“生精宝”对小鼠少精子症模型的作用及其机制探讨

目的:研究"生精宝"对小鼠少精子症模型生精功能的作用并探讨其机制。方法:昆明种雄性小鼠60只随机分4组:"生精宝"组17只(组1),维生素E组17只(组2),空白造模对照组16只(组3),正常空白对照组10只(组4);前3组予腹腔内连续5d注射环磷酰胺造模,前两组于造模次日给药灌胃,组1每只小鼠给予"生精宝"药汤2g/(kg.d),组2给予维生素E75mg/(kg.d),第36d处死各组全部小鼠。用放免法测血清睾酮水平;取一侧附睾制备悬液作精子分析,另一侧睾丸切片行HE染色,计数生精上皮层次和间质细胞,TUNEL法检测生精细胞凋亡。结果:组1血清睾酮,生精上皮层次以及间质细胞计数方面相对于组3有明显改善且高于组2,组1生精细胞凋亡阳性率低于组2和组3,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05),组1各项检测指标与组4比较无显著差异(P>0.05)。结论:"生精宝"可明显增加间质细胞数量,从而分泌高水平睾酮作用于睾丸生精上皮层次,增强生精功能;"生精宝"作用机制可能为抑制生精细胞凋亡,增加上皮层次,促进精子发生;睾酮可能为生精细胞凋亡抑制的诱导因素。     

吸烟对大鼠生精细胞发育影响的研究

目的:探讨吸烟对大鼠生精细胞发育的影响。方法:自制吸烟机将大鼠制成被动吸烟模型,大鼠随机分成被动吸烟组(A、B组各10只)及相应对照组(C、D组各10只),A、B组被动吸烟8周,随后处死A组及相应对照组C组大鼠;B组停止被动吸烟后与其相应对照组D组继续观察48 d后处死。流式细胞术(FCM)检测各组大鼠生精细胞周期,放免法测定血睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平,HE染色观察睾丸组织结构变化,透射电镜观察睾丸超微结构改变。结果:与C组比较,A组大鼠精子、精子细胞[(18.76±3.58)%]和初级精母细胞[(5.71±1.18)%]明显减少(P均<0.01),而精原细胞[(55.98±5.35)%]增加(P<0.01),增殖指数降低(P<0.01)。A组大鼠生精小管壁变薄,层次减少,生精小管内精原细胞减少,精母细胞固缩。间质细胞内质网扩张脱颗粒,高尔基复合体减少,支持细胞脂滴和溶酶体增多。A组大鼠T、LH水平低于C组(P均<0.01)。B组大鼠停止被动吸烟后,精子、精子细胞、初级精母细胞比例和增殖指数上升,T、LH水平升高,但仍低于D组。结论:吸烟导致大鼠睾丸生精上皮损伤及间质细胞和支持细胞受损,同时伴有T和LH水平的下降,延缓生精细胞增殖,停止吸烟后生精功能有逐渐恢复的趋势。     

八仙胶囊生精壮阳作用的实验研究

目的 :考察八仙胶囊的生精壮阳作用及可能机制。　方法 :实验动物 (大鼠或小鼠 )随机分为 5组 :空白对照组、八仙胶囊组 (2 .5、7.5、2 2 .5g/kg)和阳性对照组 ,连续灌胃给药 14d后 ,用放免法测定低龄大鼠血清睾酮、皮质醇含量 ;称重大鼠睾丸、附睾、精囊腺 前列腺和包皮腺重量 ,计算其脏器系数 ;观察小鼠睾丸间质细胞和精子数目的变化 ;测定给药后电刺激雄性去势大鼠阴茎勃起的时间及正常大鼠性交的次数和频率。　结果 :八仙胶囊能显著提高低龄大鼠血清睾酮和皮质醇的含量 ,增加睾丸、附睾、精囊腺 前列腺及包皮腺的脏器系数 ,显著增加低龄小鼠精子数和睾丸间质细胞数量 ,抑制去势大鼠阴茎勃起潜伏期的延长 ,提高大鼠交配能力。　结论 :八仙胶囊具有生精壮阳作用 ,该作用可能与药物促进下丘脑 垂体 性腺和肾上腺皮质系统功能有关。     

JQ1对脂多糖所致小鼠生精功能障碍的影响

目的 探讨JQ1对脂多糖(LPS)所致小鼠生精功能障碍的影响及相关机制。方法 40只8周龄雄性C57BL/6J小鼠，随机分为溶媒对照组(DMSO+NS)、模型组(DMSO+LPS)和药物干预组(JQ1+LPS),每组小鼠的数量分别为n=13、n=15和n=12,单次腹腔注射LPS诱导炎症动物模型。取材后，称量睾丸、附睾尾的重量，采用精子计数法检测小鼠精子数量，伊红染色检测精子的畸形率，苏木精-伊红(HE)染色检测睾丸形态变化；TUNEL试剂盒检测睾丸生殖细胞凋亡情况；Western blot检测凋亡基因(Bax和Bcl2)的表达情况；生化试剂盒检测睾丸丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)表达情况。结果 LPS导致小鼠附睾尾重量显著下降(P<0.05),精子数量显著下降(P<0.001);精子畸形率显著升高(P<0.01);睾丸形态结构破坏，生精小管萎缩，管腔直径变小，各级生精细胞排列紊乱，管腔内精子数量减少；睾丸中凋亡细胞数量显著上调(P<0.01);Bax/Bcl2的比值显著上升(P<0.01);MDA含量显著增加(P<...     

Annexin5对雄性SD大鼠生殖相关指标和睾酮分泌的影响

目的 探讨膜联蚩白5(annexin5)对雄性SD大鼠体重、睾丸系数、附睾系数、精子相对计数和睾酮水平的影响.方法 给雄性SD大鼠腹腔注射3个不同剂量(7.5μg/kg、15μg/kg、30μg/kg)的annexin5,对照组腹腔汴射等晕的pH 8.0 Tris-HCI,1次/d,连续20d.分别称重对照组和实验组SD大鼠体重、睾丸、附睾,并对附睾尾进行精子计数.HE染色观察睾丸组织结构.运用化学发光法检测对照组和各实验组SD大鼠血清中睾酮浓度.结果 与对照组相比,15 μg/kg实验组大鼠附睾系数与精子相对计数均显著提高,分别提高了12.5%(131.8±9.6vs 117.2±5.9)(P<0.01)和31.4%(36.8±5.6vs 31.7±5.3)(P<0.05);其它剂量组与对照纰相比差异均无统计学意义(P>0.05).HE染色显示各剂量实验组与对照组相比,睾丸的形态结构没有发牛明显改变.7.5 μg/kg组和15 μg/kg组大鼠血清睾酮含量显著高十对照组,分别提高了35.5%(36.33±3.89vs26.82±3.75)(P<0.01)和82.8%(49.04±5.17vs26.82±3.75)(P<0.01),30 μg/kg组大鼠睾酮含量虽也有升高,但与对照组比较,结果无统计学意义(P>0.05).结论 腹腔注射annexin5能影响大鼠睾丸生精、附睾功能及睾酮水平,并与剂量有关.     

苯甲酸雌二醇诱导不育小鼠睾丸中生精细胞增殖紊乱的研究

目的:探讨外源性雌激素苯甲酸雌二醇(EB)对诱导雄性不育小鼠中生精细胞增殖紊乱的影响。方法:60只雄性昆明小鼠随机分为3组,对照组肌肉注射150μl玉米油,EB处理组注射浓度分别为5、10 mg/kg的EB,隔天1次,持续4周。实验结束后取睾丸称其质量并计算睾丸指数;睾丸、附睾尾常规石蜡切片,HE染色;附睾尾制备精子悬液进行精子计数;免疫组化检测睾丸PCNA表达;qRT-PCR分析睾丸细胞周期蛋白A1、细胞周期蛋白B1、VASA、p53的表达变化;Western印迹检测p53及磷酸化p53蛋白表达。结果:与对照组相比,EB处理组小鼠睾丸指数显著下降[(0.56±0.09)%vs(0.43±0.08)%、(0.38±0.10)%,P0.05],精子悬液镜下观察未见精子,HE染色附睾管内未见精子;生精小管中精原细胞、初级精母细胞及支持细胞数量显著下降(P0.05)。免疫组化结果显示,与对照组相比,EB处理组生精小管中细胞PCNA阳性表达细胞数量显著下降(P0.05)。qRTPCR结果表明EB处理组PCNA、细胞周期蛋白A1、细胞周期蛋白B1、VASA mRNA表达与对照组相比显著下降(P0.05);p53表达随EB剂量升高而显著升高(P0.05)。Western印迹结果显示,与对照组相比,EB处理组p53及磷酸化p53蛋白表达水平显著升高,且存在剂量依赖效应,10 mg/kg组显著高于5 mg/kg组(P0.05)。结论:EB以剂量依赖的方式下调细胞周期相关因子表达抑制生精细胞的增殖,是导致雄性不育小鼠睾丸中生精细胞增殖紊乱的重要原因。     

纳米二氧化钛对雄性小鼠生殖系统的影响

目的:研究纳米二氧化钛(TiO2)对雄性小鼠的在体作用,主要观察其对雄性小鼠生殖系统的影响。方法:45只6周龄的雄性ICR小鼠随机均分3组,实验组隔日腹腔注射纳米TiO2(200mg/kg或500mg/kg),对照组注射等体积生理盐水,共给药5次。停药1周后,测量心脏、肝、肾、脾、睾丸和附睾的脏器系数,血清生化指标、睾酮和雌二醇水平;显微镜下观察附睾精子数量、活率、畸形率和睾丸内精子计数;主要脏器作病理切片和HE染色,TUNEL法检测睾丸生殖细胞凋亡。结果:与对照组相比,给药200mg/kg纳米TiO2组上述指标均无明显改变(P>0.05);给药500mg/kg组小鼠的心、肝和肾质量系数显著降低(P<0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)、丙氨酸氨基转移酶/天门冬氨酸氨基转移酶(ALT/AST)、尿素氮(BUN)均显著升高(P均<0.05);附睾精子数、精子活率以及睾丸内精子计数均显著降低,精子畸形率增高,睾丸生殖细胞凋亡明显增多(P均<0.05)。肝、肾、脾、睾丸和附睾的病理切片观察未见明显改变。结论:小剂量的纳米TiO2对雄性小鼠无明显影响,较大剂量的纳米TiO2对雄性小鼠肝、肾功能有轻度影响,对小鼠精子生成和精子功能有明显影响,并诱导睾丸生殖细胞凋亡。     

麒麟丸对无精子症模型小鼠睾丸生精功能的影响

目的:探讨麒麟丸是否促进无精子症模型小鼠生精功能恢复,揭示其调控睾丸生精功能的机制。方法:取15只4周龄ICR雄性小鼠,随机分成模型组、麒麟丸低剂量组、麒麟丸高剂量组,每组5只。采用白消安建立无精子症小鼠模型。建模后麒麟丸组每天给予不同剂量麒麟丸灌胃给药[低剂量组和高剂量组分别为2 000、8 000 mg/(kg·d)],模型组予正常饮食处理,28 d后颈椎脱臼法处死小鼠。HE染色检测小鼠附睾和睾丸组织显微结构,Western印迹检测小鼠睾丸中各级生精细胞、支持细胞和间质细胞特异性标志物表达情况,免疫荧光染色检测睾丸内这些标志物的定位与表达情况。结果:模型组小鼠睾丸中各级生精细胞数量明显减少,大多数附睾管中未见精子; Johnsen评分(5. 2±0. 5)分。麒麟丸高剂量组小鼠生精小管腔内生精细胞排列紧密、层次分明,附睾管腔中见大量精子,未见非精子细胞成分; Johnsen评分(9. 4±0. 6)分。麒麟丸低剂量组小鼠睾丸中各级生精细胞数量相比较模型组有所提升,但是对比高剂量组仍明显减少,部分附睾管中可见精子; Johnsen评分(7. 6±0. 6)分。Johnsen评分模型组显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 01),而且麒麟丸高、低剂量组间也有统计学差异(P 0. 05)。Western印迹结果显示,支持细胞标志物GATA4、WT1、SCF、BMP4的表达水平模型组均显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 01),高剂量组显著高于低剂量组(P 0. 05或0. 01);精原干细胞和未分化精原细胞标志物UCHL1、STRA8、NGN3、PLZF 3组小鼠间无显著差异;精母细胞标志物DMC1、SYCP3模型组也均显著低于麒麟丸高、低剂量组(P 0. 05或P 0. 01),高剂量组显著高于低剂量组(P 0. 05或P 0. 01)。免疫荧光染色结果显示,SYCP3的表达与Western印迹结果一致; Ki67荧光信号分布在精原细胞,其荧光信号强度模型组低于麒麟丸高、低剂量组;精子顶体标志物PNA主要分布在生精小管内,模型组小鼠没有出现明显的点状信号,麒麟丸高、低剂量组可见大量的荧光信号。结论:麒麟丸可能是通过改善睾丸中支持细胞的功能,从而促进精原细胞进入减数分裂,增加精子的生成。     

G-蛋白偶联雌激素受体在肾阴虚和肾阳虚小鼠睾丸中的表达及其与生殖功能的关系

目的:探讨肾阴虚与肾阳虚雄性小鼠睾丸G-蛋白偶联雌激素受体(GPER)的定位与表达,及其对肾阴虚与肾阳虚雄性小鼠生殖功能的影响。方法:将6周龄雄性昆明小鼠随机分为正常组、肾阳虚组和肾阴虚组。采用矿场实验、高架十字迷宫、游泳力竭等评价小鼠精神萎靡程度和自主活动次数等行为学改变;电化学发光法检测睾酮(T)和雌二醇(E2),并计算T/E2;全自动精子分析仪检测精液质量;与雌鼠合笼后记录雌鼠产仔数,计算雄鼠平均育仔数;免疫组织化学和免疫荧光染色检测GPER在小鼠睾丸中的定位和表达。结果:与肾阴虚组比较,肾阳虚组小鼠开臂进入次数百分率和中央区进入次数明显减少,同时,游泳力竭时间缩短更为明显(P0.05),但开臂滞留和中央区滞留时间百分率无明显差异(P0.05)。与肾阴虚组比较,肾阳虚组小鼠附睾精子计数和活动精子百分率明显减少,且育仔数显著下降(P0.05);精子畸形率略有升高(P0.05);血清T水平明显降低(P0.05),E2水平略有下降(P0.05),T/E2明显下降(P0.05)。肾阴虚和肾阳虚小鼠睾丸GPER均表达于睾丸间质细胞的细胞质内,细胞核和细胞膜表达为阴性,肾阳虚小鼠睾丸GPER的表达显著高于肾阴虚组(P0.05)。结论:肾阳虚与肾阴虚小鼠均出现精子数量与育仔数下降,精子畸形率增加,但以肾阳虚小鼠更为明显,这种改变可能与肾阳虚小鼠睾丸GPER表达增加有关,从而造成血清T水平及T/E2比值下降。     

柴油机尾气颗粒物对小鼠精子质量的影响

目的 研究柴油机尾气颗粒物(DEPs)对小鼠精子质量的影响.方法 21～22g健康成年ICR雄鼠随机分为对照组(PBS)、高剂量染毒组、中剂量染毒组、低剂量染毒组,每组6只.每组雄鼠乙醚麻醉后,通过咽后壁吸入的方式分别吸入PBS、360.0、90.0和24.0 μg DEPs,每周2次,连续染毒4周,于第6周处死,检测并比较小鼠体重、睾丸及附睾重量,脏器(睾丸、附睾)系数、精子密度、总活力,体外受精率等指标.结果 组间睾丸重量、睾丸系数比较差异无统计学意义(P＞0.05).剂量为360.0、90.0 μg DEPs的小鼠染毒组与PBS组、24.0 μg DEPs小鼠染毒组比较,附睾重量、附睾系数有显著增加(P＜0.05);而精子密度、总活力、受精率显著F降(P＜0.05).总活力和受精率之问呈正相关(P=0.000).结论 中、高剂量染毒(360.0、90.0 μg DEPs/小鼠)可以降低健康成年雄性ICR小鼠精子质量,低剂量(24.0μg DEPs/小鼠)则无显著影响.     

不同剂量的十一酸睾酮对大鼠生精功能影响

目的 :进一步了解睾丸内睾酮和生精功能的关系。　方法 :大鼠给予不同剂量的十一酸睾酮 (TU)后测定大鼠血清、睾丸间质液和睾网液内睾酮水平 ,以及附睾精子的数量、活力 ,以观察二者之间关系。结果 :大鼠给予不同剂量的十一酸睾酮后 ,睾丸内睾酮水平发生不同的变化 ,随之睾丸内生精功能也发生变化。低剂量十一酸睾酮(8mg/kg)不影响睾丸内睾酮水平 ,也不影响睾丸内的生精过程。附睾精子的数量、活动力与对照组无显著性差异。但给予超生理剂量 (30mg/kg) ,则抑制睾丸内睾酮的产生 ,睾丸内睾酮水平显著下降 ,使精子的发生明显受到抑制。而给予超大剂量的外源性睾酮 (6 2 5mg/kg) ,尽管抑制了睾丸内睾酮的产生 ,但由于补充了大量外源性睾酮 ,使睾丸内睾酮维持在正常水平。精子的发生能维持在正常水平。附睾精子的数量与活动力与对照组无显著性差异。　结论 :进一步论证了睾丸内高浓度的睾酮对维持生精过程起到决定性的作用     

五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究

目的:观察五子衍宗丸对实验性少弱精子症大鼠的保护作用与机制研究。方法:取60只雄性SD大鼠,随机分成正常组、模型组、阳性药组(生精胶囊1.6 g/kg),五子衍宗丸低、中、高剂量组(1、2、4 g/kg),除正常组外,其他各组灌服雷公藤多苷30 mg/(kg·d),连续6周,建立少弱精子症模型。从造模的第3周开始,各组按剂量灌胃给药,连续给药4周后计算睾丸和附睾脏器指数,检测附睾精子质量、精子凋亡率、精子线粒体通透性转换孔(MPTP)开放情况,HE染色观察大鼠睾丸病理组织学改变,Hochest染色观察大鼠睾丸细胞凋亡情况。结果:五子衍宗丸能提高少弱精子症大鼠睾丸和附睾脏器指数,增加附睾精子浓度、精子活力和精子活率,降低精子凋亡率,抑制MPTP异常开放;HE染色显示五子衍宗丸能增加少弱精子症大鼠睾丸生精小管内各级生精细胞层次和数量,Hochest染色显示五子衍宗丸明显抑制睾丸生精小管内生精细胞凋亡。结论:五子衍宗丸能明显提高少弱精子症大鼠精子质量,降低少弱精子症模型大鼠的各级生精细胞(包括精子)凋亡率,其机制可能与抑制大鼠精子线粒体MPTP开放有关。     

高氟对C57BL/6J小鼠睾丸中AQP1、AQP4表达的影响

目的观察和分析氟化钠对C57BL/6J小鼠睾丸中水通道蛋白AQP1和AQP4表达的影响。方法选择健康C57BL/6J雄性小鼠24只,随机分为2组:对照组(n=12)和氟化钠干预组(n=12)。用放射免疫法测定C57BL/6J小鼠血清中的睾酮水平。免疫组织化学法检测AQP1和AQP4蛋白在睾丸中白膜、生精小管内的支持细胞以及睾丸间质中的表达情况。结果 AQP1在睾丸中白膜、生精小管内的支持细胞以及睾丸间质中均有表达,但在氟化钠干预组中表达相对较弱,睾丸间质细胞表达最强,依次是白膜和支持细胞,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05);AQP4在睾丸中白膜、生精小管以及睾丸间质中均没有观察到,氟化钠干预组与对照组比较差异无统计学意义(P0.05);对照组和氟化钠干预组的睾酮变化具有差异性(P0.05)。结论 AQP1在睾丸中的表达要比AQP4强,AQP1在氟化钠干预组睾丸中的变化比较明显,与睾酮的变化具有正相关性,说明在氟中毒致睾丸损伤中AQP1可能起主要的调节作用。     

急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70表达的影响

目的:探讨急性热应激对性成熟雄性小鼠睾丸、附睾、输精管中热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法:将32只8周龄雄性小白鼠随机均分为4组,饲养7d后,进行热应激处理,温度控制在(39±0.5)℃,时间分别为0.5、1和3h。应激后立即采血,分离血清测定谷草转氨酶(GOT)含量。一侧附睾制备精子悬液,用于计算精子密度和顶体畸形率;另一侧附睾、睾丸、输精管用于免疫组化研究。结果:应激后,小鼠体重、睾丸系数、顶体畸形率变化不显著(P>0.05),附睾系数和精子密度有不同程度的下降,GOT含量急剧升高(P<0.01)。随着应激时间的延长,小鼠精子密度呈递减趋势,顶体畸形率呈上升趋势。应激时间最短的0.5h组小鼠体重、睾丸系数、附睾系数的降幅反而最大。免疫组化法观察发现,HSP70在性成熟小鼠睾丸、附睾、输精管中均有表达。正常状态下,HSP70在睾丸组织间质细胞中少量表达,应激后分布于间质细胞核,此外在精母细胞核与精子细胞核中也有大量分布;附睾中HSP70主要分布于主细胞质,基细胞和亮细胞中没有表达,应激后附睾体的纤毛细胞中也发现大量棕色颗粒;输精管中HSP70主要定位在基细胞质,主细胞中不表达。随着应激时间的延长,HSP70在睾丸、附睾中的表达量明显升高,而在输精管中的增幅不明显。结论:急性热应激对性成熟雄性小鼠的生殖系统造成了损伤;HSP70在睾丸、附睾、输精管中的表达与定位具有区域特异性和细胞特异性,提示其可能参与精子的发生与成熟;HSP70在应激状态下表达量大幅上升的作用可能在于保护细胞免受高热损伤。     

肥胖与雄性小鼠生殖系统慢性炎症的相关性研究

目的研究肥胖诱导的雄性小鼠生殖系统炎症反应以及相关分子机制。方法建立肥胖小鼠模型。通过Real-time PCR检测其睾丸和附睾内促炎细胞因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α),炎症小体3(NOD-like receptor family pyrin domain containing-3,NLRP3)的m RNA表达水平,运用HE染色观察肥胖小鼠睾丸组织的结构变化,采用ELISA实验检测小鼠血清中性激素,IL-6,TNF-α,皮质酮,免疫球蛋白G(immunoglobulin G,Ig G)以及免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,Ig M)浓度变化,最后通过Western blot检测肥胖小鼠睾丸中炎症反应相关信号通路蛋白p38,核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB),细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK),c-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)的含量变化。结果与正常组小鼠相比,肥胖小鼠睾丸和附睾内IL-6,TNF-α和NLRP3的含量显著上升,肥胖小鼠血清中性激素水平紊乱,表现为雌激素水平上升,睾酮和孕酮水平下降。血清中IL-6、TNF-α、皮质酮、Ig G和Ig M浓度也明显增高。此外,肥胖小鼠睾丸发育异常,且睾丸中p38、NF-κB、ERK和JNK含量显著上升。结论肥胖会诱导雄性小鼠睾丸和附睾发生炎症反应,而该炎症反应可导致小鼠生育力的损伤。     

老年大鼠睾丸间质细胞形态及睾酮合成功能变化的研究

目的 探讨衰老对睾丸间质细胞的形态及功能的影响.方法 青年(3月龄)及老年(24月龄)清洁级雄性SD大鼠各10只,麻醉后取血清检测总睾酮浓度,取睾丸组织用HE染色观察睾丸组织形态学变化,并用电镜观察睾丸间质细胞的超微结构改变.通过密度梯度离心分离原代睾丸间质细胞,并用LH刺激睾酮分泌后用Western blot比较青年组和老年组睾丸间质细胞类固醇合成快速调节蛋白(steroidogenic acute regulatory protein,StAR)表达水平的差异,并用ELISA法检测其睾酮分泌的差异.结果 HE染色显示老年大鼠睾丸呈老年退行性改变,电镜下观察到老年大鼠睾丸间质细胞线粒体水肿,线粒体嵴消失.老年大鼠血清睾酮水平显著低于青年组(P＜ 0.05).原代培养的睾丸间质细胞无论LH刺激与否,老年组细胞上清中睾酮浓度及StAR蛋白表达水平均显著低于青年组(LH刺激时P＜0.01,无LH刺激时P＜0.05).结论 衰老造成的睾丸间质细胞线粒体水肿及LH诱导的StAR蛋白表达水平下降与其睾酮合成能力降低密切相关.     

异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白的表达

目的探讨异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸间质细胞类固醇合成急性调节蛋白(StAR蛋白)的表达。方法建立异常黏液质证候模型,并筛选出阳痿病证模型后,分为证候模型组、病证模型组、证候用药组及病证用药组,两用药组采用伊木萨克片干预2周后,放免法检测各组血清中睾酮(T)含量,比较各组光镜及电镜下睾丸的形态学变化,免疫组织化学SP法及免疫印迹检测各组大鼠睾丸间质细胞StAR蛋白表达水平。结果 T含量检测结果显示,两模型组外周血清睾酮水平较正常组显著降低(P0.05),证候用药组较证候模型组T水平显著上升,差异有统计学意义(P0.05),病证用药组较病证模型组T水平亦有所上升,但差异无统计学意义(P0.05)。睾丸形态学结果显示,光镜下正常组结构完好,两模型组可见生精细胞数量及层数明显减少,并伴生精上皮脱落,间质细胞数量减少;电镜下两模型组支持细胞核形不规则,胞质电子密度高,内质网扩张,部分生精细胞坏死,两用药组上述改变有所恢复。免疫组织化学结果显示,StAR在各组大鼠睾丸间质中均有表达,两模型组StAR表达水平显著低于正常组,差异有统计学意义(P0.05);证候用药组StAR表达水平较证候模型组显著回升,而病证用药组StAR表达水平较病证模型组有所回升,但差异无统计学意义(P0.05)。免疫印迹结果与免疫组织化学结果一致。结论异常黏液质证候及阳痿病证模型大鼠睾丸的形态结构发生病理改变可能与睾酮水平下降、睾丸间质细胞StAR表达下调有关。     

光照应激对雄性大鼠生殖相关参数的影响

目的 观察比较光照应激状态下不同应激时间段SD大鼠生殖相关参数的变化.方法 建立SD大鼠的光照应激模型分为光照应激短期(2d、3d、4d、7d)和光照应激长期(14d、21d、28d),并分别取应激状态下SD大鼠睾丸、附睾称重,对附睾尾精子计数,HE染色观察睾丸结构,应用免疫组织化学和westernblot分析3 β-HSD表达,比较各实验组和对照组问上述指标的变化.结果 短期光照应激组(2d、3d、4d、7d)与对照组相比,大鼠体重、睾丸重量、附睾重量、精子数量没有明显变化(P>0.05),HE染色显示睾丸结构无明显变化,免疫组化和western blot显示3β-HSD表达无明显变化.长期光照应激组与对照组相比,大鼠重量、睾丸和附睾重量都有明显增加.与对照组相比,14 d实验组的附睾重量有显著性差异(P<0.05):21 d、28 d实验组的睾丸重量有显著差异(P<0.05),21 d、28 d实验组的体重、附睾重量和精子相对计数都有极显著差异(P<0.01).HE染色显示睾丸内生精小管变粗,管腔内生精细胞增多,免疫组化和western blot显示长期应激组14 d的3β-HSD相对表达量增加20.3%,有显著性差异(P<0.05);21d和28d实验组3β-HSD的相对含量分别增加30.4%和43.3%,差异极显著(P<0.01).结论 短期光照应激不能破坏大鼠机体内稳态的调节机制,对生殖的影响并不明显;而长期处于光照应激状态下的雄性大鼠,超出机体内稳态的调节能力,对生殖的影响不仅表现在体重、睾丸、附睾和附睾尾的重量增加,而且精子相对计数及睾丸结构都发生相应变化,3β-HSD表达量也明显增加.提示光照是影响大鼠生殖功能的一个因素.     

多菌灵对大鼠睾丸发育和生精功能影响的研究

目的:探讨多菌灵对雄性大鼠睾丸发育和生精功能的影响及其作用机制。方法:40只清洁级未成年Wistar雄性大鼠随机分为4组(对照组,低、中、高剂量组,每组10只),低、中、高剂量组经口灌胃不同浓度的多菌灵溶液(分别为20、100、200mg/kg体重),对照组给予吐温80溶液,1次/d,连续80d。染毒结束后,立即取睾丸和附睾,观察其形态。测定各组大鼠体重及右侧睾丸和附睾重量;取左侧附睾尾测定精子活率和精子数量;采用HE染色法、原位末端标记法(TUNEL)及免疫组化SABC法观察大鼠睾丸组织的病理学变化、细胞凋亡和Bcl-2/Bax表达情况。结果:中、高剂量组大鼠睾丸和附睾均明显萎缩、右侧睾丸和附睾重量减轻,左侧附睾尾精子活率和精子数量均低于对照组(P<0.01);中、高剂量组睾丸组织病理学检查可见明显异常;随多菌灵染毒浓度的增加,各剂量组生精细胞凋亡率逐渐升高,Bcl-2表达下降,Bax表达升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:多菌灵可影响雄性大鼠的睾丸发育和生精功能,可能与下调Bcl-2和上调Bax致细胞凋亡增加有关。     

男性无精子症患者血清生殖激素水平与睾丸生精功能的相关分析

目的观察男性无精子症患者血清生殖激素水平情况,探讨生殖激素水平异常能否预测临床穿刺取精结果。方法选择2011年1月至2013年10月在我院生殖中心就诊的878例男性无精子症患者作为研究组,同期在本院体检的40例正常男性作为对照组。采用免疫分析法检测外周血生殖激素水平,根据体格检查情况,对520例无精子症患者行睾丸/附睾穿刺取精,比较各组生殖激素水平及穿刺取得精子情况。结果研究组卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平较对照组显著增高(P0.01),泌乳素(PRL)和睾酮(T)水平两组间比较无显著性差异(P0.05);穿刺无精子组与穿刺有精子组及对照组比较,FSH、LH水平升高,有显著性差异(P0.01),T水平显著下降(P0.05),PRL水平无显著性差异(P0.05)。结论血清生殖激素FSH、LH升高与男性无精子症有关,FSH的升高程度可初步预测睾丸/附睾的穿刺结果,对临床上睾丸穿刺处理具有一定的指导意义。