N- 乙酰半胱氨酸对丙酮醛诱导的人肾小管 上皮细胞损伤的保护作用及机制研究

目的 探讨N- 乙酰半胱氨酸（NAC）对丙酮醛引起人肾小管上皮细胞（HK-2 细胞）损伤的保护作 用及其可能机制。方法 HK-2 细胞分为6 组：对照组、丙酮醛组、丙酮醛+ 不同浓度NAC（1、2、4 及8 mmol/L） 处理组。采用CCK-8 检测细胞活力,DAPI 染色观察细胞核形态,罗丹明123 染色及流式细胞仪检测细胞线粒 体膜电位,Western blot 检测抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、Cleaved Caspase-3 以及磷酸化ERK1/2（p- ERK1/2）蛋白表达水平。结果 与对照组比较,HK-2 细胞经400 μmol/L 丙酮醛处理后,细胞活力、线粒体 膜电位及Bcl-2 蛋白表达水平降低,凋亡细胞数增多,Bax、Cleaved Caspase-3 及p-ERK1/2 蛋白表达水平则升 高。而经不同浓度的NAC 干预后,可以逆转丙酮醛对HK-2 细胞的上述作用。结论 NAC 对丙酮醛诱导的 HK-2 细胞损伤具有保护作用,其机制可能与其抗凋亡及抑制ERK1/2 信号通路有关。     

丹参酮ⅡA对缺氧/复氧损伤肾小管上皮细胞的作用 及机制研究

目的：探讨丹参酮磺酸钠ⅡA（TanshinoneⅡA,TSNⅡA）对缺氧/复氧（hypoxia/reperfusion,H/R）肾小管上皮细胞（human kidney-2,HK-2）氧化应激和凋亡的影响。方法：取传代培养的HK-2细胞建立H/R诱导细胞模型,实验分为正常对照组,单纯H/R组,H/R+20 μg/mL TSN ⅡA组,H/R+10 μg/mL TSN ⅡA组,H/R+5 μg/mL TSN ⅡA组共5组。光镜下观察各组细胞的形态变化;CCK-8法测定H/R HK-2细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;荧光显微镜观察细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的产生;Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果：与正常对照组比较,单纯H/R组HK-2细胞增殖活性明显减少,为（43.6±10.1）%;中低浓度TSN可提高H/R HK-2细胞的增殖活性,10 μg/mL浓度的TSNⅡA对H/R HK-2细胞的增殖具有最明显的保护作用,为（79.1±11.1）%,与单纯H/R组比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。20 μg/mL浓度TSNⅡA组相对于10 μg/mL浓度组对细胞增殖有一定的抑制作用,为（51.0±10.4）%（P＜0.05）。与H/R组比较,共聚焦荧光显微镜下TSNⅡA减少细胞内活性氧产生。流式细胞术检测发现各浓度TSNⅡA均对H/R HK-2细胞凋亡有一定抑制作用,其中以20 μg/mL最为明显（P＜0.05）。Western blot结果提示TSNⅡA作用H/R HK-2细胞后凋亡抑制蛋白Bcl-2上调,而促凋亡蛋白Bax下调。结论：TSNⅡA可能通过抑制氧化应激反应减少细胞凋亡,对H/R HK-2细胞产生保护作用。     

氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞MAPKs的激活及N-乙酰半胱氨酸的干预作用

目的探讨氧化应激对肺泡Ⅱ型上皮细胞（alveolar type Ⅱ epithelial cells,ATⅡ）丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinases,MAPKs）活化的影响及N-乙酰半胱氨酸（N-Acetylcysteine,NAC）对MAPKs活化及细胞存活凋亡的干预。方法原代培养大鼠ATⅡ,分为4组：正常对照组、NAC组、H2O2组和H2O2＋NAC组。电镜观察H2O2刺激后细胞形态改变;四甲基偶氮唑盐反应比色法（MTT法）检测各组细胞存活率;流式细胞术检测凋亡率和细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平;蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测p-ERK、p-p38和p-JNK的表达。结果与正常对照组比较,H2O2刺激后ATⅡ呈典型凋亡改变,细胞存活率下降（P〈0．05）,凋亡率和细胞内ROS水平上升（P〈0．05）,p-ERK、p-p38和p-JNK的表达也明显增加（P〈0．05）,而NAC干预后可提高细胞存活率,降低凋亡率和细胞内ROS水平,并抑制p-ERK、p-p38和p-JNK的表达。结论氧化应激能激活MAPKs并诱导ATⅡ凋亡,NAC通过清除细胞内ROS和抑制MAPKs的磷酸化而对ATⅡ起保护作用。     

马兜铃酸致肾小管上皮细胞损伤中p53和Caspase-3活性的变化

目的：研究马兜铃酸（AA）对人近端肾小管上皮细胞（HK-2）毒性作用中053和Caspase-3活性的改变,对其在AA肾毒性作用中的意义进行探讨．方法：用乳酸脱氢酶（LDH）释放试验测AA对HK-2的直接毒性作用,相差显微镜观察细胞形态学改变,Hoechsd3258染色法观察细胞凋亡形态的改变,流式细胞技术测细胞凋亡百分率,RT-PCR法测p53mRNA的表达水平,分光光度法测细胞Caspase-3活性改变．结果：AA浓度为80,160mg／L时,LDH释放率显著增高（P〈0．01）;10mg／LAA可诱导HK-2细胞凋亡百分率显著增高,AA为40mg／L时,细胞凋亡形态改变最明显和细胞凋亡比例最高（P〈0．01）;各组HK-2细胞053mRNA表达水平有统计学差异;40mg／LAA诱导HK-2细胞凋亡时,细胞内Caspase-3活性显著升高（与正常组比较,P〈0．01）．结论：AA能诱导HK-2细胞凋亡,其凋亡途径可能是非053依赖途径;凋亡过程中存在Caspase-3酶的激活．     

5-Aza-2'-dc预处理致敏百草枯对V79细胞活性氧及Bcl-2/Bax表达的影响

［摘要］目的　研究DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷（5-Aza-2'-dc）与百草枯联合对V79细胞作用后的活性氧含量及抗凋亡Bcl-2蛋白和促凋亡Bax蛋白表达的影响．方法　V79细胞经传代培养后分为5-Aza-2'-dc作用组（A组）、百草枯作用组（B组）、5-Aza-2'-dc加百草枯作用组（C组,即先应用5-Aza-2'-dc对V79细胞进行预处理12h,然后给予百草枯作用12h）、对照组（D组）．采用2,7二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH-DA）荧光探针装载,流式细胞仪测定各实验组V79细胞内活性氧含量,Western blot检测各实验组V79细胞内抗凋亡Bcl-2蛋白和促凋亡Bax蛋白的表达情况．结果　5-Aza-2'-dc与百草枯联合作用组（C组）V79细胞内活性氧含量、抗凋亡Bcl-2蛋白、促凋亡Bax蛋白表达与5-Aza-2'-dc组（A组）、百草枯组（B组）和对照组（D组）比较有统计学差异（P＜0.05）;C组V79细胞内抗凋亡Bcl-2蛋白表达、抗凋亡Bcl-2蛋白/促凋亡Bax蛋白比值降低,活性氧含量和促凋亡Bax蛋白表达升高．结论　5-Aza-2'-dc调控DNA甲基化可能通过活性氧代谢失衡、细胞调亡来促进百草枯对V79细胞的毒性损伤．     

刺五加叶皂苷B对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用

目的：探讨刺五加叶皂苷B（C-B）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的乳鼠心肌细胞凋亡的影响,阐明其对氧化应激损伤所致的心肌细胞凋亡的抑制作用。方法：乳鼠心肌细胞行原代培养,取自主搏动良好的心肌细胞随机分为正常对照组、H2O2 损伤组(200 μmol•L^-1H2O2诱导心肌细胞凋亡)、100 mg•L^-1C-B 组和200 mg•L^-1 C-B 组,倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活率,AnnexinⅤ-FITC 流式细胞术检测凋亡率,分光光度法检测Caspase-3活性,免疫印迹法检测细胞Caspase-3、PARP、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：与正常对照组比较,200 μmol•L^-1H₂O₂组心肌细胞有损伤性改变,细胞
存活率明显降低（P<0.001）,凋亡率升高（P<0.001）,Caspase-3活性增加（P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达减少,Caspase-3及Bax蛋白表达增多,PARP蛋白降解增多。与H2O2损伤组比较,100及200 mg•L^-1C-B组心肌细胞损伤性改变均减轻,细胞存活率增加（P<0.05或P<0.01）,凋亡率降低（P<0.001）,Caspase-3活性降低（P<0.05或P<0.01）,细胞Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达和Caspase-3蛋白表达减少,PARP蛋白降解减少（依据电泳条带的宽窄及明暗度判断蛋白表达程度）,且200 mg•L^-1C-B组的作用更明显。结论：C-B对H₂O₂诱导的心肌细胞凋亡有一定的抑制作用,可能与其调节细胞内凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达有关。     

类风湿关节炎患者外周血CD4+T细胞凋亡及其相关信号蛋白表达的检测和临床意义

目的探讨CD4~＋T细胞凋亡在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）发病机制中的作用及其凋亡机制。方法应用流式细胞术分析类风湿关节炎患者及健康对照组外周血CD4~＋T细胞凋亡指标AnnexinV水平及凋亡相关信号蛋白Caspase-3,Caspase-8,促凋亡基因Fas和抑凋亡基因Bcl-2表达水平;同时对CD4~＋T细胞凋亡相关信号蛋白ESR、RF和DAS 28水平与临床活动相关指标进行相关性分析。结果与健康对照组相比,RA活动期患者CD4~＋T细胞数增加[（40.91±2.73）%vs（31.40±2.71）%,P〈0.05],CD4~＋T cell凋亡指标AnnexinV水平减少[（2.27±1.43）%vs（8.10±2.06）%,P〈0.05];RA患者外周血中CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达较健康对照组降低差异无统计学意义[（63.12±4.61）%vs（84.13±1.72）%,P〈0.01],抑凋亡基因Bcl-2表达增加[（93.58±2.36）%vs（75.14±5.70）%,P〈0.05],Caspase-8减少[（18.54±15.23）%vs（3.02±1.39）%,P〈0.05],Caspase-3表达无差异无统计学意义[（2.17±1.19）%vs（2.53±1.46）%,P〉0.05];CD4~＋T细胞促凋亡基因Fas表达与DAS28评分呈负相关（r=-0.89,P=0.04,P〈0.05）,Bcl-2与DAS28评分呈正相关（r=-0.97,P=0.00,P〈0.01）。结论RA患者CD4~＋T细胞数量增多与其凋亡减少有关,这可能是导致该病自身免疫反应不能控制的重要原因之一。RA患者外周血CD4~＋T细胞凋亡减少与促凋亡基因Fas表达降低、凋亡相关蛋白Caspase-8表达下降及抑凋亡基因Bcl-2表达增高有关。Fas和Bcl-2的表达可作为评价临床活动性的敏感指标。     

三氧化二砷对黑素瘤B16细胞内活性氧自由基的影响

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对黑素瘤B16细胞增殖及细胞内活性氧自由基（ROS）水平的影响。方法：30μmol/LAs2O3与500μmol/L N-乙酰半胱氨酸（N-acetylcysteine,NAC）分别单独或联合作用于B16细胞,应用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞生长抑制情况;流式细胞术检测ROS水平。结果：As2O3能明显抑制B16细胞的增殖,NAC可部分拮抗As2O3对黑素瘤细胞的杀伤效应及诱导凋亡效应。As2O3作用1 h后的B16细胞内ROS水平比对照组升高（P〈0.01）,4 h达到高峰,24 h有所下降,与对照组差异均有统计学意义（P〈0.01）。ROS升高的趋势可被抗氧化物NAC部分阻断（P〈0.05-P〈0.01）。结论：As2O3诱导B16细胞凋亡与ROS水平改变有关,As2O3可通过提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用,这也可能是As2O3抗黑素瘤的途径之一。     

活性氧激活线粒体凋亡通路介导高糖诱导心肌细胞凋亡的研究

目的探讨氧化应激和p53介导的线粒体凋亡通路在高糖诱导乳鼠心肌细胞凋亡的作用。方法将培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机分为四组：对照组、高糖组（葡萄糖浓度为25mmol/L）、高糖＋抗氧化剂组（抗氧化剂浓度为10mmol/L）和高糖＋p53抑制剂组（p53抑制剂浓度为50μmol/L）。荧光分光光度计检测细胞内的活性氧,分光光度计检测上清液中的超氧化物歧化酶,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot对各组细胞p53和Caspase-9进行半定量分析。结果与对照组相比,高糖组心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显升高（P〈0.01）,上清液中的SOD含量明显降低（P〈0.01）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达增多（P〈0.01）。与高糖组相比,高糖＋抗氧化剂组心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显降低（P〈0.01）,上清液中SOD明显升高（P〈0.01）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达减少（P〈0.01）。与高糖组相比,高糖＋p53抑制剂组的心肌细胞凋亡率（P〈0.01）和ROS明显降低（P〈0.05）,上清液中SOD含量升高（P〈0.05）,Caspase-9（P〈0.01）和线粒体蛋白p53表达减少（P〈0.01）。结论高糖可能通过产生的活性氧介导p53转位到线粒体激活线粒体凋亡通路,引起心肌细胞凋亡。     

虾青素通过SIRT1/FOXO3a信号通路预防低渗性对比剂诱导的急性肾损伤的实验研究

目的 探讨虾青素（astaxanthin,AST）通过沉默信息调节因子（Sir2）家族成员之一的SIRT1/叉头框蛋白（FOXO3a）对碘海醇诱导的人肾小管上皮（HK-2）细胞氧化损伤的作用。方法 HK-2细胞株培养贴壁后随机分为对照组、二甲基亚砜（DMSO）对照组、碘海醇组、碘海醇+SIRT1抑制剂尼克酰胺（niacinamide,NA）组、碘海醇+FOXO3a siRNA组、碘海醇+低、高剂量虾青素（1.0、10.0μmol/L）组,继续培养然后应用细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）的水平,蛋白免疫印迹法检测细胞中SIRT1及FOXO3a的蛋白水平。结果 与对照组相比,碘海醇组、碘海醇+低、高剂量虾青素组细胞存活率降低,并且随着碘海醇剂量的增加,抑制作用增强;虾青素组（在一定浓度范围内）可改善碘海醇对HK-2细胞增殖的抑制作用,一定范围内剂量增加,改善能力越强。加入碘海醇后,细胞内ROS水平明显增加,虾青素预处理后,ROS水平下调。碘海醇使SIRT1蛋白的表达上调,同时降低了叉头框蛋白（FOXO3a）的表达,虾青素可以拮抗这一作用,在一定浓度范围内,随着浓度增加,拮抗作用增强。碘海醇作用下,SIRT1抑制剂NA可以降低SIRT1的表达,增加叉头框蛋白的表达,FOXO3a siRNA使FOXO3a的表达下降,但对SIRT1的表达无明显影响。结论 虾青素可以对抗碘海醇诱导的HK-2的氧化损伤,其可能的机制与降低内皮细胞SIRT1的表达有关,且在FOXO3a的上游发挥对抗碘海醇诱导的氧化损伤作用。     

补阳还五汤对氧化应激诱导心肌细胞凋亡及5-LOX表达的影响

目的探讨补阳还五汤对氧化应激诱导乳鼠心肌细胞凋亡及5脂氧合酶(5-LOX)表达的影响。方法 SD乳鼠心肌细胞原代培养,不同剂量补阳还五汤预处理24 h后过氧化氢(H2O2)诱导心肌细胞氧化损伤。采用MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测心肌细胞凋亡情况,Western-blot检测5脂氧合酶(5-LOX)、Bax和Bcl-2的表达。结果 MTT结果显示,与对照组及补阳还五汤组比较,H2O2组心肌细胞活力显著降低(P0.01);与H2O2组相比,补阳还五汤组心肌细胞活力显著提高(P0.01)。流式细胞仪分析显示,H2O2组心肌细胞凋亡率为(19.47±1.31)%,明显高于对照组的(1.36±2.30)%,差异有统计学意义(P0.01);补阳还五汤低、中、高剂量组的细胞凋亡百分率分别为(13.25±2.84)%、(11.50±3.43)%、(9.94±4.01)%,明显低于H2O2组(19.47±1.31)%,差异有统计学意义(P0.01)。Western-blot结果显示,H2O2组心肌细胞Bcl-2蛋白表达比对照组及补阳还五汤组减少,5-LOX及Bax蛋白表达比对照组及补阳还五汤组高,差异均有统计学意义(P0.01)。不同剂量的补阳还五汤组Bcl-2蛋白表达高于H2O2组,5-LOX及Bax蛋白表达比H2O2组少(P0.01)。结论补阳还五汤能显著抑制氧化应激诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,并且呈剂量依赖性,补阳还五汤抑制心肌细胞凋亡的作用可能与抑制5-LOX表达有关。     

厄洛替尼对MKN45细胞株放射增敏机制的实验研究

目的观察厄洛替尼联合放射线对MKN45细胞的影响,初步探讨厄洛替尼对其放射增敏机制。方法通过MTT法检测厄洛替尼、5-氟尿嘧啶（5-Fu）对MKN45细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测MKN45细胞经厄洛替尼、5-Fu及联合放射线处理后细胞的7周亡率及周期分布情况;WesternBlots法检测厄洛替尼、5-Fu及联合放射线对MKN45细胞的Bax与Bcl-2蛋白表达的影响。结果厄洛替尼、5-Fu均能抑制MKN45细胞的生长,与药物浓度及作用时间呈正相关（P〈0．01）。厄洛替尼联合组使G2／M、G0／G1期细胞比率增加最明显,与5-Fu联合组比较有统计学意义（70．32±0．65vs58．25±0．42,P〈0．01）;细胞凋亡率增加最多,与5-Fu联合组比较有统计学意义（19．21±1_23 vs 13．11±0．76,P〈0．01）;厄洛替尼联合组作用于细胞后,Bcl-2蛋白表达明显减少,Bax蛋白表达则明显增加,与其他组比较差异显著（P〈0．01）。结论厄洛替尼的放射增敏机制与增加MKN45细胞的细胞凋亡率、G2／M和GO／G1期细胞比率;降低Bcl-2、升高Bax蛋白表达,从而降低Bcl-2／Bax比率有关。     

法舒地尔减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤机制

目的 探讨盐酸法舒地尔减轻大鼠急性心肌缺血再灌注损伤,抑制细胞凋亡,发挥药物后适应作用的可能机制.方法 将90只SD大鼠随机均分为五组：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后适应组（IPost组）、盐酸法舒地尔组（FH组）、盐酸法舒地尔＋PI3K抑制剂（LY294002）组（FH ＋Ⅰ组）.测定各组大鼠心肌细胞Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶（ROCK）、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Akt、P-Akt的表达.结果 与I/R组（ROCK1：2.94±0.13）相比,IPost组（ROCK1：2.79±0.11）、FH组（ROCK1：2.83 ±0.10）、FH ＋Ⅰ组（ROCK1：2.85 ±0.26）的ROCK1表达无明显变化;与I/R组（Bcl-2：1.11±0.12,P-Akt：1.09±0.06,Bax：1.74 ±0.06,Caspase-3：1.32±0.12）相比,FH组（Bcl-2：1.76±0.08,P-Akt：1.73±0.05,Bax：0.98±0.14,Caspase-3：0.97±0.06）与IPost组（Bcl-2：1.74±0.06,P-Akt：1.37±0.05,Bax：0.97±0.11,Caspase-3：1.07±0.08）的Bcl-2、P-Akt升高（P＜0.05）,Bax及Caspase-3降低（P＜0.05）;与FH组相比,FH＋Ⅰ组（Bcl-2：1.05±0.12,P-Akt：1.21±0.06,Bax：1.61 ±0.11,Caspase-3：1.42±0.11）的Bcl-2、P-Akt表达降低,Bax及Caspase-3表达升高（P＜0.05）.结论 盐酸法舒地尔后适应效应机制可能与抑制ROCK活性及激活PI3 K-Akt通路有关.     

锌和N-乙酰半胱氨酸对镉致人正常肝细胞HL-7702凋亡的拮抗作用研究

目的：探讨氯化锌（ZnCl：）和N-乙酰半胱氨酸（N—acetylcysteine,NAC）对镉所致人正常肝细胞HL-7702凋亡的拮抗作用。方法：体外培养的人正常肝细胞HL-7702分别以0、10、20、40、80、160Ixmol／L的氯化镉（CdCl2）处理24h,ZnCl,和NAC顸处理组分别在各浓度的CdCl2处理前以25．0、50．0、100．0、200．0μmol／L的氯化锌和2．5、5．0、10．0、20．0mmol／LNAC预处理24h,MTT法测定各组HL-7702细胞的相对存活率;流式细胞术Annexin—V—PI双染法检测细胞凋亡百分率。结果：随着镉处理浓度的增加,氯化镉对细胞活力的抑制作用增强,40、80、160ixmol／L的镉处理组细胞相对存活率明显降低,50ixmol／L锌预处理组在CdCl：剂量为40、80μmol／L时,细胞相对存活率显著高于相应剂量的单纯镉处理组（P〈0．01）,10mmol／LNAC预处理组只在40mmol／LCdCl2组细胞相对存活率显著高于相应剂量的单纯镉处理组（P〈0．05）;与0μmol／L镉处理组比较,40、80、160μmol／L镉处理组HL-7702细胞的凋亡百分率显著升高（P〈0．01）;与40μmol／L镉处理组比较,100μmol／L锌预处理组细胞凋亡率显著降低（P〈0．01）;5．0、10．0、20．0mmol／LNAC预处理可有效拮抗镉诱导的HL-7702细胞凋亡（P〈0．05）。结论：锌和NAC对镉致HL-7702细胞损伤和凋亡有明显的拮抗作用。     

百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC-3细胞体外生长的影响

目的 探讨百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法检测细胞相对活性,Hoechst染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、XI-AP）、半胱天冬酶（cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9）、PTEN、Akt及phospho-Akt蛋白的表达.结果 百里醌呈浓度依赖性地抑制胰腺癌BxPC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡.吉西他滨组（GEM）、百里醌组（TQ）、百里醌联合吉西他滨组（TQ＋GEM）、百里醌与吉西他滨序贯给药组（TQ-GEM）相对细胞活性分别为83.7％±4.1％、51.8％±6.0％、48.25％±6.50％、33.3％±3.9％;早期凋亡率分别为12.2％±3.8％、30.4％±4.3％、43.5％±5.7％、58.3％±6.1％;各组相对细胞活性均明显低于对照组（P＜0.05）,而细胞凋亡率显著增高（P＜0.05）;与GEM组比较,TQ-GEM组与TQ＋ GEM组相对细胞活性明显下调（P ＜0.001）,凋亡率明显上调（P ＜0.001）;TQ-GEM组较TQ＋ GEM组出现更明显的增殖受抑（P ＜0.001）,更高的细胞凋亡率（P＜0.001）.百里醌-吉西他滨序贯给药作用于胰腺癌BxPC-3细胞后,BxPC-3细胞中Bax蛋白表达明显下调,而Bcl-2、XIAP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达明显上调.百里醌可显著上调BxPC-3细胞PTEN的表达,明显抑制Akt磷酸化.结论 百里醌可明显增强吉西他滨对体外胰腺癌细胞生长抑制作用,可能是通过上调PTEN,Akt去磷酸化,促使Bcl-2、XIAP表达上调及Bax表达下调,活化caspase-3、caspase-9诱导细胞凋亡而实现。     

mtDNA缺失细胞抵抗模拟日光照射诱导的凋亡

目的探讨线粒体DNA对模拟日光照射诱导凋亡的作用。方法实验分照射组和假照射组,照射组以3．39J／cmz＋177mJ／cm。的剂量照射Rh0206细胞和143B细胞,假照射组作同样处理但不照光。6h时检测活性氧簇（ROS）产量;16h后观察其细胞形态,检测凋亡率。结果照射组Rh0206细胞、143B细胞的凋亡率和ROS的产量与假照射组比较明显上升,差异有统计学意义（P〈0．05）,照射组Rh0206细胞的凋亡率和ROS的产量与143B细胞的凋亡率和ROS的产量比较明显下降（P〈0．05）,而假照射组两细胞凋亡率和ROS的产量比较差异无统计学意义。结论线粒体DNA缺失细胞对模拟日光照射诱导的凋亡作用的抵抗可能与ROS生成减少有关。     

姜黄素促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化中活性氧表达变化研究

目的研究姜黄素对成年大鼠骨髓间充质干细胞（rBMSCs）的成骨性分化中活性氧（ROS）表达变化的影响。方法贴壁筛选法体外培养健康SPF级SD大鼠rBMSCs,分为四组,姜黄素组（15μmol/L姜黄素干预）,N-乙酰半胱氨酸（NAC）组（含40 mmol/L NAC）,姜黄素＋NAC组（含15μmol/L姜黄素＋40 mmol/L NAC）,对照组（只含等体积溶剂）。比较各组间碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性,骨钙素（bone glaprotein,BGP）含量和ROS相关蛋白表达变化。结果①姜黄素组第4、8、12天ALP表达OD值[（35.72±0.295）、（60.44±0.347）、（51.51±0.487）]均高于对照组[（19.96±0.874）、（53.55±0.978）、（41.32±0.755）],差异均有统计学意义（P〈0.05）;NAC组和姜黄素＋NAC组第4、8、12天ALP活性表达的OD值低于姜黄素组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。②姜黄素组培养12 d时BGP活性[（6.900±0.026）μg/L]高于对照组[（5.690±0.099）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.05）,说明姜黄素可明显增强rBMSCs的BGP活性。NAC组和姜黄素＋NAC组的BGP活性[（5.360±0.254）、（5.500±0.232）μg/L]低于姜黄素组[（6.900±0.026）μg/L],差异有统计学意义（P〈0.05）。③rBMSCs诱导成骨化培养8 d后,姜黄素组ERK1/2,p38蛋白的表达量高于对照组,差异有统计学差异（P〈0.05）;NAC组ERK1/2,p38蛋白表达量低于姜黄素组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论姜黄素促进rBMSCs成骨分化过程中ROS表达量的增加。     

活性氧在大黄素联合顺铂诱导食管癌EC-9706细胞凋亡中的作用

目的探讨大黄素联合顺铂诱导人食管癌EC-9706细胞凋亡过程中的作用及可能机制。方法不同浓度大黄素、顺铂与二药联合分别作用于EC-9706细胞,应用吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）双荧光染色法测细胞凋亡（形态学变化）;MTT法检测细胞抑制率;用Annexin V-FITC/碘化丙啶（PI）双染法及流式细胞术检测细胞凋亡情况（计算凋亡细胞百分率）;流式细胞术检测细胞内活性氧变化情况。结果大黄素、顺铂均可明显抑制EC-9706细胞增殖,并且呈一定的时间依赖性;大黄素、顺铂分别及联合作用24 h,细胞早期凋亡率分别为（15.39±3.40）%、（12.80±2.41）%和（23.09±3.97）%,较对照组〔（1.42±0.14）%〕明显增加（P均〈0.05）;两药分别及联合作用2 h,细胞内活性氧的含量分别为（35.57±3.16）%、（29.44±2.43）%和（43.23±3.68）%,较对照组〔（4.73±2.12）%〕明显升高（P〈0.05）。结论大黄素能抑制EC-9706细胞增殖,通过诱导细胞内活性氧的产生促进凋亡,与顺铂联用存在协同作用,其机制可能与通过诱导细胞内活性氧的产生促进细胞凋亡有关。     

海龙蛋白质提取物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的机制

目的 研究海龙蛋白质提取物对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的诱导作用.方法 采用MTT法检测蛋白质提取物对细胞生长的抑制情况,采用Annexin WPI流式细胞分析法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、P53的表达.结果 不同浓度海龙蛋白质提取物对Hela细胞的增殖有抑制作用,具有时间和浓度依赖性.Annexin V/PI流式细胞分析显示,加药组早期凋亡率分别为29.18±0.65、39.32±0.78、51.21±1.13、61.56±1.09,与对照组（9.82±0.18）差异有统计学意义（P＜0.05）;晚期凋亡率加药组分别为3.20±0.03、7.48±0.06、11.11±0.07、14.60±0.03,与对照组（1.12±0.09）差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测发现随着蛋白质提取物浓度的升高,Bax、P53蛋白的表达逐渐升高,Bcl-2蛋白的表达逐渐降低.结论 海龙蛋白质提取物在一定浓度范围内可在体外抑制Hela细胞增殖并诱导其凋亡,且随蛋白质提取液浓度的升高,凋亡率显著增加,可能的机制是增强促凋亡蛋白Bax、P53的表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.