干血斑滤纸片检测Leber''s视神经萎缩线粒体突变

目的 建立干血斑滤纸片分析Leber's遗传性视神经萎缩(LHON)线粒体DNA(mtDNA)的方法，为更加广泛开展LHON的基因诊断和为进一步研究LHON积累资料。方法 收集了81例视神经炎、视神经萎缩或临床怀疑LHON患者的干血斑滤纸片，提取DNA，用突变特异性引物PCR(MSP—PCR)和异源双键—单链构象多态性(HA—SSCP)检测其mtDNA的三个常见原发致病突变位点。结果 81例受检者中，检出51例l1778位点突变阳性；1例3460位点突变阳性；14484位点突变全部阴性。结论 应用干血滤纸片检测LHON的mtDNA，具有微量、准确、有效、邮寄方便的特点，值得推广。     

三种方法在检测Leber′s视神经萎缩mt-DNA突变的比较

比较MSP PCR、SSCP、RFLP在检测Leber s视神经萎缩 (LHON)线粒体DNA (mt DNA) 11778突变中的优缺点。 77例受试者 ,分别用MSP PCR、SSCP、RFLP法检测mt DNA11778突变。被MSP PCR检出的 48例阳性者同时也被SSCP检出 ,另外SSCP还检出 6例杂合性突变 ;MSP PCR和SSCP检测阳性的 9例患者 ,再用RFLP (MaeⅢ )检测也得出一致结果。表明多条件SSCP在mt DNA未知突变筛查中具有优势 ,而MSP PCR有助于确定突变的性质。     

不同片段的Dig—HBV—DNA探针在检测血清HBV—DNA的比较

本文运用分子克隆技术、随机引物法用非放射性Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记制备ＰＢＲ３２２－ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针、单纯ＨＢＶ－ＤＮＡ全基因探针及经ＢｇＬⅡ限制性内切酶切割后片段ＨＢＶ－ＤＮＡ探针。通过检１３０份血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，比较三种探针的敏感度和特异性。     

三种方法检测抗双链DNA抗体的比较及临床意义

目的利用绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CL-IIF）、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法3种方法单独及不同组合联合检测抗双链DNA（ds-DNA）抗体的比较,了解3种方法联合检测在系统性红斑狼疮（SLE）中的诊断及临床应用价值。方法120例SLE患者分为疾病活动组和疾病稳定组,另选择121例疾病对照（干燥综合征35例、混合性结缔组织病30例、类风湿关节炎38例、系统性硬化症18例患者血清）、40例健康患者血清对照,利用3种方法检测其血清中抗ds-DNA抗体,了解检测的敏感性和特异性,并寻找对临床有价值的联合检测方法。结果CL-IIF法、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法在SLE中的敏感性分别为45.8%、42.5%、47.5%,均明显高于疾病对照组及健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;在检测SLE疾病活动组抗ds-DNA抗体中,3种方法敏感性分别为65.2%、58.3%、61.1%,而在疾病稳定组中敏感性分别为16.6%、18.7%、27.0%,差异有统计学意义（P〈0.01）;3种方法的联合检测可以明显提高抗ds-DNA抗体在SLE中的检出率,而特异性仍然很高。结论3种方法检测SLE中的抗ds-DNA抗体均具有很高特异性,但敏感性略低,尤其在疾病稳定期中,而3种方法间的联合检测则可以弥补敏感性低的不足,尤其是CL-IIF法和胶体金快速斑点法的组合更适合临床应用。     

三种HBV DNA提取方法对荧光定量PCR检测结果影响的比较

目的 研究3种核酸提取方法对黄疸、溶血和脂血标本HBV DNA荧光定量结果的影响,为进一步提高临床检验质最和改进检测技术提供理论依据.方法 采用目前临床常用的多聚糖病毒沉淀浓缩法(PEG法)、碱液直接裂解和微量核酸释放剂(Micro-Nucleic-Releaser,MNR)等3种核酸提取方法,对含有HBV的黄疸、溶血和脂血标本进行荧光定量PCR检测,研究不同标本对荧光PCR定量结果和扩增效率的影响.选择酚一氯仿提纯法作为核酸提取对照方法.结果 黄疸、溶血和脂血标本,对3种不同核酸提取方法的荧光PCR定量结果和扩增效率都产生不同程度的影响,其中完全溶血的标本对PCR扩增效率的影响最大,如定量值为4×103拷贝/ml的低拷贝完全溶血标本,MNR法测定结果为2.21×103拷贝/ml,PEG法为1.02×103拷贝/ml,碱性直接裂解法的定量值为阴性,临床自然溶血较重的标本对荧光定量检测影响较小,脂血和黄疸标本对荧光定量PCR扩增效率有明显抑制作用,但对实际定最值无明显影响;其中,MNR法在不同标本的定量重复性和荧光PCR扩增效率最好,碱液直接裂解法较差.酚.氯仿提纯法虽然获得较高的扩增效率,但存在大约有1个数量级的核酸丢失.结论 基于MNR核酸提取方法的荧光定量PCR检测,对不同的临床标本均可获得较好的扩增效率、敏感性和重复性,操作简便、快速且无核酸丢失和污染,适合临床检验应用.     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

比较三种文坛法检测广州地区１２家医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯各产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）敏感性,用纸片扩散初筛法,初筛出１６７株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,然后进行纸片扩散确证法,双纸片协同法和浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）,结果有１４７株菌产ＥＳＢＬｓ（３２％大肠埃希菌的４２．６％克雷伯菌属ＥＳＢＬｓ菌性）,纸片扩散确下法和双纸片协同法检出率相似,但双纸片协同法的缺点的纸片中心间距不好控制,ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ初筛试条检测ＥＳＢＬｓ有一定局限性,纸片扩散确证法适合临床常规测定。     

The Ischemic Optic Neuropathy Decompression Trial (IONDT): Design and Methods

The objective of the Ischemic Optic Neuropathy Decompression Trial (IONDT) was to investigate the safety and efficacy of optic nerve decompression surgery (ONDS) compared to careful follow-up for nonarteritic ischemic optic neuropathy (NAION) and to observe the natural history of NAION in untreated patients. It was designed as a multicenter, randomized controlled clinical trial. Resource centers included a Chairman’s Office, a Coordinating Center, and 25 Clinical Centers at eye centers throughout the United States. The trial’s methods were as follows. Eligible patients with visual acuity 20/64 or worse were randomized to ONDS or careful follow-up; eligible patients with visual acuity better than 20/64 made up a natural history cohort and were followed but not randomized to treatment. The primary outcome examined was an increase of three lines or more of visual acuity at 6 months. Additional outcomes were visual acuity at other follow-up times, visual field, quality of life, and morbidity associated with ONDS. Standard quality assurance methodology was used to monitor adherence to protocol. The surgical protocol was monitored by a Surgical Quality Assurance Committee (SQAC). Enrollment began October 8, 1992, and ceased October 20, 1994, because of preliminary findings indicating that surgery was of no benefit and was perhaps harmful. This report describes the design and methods of the trial and the rationale for design elements unique to the IONDT. Specific goals of study design and conduct included achieving an accelerated study start-up and rapidly producing results acceptable to the medical community.     

三种方法检测细菌超广谱β-内酰胺酶的比较分析

目的：评价三种方法检测产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）大肠埃希菌的准确性和可靠性。方法：采用NCCLS推荐的纸片法确证试验、双纸片协同试验和E—test法对25株ESBLs阳性和25株ESBLs阴性大肠埃希菌进行了检测比较。结果：纸片法确证试验、双纸片协同试验和E—test法的敏感性分别为96．2％、92．6％和96．2％，特异性分别为100％、96．2％和100％。结论：纸片法确证试验和E—test法比双纸片协同试验准确、可靠。     

Detecting Clusters of Mutations

Positive selection for protein function can lead to multiple mutations within a small stretch of DNA, i.e., to a cluster of mutations. Recently, Wagner proposed a method to detect such mutation clusters. His method, however, did not take into account that residues with high solvent accessibility are inherently more variable than residues with low solvent accessibility. Here, we propose a new algorithm to detect clustered evolution. Our algorithm controls for different substitution probabilities at buried and exposed sites in the tertiary protein structure, and uses random permutations to calculate accurate P values for inferred clusters. We apply the algorithm to genomes of bacteria, fly, and mammals, and find several clusters of mutations in functionally important regions of proteins. Surprisingly, clustered evolution is a relatively rare phenomenon. Only between 2% and 10% of the genes we analyze contain a statistically significant mutation cluster. We also find that not controlling for solvent accessibility leads to an excess of clusters in terminal and solvent-exposed regions of proteins. Our algorithm provides a novel method to identify functionally relevant divergence between groups of species. Moreover, it could also be useful to detect artifacts in automatically assembled genomes.     

慢性肾脏疾病中LDL—C两种测定方法的比较

目的：比较正常人及慢性肾脏疾病病人血清中两途中 测定ＬＤＬ－Ｃ浓度方法的差异。方法：间接计算法利用Ｆｒｅｄｅｗａｌｄ公式计算ＬＤＬ－Ｃ的浓度,直接测定法即匀相分析法直接测得ＬＤＬ－Ｃ浓度。结果：４２例正常对照组两种方法测定结果无显著性差异（Ｐ〉０．０１）,ｒ＝０．９７９４,表明正常人群中两种方法有良好的相关性。在３７例慢性肾衰竭（ＣＲＦ）的病人及２５例肾综病人中,两种方法所得结果有显著性差异（Ｐ〈     

冬季前列腺电切术后3种膀胱冲洗方法的效果比较

目的探讨经尿道前列腺电切术后不同膀胱冲洗方法对患者术后并发症的影响以及冲洗费用的区别,指导临床选择经济实惠、安全有效的膀胱冲洗方法。方法将45例患者随机分为3组各15例,常规组采用传统室温下的冲洗液持续膀胱冲洗;简易加温组采用2只wk-1型自调温加热器并排放置,将入路输液管末端嵌入加热槽,设置温度35℃后持续膀胱冲洗;系统加温组采用Warmflo液体加温系统,将专用的加温袋平铺于加热轨道中,控制温度在35℃,持续膀胱冲洗。比较3种持续膀胱冲洗方法对患者术后出血,膀胱痉挛、手术前后体温差、冲洗时间、冲洗费用的差异。结果简易加温组、系统加温组术后出血、膀胱痉挛、低体温发生率均低于常规组,冲洗时间短于常规组（P〈0．05）;简易加温组、常规组冲洗费用比较差异无统计学意义（P〉0．05）,简易加温组冲洗费用低于系统加温组（P＜0．01）。结论采用wk-1型自凋温加热器加温膀胱冲洗液的方法可以减少患者术后出血、膀胱痉挛、低体温发生,缩短膀胱冲洗时间,而且并不增加患者经济负担,是一种安全有效、经济实惠的膀胱冲洗方法。     

不同吸氧去氮法对全麻诱导期无通气期安全时限影响的比较

目的：探讨不同吸氧去氮方法对全麻诱导期无通气期安全时限的影响。方法：45例气管插管患者随机分为常规吸氧去氮组（3MIN组）、30 s深呼吸4次组（4DB组）与60 s深呼吸8次组（8DB组）。所有患者入手术室后在呼吸空气情况下采集动脉血气标本测定血气分析,并记录SpO2值,吸氧结束时记录SpO2和动脉血的血气分析。记录各例患者SpO2降至97%、95%、93%的时间,在SpO2降至93%时采集动脉血标本测定血气分析。结果：三组SpO2降至97%、95%、93%各时点的时间,3MIN组患者与8DB组相近（P〉0.05）,而均明显长于4DB组（P〈0.05）;吸氧后动脉血二氧化碳分压（PaCO2）值三组相近,但在SpO2降至93%时点,3MIN组与8DB组的PaCO2值均明显高于4DB组（P〈0.05）;吸氧后PaO2值3MIN组与8DB组相近（P〉0.05）,而均明显高于4DB组（P〈0.05）。结论：全麻诱导前的给氧方法中,60 s深呼吸8次法、传统吸氧去氮法的吸氧去氮效果明显优于30 s深呼吸4次法。     

经颅多普勒超声诊断缺血性视神经病

本文报告用经颅多普勒超声确诊缺血性视神经病2例,经治疗后视力恢复。经颅多普勒超声由眶窗探测眼动脉,是一种无损害、操作简便,可重复,可靠性大的检查方法。     

人工流产中三种镇痛方法的比较

10 99例行人工流产孕妇随机分为 4组 ,3组分别用异丙酚、笑气联合利多卡因、单纯利多卡因术中镇痛 ,对照组不用药。结果镇痛组镇痛总有效率明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,无痛率以异丙酚组最高 (P <0 .0 1) ,总有效率笑气联合利多卡因组与异丙酚组相比无显著差异 (P >0 .0 5 )。异丙酚镇痛效果最佳 ,但需呼吸循环监护 ,笑气联合利多卡因镇痛效果佳 ,手术要求简单 ,可在基层医院推广。