病的主要方法。行食管粘膜外肿瘤摘除９例，食管部分切除１例，效果良好。本文就其诊断与手术治疗进行了讨论。     

Assessment of the degree of carcinogenicity of small doses of nitrites

Chronic experiments on CBA and C57B1 mice and acute experiments on CBA mice established: (a) carcinogenic effect of sodium nitrite given continuously with drinking water (0.1; 1.0 and 10.0 maximum allowable concentration) in combination with morpholine fed with bread, and (b) endogenous synthesis of nitrosomorpholine as a result of simultaneous intragastric administration of same doses of sodium nitrite and morpholine. Also, nitrosomorpholine and N-nitrosodimethylamine synthesis was observed in vitro following addition of low-dose sodium nitrite, morpholine and amidopyrine to human gastric juice. Carcinogenic hazard associated with low-dose nitrite consumption in humans is discussed.     

仙人掌原毒性的初步研究

背景与目的:研究仙人掌原液的毒性。材料与方法:小鼠急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30 d喂养试验。结果:仙人掌原液雌、雄小鼠LD50均大于20.0 g／kg,属无毒物质;Ames试验、微核试验和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠30 d喂养试验结果显示该样品30 d喂养对大鼠各项观察指标未见毒性作用。结论:在本次实验条件下,仙人掌原液为无毒物质,未显示有遗传毒性和亚急性毒性作用。     

中晚期贲门癌148例的外科治疗

目的　总结贲门癌手术治疗影响生存率的因素 ,提供今后工作参考。方法　对 14 8例经手术治疗的贲门癌患者进行术后并发症、绝对生存率的X2 检验。结果　本组切除率为 94.5 9% ,近半胃切除占 72 .14 % ,1、3、5年生存率分别为 67.9%、45 %和 2 4.3 %。病期、外侵程度和淋巴结转移等因素对 5年生存率有显著影响 (P <0 .0 1)。术后并发症以吻合口瘘及肺癌并发症为多见 ,其发生率为 3 .6% ,手术死亡率 1.4%。结论　提高生存率的关键在于早期诊断 ,根治手术和术后积极综合治疗。     

胆囊癌29例分析

目的探索胆囊癌的防治方法。方法分析29例胆囊癌病人临床资料、治疗方法及结果。结果术前诊断明确者21例，剖腹探查发现已属晚期，9例为Ⅳ期行根治术，12例为Ⅴ期未行根治术，均于术后1年内死亡。术前怀疑胆囊癌者5例，剖腹探查冰冻切片证实为Ⅴ期及Ⅳ期者各1例，Ⅴ期未行根治术，Ⅳ期行根治术，均于术后1年内死亡；Ⅲ期者3例，行胆囊癌根治术分别于术后10月、13月、17月死亡。2例术中冰冻切片发现的Ⅱ期胆囊癌，行胆囊癌根治术，分别于术后23月、26月死亡。1例意外胆囊癌属Ⅰ期胆囊癌，术后5年半死亡。结论要减少胆囊癌危害，重在及时治疗胆囊结石。