突触核蛋白在结直肠癌中的表达模式及其临床意义

目的 探讨结直肠癌组织中突触核蛋白（Synuclein）的表达模式,并分析其与临床病理特征的关系。方法 半定量RT-PCR检测20例结直肠癌及其癌旁组织中α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein基因的mRNA水平,免疫组化SP法检测51例结直肠癌及其癌旁组织中α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein蛋白的表达。结果 结直肠癌组织中α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein mRNA的的相对表达量分别为0.62±0.32、0.61±0.32和0.72±0.37,显著高于癌旁组织的0.41±0.27、0.40±0.25和0.45±0.25（P=0.034,P=0.026,P=0.007）。γ-synuclein蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为47.1％,显著高于癌旁组织的23.5％（P=0.022）,而α-synuclein、β-synuclein蛋白在结直肠癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义。在α-synuclein、β-synuclein和γ-synuclein表达模式的8种组合中,任一种蛋白表达、α-synuclein或γ-synuclein、β-synuclein或γ-synuclein、α-synuclein和γ-synuclein在结直肠癌组织中的表达率明显高于癌旁组织（P＜0.05）。α-synuclein、β-synuclein蛋白的表达与临床病理特征无关,γ-synuclein蛋白的表达与分期和淋巴结转移有关（P=0.047,P=0.048）。淋巴结转移及分期较晚者任一蛋白的阳性表达率明显高于无淋巴结转移及分期较早者（P=0.030,P=0.040）。结论 Synuclein在结直肠癌组织中的表达较癌旁组织有增高的趋势,其中γ-synuclein对于评估结直肠癌病程的发展和转归具有潜在价值。     

SATB1基因在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的 检测结直肠癌组织中特异AT序列结合蛋白1(special AT-rich sequence binding protein,SATB1)的表达情况与结直肠癌生物学行为的相关性.方法 采用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测39例结直肠癌及相应癌旁对照组织中SATB1 mRNA的表达,采用免疫组织化学方法检测39例结直肠癌及相应癌旁对照组织中SATB1的表达,分析SATB1基因表达与患者临床病理因素的相关性.结果 癌组织中SATB1蛋白表达阳性率为69.23％(27/39),SATB1 mRNA表达量为(1.178±0 644),均高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).而SATB1蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率与有无淋巴结转移显著相关(P＜0.01),有淋巴结转移其SATB1蛋白阳性表达率为100％,与肿瘤浸润深度和临床TNM分期密切相关(P＜0.05).SATB1 mRNA的表达与肿瘤浸润深度、是否淋巴结转移显著相关(P＜0.01),与肿瘤临床分期密切相关(P＜0.05).结论 SATB1基因在癌组织中的表达较癌旁组织显著增高表明其可能与结直肠癌的发生有关,而SATB1高表达预示结直肠癌恶性程度高临床分期较晚,可能存在淋巴结转移,预后不良,因此检测SATB1表达可作为临床上筛选结直肠癌高危转移患者、制定治疗方案和判断预后的一个新指标,并有望成为新的治疗靶点.     

结直肠癌及淋巴结组织CEA mRNA表达的实时荧光定量检测

目的:建立检测CEA mRNA表达水平的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,并探讨结直肠癌及淋巴结组织中CEA mRNA表达的应用价值。方法:应用SYBR Green Ⅰ作为荧光染料,以GAPDH作为内对照,建立检测CEA mRNA的FQ-PCR方法,并对56例结直肠癌组织、淋巴结组织CEA mRNA的表达水平进行检测。结果:CEA mRNA在结直肠癌组织中均表达,但表达水平在不同病理分化程度(P=0.8661)及不同Duke分期(P=0.2986)中无明显变化;在检测的231个淋巴结中,共有137个淋巴结CEA mRNA表达为阳性,表达水平为18.31±36.85,其阳性表达率为59.3%(137/231),明显高于常规病理检测[29.4%(68/231)],χ2=41.7497,P=0.0001;CEA mRNA在Duke C D期淋巴结中表达水平(32.85±53.49)显著高于Duke A B期(6.54±14.57),P=0.0001。结论:FQ-PCR方法简便、特异和可靠;比常规病理检查更加敏感,可有效补充常规病理检查的不足,在预测肿瘤微转移方面具有重要的临床应用价值。     

Runx3和CHD5基因在结直肠癌中的表达及临床意义

目的 探讨Runt相关转录因子3(Runx3)和染色质解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)基因在结直肠癌组织中的表达及临床意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blotting方法检测96例新鲜结直肠癌组织、对应的癌旁10 cm正常组织以及72例腺瘤中的Runx3和CHD5基因的表达,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系以及诊断价值和预后关系.结果Runx3和CHD5 mRNA、蛋白在结直肠癌组织中的相对表达量为0.35 ±0.00、0.28 ±0.02和0.26±0.02、0.31±0.01,显著低于癌旁正常组织中的相对表达量0.95 ±0.02、0.92 ±0.02和0.89 ±0.03、0.93 ±0.02(t=2.36,P＜0.05;t 1.25,P＜0.05;t=1.37,P＜0.05;t =1.13,P＜0.05)以及腺瘤中的相对表达量0.89±0.02、0.90 ±0.02和0.85±0.02、0.87 ±0.04(t =2.27,P ＜0.05;t =2.16,P＜0.05;t=1.25,P ＜0.05;t =2.65,P＜0.05).Runx3和CHD5的表达与结直肠癌TNM分期(x2=4.65,P=0.031;x2=7.89,P=0.005)、浸润深度(x2=4.17,P=0.041;x2 =4.86,P =0.028)、淋巴结转移(x2=4.20,P=0.040;x2=7.02,P=0.008)以及分化程度(x2=7.31,P=0.036;x2=9.54,P=0.023)呈负相关.线性相关性分析显示两基因表达呈正相关(r =0.572,P=0.001).受试者特征(ROC)曲线进行评价表明Runx3、CHD5在结直肠癌中具有诊断价值(曲线下面积分别为0.712、0.745,敏感性和特异性分别是45.9％、52.5％和83.6％、81.4％).Runx3和CHD5均低表达组与其他患者组在总生存时间(x2=8.156,P＜0.05)及无进展生存时间(x2=6.325,P＜0.05)上的差异具有统计学意义.结论 Runx3和CHD5在结直肠癌中低表达,两基因共同检测可以作为结直肠癌诊断靶标以及预后指标.     

HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况

目的 探讨HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达情况.方法 选取行手术切除的经病理学检查确诊的肾细胞癌患者的肾细胞癌组织标本61例,同时选取对应的癌旁正常肾组织标本61例为对照;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肾细胞癌组织和癌旁正常肾组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的表达水平.结果 肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的相对表达量均明显高于癌旁正常肾组织(P﹤0.01);不同临床分期、淋巴结转移情况肾细胞癌患者的肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);肾细胞癌组织中HOTAIR mRNA的相对表达量为(0.76±0.20),EZH2 mRNA的相对表达量为(2.04±0.51),两者呈正相关(r=0.683,P﹤0.01).结论 HOTAIR mRNA和EZH2 mRNA在肾细胞癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常肾组织,检测肾细胞癌患者的HOTAIR、EZH2水平对其肿瘤的恶性程度判断具有一定参考价值.     

结直肠癌组织Tip60蛋白表达及其临床意义探讨

目的:探讨结直肠癌组织中Tip60蛋白的表达及其临床意义。方法:选择2010-02-01-2011-02-01嘉兴市第一医院行手术治疗的结直肠癌患者100例和结直肠腺瘤患者20例,采用免疫组织化学检测Tip60蛋白在100例结直肠癌组织和相应癌旁正常组织(距离癌组织>3cm)及20例结直肠腺瘤组织中的表达及差异,观察Tip60和Ki-67及Bcl-2蛋白在结直肠癌组织中表达的相关性。结果:Tip60蛋白在结直肠癌组织中的阳性表达率为24%(24/100),癌旁正常组织为72%(72/100),结直肠腺瘤组织为75%(15/20),结直肠癌中的表达明显低于癌旁组织,χ2=46.154,P<0.001;也低于腺瘤组织,χ2=19.761,P<0.001;癌旁组织及腺瘤组织的表达差异无统计学意义,χ2=0.075,P=0.781。Tip60的表达与患者性别(χ2=1.629,P=0.202)、年龄(χ2=1.170,P=0.279)、肿瘤浸润深度(χ2=3.102,P=0.078)及淋巴结转移(χ2=0.718,P=0.397)无关,而与肿瘤大小(χ2=14.649,P<0.001)、肿瘤分化程度(χ2=6.469,P=0.039)和Duke分期(χ2=4.702,P=0.030)相关。Tip60和Ki-67的表达呈负相关,r=-0.273,P=0.006,Tip60和Bcl-2蛋白的表达呈负相关,r=-0.216,P=0.031。Logistic回归分析发现,肿瘤大小是结直肠癌Tip60蛋白表达的独立相关因素,B=-1.833,P<0.001。结论:Tip60蛋白在结直肠癌组织中表达下调,且与结直肠癌的进展有关,Tip60可作为预测结直肠癌进展和预后的生物学指标。     

溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1与非小细胞肺癌患者临床特征及预后的关系

目的 分析溶血卵磷脂胆碱酰基转移酶1(LPCAT1)与非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床特征及预后的关系.方法 收集95例NSCLC患者癌旁组织及肿瘤组织,采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法对其癌旁组织及肿瘤组织中的LPCAT1 mRNA相对表达量进行比较,分析LPCAT1 mRNA相对表达量与NSCLC患者临床特征及预后的关系.结果 NSCLC患者癌旁组织LPCAT1 mRNA相对表达量为(0.069±0.017),明显低于肿瘤组织的(0.621±0.124),差异有统计学意义(P﹤0.01).TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移的NSCLC患者肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量均明显高于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移者(P﹤0.01);不同年龄、性别、病理类型、肿瘤直径、分化程度及是否吸烟NSCLC患者的肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05).LPCAT1 mRNA相对表达量高水平组患者总生存率为37.50％,低于低水平组的68.09％,差异有统计学意义(P﹤0.05).结论 NSCLC患者肿瘤组织中LPCAT1 mRNA相对表达量高于癌旁组织,且NSCLC患者临床特征及预后与LPCAT1 mRNA相对表达量有关.     

ADAR1 mRNA在肝癌及癌旁组织的表达及意义

目的探讨ADAR1mRNA在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁组织的表达及意义。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测诊断为HCC41例患者的肝癌及癌旁组织RNA编辑酶ADAR1mRNA的表达。结果所有肝癌组织RNA编辑酶ADAR1均有表达,相对表达量为3.340±0.863;所有癌旁组织有RNA编辑酶ADAR1表达,相对表达量为0.801±0.209;对照的26例正常肝组织及其他肝脏疾病标本RNA编辑酶ADAR1的相对表达量为0.880±0.226。将肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间存在显著性差异(t=18.30,P<0.001);肝癌组织和对照肝组织的ADAR1mRNA表达量进行成组t检验,两者间亦存在显著性差异(t=17.65,P<0.001);将癌旁组织和对照肝组织检测到的ADAR1mRNA的表达量进行成组t检验,两者间差异无统计学意义(t=1.64,P>0.10)。将从同一患者取材的肝癌组织和癌旁组织的ADAR1mRNA表达量进行配对t检验,两者间存在显著性差异(t=18.53,P<0.001)。结论ADAR1mRNA在肝癌组织的表达增高,可能在肝癌的发生机制中起一定的作用。     

结直肠癌组织STAT3和MMP-9表达及其与血管生成相关性的研究

目的:探讨结直肠癌组织中信号转导与转录激活因子3(STAT3)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及其与血管生成的相关性。方法:应用免疫组化SP法检测60例结直肠癌组织和20例癌旁正常组织中STAT3和MMP-9的表达,以及CD-105标记的微血管密度(MVD)情况。结果:STAT3和MMP-9在结直肠癌组织中阳性表达率分别为61.7%和73.3%,明显高于癌旁正常组织的30.0%和35.0%,P值均<0.05。癌组织中MVD值为36.02±9.74,明显高于癌旁正常组织11.25±7.35,t=11.97,P<0.01。癌组织中STAT3和MMP-9均阳性表达时MVD值明显高于均阴性组或单一阳性组,P值均<0.01。STAT3、MMP-9和MVD三者均与肿瘤分化程度、Duke分期、淋巴结转移及肝转移相关,P值均<0.05;而与年龄、性别及肿瘤大小无关,P值均>0.05。结论:STAT3、MMP-9及MVD的高表达与结直肠癌的浸润及转移有关,联合检测3项指标对判断结直肠癌的侵袭转移及预后有重要意义。     

MTDH基因和ATG7基因在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨异黏蛋白(MTDH)基因和自噬相关基因7 (ATG7)在结直肠癌(CRC)中的表达及临床意义。方法选取66例CRC患者的CRC组织及癌旁组织,比较CRC组织及癌旁组织中的MTDH mRNA和ATG7mRNA的相对表达量;比较不同临床特征CRC患者的CRC组织/癌旁组织MTDH mRNA、ATG7 mRNA的相对表达量;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CRC组织/癌旁组织中MTODH mRNA和ATG7 mRNA对结直肠癌的诊断价值,并分析MTDH mRNA与ATG7 mRNA的相关性。结果 CRC组织中MTDH mRNA和ATG7 mRNA相对表达量显著高于癌旁组织(P <0.01);TNM分期为Ⅲ~Ⅳ和有肝转移的CRC患者中,CRC组织/癌旁组织中的MTDH mRNA和ATG7 mRNA相对表达量均显著高于Ⅰ~Ⅱ期和无肝转移的CRC患者,低分化程度的CRC患者中CRC组织/癌旁组织中的MTDH mRNA和ATG7 mRNA相对表达量最高(P <0.01)。ROC曲线分析结果 CRC组织/癌旁组织中MTDH mRNA、ATG7 mRNA的AUC面积分别是0.934、0.900,诊断敏感度分别为90.91%、89.39%,特异度分别为86.37%、84.35%。Pearson分析结果表明CRC中MTDH的表达与ATG7的表达呈正相关(r=0.372,P=0.002)。结论 CRC组织中MTDH mRNA、ATG7 mRNA的表达高于癌旁组织。CRC组织中MTDH mRNA、ATG7 mRNA与TNM分期、分化程度、伴肝转移相关。CRC组织中MTDH mRNA、ATG7 mRNA具有诊断价值且两者具有正相关。