热启动双重聚合酶链反应检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体

建立了蜡隔热启动双重聚合酶链反应同时检测临床泌尿生殖道样品的淋病奈瑟菌和沙眼衣原体的方法，对１７５例临床样品进行了检测，其中淋病奈瑟菌阳性２０例，占１１．４％，沙眼衣原体阳性为３９例，占２２．３％，淋病奈瑟菌和沙眼衣原体双重感染为１２例，占６．９％，做了单一ＰＣＲ与双重ＰＣＲ对照，结果完全相符，并对阳性ＰＣＲ产物进行了限制性酶切鉴定，本实验表明，双重ＰＣＲ对于临床检测淋病奈瑟菌和沙眼衣原体是一快捷     

应用PCR杂交梳法联合检测淋病奈瑟氏菌,解脲支原体,沙眼衣原体

近年来,性传播疾病(STD)发病率呈明显上升趋势,尤其是多病原体混合感染病例增多给STD的诊断与治疗带来困难。对于常见的STD病原体如淋病奈瑟氏菌(NG)、解脲支原体(UU),沙眼衣原体(CT),其实验室诊断大多存在着特异性低,敏感性差,不易早期诊断的缺陷。PCR技术对于微生物病原体实验诊断具有灵敏、快速的优点,但其在临床实验室应用中由于多种原因,易于出现假性结果。本文应用PCR联合检测NG、UU、CT,并在实验中实行了严格的质量控制程序。现将我们对127例疑似STD的患者标本检测结果分析报告如下。     

三重荧光PCR技术检测淋病奈瑟氏球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的临床研究

目的探讨运用三重荧光聚合酶链反应（PCR）同时检测淋病奈瑟氏球菌（NG）、沙眼衣原体（CT）和解脲支原体（UU）的临床意义。方法采用三重荧光PCR方法检测临床上诊断为尿道炎和宫颈炎的患者。结果和对照方法比较,淋球菌阳性符合率97.4%,阴性符合率98.6%;解脲支原体阳性符合率95.2%,阴性符合率87.2%;沙眼衣原体阳性符合率92.7%,阴性符合率97.6%。结论三重荧光PCR在性病临床检验中,与金标准实验结果比较符合性良好,具有同等检测效果。可降低检测的费用,缩短检测的时间,提高临床工作效率。     

PCR检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和解脲支原体的核酸

ＰＣＲ检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和解脲支原体的核酸金小丽杨君瑞（温州市第三人民医院，浙江温州３２５０００）关键词聚合酶链反应淋病奈瑟菌沙眼衣原体解脲支原体核酸我们对８９７２例泌尿生殖系统感染的尿道及阴道分泌物和慢性前列腺炎的前列腺液用ＰＣＲ检测淋病奈...     

6932例患者泌尿生殖道沙眼衣原体与淋病奈瑟菌感染调查分析

目的了解泉州地区人群泌尿生殖道沙眼衣原体(CT)和淋病奈瑟菌(NG)临床感染现状,为临床诊断治疗提供参考。方法选取2019年9月至2020年3月在该院泌尿科、妇产科、皮肤性病科就诊的患者6932例,其中男性患者1320例,女性患者5612例。采用荧光定量聚合酶链反应检测患者泌尿生殖道的CT和NG。结果6932例患者CT和NG阳性率分别为8.98%和6.85%,二者同时检出患者达1.60%。男性患者CT和NG阳性率分别为3.48%和4.95%,二者同时检出患者占1.11%;女性患者CT和NG阳性率分别为5.50%和1.90%,二者同时检出患者占0.49%。男性NG感染率(4.95%)显著高于女性(1.90%),差异有统计学意义(P<0.05);而男性CT感染率(3.48%)低于女性(5.50%),差异有统计学意义(P<0.05)。从年龄分布来看,以20~30岁年龄段2种病原体感染率最高。结论泉州地区泌尿生殖道CT、NG感染率不尽相同,该地区男性患者NG感染率高于女性,而女性患者CT感染率高于男性,CT、NG同时感染在男性患者中较为常见,20~30岁年龄段感染率最高,应该加强监测。     

荧光定量聚合酶链反应在同时检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体和解脲脲原体中的应用

目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲脲原体(UU)检测中的应用价值及NG、CT、UU的感染状况。方法采用FQ-PCR同时检测328例疑有泌尿生殖道感染患者的NG、CT和UU,并与培养法做比较。结果 FQ-PCR对NG、CT和UU的阳性检出率高于培养法。阳性标本定量均值分别为NG 1.1×108拷贝/mL、CT 1.2×107拷贝/mL、UU 3.9×106拷贝/mL。UU的阳性率为60.67%,CT为6.40%,NG为3.05%;CT+UU合并感染的阳性率为4.57%,NG+UU为1.83%,NG+CT为0.61%,总阳性率为70.12%(230/328)。结论 FQ-PCR灵敏度高、特异性强,可对NG、CT和UU进行定量测定,对三者感染的诊断具有重要的临床意义。     

深圳地区性病门诊淋病奈瑟菌沙眼衣原体支原体检测情况分析

为了解深圳地区近期 STD门诊淋病奈瑟菌( Ng)、沙眼衣原体 ( Ct)、解尿支原体 ( Uu)、人型支原体 ( Mh)的流行情况 ,我们对 1 998年 4月～ 1 999年 3月 STD门诊拟诊为淋菌尿道炎 ( NGU)、粘液脓性宫颈炎 ( MPC)患者 2 0 99例进行 Ng、Uu、Mh培养 ,以及 Ct抗原检测。材料和方法一、临床资料　 2 0 99例患者均来自我院皮肤科门诊 ,临床拟诊为 NGU或 MPC,诊断标准见参考文献[1] 。年龄最大 64岁 ,最小 1个月 ,2 2～ 40岁占 90 .3% ,其中男 1 1 57,女 942例。二、实验材料　法国 Bio- Mérieux淋病奈瑟菌选择培养基。英国 Clearview…     

钟祥市247例女性淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、支原体检测情况分析

为了了解钟祥市女性近年淋病奈瑟菌(Ng)、沙眼衣原体(Ct)、支原体感染情况,笔者对本院2004年8月至2005年7月妇科门诊拟诊为淋病感染或支原体、衣原体感染的247例女性患者,同时用不同的方法对Ct、解脲支原体(Uu)、Ng进行检测和比较,以为临床提供提供可靠的诊断依据.……     

多重PCR-核酸探针杂交法同时检测沙眼衣原体、解脲支原体和淋病奈瑟菌

目的：建立一种同时检测沙眼衣原体，解脲支原体，淋病奈瑟菌三种病原体DNA的方法并用于临床标本检测。方法：采用多重PCR－核酸探针杂交技术，结果与常规PCR法比较。结果：本法特异性良好，敏感度达到0.1fg。经过对166例性传播疾病门诊患者标本测定证实，沙眼衣原体，解脲支原体，淋病奈瑟菌检出率分别为22．9％，54．8％，34．3％，并有22．2％的双重复合感染和4．8％的三重复合感染。并与常规PCR法具有很好的一致性。结论：本法快速，简便，特异性好，能指示多重感染。     

不对称熔解曲线PCR法和DNA测序法检测HBV A1762T/G1764A结果分析

目的：以DNA测序法为标准,探讨不对称PCR熔解曲线法检测乙型肝炎病毒A1762T/G1764A基因变异的敏感性和特异性。方法：选取45例HBV阳性且经PCR熔解曲线法显示A1762T/G1764A变异的乙型肝炎患者血清,另选10例未发生HBV A1762T/G1764A变异的慢乙肝患者血清,用DNA测序法进行比较,分析两者检测结果。结果：55例测序样本中有51例两法结果完全一致,总符合率92.7%,另4例结果是：不对称PCR熔解曲线法检测显示为不完全变异型,而测序法则显示为完全变异型。结论：两法的相符率高,PCR熔解曲线法对A1762T/G1764A变异的检测是一简单易行较实用的方法,适用于临床基层开展。     

G＋C超含量DNA序列的PCR扩增

结合PCR技术和变性剂的作用，扩增出内皮型一氧化氮合成酶（eNOS)801-902AA区G＋C超含量（71．5％）编码基因，同时研究了各种变性剂及其不同浓度对扩增的影响，结果显示，DMSO，吐温20可促进该序列特异性扩增，其中DMSO在1．5－2％，吐温20在0．15％浓度时效果最佳，扩增产物为建立eNOS检测试剂盒作了必要准备，本实验证明，变性剂可明显改善G＋C超含量DNA序列的特异性扩增，这对临床应用PCR技术扩增G＋C高或超含量基因片段具有重大的参考意义。     

S.T.O.N.E评分系统及其改良对经皮肾镜碎石取石术后结石清除状态的预测研究

目的探讨S.T.O.N.E肾结石评分系统对预测经皮肾镜碎石取石术后结石清除状态的利用价值并改进。方法对符合纳入条件的经皮肾镜碎石取石术患者进行术前S.T.O.N.E肾结石评分,分析S.T.O.N.E评分系统及其所包含的各子项因素与术后结石清除状态的相关性,并进行改进。结果 146例患者结石清除率为73.97%。二元Logistic回归分析S.T.O.N.E总评分(O^R=2.033,95%CI:1.469～2.814,P=0.000)与结石残留显著相关。多因素Logistic回归分析S评分(OR^=4.003,95%CI:1.930～8.300,P=0.000)和N评分(O^R=2.159,95%CI:1.042～4.476,P=0.038)是结石残留的显著影响因子。T、O、E评分未见相关性(P0.05)。剔除T评分,引入结石的位置(L)信息。结石没有累及肾上极得1分,累及到肾上极得2分,称作L评分。改进O评分方法,积水程度反映了手术可操作空间(I)的大小,规定轻度积水和中度积水评1分,无积水和重度积水评2分,称作I评分。改良后的S.T.O.N.E肾结石评分与结石残留显著相关(OR^=2.400,95%CI:1.730～3.328,P=0.000)。多因素Logistic回归分析L评分(OR^=4.421,95%CI:0.989～19.757,P=0.052)、I评分(O^R=2.726,95%CI:1.119～6.642,P=0.027)和S评分(O^R=3.962,95%CI:1.903～8.247,P=0.000)与结石残留显著相关,N、E评分未见相关性(P0.05)。改良的S.T.O.N.E(L.I.N.E.S)和S.T.O.N.E评分预测结石残留的受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分别为0.7997(SE=0.043,95%CI:0.716～0.884)和0.7483(SE=0.047,95%CI:0.656～0.840),差异具有统计学意义(χ2=4.81,P=0.028)。结论改良的S.T.O.N.E(L.I.N.E.S)评分和S.T.O.N.E肾结石评分系统均可用来预测术后结石清除状况,改良的S.T.O.N.E评分操作更简便,预测准确性更高。     

改进耳鼻喉科门诊护理教学方法的效果

目的探讨一种新的更有效的护理教学方法。方法将64例实习护士随机分为2组,采用对照研究的方法。甲组在护理教学中采用耳鼻咽喉专科门诊各种规章制度、工作流程、基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解、发放法,课后熟记程序并运用于实际工作中。乙组在护理教学中采用上述内容讲解法,缺少课后熟记与思考的过程,比较2组教学方法的效果。结果护理教学中采用各种规章制度及工作流程基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解法和发放法使实习护士进入工作状态加快,提前了解掌握了各班工作,经过统计学处理有显著性意义（P〈0.01）。结论护理教学中应采用耳鼻咽喉专科门诊各种规章制度、工作流程基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解、发放法。     

耳鼻咽喉科吸引管不同清洗方法的效果比较

目的寻求一种高效、安全、经济、实用的清洗方法,以保证耳鼻咽喉科吸引管的清洗质量。方法将消毒供应中心回收的360件耳鼻咽喉科吸引管,随机分为3组（每组各120件）,分别为A组（传统手工清洗法）、B组（超声波清洗法）、C组（刷洗＋超声波清洗法）,以目测、5倍放大镜、棉签法、潜血试验检测各组吸引管的清洁效果。结果4种检测方法均显示刷洗＋超声波清洗法的清洗合格率显著高于传统手工清洗法和超声波清洗法（P〈0．05）。结论采用刷洗＋超声波清洗法能有效清除吸引管内壁上的有机残留物,具有较好的清洗效果,安全性好,可操作性强。     

改进耳鼻喉科门诊护理教学方法的效果

目的探讨一种新的更有效的护理教学方法。方法将64例实习护士随机分为2组,采用对照研究的方法。甲组在护理教学中采用耳鼻咽喉专科门诊各种规章制度、工作流程、基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解、发放法,课后熟记程序并运用于实际工作中。乙组在护理教学中采用上述内容讲解法,缺少课后熟记与思考的过程,比较2组教学方法的效果。结果护理教学中采用各种规章制度及工作流程基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解法和发放法使实习护士进入工作状态加快,提前了解掌握了各班工作,经过统计学处理有显著性意义（P〈0.01）。结论护理教学中应采用耳鼻咽喉专科门诊各种规章制度、工作流程基本语言沟通技巧及“10项专科技术操作”标准讲解、发放法。     

Late onset of type 2 diabetes is associated with mitochondrial tRNATrp A5514G and tRNASer(AGY) C12237T mutations

BackgroundMitochondrial dysfunctions caused by mitochondrial DNA (mtDNA) pathogenic mutations play putative roles in type 2 diabetes mellitus (T2DM) progression. But the underlying mechanism remains poorly understood.MethodsA large Chinese family with maternally inherited diabetes and deafness (MIDD) underwent clinical, genetic, and molecular assessment. PCR and sequence analysis are carried out to detect mtDNA variants in affected family members, in addition, phylogenetic conservation analysis, haplogroup classification, and pathogenicity scoring system are performed. Moreover, the GJB2, GJB3, GJB6, and TRMU genes mutations are screened by PCR‐Sanger sequencing.ResultsSix of 18 matrilineal subjects manifested different clinical phenotypes of diabetes. The average age at onset of diabetic patients is 52 years. Screening for the entire mitochondrial genomes suggests the co‐existence of two possibly pathogenic mutations: tRNA^Trp A5514G and tRNA^Ser(AGY) C12237T, which belongs to East Asia haplogroup G2a. By molecular level, m.A5514G mutation resides at acceptor stem of tRNA^Trp (position 3), which is critical for steady‐state level of tRNA^Trp. Conversely, m.C12237T mutation occurs in the variable region of tRNA^Ser(AGY) (position 31), which creates a novel base‐pairing (11A‐31T). Thus, the mitochondrial dysfunctions caused by tRNA^Trp A5514G and tRNA^Ser(AGY) C12237T mutations, may be associated with T2DM in this pedigree. But we do not find any functional mutations in those nuclear genes.ConclusionOur findings suggest that m.A5514G and m.C12337T mutations are associated with T2DM, screening for mt‐tRNA mutations is useful for molecular diagnosis and prevention of mitochondrial diabetes.     

G1型轮状病毒分子生物学检测及临床应用价值

目的探讨G1型轮状病毒（rotavirus,RV）的分子生物学检测及其在RV感染性腹泻诊治中的应用价值。方法收集90例腹泻患儿第1、3天大便标本各90份,根据RV基因序列,结合文献设计针对RV G1型引物和探针,采用PCR法检测第1天标本中RV核酸,以免疫胶体金法检测第1、3天标本中RV抗体,比较2种方法检测阳性率。将PCR检测阳性病例随机分为2组,观察组立即行抗病毒及对症治疗,对照组在免疫胶体金法RV抗体阳性时再行上述治疗,比较2组住院时间。结果 PCR法共检出RV核酸51例,检测阳性率（56.7%）与第1天免疫胶体金法检测阳性率（6.7%）比较差异有统计学意义（P〈0.01）,与第3天阳性率（48.9%,）比较差异无统计学意义（P〉0.05）;观察组住院时间（（8.0±2.5）d）低于对照组（（15.0±1.5）d）（P〈0.05）。结论 PCR技术对RV G1型检测具有较高特异性和敏感性,有助于疾病的早期诊断与治疗。     

二重RT—PCR同时检测HGV与HCV RNA

庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）与丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）具有相近的传播途径与类似的检测方法，本文建立了二重ＲＴ－ＰＣＲ法，用于同时检测ＨＧＶ与ＨＣＶ病毒核酸，其扩增产物分别为６０９ｂｐ与２５７ｂｐ在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上的均能安全分离，ＨＧＶ产物经测序显示与报道的核酸序列同源性为８９．２％～９２．６％，该法具较好的批间重复性，二重ＰＣＲ法减轻了实验人员的操作强度，可降低测定费用近５０％，７６例样本检测显示     

MDCT联合多平面重建技术在胃癌术前T、N分期中的应用研究

目的：利用16排螺旋CT以及多平面重建（multiplanar reconstruction,MPR）后处理技术对胃癌进行术前T、N分期并与病理相对照,比较横断面和MPR在胃癌术前T、N分期中的作用。方法经胃镜证实的71例患者,术前采用16排螺旋CT平扫和双期增强扫描,由2位资深放射科医师对横断面图像及重建出的MPR图像中的肿瘤进行定位及T、N分期,并与病理结果对照。结果横断面与MPR图像对胃癌的检出率分别为90.1%和97.2%,其中MPR对进展期胃癌的检出率为100%。横断面与MPR图像的术前T分期总体准确率分别为59.2%和73.2%,差异具有统计学意义;两种方法的术前N分期总体准确率分别为78.9%和83.1%。结论和横断面相比,采用MPR后处理技术能提高病变的检出率,又能提高病变的T、N分期。