供受体混合骨髓移植GVHD反应的动物实验研究

目的 观察混合骨髓移植的GVHD反应。方法 以急性放射病BALB/C小鼠(H-2d)为受鼠,C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠。供体鼠骨髓和脾细胞中混合一定比例的受体鼠脾脏细胞,进行混合骨髓移植。观察移植后小鼠死亡率、白细胞系造血重建、脾结节、体内混合淋巴细胞培养、嵌合体及病理学改变,观察混合骨髓移植方式的GVHD反应。结果 异基因骨髓移植组发生明显的GVHD反应。供受鼠脾脏3:1混合骨髓移植不能明显降低GVHD反应,供受鼠脾细胞比例1:1和2:1移植组可以明显减轻GVHD反应。表现为外周血白细胞及骨髓造血恢复快,体内混合淋巴细胞反应降低及嵌合体百分率升高。结论 混合骨髓移植方式可以降低GVHD反应,并与同基因和异基因脾细胞比例有关。     

IL-11在半相合混合骨髓移植造血恢复中作用的研究

目的 观察白介素-11 IL-11在活化半相合混合骨髓移植小鼠造血恢复中的作用。方法 以急性放射病615小鼠模型为受鼠,615×C57BL/6杂交F1代小鼠为半相合供鼠。半相合鼠骨髓和脾细胞中混合一定比例的同基因脾细胞,进行半相合混合骨髓移植。观察移植后小鼠死亡率、白细胞系造血重建、骨髓集落形成、脾结节及病理学改变。结果 加用IL-11的半相合混合骨髓移植组(供受体小鼠脾细胞比例2:1)为外周血白细胞及骨髓集落数量明显高于未加用IL-11组。结论 IL-11可以明显促进半相合混合骨髓移植小鼠造血恢复。     

骨髓间充质干细胞对异基因骨髓移植后GVHD和生存率的影响

目的　观察骨髓间充质干细胞 (BMMSC)对急性淋巴细胞白血病 (ALL)小鼠异基因骨髓移植 (allo -BMT)后移植物抗宿主病 (GVHD)和生存率的影响。方法　建立ALL小鼠动物模型 ,对其进行allo -BMT的同时 ,静脉输注体外培养的供鼠BMMSC ,同时设立单纯allo -BMT对照组。流式细胞仪检测受鼠CD4+ 、CD8+ T细胞亚群的差异 ;观察受鼠发生GVHD一般反应及病理学变化 ;记录受鼠存活时间。结果　BMMSC减少受鼠CD4+ T细胞的同时增加CD8+ T细胞 ;推迟GVHD发生的时间 ;明显延长ALL小鼠allo -BMT后的生存时间 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　BMMSC能抑制ALL小鼠allo -BMT后GVHD的发生 ,但同时具有一定程度的GVL作用。     

刺五加对放射损伤骨髓微血管的保护作用

目的 观察刺五加注射液对放射损伤小鼠骨髓微血管的保护作用。方法 用^60Coγ射线辐射小鼠建立骨髓微血管放射损伤模型；6周龄雌性小鼠随机分为正常、模型、模型 刺五加注射液低剂量，模型 刺五加注射液高剂量和模型 复方丹参注射液5组。采用分光光度法分别测定各组小鼠股骨骨髓血红蛋白溶液标本的吸光度(A)值；鼠尾采血测定外周血红细胞、白细胞数量和血红蛋白含量；并分别观测骨髓毛细动脉根数、面积和骨髓造血组织容量百分率。结果 刺五加注射液能明显降低放射损伤小鼠骨髓血红蛋白含量，提高外周血红细胞和白细胞的数量以及增加骨髓毛细动脉根数、面积和骨髓造血组织容量百分率。结论 刺五加注射液能明显修复放射损伤小鼠骨髓微血管。保护骨髓造血微环境。     

同基因骨髓基质干细胞移植促进骨髓细胞诱导免疫耐受的实验研究

目的:探讨受体来源的同基因骨髓基质干细胞(MSC)在促进异基因骨髓细胞诱导小鼠皮肤移植免疫耐受中的作用。方法:第-5~-3天,C57BL/6(H-2b)受体小鼠每天腹腔注入0.5 ml抗淋巴细胞血清(ALS),共3天。第0天,5×105源自C57BL/6的MSC及2×107源自BALB/c(H-2d)的骨髓细胞(BMC),通过尾静脉注入到受体鼠。第2天,受体鼠腹腔注入200 mg/kg的环磷酰胺(CP)。第6天进行从BALB/c到C57BL/6的尾-尾皮肤移植。每天观察移植皮片存活情况,共观察100天。并于骨髓细胞移植后第30天、50天及70天对受体小鼠外周血进行嵌合体检查。结果:同基因MSC的输注能促进异基因BMC的植入。与ALS+BMC+CP移植组相比,同基因MSC协同高剂量的异基因BMC移植(即ALS+MSC+BMC+CP移植组)能适度地延长移植皮片的存活时间。在第30天、50天及70天,ALS+BMC+CP移植组及ALS+MSC+BMC+CP移植组受体小鼠体内能检测到供体骨髓源性细胞,ALS+MSC+BMC+CP移植组的嵌合率较高,随着时间推移,嵌合率下降,而且移植皮片存活时间与嵌合率具一定相关性。结论:同基因MSC能协助异基因BMC植入,形成嵌合体,促进免疫耐受的诱导,使移植皮片存活时间得到适度地延长。     

宽筋藤对辐射损伤小鼠造血功能的影响

目的 研究宽筋藤对辐射损伤小鼠造血功能的影响。方法 小鼠被分为五组:阴性对照组、照射对照组、药物高、中、低剂量组。实验组小鼠在⁶⁰Coγ射线6Gy照射后,药物组被给予不同剂量药物,其余两组给予生理盐水。分别在照射前4小时、照后第7、14天检测血象三次。在照后14d,处死小鼠,观察药物对骨髓DNA含量、骨髓有核细胞数、脾结节的影响。结果 宽筋藤照后给药,给药组小鼠外周血红细胞、血小板,骨髓有核细胞计数及骨髓DNA含量比照射对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宽筋藤照后给药能促进放疗后骨髓造血功能的恢复,具有一定的抗辐射作用。     

咖啡酸对辐射损伤小鼠造血恢复作用的初步研究

目的 观察咖啡酸对辐射损伤小鼠造血恢复的影响。方法 建立接受4.5 Gy X射线照射的辐射损伤小鼠模型,BALB/c小鼠随机分为空白对照组,单纯照射组,CFA组,观察小鼠30天存活率、体重、外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、骨髓有核细胞(BMNC)、粒细胞巨噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、巨核细胞形成单位(CFU-MK)及脾集落形成单位(CFU-S)和脾脏指数(SI)等指标。结果 CFA组小鼠的30天存活率、体重、WBC、BMNC、CFU-GM、CFU-MK、CFU-S和SI数均明显高于单纯照射组,差异有统计学意义(P < 0.05或P < 0.01)。结论 CFA能促进辐射损伤小鼠的造血恢复。     

医药信息

外周血造血干细胞移植代替骨髓治疗白血病 骨髓移植治疗白血病,是目前疗效较好的方法。但骨髓的采集麻烦且不易获得,对患者的治疗有诸多限制。用异基因外周血造血干细胞移植(A110—PBSCT)手术冶疗,只需从供血者静脉中采集外周血造血干细胞2-3次,每次约50毫升,即可对病人进行移植治疗。 异基因外周血造血干细胞移植初始于国外,我国首次用这种打法的是北京医科大学血液研究所。据该所所长陆道培教授介绍:用这种方法移植后,患者的造血功能较异基因骨髓移植重建迅     

异基因骨髓间充质干细胞与外周造血干细胞联合移植治疗白血病2例分析

目的初步探讨异基因骨髓间充质干细胞(BM-MSC)与外周血造血干细胞(PBSC)联合移植治疗白血病的安全性、疗效,以及对造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)及移植物抗白血病(GVL)的影响。方法采用体外培养扩增供者骨髓间充质干细胞(MSC),联合组织相容白细胞抗原(HLA)全相合PBSC共同移植治疗2例白血病。结果联合移植无明显不良反应。中性粒细胞(ANC)≥0.5×109/L的时间分别为移植后15d、17d,血小板(Pt)≥20×109/L的时间分别为移植后21d、25d。移植后30d经短串联重复序列-聚合酶链反应(STR-PCR)显示完全供者型植入。1例发生Ⅱ度急性GVHD(aGVHD)。2例患者移植后均获完全缓解(CR),目前持续CR。结论MSC联合HLA全相合PBSC移植治疗白血病安全、有效、可行性大,MSC对异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)造血重建有促进作用,对GVHD及GVL的影响有待进一步研究。     

E838对环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症的防治研究

目的 观察E838对环磷酰胺(Cy)所致IRM-2小鼠白细胞(WBC)减少症和造血功能的影响。方法 实验设对照组、E838低、中、高三个剂量组、阳性对照茜草双酯组,连续5d给药,从第3d注射给予Cy,连续3d,观察外周血白细胞、骨髓有核细胞数、内源性脾结节形成(CFU-S)、脾脏指数及胸腺指数的变化。结果 E838各组的外周血白细胞、骨髓有核细胞数与对照组相比有明显的增高,中、高剂量组与对照组比较,经统计学处理差异有显著性(P<0.01)。CFU-S与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。脾脏指数及胸腺指数均高于对照组,高剂量组脾脏指数与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论 E838有显著改善机体免疫功能和刺激骨髓造血功能的作用,能明显增加小鼠WBC的数量。     

二氧化硫吸入诱发小鼠骨髓细胞染色体畸变的效应

目的 为了了解二氧化硫（SO2）吸入对小鼠骨髓细胞染色体畸变（CA）的诱发作用。方法 以不同浓度SO2气体对小鼠熏气,随后分析小鼠骨髓细胞分裂指数和染色体畸变（CA）率和畸变细胞率。结果 SO2可诱发细胞CA率和畸变细胞率显著增高,且呈明确的剂量－反应关系。在SO2不同浓度（0、14、28、56及84ng/m^3）染毒条件下,小鼠骨髓细胞畸变细胞率（％）分别为1．81、3．00、3．58、4．26、4．86。SO2在低浓度下主要诱发染色单体型畸变,在高浓度下既可引起染色单体畸变,又可引起染色体型畸变。SO2可引起骨髓细胞分裂指数显著降低。结论 吸入SO2气体可抑制小鼠骨髓细胞分型,引起染色体畸变,SO2是染色体断裂剂和基因毒性因子。长期接触环境低浓度SO2污染,有引起接触人群体内细胞遗传物质损伤的潜在危险。     

免疫细胞疗法对苯中毒所致骨髓造血功能障碍的改善作用

目的 探讨免疫细胞疗法对苯引起的骨髓造血功能损伤的疗效。方法 抽取患者外周血40～50ml，分离单个核细胞经白细胞介素-2、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)混合培养6d，收集形成的新免疫细胞并清除杂质后静脉回输给患者，治疗前后分别检测CD4、CD8含量，重度苯中毒患者治疗前后均在右髂后上棘作骨髓穿刺涂片及骨髓病理检查。结果 20例慢性苯中毒患者中9例重度中毒者，经免疫细胞治疗后外周血细胞数、骨髓涂片及骨髓活检结果全部恢复正常；在治疗前T细胞亚群检测CD4、CD8比例倒置者，经治疗后恢复正常比例，治疗期间分别定期检测心、肝、肾功能未发现异常。对所有治疗患者进行追踪观察(最长为1年3个月)，骨髓造血功能均在正常范围内。结论苯中毒所致的骨髓造血功能障碍与免疫功能紊乱有密切关系，采用免疫细胞治疗对恢复苯中毒引起的骨髓造血功能障碍有显著疗效。     

低剂量~（12）C~（6＋）离子辐射诱导的小鼠骨髓细胞适应性反应实验研究

目的研究低剂量重离子辐射（LDR）对小鼠造血系统的适应性反应特征。方法对小鼠给予大剂量（2.0 Gy）12C＋6射线照射前预先采用0.050,0.075 Gy 12C＋6离子束全身照射,其中一批小鼠24 h处死,测定外周血指标、脏器系数、骨髓细胞微核率、骨髓DNA含量;第二批小鼠接受大剂量（2.0 Gy）全身辐照后观察其30 d存活情况。结果与大剂量直接照射组相比,0.050Gy低剂量照射组小鼠外周血白细胞明显升高,骨髓DNA含量升高,小鼠骨髓细胞的微核率降低（均P〈0.05~0.01）,其余指标无统计学差异。0.075 Gy低剂量照射后小鼠外周血白细胞与照射对照组比较有一定下降,其余指标无明显差异。结论低剂量碳离子束照射能拮抗大剂量照射后引起的骨髓细胞损伤,对造血组织产生适应性反应,对重离子治疗肿瘤及放射防护具有一定参考意义。     

E838对辐射暴露小鼠造血功能的影响

目的 研究E838对辐射暴露小鼠造血功能的防护作用。方法 用内源性脾结节形成(CFU-S),股骨有核细胞(BMN)计数及脾脏指数等方法观察E838、炔雌醇、尼尔雌醇对¹³⁷Csγ射线照射7.5Gy小鼠造血功能的影响。观察受照小鼠的BMN、CFU-S和脾指数的变化。结果 照射后第9天E838各组的BMN数、CFU-S及脾脏指数与对照组相比有明显的增高,经统计学处理差异有显著性(P<0.001)。E838三个剂量组的BMN数与尼尔雌醇组比较有所上升,差异有显著性(P<0.001),与炔雌醇比较,中、高剂量组差异有显著性(P<0.05)。E838三个剂量组的脾脏指数与尼尔雌醇组和对照组相比较,差异有显著性(P<0.001),结论 E838对辐射暴露小鼠造血系统具有保护作用。     

红细胞和网织红细胞相关新参数在贫血和骨髓移植中的应用

目的:建立Ret-He、Hypo-He%、RBC-He、D-He、FRC%、FRC#、IRF、CHr及Hypo%的参考范围,并探索各参数在诊断贫血和监测骨髓移植中的临床意义。方法:采用XE-5000全自动血细胞分析仪检测401例表观健康人的Ret-He、Hypo-He%、RBC-He、D-He、FRC%、FRC#、IRF,用ADVIA 2120全自动血细胞分析仪检测CHr、Hypo%,建立上述各参数的参考范围;收集52例小细胞低色素性贫血和53例大细胞性贫血患者标本,评估上述各参数在两种类型贫血中的变化;动态观察9例骨髓移植患者的Ret%、Ret-He、CHr、IRF、RBC、HGB、WBC及PLT的变化,以寻找监测骨髓移植重建的早期指标;将意义相似但检测系统不同的参数进行相关性分析。结果:参考范围建立:Ret-He、IRF%、CHr为正态分布,参考范围分别为:35.5±2.4、9.63±6.7、31.7±1.7;RBC-He、Hypo-He%、FRC%、FRC#、D-He、Hypo%为偏态分布,参考范围分别为:29.6～33.7、0.1～0.6、0～0.35、0～0.0168、2.0～5.1、0.1～1.8。在小细胞低色素性贫血患者中,Ret-He、RBC-He和CHr降低,而Hypo-He%、FRC%、IRF、Hypo%升高;在大细胞性贫血患者中,Ret-He、Hypo-He%、RBC-He、D-He、FRC%、FRC#、IRF、CHr和Hypo%均升高。Ret-He与CHr、Hypo-He%与Hypo%的相关性均良好(r值分别为0.950、0.969,P<0.001)。IRF在移植术后10(7～13)d开始明显升高,较常规指标可提前5 d预测骨髓移植成功情况,而RBC、HGB、Ret-He、CHr在移植后25 d内没有明显变化。结论:Ret-He、RBC-He和CHr可用于小细胞低色素性贫血和大细胞性贫血的鉴别;IRF是监测移植重建的敏感指标。     

骨髓基质细胞诱导神经干细胞移植治疗颞叶癫痫幼年大鼠学习记忆障碍的实验研究

目的:探讨骨髓基质细胞诱导神经干细胞移植至KA大鼠海马后对学习记忆障碍的改善作用,从而为干细胞移植治疗癫痫提供理论依据。方法:首先分离幼年大鼠骨髓基质细胞,并在特定的条件下培养、诱导分化为神经干细胞。然后用KA建立大鼠癫痫模型,之后把神经干细胞移植至KA致痫鼠的海马内,用Morris水迷宫测试大鼠的学习记忆能力。结果:癫痫移植组与癫痫未移植组相比幼年大鼠空间学习记忆能力有显著性差异(P<0.05)。结论:骨髓基质细胞诱导神经干细胞移植至KA幼年大鼠海马后对学习记忆障碍有明显的治疗作用,但其具体的作用机理有待进一步研究。     

Protection against radiation induced hematopoietic damage in bone marrow of Swiss albino mice by Mentha piperita (Linn)

The protective effects of Mentha piperita (Linn) extract against radiation induced hematopoietic damage in bone marrow of Swiss albino mice have been studied. Mice were given either double distilled water or leaf extract of M. piperita orally (1 g/kg b.wt./day) once a day for three consecutive days, and after 30 min of treatments on the third day were exposed to 8 Gy gamma radiation. Mice were autopsied at 12, 24, 48 hrs and 5, 10 and 20 days post-irradiation to evaluate the percentage of bone marrow cells, frequency of micronuclei and erythropoietin level in serum. An exposure to gamma radiation resulted in a significant decline in the number of bone marrow cells such as leucoblasts, myelocytes, metamyelocytes, band/stab forms, polymorphs, pronormoblasts and normoblasts, lymphocytes, and megakaryocytes. Pretreatment with leaf extract of M. piperita followed by radiation exposure resulted in significant increases in the numbers of leucoblasts, myelocytes, metamyelocytes, band/stab forms, polymorphs, pronormoblasts and normoblasts, lymphocytes, and megakaryocytes in bone marrow as compared to the control group. Pretreatment with leaf extract of M. piperita followed by radiation exposure also resulted in significant decreases in micronucleus frequencies in bone marrow of Swiss albino mice. A significant increase in erythropoietin level was observed at all the studied intervals in leaf extract of M. piperita pretreated irradiated animals as compared to control animals (radiation alone). The results of the present investigation suggest the protective effects of leaf extract of M. piperita against radiation induced hematopoietic damage in bone marrow may be attributed to the maintenance of EPO level in Swiss albino mice.