1型糖尿病小鼠同基因骨髓移植治疗后的免疫变化

摘要本研究旨在观察同基因骨髓移植（syn—BMT）治疗1型糖尿病（T1D）4、鼠前后外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞比例的变化。探讨其在小鼠T1D的发生及同基因骨髓移植在诱导T1D小鼠恢复免疫耐受中的作用。选取C57BL／6J小鼠以链脲佐菌素腹腔注射建立T1D模型,并将成模小鼠分为病鼠移植组及病鼠对照组;另取正常C57BL／6J小鼠6只作为正常对照组。病鼠移植组小鼠于成模后第10天行同基因骨髓移植治疗;正常对照组和病鼠对照组不作处理。每10天监测1次正常对照组、病鼠对照组、病鼠移植组空腹血糖;每3天监测1次病鼠移植组小鼠移植后血象。小鼠成模后第10天即移植治疗当天及移植后30天分别取正常对照组、病鼠对照组及病鼠移植组小鼠外周血标本,用流式细胞术测定外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞比例。结果显示,syn—BMT后,小鼠空腹血糖逐渐下降,至移植后25天,与正常对照鼠相比无差异,显著低于对照病鼠;移植后小鼠外周血白细胞和血小板计数分别在接受预处理及骨髓移植后3天和6天达最低值,此后逐渐上升,至移植后27天基本恢复正常。糖尿病小鼠外周血CD4^＋T淋巴细胞比例、CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值和NK细胞比例均较正常对照鼠明显升高（P〈0．01）,CD8^＋T淋巴细胞比例较正常对照鼠显著下降（P〈0．01）。syn．BMT后CD4^＋T淋巴细胞比例、CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值和NK细胞比例较对照病鼠不同程度的降低,CD8^＋T淋巴细胞比例较对照病鼠及正常对照鼠明显升高（P〈0．01）。结论：同基因骨髓移植可以逆转糖尿病小鼠的高血糖状态。糖尿病小鼠发病初期,外周血CD4^＋T淋巴细胞比例、CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值和NK细胞比例增高及CD8^＋T淋巴细胞比例降低,这些变化可能与糖尿病的发生有关。同基因骨髓移植可以不同程度的逆转糖尿病小鼠的免疫紊乱。     

严重创伤患者细胞免疫功能变化和预后相关性研究

目的探讨严重创伤患者T淋巴细胞亚群变化特点以及与预后的关系。方法20例严重创伤患者于入院第1天晨抽取肘静脉血2mL，对照组为20例健康体检者，晨空腹抽取肘静脉血2mL，分别检测T淋巴细胞亚群并进行统计学分析。结果观察组CD3^＋、CD4^＋亚群均比对照组下降非常显著（P均〈0．001），而观察组CD8^＋亚群、CD4^＋／CD8^＋比值较对照组无明显下降（P〉0．05）。恶化组与好转组CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋比值均无统计学意义（P均〉0．05）。结论严重创伤患者T淋巴细胞亚群发生明显变化，并导致细胞免疫功能下降；而恶化组与好转组间T细胞亚群变化似乎不明显。     

恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义

【目的】研究恶性肿瘤患者外周血淋巴细胞亚群、调节性T细胞水平的变化及其临床意义。【方法】采用流式细胞仪对40例恶性肿瘤患者及40例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平进行检测。【结果】病例组与正常对照组比较,CD3^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋T淋巴细胞百分比、CD4^＋／CD8^＋比值及CDl6^＋／56^＋-NK细胞百分比均明显降低（P〈0．05）;CD8^＋T淋巴细胞和CD19^＋B淋巴细胞百分比明显高于正常对照组（P〈0．01）。与对照组相比较,恶性肿瘤患者外周血CD4^＋、CD25^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞均明显升高（P〈0．05）。【结论】恶性肿瘤患者细胞免疫功能明显异常;CD4^＋CD25^＋曲调节性T细胞增多可能是肿瘤患者免疫功能受抑的重要原因之一。淋巴细胞亚群及调节性T细胞水平检测在评价肿瘤患者疗效及判断预后方面具有一定的临床价值。     

子痫前期患者及正常孕妇外周血T淋巴细胞亚群的变化

目的：研究外周血T淋巴细胞亚群在子痫前期患者及正常孕妇中的变化。方法：采用流式细胞技术检测子痫前期患者及正常孕妇外周血CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞并与未孕妇女进行对照，探讨T淋巴细胞亚群及CD4^＋／CD8^＋T细胞比值在子痫前期及正常孕妇中的变化。结果：子痫前期与正常妊娠妇女相比，子痫前期患者总T淋巴细胞无显著变化，CD^4＋T淋巴细胞升高，差异非常显著（P〈0．001）；CD8^＋T淋巴细胞下降，差异非常显著（P〈0．001）：CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比值升高．差异非常显著（P〈0．001）。与未孕妇女相比差异无显著性（P〉0．05）。子痫前期患者中CD^4＋／CD^8＋T淋巴细胞比值与平均动脉压呈正相关（r=0．569，P〈0．01）。结论：T淋巴细胞亚群的数量变化及相互间的平衡失调在子痫前期发病机制中发挥重要作用：     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血T淋巴细胞亚群检测的意义

目的 探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子的特点及意义。方法 以35倒健康人作为对照组,用流式细胞术分析了35例确诊的PBC患者外周血T淋巴细胞亚群及其分泌IL-4和IFN-γ情况。结果 PBC患者组CD^4＋T细胞升高,CD8^＋T细胞下降,CD4^＋T／CD8^＋T比值上升（P〈0．05）;PBC患者CD4^＋T细胞IFN-1表达显著升高（P〈0．05）,而IL-4水平与对照组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论 在PBC发病机制中,CD4^＋T细胞和TH1亚群细胞超重要作用。     

肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群的临床分析

目的检测并分析肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群CD3＋CD4＋和CD4＋/CD8＋比值的变化及其临床意义。方法应用流式细胞术测定24例肺结核患者和18例健康对照者外周血T淋巴细胞亚群CD3＋CD4＋和CD4＋/CD8＋比值。结果肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群CD3＋CD4＋和CD4＋/CD8＋比值显著低于对照组（均P〈0.01）。结论肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群CD3＋CD4＋和CD4＋/CD8＋比值降低,其水平变化可能可以作为评估肺结核患者疗效的指标。     

流式细胞术测肺癌患者外周血T细胞亚群及其与临床病理的关系

目的：探讨应用流式细胞术检测肺癌患者细胞免疫功能的方法及其与临床病理的关系。方法：应用三色免疫荧光流式细胞仪测定105例肺癌患者及18例正常对照者外周血T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、NK细胞、CD4^＋／CD8^＋比值。结果：全组肺癌患者外周血中各T淋巴细胞亚群比例较正常对照组无显著性差异；Ⅰ期、Ⅱ期肺癌患者和健康对照组之间T细胞各亚群相比没有统计学差异；Ⅲ期、Ⅳ期肺癌患者和健康对照组相比：CD4^＋明显降低（P=0．04）；CD8^＋则明显升高（P=0．02）；CD4^＋／CD8^＋较正常有所下降，但没有显著性差异。结论：外周血T细胞亚群的检测有助于对肺癌患者的病情、临床分期以及机体免疫状态的判断，晚期肺癌患者机体免疫状态成紊乱型改变。     

肺结核患者外周血腺苷脱氨酶活性与T淋巴细胞亚群定量检测的相关性及临床意义

目的探讨肺结核患者外周血淋巴细胞内腺苷脱氨酶（ADA）活性和T淋巴细胞亚群定量检测的关系及临床意义。方法应用全自动生化分析仪测定肺结核患者血清ADA的活性和用流式细胞仪测定外周血中T淋巴细胞亚群。结果肺结核患者外周血ADA活性显著高于对照组,化疗2个月及6个月后,其活性显著降低,外周血CD4＋、CD8＋及CD4＋／CD8＋比值差异有统计学意义,ADA与CD4＋／CD8＋之间存在相关性。结论肺结核患者淋巴细胞内ADA活性升高与T淋巴细胞亚群比例失调有关,检测患者外周血ADA、T淋巴细胞亚群的变化有助于临床病情监控、疗效判定及预后判断。     

结核病患者外周血中淋巴细胞亚群变化及其临床意义

目的 结核病免疫是由T淋巴细胞介导的细胞免疫，观察结核病患者外周血中T淋巴细胞亚群的数量变化，探讨其在结核病诊断和治疗中的价值。方法 用流式细胞术检测30例肺结核病人外周血中T淋巴细胞亚群与正常健康人进行比较。结果 CD3^＋，CD4^＋和CD8^＋T细胞绝对值明显低于正常人（P〈0．01），而CD4^＋／CD8^＋比值无显著性差异（P〉0．05）。结论 肺结核病患者免疫功能低下，通过T淋巴细胞亚群的检测可以监控患者的免疫状态，从而对指导临床免疫治疗提供依据。     

恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群检测结果回顾性分析

[目的]回顾分析恶性肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群检测水平,探讨检测T细胞亚群与恶性肿瘤发展及预后的关系。[方法]采用流式细胞术检测56例正常人及291例恶性肿瘤患者外周血治疗前后CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及CD4＋／CD8＋比值水平,并进行统计学分析。[结果]恶性肿瘤患者外周血CD3＋、CD4＋T细胞、CD4＋／CD8＋比值均明显低于正常对照组,有显著统计学意义;恶性肿瘤患者经手术或放疗后外周血中CD3＋、CD4＋T细胞、CD4＋／CD8＋比值与治疗前明显升高,差异显著。[结论]检测恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群,对反应恶性肿瘤患者免疫功能状态、治疗效果观察、疾病进展及预后判断具有一定的临床意义。     

严重多发伤患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节T细胞的变化特点

目的观察严重多发伤患者早期SIRS中CD4^＋CD25^＋调节T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）比例的变化，并探讨其与患者继发感染之间的关系。方法对符合SIRS诊断标准的23名严重多发伤患者，于确诊后的24h内无菌抗凝抽取静脉血，用流式细胞仪技术检测CD4^＋CD25^＋Treg的比例及CD4／CD8的比值，同时留取细胞培养，以嗜银染技术观察患者外周血淋巴细胞核仁形成区银染蛋白（Ag—NORs）的量，以核仁银染面积与核面积的比值（IS％）表示，了解淋巴细胞的增殖情况。并对入选患者于诊断成立的第1、5天留取痰、分泌物等标本行细菌学培养，观察患者的情况。结果符合SIRS的严重多发伤患者早期即有CD4^＋CD25^＋Treg比例的显著升高。并有IS％及CD4／CD8显著下降，和对照组相比，均有P〈0．01。CD4’CD25’Treg比例升高愈显著者，继发感染机率愈高。结论检测CD4^＋CD25^＋Treg的水平对于评估严重多发伤患者的细胞免疫状态，预测继发感染均有很大的帮助。     

重型甲型H1N1流感患者T淋巴细胞亚群变化分析

[目的]探讨重型甲型H1N1流感患者T淋巴细胞亚群的动态变化.[方法]采用流式细胞仪对21例重型甲型H1N1流感患者(重症组病例12例,危重组病例9例)病程初期(入院24 h)、病程中期(入院后10 d)、恢复期(入院后30 d)外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+进行检测和统计分析.[结果]两组患者病程初...     

胸腺肽α1对老年胃大部切除手术后T细胞亚群的影响

【目的】观察老年胃大部切除手术前后使用胸腺肽α1对病人的T细胞亚群的影响。【方法】35例老年手术病人随机分为对照组（肠内营养组n=20）和研究组（胸腺肽加肠内营养组n=15）。研究组术前1d至术后d6每天给予胸腺肽α1,于术前1d,术后d1、d0分别检测T细胞亚群CD3^＋、CD4^-、CD4^＋／CD8^＋和术前d0,术后d3、d7分别检测血清白介素6（IL6）、肿瘤坏死因子（TNF—α）等急性炎性反应指标。【结果】两组病人术后CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋均有下降及急性炎性反应的发生,但研究组较对照组术后d10的T细胞亚群指标有明显提升（P〈0．05）,且研究组病人术后的IL6、TNF-α水平有显著下降。【结论】老年胃大部切除手术病人围手术期应用胸腺肽α1既可提高T细胞亚群水平又能缓解急性相炎性反应。     

强化胰岛素治疗对严重创伤患者降钙素原及淋巴细胞亚群的影响

目的 探讨强化胰岛素治疗对严重创伤患者血清降钙素原及淋巴细胞亚群的影响.方法 前瞻性地对2008年1月至2011年1月宁波第二医院收治的56例严重刨伤患者的临床资料进行收集、分析;把患者分为强化胰岛素治疗组(控制血糖在4.4-6.1 mmol/L,A组)和常规治疗组(控制血糖在10.0～11.1 mmol/L,B组),...     

肝癌病人术后早期复温对免疫功能影响的临床研究

[目的]探讨不同复温时间对肝癌部分切除术低体温病人免疫功能的影响。[方法]将90例低体温病人依不同复温时间随机分3组,A组30 min、B组30 min~60min、C组60min,每组30例。术前、术后1d、2d测外周血白细胞介素(IL)-2,IL-6;术前、术后1d、5d测外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)。[结果]C组1dCD3+、CD4+、CD4+/CD8+及5dCD4+/CD8+低于A组、B组(P0.05)。3组病人T细胞亚群重复方差分析,各指标时间效应、交互效应、CD3+、CD4+、CD4+/CD8+组间效应P0.05。各组CD8+术前与术后、组间比较差异无统计学意义(P0.05)。C组术后1d、2dIL-2低于A组、B组,C组术后2dIL-6高于A组、B组(P0.05)。IL-2组间效应、IL-6组间效应、时间效应及交互效应P0.05。[结论]复温时间60min可延迟免疫恢复,肝癌病人术后早期有效复温能减轻免疫抑制,利于病人术后康复。     

早期空肠管饲营养对食管癌术后患者机体免疫功能的影响

目的：研究食管癌术后早期空肠管饲营养对机体免疫功能及炎症反应的影响。方法：58例食管癌患者随机分为早期空肠管饲营养（EJTN）组和传统肠内营养（TEN）组，每组29例。EJTN组在术后6h行营养支持，TEN组按传统方法，术后禁食，待肛门排气后经口腔进食。分别于术前1d及术后第1天和第8天取外周血检测IgA、IgG,IgM、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性等免疫指标及炎症介质TNF—α和IL-2。结果：术后8d EJTN组IgA、IgG,IgM及CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性明显回升，CD8^＋则回落至正常水平，而TEN组CD8^＋仍处于高水平，其余指标处于较低水平，两组间有显著差异（P〈0．05～0．01）。炎症介质TNF-α在术后第8天明显低于TEN组（P〈0．05），而IL-2两组间无显著差异（P〉0．05）。结论：早期空肠管饲营养可提高食管癌术后患者机体免疫功能并减轻炎症反应的程度。     

高容量血液滤过对多器官功能障碍综合征患者细胞免疫功能的影响

目的探讨高容量血液滤过（HVHF）对多器官功能障碍综合征（MODS）患者细胞免疫功能的影响。方法选择MODS患者14例,行HVHF治疗,HVHF前和HVHF1、3和5d分别取静脉血5ml,检测单核细胞计数,并且通过流式细胞仪检测CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋、单核细胞HLA-DR水平的动态变化。结果14例患者存活9例,死亡5例。存活组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋值在HVHF治疗后较治疗前均有不同程度的升高,其中CD3^＋于HVHF5d与HVHF前相比有显著差异（P〈0.05）;CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋于HVHF3d、5d与HVHF前相比显著升高（P〈0.05）;CD8＋呈逐渐下降趋势,于HVHF3d、5d与HVHF前相比显著下降（P〈0.05）。死亡组CD3^＋、CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋值在HVHF治疗后均有不同程度的升高,但与HVHF前相比均无统计学意义;CD8^＋在HVHF治疗前后呈下降趋势,但与HVHF前相比均无统计学意义。存活组外周血单核细胞计数和单核细胞HLA-DR表达在HVHF治疗后均呈升高趋势,与HVHF前相比,外周血单核细胞计数于HVHF ld有显著差异（P〈0.05）.于HVHF3d、HVHF5d有非常显著差异（P〈0．01）。死亡组外周血单核细胞计数、单核细胞HLA—DR表达在HVHF治疗前后无明显变化（P〉0．05）。结论HVHF可以调整MODS患者T细胞亚群比例,使单核细胞数目增加,单核细胞抗原提呈能力提高,改善MODS患者的免疫抑制状态。     

CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞水平在胃癌患者外周血中的变化

目的探讨T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值水平在胃癌患者外周血中的表达及意义。方法采用血液分析仪技术,检测40例胃癌手术前患者(按临床分期为Ⅰ～Ⅱ级组18例,Ⅲ～Ⅳ级组22例)及25名正常对照组外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平。结果胃癌患者外周血CD3+、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值分别为0.78%±0.35%、0.37%±0.21%、0.61%±0.42%,明显低于正常对照组(P<0.05);胃癌Ⅲ～Ⅳ级组CD3+、CD4+细胞CD4+/CD8+比值分别为0.42%±0.27%、0.21%±0.17%、0.29%±0.25%,明显低于Ⅰ～Ⅱ级组(0.95%±0.35%、0.45%±0.19%、0.76%±0.30%,P<0.05)。结论检测胃癌患者手术前外周血CD3+、CD4+、CD8+细胞和CD4+/CD8+比值T细胞水平,可以初步评估胃癌患者机体免疫状态,也为肿瘤的免疫增强治疗提供了理论依据。     

注射用黄芪多糖对鼻咽癌放射治疗患者免疫功能的影响

目的观察注射用黄芪多糖对鼻咽癌放射治疗患者免疫功能的影响。方法采用随机分组方法将32例鼻咽癌放射治疗患者随机分成治疗组和对照组,每组各16例。对照组进行单纯常规放射治疗,治疗组于常规放射治疗第1天开始,注射用黄芪多糖针250 mg加入5%葡萄糖溶液(GS)中静脉滴注,每日1次,连续用3周,间歇1周,重复应用,直到放疗终止。观察两组患者治疗前后外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+和NK淋巴细胞的数据变化。结果对照组放疗后CD8+细胞和NK淋巴细胞百分数较放疗前略微增加,其他检测指标较放疗前均有下降,且差异无统计学意义(P0.05)。而治疗组治疗后除CD8+下降外,CD3+、CD4+、NK淋巴细胞百分数、CD4+/CD8+值明显升高,并明显高于治疗前和对照组的水平(P0.01)。结论注射用黄芪多糖可明显增强鼻咽癌放射治疗患者的细胞免疫功能。