依那普利拉对严重烫伤大鼠早期心肌力学的影响

目的 了解依那普利拉对严重烫伤大鼠早期心肌力学的影响.方法 将84只SD大鼠背部造成30%TBSA的Ⅲ度烫伤后,随机分为烫伤组,伤后按Parkland公式腹腔注射等渗盐水;小剂量治疗组、中剂量治疗组、大剂量治疗组,伤后即刻分别腹腔注射1、2、4 mg/kg依那普利拉.烫伤组、小剂量治疗组伤后1、3、6、12、24 h,中剂量治疗组、大剂量治疗组伤后6、12 h左心室置管检测大鼠左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升/下降速率(±dp/dt max),并处死大鼠取心肌组织检测血管紧张素Ⅱ(AⅡ)含量.另取6只大鼠作为假伤组,模拟烫伤后检测以上指标.结果 伤后3～24 h,烫伤组及各剂量治疗组大鼠LVSP、LVEDP、±dp/dt max值普遍低于假伤组(P＜0.05或P＜0.01);而各剂量治疗组LVSP、LVEDP、±dp/dt max值普遍高于烫伤组(P＜0.05或P＜0.01);伤后6、12 h,大剂量治疗组±dp/dt max明显低于小、中剂量治疗组.伤后1 h,烫伤组心肌组织AⅡ含量[(53.0±2.6)pg/200 mg]明显高于假伤组[(14.8±0.7)pg/200 mg,P＜0.01],6 h达高峰,以后逐渐下降,伤后24 h仍明显高于假伤组(P＜0.01);伤后3～24 h.小剂量治疗组AⅡ含量均明显高于假伤组(P＜0.05或P＜0.01),但均低于烫伤组.伤后6 h烫伤组AⅡ含量为(145.2±14.5)pg/200 mg,高于小、中、大剂量治疗组[(65.1±0.9)、(53.6±1.1)、(34.2±0.9)pg/200 mg,P ＜0.01].结论 严重烫伤后早期心肌组织损害明显.心功能即明显下降,依那普利托注射液可以改善心肌力学指标、保护心功能,以小剂量效果最为明显.     

严重烫伤大鼠早期心肌抑制对肝肾肠损害的影响

目的 了解严重烫伤大鼠早期心肌抑制对肝、肾、肠损害及血流灌注的影响.方法 将32只Wistar大鼠按随机数字表分为假伤组、普萘洛尔组、烫伤对照组和烫伤+普萘洛尔组,每组8只.各组大鼠腹腔注射10 g/L戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉后,假伤组、普萘洛尔组置于37℃水中18 s致假伤,其余2组置于97℃水浴中18 s,造成30%TBSAⅢ度烫伤.伤后30 min按Parkland公式腹腔注射复方乳酸钠林格液(4 mL·kg-1·1%TBSA-1).普萘洛尔组、烫伤+普萘洛尔组补液的同时静脉注射普萘洛尔0.75 mg/kg.伤后6 h以多道生理信号采集仪检测大鼠动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)以及左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升/下降速率(±dp/dt max);以激光多普勒血流仪检测肝、肾、肠血流量;同时抽取大鼠静脉血检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、总胆汁酸(TBA)、β2-微球蛋白(β2-MG)浓度和二胺氧化酶(DAO)活性.结果 普萘洛尔组除LVEDP外,SBP、DBP、MAP、LVSP、±dp/dt max均低于假伤组(P<0.05).烫伤对照组与假伤组比较,心肌力学指标均下降(P<0.05).烫伤+普萘洛尔组与烫伤对照组比较,各项心肌力学指标均明显下降(P<0.05).与假伤组比较,烫伤对照组肝、肾、肠血流量显著降低(P<0.05);与烫伤对照组比较,烫伤+普萘洛尔组肝、肾、肠血流量降低(P<0.05).烫伤对照组血清cTnI、TBA、β2-MG和DAO值分别为(4.86±0.29)μg/L、(83.6±18.2)μmol/L、(2.75±0.19)mg/L、(1.45±0.09)×103U/L,均高于假伤组[(1.73±0.09)μg/L、(24±2.4)μmol/L、(1.15±0.18)mg/L、(0.87±0.13)×103U/L,P<0.05];与烫伤对照组比较,烫伤+普萘洛尔组血清cTnI(5.95±0.42)μg/L、TBA(125.8±21.3)μmol/L、β2-MG(3.25±0.17)mg/L、DAO(1.83±0.13)×103U/L均明显升高(P<0.05).结论 严重烫伤大鼠早期心肌抑制能加剧肝、肾、肠损害,提示"休克心"可能是严重烧伤后早期肝、肾、肠血流量减少和损害的启动因素之一.     

大鼠严重烧伤后早期心功能和脏器血流量的变化及关系

目的 了解大鼠严重烧伤后早期迅即发生的心功能和脏器血流量变化规律及关系.方法 将36只SD大鼠按随机数字表法分为假伤组(6只)和烧伤组(30只).烧伤组大鼠制成30%TBSA Ⅲ度烧伤模型,并设伤后10、30 min及1、3、6 h共5个时相点(每时相点6只);假伤组用37℃温水致假伤.检测2组大鼠心率、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升/下降速率(LV±dp/dt max),并以荧光微球法检测大鼠心脏、大脑、肾、脾、胃、回肠血流量.对LV±dp/dt max与心肌血流量进行相关性分析. 结果 (1)与假伤组比较,烧伤组大鼠伤后心率逐渐下降;伤后10 min,MAP、LVSP、LV+dp/dt max、LV-dp/dt max及心肌血流量均明显降低(F值分别为12.062、12.629、11.066、18.374、9.468,P值均小于0.01),其中心肌血流量由(6.8±0.8)mL·min~(-1)·g~(-1)降至(2.6±0.5)mL·min~(-1)·g~(-1).而后随着时间的推移,上述各指标逐渐回升,伤后1 h达最高值(LV-dp/dt max除外),此后再次降低,伤后3、6 h均显著低于假伤组(各指标F值同前,P值均小于0.01).烧伤组各时相点LVEDP与假伤组接近(F=1.205,P值均大于0.05).(2)与假伤组比较,烧伤组大鼠伤后10 min肾、脾、胃、回肠血流量亦明显下降(F值分别为22.694、20.856、12.653、7.293,P<0.05或P<0.01),但下降幅度不如心脏;伤后1 h或3 h达到最低值.烧伤组大鼠各时相点的大脑血流量与假伤组接近(F=1.812,P值均大于0.05).(3)Lv+dp/dt max和LV-dp/dt max与心肌血流量均呈显著正相关(r值分别为0.651和0.617,t值分别为4.456、4.222,P值均小于0.01). 结论 严重烧伤后极短时间内(伤后10 min)即可发生心肌缺血和心功能下降,心脏血流量迅即减少是心功能变化的重要原因,心肌损害和心功能下降可能是导致其他脏器血流量降低的重要因素之一.     

内皮素1与一氧化氮对大鼠严重烧伤后早期心功能迅即变化的影响

目的 了解内皮素1和NO是否参与严重烧伤后早期心功能的迅即变化. 方法 (1)取31只Wistar大鼠,按随机数字表法分为假伤A组(7只)、烧伤A组(10只)、非选择性内皮素A/B受体拮抗剂PD142893组(7只)和选择性内皮素A受体拮抗剂BQ-123组(7只).后3组大鼠制成30%TBSA Ⅲ度烧伤模型,其中PD142893组和BQ-123组伤后即刻分别经静脉给予PD142893(0.1me,/kg)和BQ-123(30 nmol·kg~(-1)·min~(-1)).假伤A组除致假伤外,其余处理同烧伤A组.采用生理信号采集处理系统,监测假伤A组和烧伤A组大鼠伤前及伤后10、30、60、180 min时的左心室收缩压(LVSP)、心率、左心室压力最大上升/下降速率(LV±dp/dt max);计算4组大鼠伤后10 min上述各项心功能指标较各自伤前值变化的百分率.(2)另取20只Wistar大鼠,按随机数字表法分为假伤B组(4只)和烧伤B组(16只),同前致伤.烧伤B组分别于伤后10、30、60、180 min(每时相点4只)取心脏组织,假伤B组伤后即刻取心脏组织,用ELISA法检测内皮素1和NO含量. 结果 (1)与伤前值比较,烧伤A组大鼠伤后10 min LVSP、心率、LV+dp/dt max、LV-dp/dt max即明显下降(F值分别为7.14、16.40、14.09、14.98,P<0.05或P<0.01).假伤A组大鼠受伤前后4项心功能指标无明显变化(F值依次为0.59、0.51、1.03、1.04,P值均大于0.05).(2)与伤前值比较,伤后10 min烧伤A组LVSP下降27%、心率下降14%、LV+dp/dt max下降51%、LV-dp/dt max下降50%.PD142893组伤后10 min LVSP下降14%、心率升高4%、LV+dp/dt max下降31%、LV-dp/dt max下降14%,与烧伤A组相比各指标变化情况显著改善(F值分别为8.10、6.50、23.67、10.39,P<0.05或P<0.01).BQ-123组大鼠心率较伤前升高3%、LV-dp/dt max下降26%,与烧伤A组相比明显改善(F值分别为6.50、10.39,P<0.05或P<0.01);其LVSP和LV+dp/dt max变化百分率与烧伤A组接近(F值分别为8.10、23.67,P值均大于0.05).(3)与假伤B组相比,烧伤B组伤后10、60、180min心肌组织内皮素1含量均升高(F=2.85,P<0.05或P<0.01),NO含量于伤后60、180 min明显升高(F=1.87,P值均小于0.05). 结论 内皮素1可能参与了大鼠严重烧伤后早期心功能的迅即下降,在伤后立即出现的心肌损害中起重要作用.     

胰岛素强化治疗对严重烫伤大鼠血清凋亡配体的作用

目的 了解大鼠严重烫伤后血清凋亡相关配体的变化及胰岛素强化治疗的作用.方法 将150只Wistar大鼠随机分为假伤组、烫伤组和治疗组.烫伤组和治疗组烫伤后立即腹腔注射等渗盐水40 mL/kg复苏;治疗组伤后24 h皮下注射胰岛素0.25 U/100 g,以后每12小时注射1次,共注射5 d.第1～5天的剂量分别为0.25、0.50、0.75、1.00、1.25 U/100 g,将大鼠血糖控制在3～6 mmol/L.假伤组浸入37℃温水假伤后不进行液体复苏.于伤后1、4、7、10、14 d抽取各组大鼠腹主动脉血,采用酶联免疫吸附测定法检测血清TNF-α、可溶性Fas配体(sFasL)、可溶性Fas受体(sFas);放射免疫法检测血清胰岛素水平.结果 烫伤组大鼠伤后1 d血清TNF-α水平[(30.9±8.7)ng/L]即达高峰,与假伤组[(12.7±2.8)ng/L]和治疗组[(16.8±4.7)ng/L]比较,差异有统计学意义(P<0.01),以后逐渐下降;治疗组大鼠伤后血清TNF-α水平虽然有所上升,但在伤后7 d内明显低于烫伤组(P<0.01).烫伤组、治疗组大鼠血清sFasL分别在伤后7～14 d和4～10 d高于假伤组(P<0.05),此后逐渐恢复至正常水平.伤后4～10 d治疗组sFas水平明显高于烫伤组及假伤组(P<0.05).伤后7、10 d烫伤组大鼠血清sFasL与sFas比值高于假伤组,而治疗组则在伤后7 d低于烫伤组(P<0.05),伤后14 d 2组均接近正常水平.烫伤组大鼠血清胰岛素水平在伤后4～10d低于假伤组(P<0.05).治疗组从伤后第1天起血清胰岛素水平即显著升高,伤后4 d[(327±15)μU/mL]达高峰,并显著高于假伤组[(42±15)μU/mL,P<0.01]和烫伤组[(28±10)μU/mL,P<0.01],随着治疗的进行,该指标逐渐恢复到正常水平.结论 胰岛素可能通过调节凋亡配体的分泌而抑制烧伤后细胞凋亡.     

"休克心"对严重烫伤大鼠早期肝肾肠损害的启动作用

目的 了解"休克心"对严重烫伤大鼠早期肝、肾、肠损害是否具有启动作用.方法 将56只Wistar大鼠随机分为对照组(8只),不予烫伤;烫伤组(48只),大鼠背部造成30%TBSA Ⅲ度烫伤,设伤后0.5、1.0、3.0、6.0、12.0和24.0 h观察时相点,每时相点8只大鼠.伤后30 min按Park-land公式腹腔注射乳酸林格液(4 mL·kg-1·1%TBSA-1).检测大鼠肝、肾、肠血流量;动脉收缩压(SBP)、动脉舒张压(DBP)、平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升/下降速率(±dp/dt max);抽取各组大鼠静脉血检测其血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、总胆汁酸(TBA)、β2微球蛋白(β2-MG)、二胺氧化酶(DAO)含量.结果 伤后1.0 h烫伤组大鼠肝、肾、肠血流量均明显降低.伤后12.0 h内均呈持续下降趋势,至伤后24.0 h仍显著低于对照组(P＜0.05或P＜0.01).烫伤组大鼠伤后1.0 h,LVSP和±dp/dt max即明显下降;伤后3.0 h,SBP、DBP、MAP明显下降;伤后6.0 h所有心脏功能指标均降低,至伤后24.0 h仍低于对照组(P＜0.01).与对照组[(1.71±0.07)μg/L]比较,伤后0.5 h烫伤组大鼠血清cTnI[(2.22±0.08)μg/L]即明显升高,伤后12.0 h[(7.07±0.44)μg/L]达峰值,伤后24.0 h[(4.57±0.30)μg/L]仍保持在较高水平(P＜0.01);伤后3.0 h血清TBA及伤后1.0 h血清β2-MG、DAO开始明显升高,并超过对照组(P＜0.05或P＜0.01),至伤后12.0 h仍呈上升趋势.结论 严重烫伤后心肌损害在时间上明显早于其他脏器,且与其他脏器损害指标和血流量呈显著相关,提示"休克心"可能是严重烫伤后早期肝、肾、肠血流量减少和损害的启动因素之一,但还需深入研究以进一步证明.     

口服补液复苏对严重烧伤家兔心肌力学指标的改善作用

目的 了解口服补液复苏对严重烧伤家兔心脏功能的保护作用. 方法 150只家兔随机分为正常对照组(6只)、烧伤组(42只)、立即补液组(42只)、延迟补液组(30只)和延迟快速补液组(30只).正常对照组不致伤不补液.其余4组家兔均造成40%TBSAⅢ度烧伤,烧伤组不补液,余下3组伤后用灌胃的方式进行口服补液复苏.经家兔颈动脉左心室内置管,测量正常对照组及4组致伤家兔伤后2、6、8、12、24、36、48 h的平均动脉压(MAP)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)以及左心室压力最大上升/下降速率(LV±dp/dt max),另检测休克期尿量. 结果烧伤组家兔LVSP、LV±dp/dt max较正常对照组显著下降.立即补液组和延迟快速补液组上述指标在伤后24 h内高于烧伤组,其中立即补液组LV+dp/dt max在伤后8 h达峰值[(892±116)kPa/s,1 kPa=7.5 mm Hg],LV-dp/dt max在伤后6 h达峰值[(724±149)kPa/s];伤后8 h,延迟快速补液组LV±dp/dt max均达峰值.延迟补液组伤后各时相点LVSP、LV±dp/dt max与烧伤组接近.各组家兔MAP、伤后第1个24 h尿量的比较情况大致与以上指标相似.烧伤组与其余4组比较,各时相点LVEDP差异无统计学意义(P>0.05). 结论严重烧伤家兔伤后24 h内给予有效的口服补液,可改善心肌力学指标;延迟复苏的家兔按照延迟复苏补液公式预估补液量,才能进行有效复苏.     

胰岛素对烫伤血清诱导骨骼肌成肌细胞凋亡的调控作用

目的 探讨胰岛素对烫伤大鼠血清诱导大鼠骨骼肌成肌细胞株L6凋亡的调控作用及机制.方法 体外培养L6细胞,按照随机数字表法分为对照组、烫伤血清组、胰岛素组和烫伤血清+胰岛素组.在上述4组细胞培养液中分别添加体积分数20％正常大鼠血清、体积分数20％烫伤大鼠血清、体积分数20％正常大鼠血清+100 nmol/L胰岛素、体积分数20％烫伤大鼠血清+100 nmol/L胰岛素,孵育48 h.行Hoechst 33258染色,于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡形态并计数凋亡细胞;行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双标记染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法检测细胞磷酸化(p一)蛋白激酶B(Akt)、p-磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Bax、Bcl-2、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3( caspase-3)的蛋白表达量.对实验数据行组间或配对t检验.结果 (1)倒置荧光显微镜下可见,烫伤血清组凋亡细胞为每视野(59.6±3 9)个,显著多于对照组、胰岛素组、烫伤血清+胰岛素组[每视野(4 9±2.6)、(5 5±2 1)、(19.7±2 3)个,t值分别为28.53、29.86、21.53,P值均小于0.01].(2)流式细胞仪检测结果显示,烫伤血清组细胞凋亡率为(18.5±1.8)％,明显高于对照组、胰岛素组及烫伤血清+胰岛素组[(1.1±0 6)％、(1 5±0 3)％、(7.8±0.6)％,t值分别为22.41、22 83、13 92,P值均小于0 01].(3)蛋白质印迹检测显示,烫伤血清组Bax蛋白表达量(1.12±0.63)及活化caspase-3蛋白表达量(2.15±0.51)明显高于对照组(0.16±0 03、0.21±0.03,t值分别为3 80、10 69,P值均小于0 01),p-Akt蛋白表达量(0.20±0.03)明显低于对照组(0 42±0 07,t=-8.46,P＜0.01);Bcl-2及p-PI3K蛋白表达量(0.19±0 03、0.17±0.03)与对照组(0.26±0 09、0 28±0.07)接近(t值分别为-2.73、-1.14,P值均大于0 05).与烫伤血清组比较,烫伤血清+胰岛素组Bax蛋白表达量(0.40±0.14)和活化caspase-3蛋白表达量(0.83±0.18)明显降低(t=-3.23,P ＜0.05;t =6.66,P ＜0.01),Bcl-2、p-Akt及p-PI3K蛋白表达量均升高(0.39±0.10、0 78±0 03、0.47±0.12,t值分别为4.07、18.71、5 05,P＜0.05或P＜0.01).结论 烫伤大鼠血清可显著促进骨骼肌成肌细胞凋亡,胰岛素能通过PI3K/Akt信号途径抑制细胞凋亡.     

褪黑素对烫伤大鼠毛囊细胞氧化应激损伤的保护作用

目的 了解早期应用褪黑素对烫伤大鼠皮肤残留毛囊细胞的保护作用.方法 将18只雄性SD大鼠分为烫伤组、治疗组和假伤组,每组6只.在烫伤组和治疗组大鼠背部造成30%TBSA的深Ⅱ度烫伤,假伤组浸入37℃水中25 s致假伤.烫伤组和治疗组大鼠在伤后1 h补充平衡盐液抗休克,假伤组不补液.治疗组大鼠伤后1 min和8、16 h腹腔注射褪黑素溶液(10 mg/kg).烫伤组和假伤组腹腔注射相同剂量的乙醇-等渗盐水溶液(两者体积比为1:99).于伤后6、12、24 h采集各组大鼠致伤区皮肤组织,检测丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量.采用原位缺口末端标记法和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)免疫组织化学法,检测致伤区皮肤组织残留毛囊细胞凋亡情况.结果 烫伤组大鼠伤后各时相点皮肤组织MDA含量均显著高于假伤组(P＜0.01),且伤后12 h升高达峰值;治疗组MDA含量较烫伤组明显降低(P＜0.05).GSH的变化情况与MDA相反.在荧光显微镜下可见残留的毛囊细胞呈蓝色,凋亡细胞呈绿色.烫伤组伤后6、12、24h细胞凋亡率分别为(20.2±3.4)%、(31.2±3.6)%、(22.4±2.7)%,均明显高于假伤组[(4.3±2.3)%、(5.1±2.5)%、(4.1±2.4)%,P＜0.01].治疗组伤后6、12、24 h细胞凋亡率分别为(10.9±3.2)%、(19.1±3.7)%、(13.1±3.4)%,均明显低于烫伤组(P＜0.05).烫伤组各时相点caspase-3阳性细胞评分均高于假伤组(P＜0.01),而治疗组均低于烫伤组(P＜0.05).结论 大面积深Ⅱ度烫伤后,大鼠氧化应激水平与毛囊细胞凋亡率关系密切;早期应用褪黑素,可以改善机体的氧化应激程度,进而对皮肤残留的毛囊细胞产生抗凋亡作用.     

血管紧张素(1-7)和依那普利拉对烧伤血清离体灌注大鼠心脏功能的影响

目的 了解血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]和依那普利托对烧伤血清离体灌注大鼠心脏功能的影响.方法 选取80只SD大鼠制备烧伤血清.另取24只SD大鼠心脏建立Langendofff离体灌注模型.根据灌注液不同,将大鼠心脏分为K-H液组、含体积分数20%烧伤血清的K-H液组(烧伤血清组)、含体积分数20%烧伤血清和2μg/mL依那普利拉的K-H液组(依那普利托组)、含体积分数20%烧伤血清和1 nmoL/mL Ang(1-7)的K-H液组[Ang(1-7)组].各组大鼠心脏连续灌注30min上述溶液后,检测其左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力最大上升/下降速率(±dp/dt max),以及冠状动脉血流量(CF)和冠状动脉流出液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量.结果 与K-H液组LVSP[(11.2±1.0)kPa,1 kPa=7.5 mm Hg]、+dp/dt max[(642±53)kPa/s]、-dp/dt max[(380±61)kPa/s]及CF值比较,烧伤血清组、依那普利拉组和Ang(1.7)组LVSP[(5.9±0.8)、(8.0±1.1)、(8.9±1.3)kPa]、+dp/dt max[(275±37)、(454±48)、(479±63)kPa/s]、-dp/dt max[(135±35)、(219±47)、(277±58)kPa/s]及CF值均明显降低(P<0.05或P<0.01),LVEDP和冠状动脉流出液中CK、LDH的含量升高.与烧伤血清组比较,依那普利拉组和Ang(1-7)组CF、LVSP及±dp/dt max均明显升高(P<0.05或P<0.01),LVEDP和冠状动脉流出液中CK、LDH的含量明显降低(P<0.01).结论 Ang(1-7)和依那普利拉均能有效改善烧伤血清离体灌注大鼠左心功能,减轻心肌损伤.     

牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性的保护作用

目的 了解牛磺酸对大鼠烫伤后心肌线粒体成分和酶活性变化的影响.方法 将120只大鼠背部脱毛后造成30%TBSA的Ⅲ度烫伤.分为烫伤组(60只),伤后腹腔注射等渗盐水(4mL·kg-1·1%TBSA-1);牛磺酸治疗组(60只),伤后腹腔注射20 g/L牛磺酸液(200 mg/kg).伤后1、3、6、12、24、48 h处死大鼠.取心肌组织检测心肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素c氧化酶(CCO)、超氧化物歧化酶(SOD)、Ca2+-腺苷三磷酸酶(ATPase)活性和细胞色素c、细胞色素aa3、丙二醛(MDA)、细胞质及线粒体内ca2+含量.另取10只大鼠作为对照组,模拟烫伤不予补液,1 h后处死大鼠取心肌组织检测以上指标.结果 烫伤组大鼠伤后1 h CCO活性即开始下降,伤后6、12 h下降最明显,而SDH活性在伤后6 h下降最明显,且各时相点均低于对照组;牛磺酸治疗组CCO和SDH下降不明显,伤后3、6、12 h CCO活性与烫伤组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).伤后3、6、12、及24 h烫伤组心肌线粒体细胞色素c和细胞色素aa3均显著降低.而牛磺酸组虽然有所下降,但以上4个时相点的值均高于烫伤组(P＜0.05).烫伤组SOD活性在伤后3、6、12 h均显著性下降,ca2+ATPase活性在伤后3、6、12及24 h均有不同程度下降;而牛磺酸治疗组虽然有所下降,但以上4个时相点SOD、Ca2+-ATPase值均高于烫伤组(P＜0.05).伤后3～48 h烫伤组、牛磺酸治疗组MDA值均高于对照组(P＜0.05),但牛磺酸治疗组低于烫伤组(P＜0.05).伤后1 h烫伤组大鼠心肌线粒体中Ca2+即开始升高为13.7±1.5,伤后3、6、12、24 h分别为24.8±2.6、29.7±3.1、16.3±1.9及13.5±1.7.均高于对照组(10.7±1.6,P＜0.05);心肌细胞质中ca2+在伤后3、6、12、24 h也明显高于对照组(P＜0.05).伤后3、6、12及24 h牛磺酸治疗组大鼠心肌线粒体中ca2+浓度分别为16.8±2.8、18.7±1.9、10.5±1.8及13.3±1.7,均低于烫伤组.结论 牛磺酸对烫伤大鼠心肌线粒体成分和酶活性破坏具有保护作用,其机制与提高线粒体清除氧自由基的能力和减轻Ca2+超载有关.     

去乙酰毛花甙与依那普利拉单用及配伍应用对烫伤大鼠脏器早期损害的影响

目的 了解去乙酰毛花甙与依那普利拉单用及两药配伍应用对严重烫伤大鼠心、肝、肾、肠早期损害的影响. 方法 将40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假伤组(模拟烫伤)、烫伤对照组、去乙酰毛花甙组、依那普利拉组、去乙酰毛花甙+依那普利拉组,每组8只.大鼠麻醉后给予背部30%TBSAⅢ度烫伤,伤后30 min腹腔注射乳酸钠林格液(4 mL·kg-1·1%TBSA-1)复苏治疗.补液同时去乙酰毛花甙组静脉注射去乙酰毛花甙0.2 mg/kg;依那普利拉组静脉注射依那普利拉1 mg/kg;去乙酰毛花甙+依那普利拉组静脉注射去乙酰毛花甙及依那普利拉,剂量同前.伤后6h,以多道生理信号采集处理系统记录各组大鼠心肌力学指标;以激光多普勒血流仪记录肝、肾、肠血流量;取大鼠静脉血检测心肌肌钙蛋白I(cTnI)、总胆汁酸(TBA)、β2微球蛋白(β2-MG)、二胺氧化酶(DAO). 结果 与假伤组比较,烫伤对照组大鼠各项心肌力学指标均显著降低;肝血流量为(158±32)血流灌注单位(PU)、肾(156±46)PU、肠(119±30)PU,亦显著降低(P＜0.05);血清cTnl(5.0±0.3)μg/L、TBA(82±23)μmol/L、β-MG(2.55±0.15)mg/L、DAO(1.52±0.08)kU/L,明显高于假伤组(P＜0.05).与烫伤对照组比较,去乙酰毛花甙组和依那普利拉组心肌力学指标均有不同程度提升,肝、肾、肠血流量增加(P＜0.05),血清cTnl、TBA、β2-MG浓度和DAO活性降低(P＜0.05).去乙酰毛花甙+依那普利托组大鼠心肌力学指标全部升高,血流量分别为肝(240±49)PU、肾(239±75)PU、肠(194±55)PU,明显升高(P＜0.05),血清cTnI为(3.4±0.2)μg/L、TBA(47±8)μmol/L、β2-MG(2.01±0.16)mg/L、DAO(1.17±0.15)kU/L,均明显降低(P＜0.05). 结论 严重烫伤后早期单用去乙酰毛花甙或依那普利拉,均能改善大鼠心功能,对肝、肾、肠损害有一定防治作用,两药配伍应用可产生协同作用.     

缺血后处理对缺血-再灌注心肌的保护作用及其与线粒体ATP敏感性钾通道的关系

目的探讨缺血后处理（IPo）的心肌保护作用及与心肌线粒体三磷酸腺苷（ATP）敏感性钾通道（mitoKATP）的关系,为药物后处理的研发提供依据。方法40只Wistar大鼠,建立大鼠离体心脏Langendorff灌注模型,采用随机数字表法分为5组,每组8只,正常对照组（NC组）：用K-H液持续灌注100min,不做任何处理;缺血-再灌注（I/R）组：全心缺血40min,再灌注60min;IPo组：全心缺血40min,再灌注10s,缺血10s,反复6次,然后持续再灌注58min;5-羟基癸酸（5-HD）组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注15min,再用不含5-HD的K-H液再灌注45min;IPo＋5-HD组：全心缺血40min后,先用含5-HD（100μmol/L）的K-H液再灌注10s,缺血10s,反复6次,再用含5-HD的K-H液持续灌注13min,然后用不含5-HD的K-H液再灌注45min。观察比较各组心功能、冠状动脉流量（CF）、冠状动脉流出液中心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量、心肌梗死（AMI）面积和心肌细胞超微结构改变。结果再灌注末IPo组左心室发展压（74.3±3.3mmHgvs.57.1±3.3mmHg,t=13.00,P=0.000）、＋dp/dtmax（1706.6±135.6mmHg/svs.1313.3±96.2mmHg/s,t=6.28,P=0.000）、-dp/dtmax（1132.8±112.1mmHg/svs.575.7±67.7mmHg/s,t=13.48,P=0.000）、CF（6.49±0.30ml/minvs.3.70±0.24ml/min,t=28.60,P=0.000）与I/R组比较均升高;左心室舒张期末内压（10.9±1.7mmHgvs.26.2±1.5mmHg,t=-19.21,P=0.000）,冠状动脉流出液中cTnI含量（0.62±0.01ng/mlvs.0.71±0.01ng/ml,t=-12.00,P=0.000）均降低,AMI面积与I/R组比较减少20.8%（P〈0.05）。IPo＋5-HD组对心肌的保护作用与IPo组相似,但作用轻于IPo组。电子显微镜观察结果表明,IPo和IPo＋5-HD可减轻I/R引起的心肌纤维和线粒体损伤。结论IPo对I/R心肌有保护作用,其作用与mitoKATP的激活有关。     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂(DADLE)对脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢的影响.方法清洁级健康雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=20):假手术组(S组)仅穿线,不结扎穿孔;脓毒症组(SEP组)采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型;DADLE1组和DADLE2组分别于制模前0.5 h和制模后即刻经腹腔注射DADLE 10 mg/kg,浓度为0.5mg/ml.于制模后即刻、2 4 6 h(T1～4)时记录心排血量(CO)、MAP、左心室收缩压(LVSP)和心室压力最大变化速率(±dp/dtmax),计算心指数(CI).于T4时从左颈总动脉及右颈外静脉取血样,计算氧供给(DO2)、氧消耗(VO2)、氧摄取率(ER02).结果 与S组比较,SEP组MAP、LVSP T2时升高,T3,4时降低,±dp/dtmax升高,DADLE1组和DADLE2组MAP T2时升高,T3,4时降低,LVSP T2,3时升高,T4时降低,±dP/dtmax升高,SEP组、DADLE1组和DADLE2组CI、DO2和VO2降低,ERO2升高.与SEP组比较,DADLE1组和DADLE2组MAP、LVSP、±dp/dtmax T3,4时升高,CI、DO2和VO2升高,ERO2降低(P＜0.05).DADLE1组和DADLE2组间上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DADLE能改善脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢.

Abstract：

Objective To investigate the effects of δ-opioid receptor agonist DADLE (D-Ala2-D-Leu5-enkephalin) on the hemodynamics and oxygen metabolism in rats with sepsis. Methods Eighty healthy male SD rats were randomly divided into 4 groups ( n = 20 each) : sham operation group (group S), sepsis group (group SEP) ,DADLE, group and DADLE2, group. Sepsis was induced by cecum ligation and puncture (CLP) in SEP, DADLE,and DADLE2 groups. In DADLE1 and DADLE2 groups, 0.5 mg/ml DADLE 10 mg/kg was injected intraperitoneally (IP) 0.5 h before CLP and immediately after CLP respectively. Mean arterial pressure (MAP), left ventricular systolic pressure (LVSP) and ± dp/dtmax were recorded at 0, 2, 4 and 6 h after CLP (T1-4). Blood samples from left common carotid artery and right external jugular vein were collected at T4 for blood gas analysis. The cardiac index (CI), O2 delivery (DO2), O2 consumption (VO2) and O2 extraction rate (ERO2) were calculated.Results Compared with group S, MAP and LVSP were significantly increased at T2, while decreased at T3,4, and ± dp/dtmax was significantly increased in group SEP, MAP was significantly increased at T2, while decreased at T3,4, LVSP was significantly increased at T2,3, while decreased at T4 , and ± dp/dtmax was significantly increased in DADLE, and DADLE2 groups, and CI, DO2 and VO2 were significantly decreased and ERO2 was increased in SEP, DADLE, and DADLE2 groups (P＜0.05). Compared with group SEP, MAP, LVSP and ± dp/dtmax at T3,4 and CI, DO2 and VO2 were significantly increased, while ERO2 was significantly decreased in DADLE1 and DADLE2 groups (P ＜ 0.05). There was no significant difference in the parameters mentioned above between DADLE1 and DADLE2 groups ( P ＞ 0.05). Conclusion δ-opioid receptor agonist DADLE can obviously improve the hemodynamics and oxygen metabolism in septic rats.     

舒芬太尼后处理和七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

目的 评价舒芬太尼后处理和七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠,体重230～250 g,成功制备Langendorff离体灌注模型的40个心脏随机分为4组(n=10):缺血再灌注组(Ⅰ组)、七氟醚后处理组(Ⅱ组)、舒芬太尼后处理组(Ⅲ组)和七氟醚联合舒芬太尼后处理组(Ⅳ组).采用K-H液平衡灌注(灌注压10 kPa)30 min,全心缺血40 min再灌注120 min.再灌注即刻时Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组进行药物后处理15 min:Ⅱ组K-H液中通入3.0%七氟醚,Ⅲ组K-H液中加入100 nmol/L舒芬太尼,Ⅳ组同时进行七氟醚后处理和舒芬太尼后处理.分别于平衡灌注末(基础状态)、再灌注15 min、30 min、60 min、90 min、120 min时记录左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室发展压(LVDP)、左室内压上升最大速率(+dp/dtmax)、左室内压下降最大速率(-dp/dtmax)、心率(HR)和灌脉流量(CF).再灌注5 min时,收集冠脉流出液,测定肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性.再灌注120 min时取心肌组织,测定心肌梗死体积、Bcl-2和Bax的表达水平,并计算Bcl-2和Bax表达的比值(Bcl-2/Bax).结果 与Ⅰ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组LVSP、LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax和CF升高,LVEDP和LDH、CK的活性降低,心肌梗死体积缩小,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高(P＜0.05或0.01);Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组间上述指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 舒芬太尼后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,联合七氟醚后处理时心肌保护作用并未增加,其心肌保护的机制与上调Bcl-2表达、下调Bax表达从而抑制细胞凋亡有关.     

不同剂量左旋甲状腺素钠预处理对幼龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的 评价不同剂量左旋甲状腺素钠预处理对幼龄大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雌性 Wistar大鼠48只,日龄35 d,体重120～140 g,采用随机数字表法,将其随机分为6组(n=8):对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和不同剂量左旋甲状腺素钠预处理组(LS1-4组).C组和I/R组大鼠采用普通饲料喂养7 d;LS1-4组大鼠除了采用普通饲料喂养之外,每天胃内灌注左旋甲状腺素钠10、20、40和80 μg/100 g.第8天时,抽取外周静脉血样,测定血清甲状腺激素水平.采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型.C组K-H液持续灌注80 min;其余各组K-H液平衡灌注30 min,然后全心缺血20 min,恢复灌注30 min.于平衡灌注20 min和再灌注30 min时,记录HR、SP、左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),计算再灌注30min时HR、SP、+dp/dtmax和-dp/dtmax的恢复率.于平衡灌注10 min和再灌注15 min时,收集冠状动脉流出液2 ml,测定CK-MB的活性.再灌注30 min时,取心室肌组织,采用Western blot法检测心肌热休克蛋白70(HSPT0)的表达,采用RT-PCR法测定甲状腺激素受体(TR)亚型(TRα1、TRα2和TRβ1)mRNA以及肌球蛋白重链α和β(MHCα和MHCβ)mRNA的表达.结果 与C组相比,I/R组HR、SP和±dp/dtmax的恢复率降低,冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌MHCα mRNA表达下调,LS1-4组SP和±dp/dtmax的恢复率降低,冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌HSP70和MHCα mRNA表达上调,LS2-4组血清甲状腺激素水平升高,心肌TRα1 mRNA表达上调(P＜0.05).与I/R组相比,LS1-4组HR和±dp/dtmax的恢复率升高,心肌HSP70表达上调,MHCa mRNA表达上调,MHCβ mRNA表达下调,LS1-3组冠脉流出液CK-MB活性降低,LS2-4组血清甲状腺激素水平升高,心肌TRα1 mRNA表达上调(P＜0.05).LS1组、LS2组、LS3组和LS4组的甲状腺激素血清水平随左旋甲状腺素钠剂量的增加逐渐升高(P＜0.05).与LS1组和LS2组相比,LS3组和LS4组冠脉流出液CK-MB活性升高,心肌HSP70表达下调(P＜0.05).结论 10 μg/100 g左旋甲状腺素钠胃内灌注预处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,且不会导致甲状腺激素水平升高,其机制可能与心肌HSP70和MHCα mRNA表达上调有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of preconditioning with different doses of levothyroxine sodium on myocardial ischemia-reperfusion (I/R) injury in immature rats. Methods Forty-eight female immature Wistar rats, aged 35 days, weighing 120-140 g, were randomly allocated into 6 groups ( n = 8 each): control group (group C), I/R group, and preconditioning with levothyroxine sodium 10, 20, 40 and 80 μg/100 g groups (groups LS1-4 ) . The rats received levothyroxine sodium 10, 20, 40 and 80 μg/100 g through a gastric tube every day for 7 days in groups LS1-4 , respectively. Venous blood samples were taken on 8th day for determination of serum thyroid hormone levels. The hearts were removed from the animals and perfused in a Langendorff apparatus with K-H solution saturated with 95% O2-5% CO2 at 37 ℃. The hearts were continuously perfused for 80 min in group C. After 30 min of equilibration, the isolated hearts were subjected to 20 min of ischemia followed by 30 min of reperfusion in I/R and LS1-4 groups. HR, SP and ± dp/dtmax were recorded at 20 min of perfusion and 30 min of reperfusion. The recovery rates of HR, SP and ± dp/dtmax were calculated at 30 min of reperfusion. The coronary effluent was collected at 10 min of perfusion and 15 min of reperfusion for determination of creatine kinase (CKMB) activity. The samples of ventricular myocardial tissues were taken at 30 min of reperfusion to detect the expression of heat shock protein 70 (HSP70), thyroid hormone receptor (TR) mRNA (TRa, , TRoj and TRft ) and myosin heavy chain (MHC) mRNA. Results Compared with group C, the recovery rates of HR, SP and. ± dp/dtmax were significantly decreased, the CK-MB activity was significantly increased, and MHCα mRNA expression was down-regulated in group I/R, the recovery rates of SP and ± dp/dtmax were significantly decreased, the CK-MB activity was significantly increased, and the expression of HSP70 and MHCα mRNA was up-regulated in groups LS1-4, and the serum thyroid hormone level was significantly increased and the expression of TRa, mRNA was up-regulated in groups LS2-4 ( P ＜ 0.05) . Compared with group I/R, the recovery rates of HR and ± dp/dtmax were significantly increased, the pression of HSP70 and MHCa mRNA was up-regulated, and the MHCJ3 mRNA expression was down-regulated in groups LS1-4 the CK-MB activity was significantly decreased in groups LS1-3, and the serum thyroid hormone level was significantly increased and the expression of TRα1, mRNA was up-regulated in groups LS2-4 ( P ＜ 0.05) . The serum thyroid hormone level increased gradually with the increase in the dose of levothyroxine sodium in groups LS1-4 ( P ＜ 0.05) . The CK-MB activity was significantly higher, while the HSP70 expression lower in groups LS3-4 than in groups LS1-2 (P ＜ 0.05). Conclusion Preconditioning with levothyroxine sodium 10 μg/100 g can alleviate the myocardial I/R injury in immature rats and does not lead to the increase in the level of thyroid hormone, and the up-regulation of HSP70 and MHCa mRNA expression may be involved in the mechanism.