Blimp-1在系统性红斑狼疮患者外周血B细胞中的表达和临床意义

目的检测系统性红斑狼疮( SLE)患者和健康者外周血CD19+ B细胞中B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp-1) mRNA的表达,并探讨Blimp-1在SLE的临床意义。方法应用实时荧光定量PCR技术检测40例SLE患者和20例健康者外周血CD19+ B细胞中Blimp-1 mRNA的表达水平,应用流式细胞术检测外周血中CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞比例、CD19+CD27+记忆性B细胞/CD19+ B细胞比例,分析SLE患者Blimp-1表达与B细胞亚群及临床相关指标的相关性。结果① SLE 组 CD19+ B 细胞中 Blimp-1 mRNA的表达水平高于正常对照组( P<0.05)、活动组高于稳定组(P<0.05);② SLE组CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞比例显著高于正常对照组( P<0.01)、活动组高于稳定组( P <0.05);SLE 组与正常对照组外周血中 CD19+CD27-记忆性B细胞/CD19+ B细胞比例差异无统计学意义( P>0.05);③SLE患者Blimp-1表达与CD19-CD138+浆细胞/CD19+ B细胞比例呈正相关性(rs =0.336,P=0.034),与CD19+CD27+记忆性 B细胞/CD19+ B细胞比例无显著相关性(rs =-0.271,P=0.116),与抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白IgG呈正相关性( rs =0.493,P =0.006;rs =0.527,P=0.004),与抗核小体抗体、抗 C1q 抗体呈正相关性( rs =0.452,P =0.040;rs =0.522,P =0.015),与白细胞数量、血小板数量呈负相关性(rs =-0.367,P=0.046;rs =-0.386, P =0.035)。结论 Blimp-1在SLE患者B细胞中表达升高,与浆细胞明显相关,提示Blimp-1可能通过促进B细胞分化而参与SLE的发病。     

ZBTB20在SLE患者外周血B细胞中的表达和临床意义

目的 研究锌指和BTB结构域蛋白20 (ZBTB20)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血B细胞中的表达,并探讨ZBTB20在SLE中的临床意义.方法 采用RT-PCR技术检测36例SLE患者(SLE组)和30例健康对照者(对照组)外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平;Western blot检测分析外周血ZBTB20蛋白水平;流式细胞术检测B细胞亚群所占比例.分析SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达与B细胞亚群比例变化的关系及与临床指标(抗ds-DNA抗体、抗核抗体、免疫球蛋白IgG、抗ENA抗体)的相关性.结果 SLE组外周血CD19+B细胞中ZBTB20 mRNA的表达明显高于对照组(P＜0.05);SLE组患者外周血ZBTB20蛋白水平高于对照组(P＜0.05).与对照组相比,SLE患者外周血B细胞亚群,CD19+B细胞比例降低(P＜0.05),CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞之间的比值及CD19-CD138+浆细胞比例明显增高(P＜0.05);SLE患者B细胞中ZBTB20 mRNA的表达水平与CD19-CD138+浆细胞/CD19+B细胞的比值呈正相关(P＜0.05);ZBTB20 mRNA与抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白IgG、抗核抗体、抗ENA抗体均呈正相关(P＜0.05).结论 ZBTB20可能通过促进B细胞分化从而参与SLE发病.     

心肌梗死后心室重构与CD138+浆细胞的相关性研究

目的 研究心肌梗死后心室重构与静脉血CD138⁺浆细胞的相关性。方法 选取急性前壁心肌梗死且急诊行PCI治疗的患者40例为心肌梗死组,另外选取健康者40例为对照组。使用流式细胞技术检测静脉血CD138⁺浆细胞数量,超声心动图测定左室舒张末期容积(left ventricle end-diastolic volume, LVEDV)。结果 急性期心肌梗死组患者静脉血CD138⁺浆细胞数量较对照组显著升高(P＜0.01),且第3天达到高峰。心肌梗死后非重构组的静脉血CD138⁺浆细胞数量较心肌梗死后重构组高(P＜0.01),但在1个月后均恢复基础水平。结论心肌梗死患者血CD138⁺浆细胞数量明显升高,但其数量与心肌梗死后心室重构呈负相关。     

系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞及TGF-β的检测

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+CD25+FOXP3+T细胞及细胞因子TGF-β的变化,分析其在SLE发病机制中的作用。方法收集SLE患者及健康对照组外周抗凝静脉血,流式细胞仪检测CD4+CD25+FOXP3+T细胞的表达。ELISA法检测研究对象血清中TGF-β的水平。结果SLE患者的CD4+CD25+FOXP3+T细胞百分率低于健康对照组,患者血清中TGF-β水平明显低于健康对照组(P0.05)。结论CD4+CD25+FOXP3+T细胞数量减少和TGF-β含量降低可能与SLE发生有关。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T细胞体外活化特性研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性。方法采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达及不同体外刺激活化后的增殖能力。通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4表达水平来判断其在调节炎症免疫反应中的作用。结果 SLE患者外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SLE疾病活动组与稳定组之间差异无统计学意义。与佛波酯(PMA)和离子霉素的非特异性刺激相比,经抗CD3单克隆抗体和IL-2特异性诱导刺激对CD3+CD56+NKT样细胞的增殖能力更强,Th1型细胞因子IFN-γ表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4在两种刺激条件下几乎均不表达。结论 CD3+CD56+NKT样细胞通过分泌Th1型细胞因子IFN-γ来调节炎症免疫作用,SLE的发病可能与外周血CD3+CD56+NKT样细胞表达数量减少及其免疫功能严重失调有关。     

SLE患者CD4~+和CD8~+T淋巴细胞CD70的表达

目的了解SLE患者T淋巴细胞CD70 mRNA及其蛋白的表达情况,探讨CD70在SLE发病机理中的作用。方法用定量RT-PCR方法测定15例活动期、15例非活动期SLE患者和l5例正常人对照组外周血CD4+CD8+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平。用流式细胞仪检测各组的CD4+CD70+T/CD8+CD70+T淋巴细胞阳性率。结果活动期、非活动期SLE患者CD4+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平高于正常对照组,且活动期SLE患者CD4+T淋巴细胞的CD70mRNA转录水平高于非活动期SLE患者(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者CD8+T淋巴细胞CD70 mRNA转录水平与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者外周血CD4+CD70+T淋巴细胞阳性率高于正常对照组,且活动期SLE患者CD4+CD70+T淋巴细胞阳性率明显高于非活动期SLE患者(P0.05)。活动期、非活动期SLE患者CD8+CD70+T淋巴细胞阳性率与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD4+T淋巴细胞CD70的过度表达在SLE的发生发展中可能起作用,并且CD70过度表达可以作为SLE疾病活动的一个指标。     

系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞的表达

目的 探讨系统性红斑狼疮患者(SLE)外周血CD4+CD127-调节性T细胞(Treg)的表达水平及意义.方法 应用流式细胞术检测SLE患者(10例SLE活动期、10例SLE非活动期)和20例健康志愿者外周血CD4+、CD4+CD127-Treg及CD4+CD25+CD127-Treg的表达水平.结果 活动期组CD4+T细胞占淋巴细胞的比例显著高于非活动期组,而CD4-CD127-和CD4+CD25+CD127-Treg显著低于非活动组.非活动期组CD4+T淋巴细胞、CD4+CD127-Treg和CD4+CD25+CD127-Treg较健康对照组差异无显著性.结论 由于缺乏CD4+CD127-Treg,SLE免疫抑制功能降低,提示Treg可能在SLE的发病机制中发挥重要作用.     

The study of biological features of CD3+CD56+ NKT like cellsin peripheral blood of patients with systemic lupus erythematosus

目的 探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD3+CD56+自然杀伤样T(NKT样)细胞的表达以及体外活化后的增殖能力和生物学特性.方法 采用流式细胞仪检测30例SLE患者(疾病活动组20例,稳定组10例)和20例正常对照组外周血CD3+CD56+ NKT样细胞的表达及不同体外刺激活化后的增殖能力.通过检测Th1型细胞因子干扰素γ(IFN-γ)和Th2型细胞因子白介素(IL)-4表达水平来判断其在调节炎症免疫反应中的作用.结果 SLE患者外周血CD3+CD56+NKT样细胞的表达明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而SLE疾病活动组与稳定组之间差异无统计学意义.与佛波酯 (PMA)和离子霉素的非特异性刺激相比,经抗CD3单克隆抗体和IL-2特异性诱导刺激对CD3+ CD56+ NKT样细胞的增殖能力更强,Th1型细胞因子IFN-γ表达水平更高,差异有统计学意义(P<0.05),而Th2型细胞因子IL-4在两种刺激条件下几乎均不表达.结论 CD3+CD56+ NKT样细胞通过分泌Th1型细胞因子IFN-γ来调节炎症免疫作用,SLE的发病可能与外周血CD3+CD56+ NKT样细胞表达数量减少及其免疫功能严重失调有关.     

多发性骨髓瘤的免疫表型特征及其意义

目的探讨多发性骨髓瘤(MM)的细胞免疫表型特征及意义。方法应用多参数流式细胞术(MPFCM)测定多发性骨髓瘤30例和反应性免疫球蛋白增高症患者15例(对照组)骨髓细胞的免疫表型。结果 MM组CD138和CD38阳性率均为100%,CD56阳性率86.67%,CD117阳性率33.33%,CD19阳性率仅3.33%;对照组CD38、CD138阳性率均为100%,CD19阳性率93.33%,CD56阳性率6.67%,CD117不表达。MM组浆细胞比例及CD138、CD56、CD117表达率均高于对照组(P<0.01),CD19表达率低于对照组(P<0.01)。结论应用MP-FCM同时检测细胞表面CD38、CD138、CD19、CD56、CD117等抗原表达情况,可方便区分骨髓瘤细胞与良性浆细胞,是多发性骨髓瘤的重要诊断依据。     

骨桥蛋白在 SLE 肾损害 Th17细胞异常中的作用

目的：探讨骨桥蛋白( OPN)在系统性红斑狼疮(SLE)肾损害患者 Th17细胞异常中的作用。方法取40例健康者和50例 SLE 患者(其中,伴肾损害 SLE 患者25例、无肾损害的 SLE 患者25例的血清和肝素钠抗凝血,用ELISA 法检测血清中 OPN 和白介素-17(IL-17)的表达水平,用流式细胞术检测外周血中 CD3+ CD8- IL-17A + T 细胞的阳性率,并分析各组间差异,以及各因素间的相互关系。结果① SLE 肾损害患者组的 OPN、IL-17水平和 CD3+ CD8-IL-17A + T 细胞阳性率显著高于无肾损害的 SLE 患者组、健康对照组,差异均有统计学意义(P <0．01);无肾损害的 SLE患者组和健康对照组间 OPN、IL-17、CD3+ CD8- IL-17A + T细胞阳性率的差异均无统计学意义(P >0．05)。②血清中OPN 分泌与 IL-17水平、CD3+ CD8- IL-17A + T 细胞阳性率之间均成明显正相关性( P <0．01)。结论外周血中的OPN 对 SLE 肾损害患者的 Th17细胞异常起着重要的调控作用。     

系统性红斑狼疮合并冠状动脉性心脏病患者Th1／Th2失衡的研究

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）合并冠状动脉性心脏病（简称冠心病）患者的 Th1／Th2是否存在失衡状况。方法收集 SLE 患者（SLE 组）、SLE 合并冠心病患者（合并组）及健康对照者（对照组）外周血,real-time PCR 法检测外周血 Th1／Th2细胞转录因子 T-bet／GATA-3的表达;流式细胞术检测 Th1／Th2细胞内 IFN-γ及 IL-4水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者外周血清中 IFN-γ及 IL-4水平并与对照组比较。结果 SLE 组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显低于对照组（P＜0．05）。合并组患者外周血 Th1细胞转录因子 T-bet 表达水平、CD4＋ T 细胞内 IFN-γ分泌水平及血清 IFN-γ水平均明显高于 SLE 组患者及对照组（P＜0．05）;合并组患者外周血 Th2细胞转录因子 GATA-3表达水平、CD4＋ T 细胞胞内 IL-4分泌水平及血清 IL-4水平均明显低于 SLE 组患者及对照组（ P ＜0．05）。结论 SLE合并冠心病患者存在 Th1优势活化的 Th1／Th2失衡状态,这种失衡状态可能与疾病的发生发展有关。     

系统性红斑狼疮病人外周血浆细胞样树突状细胞中Toll样受体7的表达及其意义

目的:检测系统性红斑狼疮（SLE）病人外周血中浆细胞样树突状细胞（pDC）中Toll样受体7（TLR7）的表达,探讨其意义。方法:选取SLE病人52例（SLE组）和正常健康人28名（对照组）,利用流式细胞术检测外周血TLR7+的pDC细胞在各组中的比例。结果:SLE病人外周血单核细胞（PBMC）中pDC相对计数显著低于对照组（P<0.01）,SLE组和正常对照组髓样树突状细胞水平差异无统计学意义（P>0.05）。感染组SLE病人外周血pDC水平显著低于非感染组（P<0.01）,初发组SLE病人外周血髓样树突状细胞水平低于复发组（P<0.05）,pDC水平与外周血CRP呈负相关关系（P<0.05）。SLE病人外周血PBMC内pDC中TLR7+细胞的比例显著高于对照组（P<0.01）。血液系统受累组pDC内TLR7+细胞比例高于无血液系统受累组（P<0.05）。TLR7+pDC细胞比例在抗dsDNA抗体、抗Sm抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性组及阴性组之间差异均无统计学意义（P>0.05）;TLR7+pDC细胞比例和蛋白尿分级呈显著正相关关系（P<0.01）。结论:SLE病人外周血TLR7+的pDC细胞比例显著升高,且与临床病情活动性有一定的相关性。     

系统性红斑狼疮患者外周血浆细胞样树突状细胞的变化及意义

目的:探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中浆细胞样树突状细胞（pDC）及干扰素-α（INF-α）水平的变化及意义。方法:选取SLE患者60例（SLE组）和正常健康人30名（对照组）,利用流式细胞术检测外周血pDC在各组的相对计数;ELISA法测定血清中INF-α的浓度。结果:SLE患者外周血pDC相对计数显著低于对照组（P<0.01）。活动期SLE患者外周血pDC相对计数明显低于稳定期患者（P<0.01）。抗dsDNA抗体阳性的SLE患者外周血pDC的相对计数低于抗dsDNA抗体阴性的患者（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数与dsDNA定量和ANA定量均呈明显负相关关系（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数在P0抗体、抗U1RNP抗体、抗Sm抗体、抗组蛋白抗体、抗核小体抗体、抗SSA/Ro60抗体、抗SSA/Ro52抗体、抗SSB抗体阳性组和阴性组间差异均无统计学意义（P>0.05）。肾脏病变阳性组的SLE患者外周血pDC相对计数低于阴性组患者（P<0.01）;血液系统损害阳性组的SLE患者外周血pDC相对计数低于血液系统阴性组患者（P<0.01）;SLE患者外周血pDC相对计数在颊部红斑、光过敏、口腔溃疡、关节炎阳性组与阴性组间的差异均无统计学意义（P>0.05）。SLE患者外周血pDC相对计数与红细胞沉降率、C反应蛋白、免疫球蛋白G、免疫球蛋白A、补体3、补体4及系统性红斑狼疮疾病活动度评分均无相关关系（P>0.05）。SLE患者血清中IFN-α水平均显著高于对照组（P<0.01）。结论:SLE患者外周血pDC相对计数显著降低,SLE的pDC相对计数与病情相关,检测pDC相对计数可作为临床判断SLE病情活动的参考指标。     

VTRNA2-1在系统性红斑狼疮患者B 细胞中的高表达及其意义

目的： 检测系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者中T和B淋巴细胞中穹窿核糖核酸 2-1(vault ribonucleic acid 2-1,VTRNA2-1)基因的表达水平,初步探索SLE的发病机制。方法： 收集25 例健康对照者 和32 例SLE患者的外周血CD4+ T淋巴细胞,另外再收集62 例SLE患者(其中活动性SLE患者47 例,非活动性患者15 例)和29 例健康对照者的外周血CD19+ B淋巴细胞,采用real-time PCR检测VTRNA2-1 基因的表达水平。采用免疫共 沉淀实验寻找VTRNA2-1 的直接作用蛋白。结果： 通过对SLE 患者和健康对照者外周血T 细胞和B 细胞中的 VTRNA2-1 基因进行检测,发现SLE患者T细胞中的VTRNA2-1 基因表达水平与健康对照者相比较,差异无统计学 意义(P>0.05)。活动性和非活动性的SLE患者外周血B细胞中的VTRNA2-1 基因表达水平与健康对照者相比均显著增 高,差异均有统计学意义(分别P<0.01 和P<0.05)。免疫共沉淀实验证实VTRNA2-1 通过与蛋白激酶R(protein kinase R,PKR)特异性结合而发挥生物学功能。结论： VTRNA2-1 基因在SLE患者的B细胞中呈高表达,其机制可能是通 过调控PKR而发挥生物学功能。     

可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系

目的　检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础。方法　采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者 (n=51)以及健康体检者 (n=30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系。结果　与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0 05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0 05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者 (P<0 05);血清抗dsDNA抗体( +)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种 )异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( -)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0 05)。结论　SLE患者外周血某些T     

系统性红斑狼疮患者外周血调节性T细胞与IL-10及TGF-β_1的检测

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulation T cells,Tr细胞)及相关细胞因子的变化,分析它们在SLE发病机制中的作用。方法:收集SLE患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。PE标记的抗CD4单抗,FITC标记的抗CD25单抗,作双色流式细胞术,分析SLE患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率,ELISA法检测调节性T细胞相关细胞因子的表达。结果:SLE患者外周血Tr细胞的数量明显低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];患者血清中IL-10、TGF-β1的含量均低于正常对照组,差异有显著性[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml,P<0.05;TGF-β1:(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05]。患者外周血Tr细胞的比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量呈正相关(r1=0.53,r2=0.64,P<0.05)。结论:SLE患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与SLE的免疫学发病机制有关。     

Expression of Costimulatory Molecules B7／CD28 in Systemic Lupus Erythematosus

Systemiclupuserythematosus (SLE)isacom monchronicinflammatorydiseasewhichderivesfromimmunoloregulationdisorderofbody ,anditsetiologyandpathogenesisareunknown .Inrecentyears ,thestudiesreportedthatthe pathogenesisofSLEwascorrelatedwiththeabnormalpathwayofc…     

系统性红斑狼疮患者外周血辅助性T细胞亚型和细胞因子的检测及其临床意义

目的：探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血中产生白细胞介素22（IL-22）的辅助性T 细胞(Th)亚型Th22、Th17和Th1及其细胞因子的表达水平变化及其临床意义,为治疗SLE提供依据。方法：选取30例初发SLE患者（SLE组）和30名健康对照者（健康对照组）,采用流式细胞术检测2组研究对象外周血中Th22、Th17 （IL-22+Th17和IL-22－Th17）、Th1（IL-22+Th1和IL-22－Th1）细胞表达比率;ELISA法检测2组研究对象血浆中IL-22、IL-17和干扰素γ（IFN-γ）等细胞因子的表达水平;细胞比率和细胞因子表达水平之间相关性分析采用Spearman相关检验。结果：与健康对照组比较,SLE组患者外周血中IL-22+Th1、Th17和Th22细胞的比率明显升高（P<0.05）,SLE患者血浆中IL-17和IL-22的表达水平亦明显升高（P<0.05）;SLE患者Th22细胞比率与Th17（IL-22+和IL-22－）细胞比率之间呈正相关关系（r=0.721,P<0.0001;r=0.222,P=0.0132）,Th22细胞比率与血浆中IL-22的水平呈正相关关系(r=0.0326,P<0.0001)。SLE患者IL-22+CD4+T和IL-22－Th17细胞的比率随着疾病活动指数(SLEDAI)的升高而升高（r=0.549,P=0.0003;r=0.231,P=0.028）。有颜面部红斑或脱发、抗核抗体（ANA）阳性的SLE患者外周血中Th22细胞的比率均显著升高（P<0.05）;光过敏或抗dsDNA阳性的SLE患者Th17（包括IL-22+和IL-22－Th17）细胞的比率上升（P<0.05）。结论：以Th22为主的IL-22+ CD4+T细胞及其细胞因子IL-22可能在SLE的发病中起致病性作用,并可作为监测疾病严重程度的生物指标。