男性不育患者精浆exosome中miR-184水平变化及临床意义

目的:探讨男性不育患者精浆外泌体(exosome)中miR-184的水平变化及临床意义。方法:收集2015～2019年在江苏省中医院、东部战区总医院及温州医科大学附属第一医院就诊的97例无精子症患者、96例弱精子症患者及同期募集的92例正常生育男性精浆标本,分离精浆exosome后运用透射电镜、Nanosight和Western印迹对exosome进行鉴定;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测exosome miR-184的水平,统计分析miR-184变化、临床价值及与精液参数的相关性,进一步用生物信息学方法预测和分析miR-184靶基因、相关信号通路及与男性不育关系。结果:透射电镜、Nanosight和Western印迹结果显示,精浆中含有大量exosome。qRT-PCR结果显示,无精子症患者精浆exosome miR-184水平显著低于正常对照[0.227 (0.092, 0.790)vs 0.650 (0.408, 1.061)](P0.01),弱精子症患者精浆exosome中miR-184水平显著高于正常对照[1.176 (0.661, 1.946)vs 0.650 (0.408, 1.061)](P0.01)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示,精浆exosome miR-184无精子症、弱精子症患者的曲线下面积(AUC)为0.866(95%CI 0.815～0.916)和0.724(95%CI 0.653～0.795);区分弱精子症和无精子症患者的AUC为0.964(95%CI 0.943～0.985)。相关性分析显示,弱精子症患者精浆exosome miR-184水平与精子浓度呈显著正相关(r=0.243,P=0.017),与前向运动精子百分率呈显著负相关(r=-0.407,P=0.006)。生物信息学分析发现miR-184的靶基因显著富集于男性生殖和精子发生密切相关的蛋白调控通路。结论:男性不育患者精浆exosome miR-184水平与正常生育男性具有统计学差异,具备作为男性不育辅助诊断标志物潜能并可能参与男性不育的发生发展。     

miR-30b 在肾癌中的表达和临床意义

目的：通过检测 miR-30b 在肾癌组织及其配对癌旁正常组织中的表达水平,探讨其与临床病理特征之间的相关性,为进一步研究在肾癌发生、发展过程中 miR-30b 的作用奠定基础.方法从33例经手术切除的肾癌组织及其配对癌旁正常组织中分别提取各自的RNA,经逆转录得到 cDNA,使用 RT-qPCR检测两者 miR-30b 的表达水平,通过统计学软件进一步分析其表达量与患者临床病理特征的相关性.同时,通过检测 miR-30b 在不同肾癌细胞系的表达量,分析 miR-30b在正常细胞系和肾癌细胞系的表达差异.结果 miR-30b 在肾癌组织中的表达量明显高于配对的癌旁正常组织(P＜0.001),其中22例肾癌标本 miR-30b呈现高表达.肾癌组织中 miR-30b的表达水平与患者的年龄、性别、肾癌组织类型、TNM分期及 UICC/AJCC 临床分期均无显著相关性(P＞0.05).miR-30b在不同肾癌细胞系表达水平不同,但均高于正常组织细胞系(P＜0.05).结论肾癌组织中 miR-30b的表达明显上调,提示其可能与肾癌的发生、发展相关.     

IL-6在慢性前列腺炎患者精浆中的表达及其临床意义

目的探讨慢性前列腺炎/慢性骨盆疼痛综合症(CP/CPPS)患者精浆中IL-6的表达及临床意义。方法采用电化学发光免疫分析法(ECLIA)对52例炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢA型)、38例非炎症型慢性骨盆疼痛综合征(ⅢB型)患者及36例健康志愿者精浆中IL-6含量进行测定分析,并将ⅢA、ⅢB型IL-6的表达与其NIH-CPSI评分进行相关性分析。结果 CP/CPPS患者ⅢA[(27.46±5.29)ng/mL]、ⅢB型[(9.83±2.09)ng/mL]精浆中IL-6含量均明显高于健康对照组[(4.94±1.55)ng/mL](P0.01)。在CP/CPPSⅢA、CP/CPPSⅢB型患者精浆中IL-6的含量有明显差异(P0.01)。CP/CPPS患者ⅢA型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.590,P0.01),与疼痛评分呈正相关(r=0.436,P0.01),与排尿评分呈正相关(r=0.557,P0.01),与生活质量评分正相关(r=0.321,P0.01)。CP/CPPS患者ⅢB型精浆中IL-6的含量与NIH-CPSI总评分呈正相关(r=0.404,P0.05),与疼痛评分呈正相关(r=0.597,P0.01),与排尿评分无相关性(r=-0.262,P=0.226),与生活质量评分无相关性(r=0.290,P=0.179)。结论精浆中IL-6含量可能作为CP/CPPS分型诊断指标,精浆中IL-6含量有望作为评价CP/CPPS病情程度的分子生物学指标。     

男性不育患者精浆免疫球蛋白的测定与临床意义

对114例男性不育(包括前列腺炎、无精子症和抗精子抗体阳性者等)患者进行精浆免疫球蛋白IgG、HgA、IgM含量的测定,并与12例正常人对照,结果发现前列腺炎组的IgG值明显增高;IgG值增高与前列腺炎呈明显的正相关。表明此种检测可作为诊断前列腺炎的一个指标。     

男性不育患者精浆尿酸的检测及临床意义初探

目的 :检测男性不育患者精浆尿酸的含量 ,并探讨其与不育的关系。　方法 :2 0 0 3年 2～ 8月就诊的男性不育患者 1 6 3例 ,分为 4组 :梗阻性无精子症组 ,1 5例 ;非梗阻性无精子症组 ,36例 ;少精子症组 ,4 3例 ;弱精子症组 ,6 9例。 2 0例正常生育男性为正常对照组。上述各组均作精液参数分析及精浆尿酸含量的测定。　结果 :正常对照组精浆尿酸含量为 (396 .9± 5 3.1 ) μmol/L ,显著高于梗阻性无精子症组 [(79.5± 1 8.1 ) μmol/L]、非梗阻性无精子症组[(2 4 5 .8± 76 .5 ) μmol/L]、少精子症组 [(2 6 2 .2± 79.2 ) μmol/L]和弱精子症组 [(2 5 1 .4± 75 .4 ) μmol/L](P均 <0 .0 1 )。其中 ,梗阻性无精子症组精浆尿酸含量又显著低于其他各不育症组 (P均 <0 .0 1 ) ,其余各不育症组间精浆尿酸含量差异无显著性 (P >0 .0 5 )。　结论 :精浆中尿酸作为生殖系统中的一种重要抗氧化物 ,可能在男性生殖中具有一定意义。     

miR-20b在肾癌中的表达分析及临床意义研究

目的检测miR-20b在肾癌及癌旁组织中的表达水平,分析miR-20b的表达与临床病理特征之间的关系,探究其临床意义。方法提取42例手术切除的肾癌及配对癌旁组织标本中的总RNA,经逆转录获得cDNA,通过实时荧光定量PCR检测研究标本中miR-20b的表达量,使用统计学软件分析miR-20b表达的差异及表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。结果 miR-20b在肾癌组织中的表达水平明显低于配对癌旁组织(P<0.05),其中有29例(69.048%)肾癌标本miR-20b表达下调。肾癌组织中miR-20b表达量与患者性别、年龄、肾癌组织类型、AJCC临床分期、TNM分期无明显相关(P>0.05)。结论 miR-20b在肾癌组织中的表达明显下调,提示其可能和肾癌的发生发展相关。     

miR-21在骨肉瘤中的表达及其临床意义

[目的]探讨miR-21在骨肉瘤中的表达并分析其与临床病理之间的联系。[方法]本文通过实时定量PCR方法检测42例骨肉瘤组织(包括12例来自同一患者的原发骨肉瘤组织和转移肿瘤组织)和来自同一患者的邻近正常骨组织中miR-21的表达并评估miR-21的临床相关性。[结果]miR-21在所有的组织中都有表达,且在肿瘤组织中比在正常组织中有明显的高表达(P=0.013),此外,miR-21在转移的肿瘤组织中比在同一样本中的原发肿瘤组织中高表达(P=0.002),另外,miR-21高表达的患者有着显著更差预后(P=0.016)。[结论]miR-21高表达潜在的导致转移,其可以作为骨肉瘤患者预后的一个指标。     

miR-18a在前列腺癌患者血清中的表达及其临床意义

目的探讨前列腺癌患者microRNA-18a(miR-18a)在血清中的表达及其诊断价值。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测60例前列腺癌患者(PCa)、30例良性前列腺增生患者(BPH)和20例健康对照者(HC)血清miR-18a的表达水平。分析miR-18a表达水平与前列腺癌Gleason分级、TNM分期及PSA的关系。通过分析受试者工作特征(ROC)曲线判断miR-18a表达水平在前列腺癌诊断中的灵敏度和特异度。结果PCa患者血清miR-18a的表达水平分别明显高于BPH组和HC组(P<0.01);miR-18a与Gleason评分、肿瘤分期有关(P<0.01);miR-18a与PSA之间呈正相关(r=0.701,P=0.000);miR-18a的ROC曲线下面积(AUC)为0.928(95%CI:0.880~0.976,P=0.000),敏感度为84.3%,特异度为75.8%。结论miR-18a在PCa患者血清中表达水平明显增高,对于PCa的诊断有潜在的临床参考价值。     

miR-130b和RUNX3mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究miR-130b和RUNX3mRNA在胃癌组织中的表达,并评价miR-130b对抑癌基因RUNX3表达的影响.方法 用荧光定量PCR技术检测40对胃癌组织及其对应的癌旁正常胃黏膜组织中miR-130b和RUNX3mRNA的表达量;用免疫组织化学SP法检测RUNX3蛋白的表达.结果 胃癌组织中miR-130b的表达显著高于对应的癌旁组织(2.18±3.75)比(2.59±3.45),P＜0.05;而胃癌组织中RUNX3mRNA的表达显著低于对应的癌旁组织(8.76±2.82)比(7.58±2.87),P ＜0.05.miR-130b和RUNX3mRNA的表达与胃癌的淋巴结转移、临床分期有关(P＜0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、有无浸润周边器官组织无关(均P ＞0.05).miR-130b的表达与RUNX3蛋白的核表达、细胞核+细胞质的表达存在负相关(P＜0.05),而与RUNX3mRNA、RUNX3蛋白的细胞质表达无相关性(P＞0.05).结论 miR-130b和RUNX3mRNA的异常表达与胃癌预后有关;miR-130b可能通过减少RUNX3蛋白的表达水平导致肿瘤的发生.     

miR-10b表达水平在系膜增生性肾小球肾炎患者中的表达及临床意义

目的:探究系膜增生性肾炎患者血清及尿液miR-10b水平的表达及其与临床指标间的关系,进而明确血清及尿液miR-10b表达水平在系膜增生性肾小球肾炎中的临床意义.方法:选择2018年3月—2019年9月间在我院接受治疗的45例系膜增生性肾小球肾炎患者血清及15例健康组志愿者的血液及尿液样本,通过荧光实时定量PCR进行血...     

miR-155在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-155在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法 收集2009年2月至6月乳腺癌手术切除标本45例,应用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织及正常乳腺组织标本中miR-155的表达水平,探讨其表达与乳腺癌临床病理参数间的关系.结果 茎环RT-PCR检测miR-155表达的敏感性和特异性良好;miR-155在乳腺癌中相对表达量的中位值为0.360,显著高于其在正常乳腺组织中的表达(中位值0.135,P<0.05);miR-155的表达增高与TNM分期较晚(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的中位值分别为0.316、0.358和0.417)、淋巴结转移(转移组和非转移组的中位值分别为0.383和0.355)、高增殖指数(Ki67≤10%组和>10%组的中位值分别为0.353和0.387)、雌激素受体阳性(阳性组和阴性组的中位值分别为0.367和0.318)及孕激素受体阳性(阳性组和阴性组的中位值分别为0.398和0.335)有关(P值均<0.05).结论 miR-155在乳腺癌组织中表达增高,尤其是在雌、孕激素受体阳性的乳腺癌组织中表达增高更为明显.miR-155与乳腺癌的增殖、侵袭及转移密切相关,其可能成为乳腺癌治疗、预后判断的潜在生物学指标.     

miR-155在结肠癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究miR-155在结肠癌组织中的表达并探讨其表达与结肠癌临床病理特征的关系.方法 收集2011年3月至9月襄阳市中心医院手术切除的原发性结肠癌标本57例,分别提取结肠癌和正常黏膜组织中总RNA并行逆转录反应,应用实时荧光逆转录聚合酶链反应检测肿瘤组织及正常黏膜组织中miR-155的表达水平,探讨其表达与结肠癌临床病理参数间的关系.配对标本采用非参数Wilcoxon秩和检验,两独立样本采用u检验.结果 miR-155在结肠癌组织中相对表达水平为0.421(0.016 ～1.241),显著高于其在正常黏膜组织中表达的0.128(0.000～0.337),两者比较,差异有统计学意义(u=3.783,P＜0.05);miR-155的表达增高与TNM分期、肿瘤浸润程度、淋巴结转移、肿瘤分化程度明显相关(u=2.364,2.152,2.338,2.214,P＜0.05).结论 miR-155在结肠癌组织中表达增高,miR-155可能作为原癌基因参与结肠癌的发生、发展,与结肠癌的侵袭、转移密切相关.     

miR-153在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨miR-153在胃癌中的表达及其临床意义。方法:收集49例胃癌根治术后组织和配对癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-153的表达水平,并分析其与胃癌临床TNM分期、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移等临床病理参数之间的关系。结果:miR-153在胃癌组织中的表达量显著低于相应癌旁正常组织(P0.01),miR-153的表达量与胃癌淋巴结转移有关(P0.05),与民族、性别、年龄、分化程度、肿瘤大小、临床TNM分期等病理参数无关(P0.05)。结论:miR-153在胃癌组织中低表达,提示miR-153可能与胃癌的发生发展有关。     

miR-19 在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的：探讨肝细胞肝癌（HCC）组织中miR-19的表达情况及其临床意义。 方法：用qRT-PCR的方法检测51例HCC组织及其癌旁组织以及10例正常肝组织中miR-19的表达;分析了miR-19表达与HCC患者临床病理因素及预后的关系。 结果：miR-19的表达量在正常肝组织、癌旁组织、HCC组织中依次增高,差异均有统计学意义（均P<0.05）。miR-19表达与HCC患者的肿瘤大小（P=0.029）、转移（P=0.011）、静脉侵犯（P=0.002）及AJCC分期（P=0.008）有关,而与年龄、性别、肿瘤分化、卫星灶、肿瘤数量及AFP无相关（均P>0.05）。miR-19高表达的患者5年生存率明显低于低表达的患者（P<0.05）。miR-19高表达以及转移、静脉侵犯均为影响HCC患者生存的独立风险因素（均P<0.05）。 结论：miR-19在HCC组织中表达上调,并可能与HCC的增殖、转移有关;miR-19高表达提示预后不良。     

miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的研究miR-196b和HoxB8在结直肠癌组织中的表达及与其临床病理特征的关系,并探讨在结直肠癌组织中miR-196b与靶基因HoxB8表达的关系。方法用实时荧光定量PCR技术检测30例结直肠癌组织及对应的正常黏膜组织中miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA的表达量,用Western blot法检测HoxB8蛋白的表达。结果 miR-196b mRNA和HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中的表达量均高于其在对应的正常黏膜组织中的表达量（P〈0.05）。miR-196b mRNA的表达与结直肠癌的淋巴结转移、肿瘤分期（Ⅰ＋Ⅱ与Ⅲ＋Ⅳ）及远处转移均有关（P〈0.05）,而与肿瘤部位、大小、大体类型、浸润深度、组织分化程度、患者的年龄及性别均无关（P〉0.05）;HoxB8mRNA的表达与结直肠癌的上述临床病理特征均无关（P〉0.05）。miR-196b mRNA与HoxB8 mRNA的表达存在负相关（r=-0.458,P〈0.05）,而与HoxB8蛋白的表达无明显相关性（r=-0.236,P〉0.05）。结论 miR-196bmRNA及HoxB8 mRNA在结直肠癌组织中均呈高表达,miR-196b mRNA的高表达与结直肠癌的发生、发展及预后有关。miR-196b可能通过与靶基因HoxB8 mRNA的3′非编码区结合抑制HoxB8 mRNA的表达。     

男性不育患者精浆转铁蛋白含量测定

人类精浆中包含着大量的由支持细胞分泌的转铁蛋白(Transferrin,Tf)。本文采用单向免疫扩散法测定了50例生育男性、56例妻子流产的男性及143例不育男性精浆Tf含量。结果表明精子密度、活动力、活动率等皆与精浆Tf含量呈正相关;正常生育男性的精浆Tf含量与不育男性有高度显著性差异(P<0.01),而与妻子流产的男性则无明显差异(P>0.05)。精浆Tf含量测定有助于评价精子质量,可以作为反映支持细胞功能的特异性指标。     

男性不育患者精浆内细胞因子研究

为了研究精浆内细胞因子对男性生育能力的影响,通过对男性不育患者和正常生育男性精浆内细胞因子含量的测定（ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） ,发现少精和无精不育患者伴有生殖系特异感染（ 支原体、衣原体、淋球菌） 时细胞因子（ Ｉ Ｌ１ , Ｔ Ｎ Ｆα, Ｉ Ｌ６） 的水平明显高于无生殖系特异感染的不育患者和正常男性,差异有极显著性（ Ｐ＜ ０ ．００１） ,显示在炎症特别是性传播疾病时所产生的细胞因子与男性不育有密切相关性,说明精浆内明显表达不同的细胞因子可能参与影响精子功能,是导致男性不育的原因之一。     

男性不育患者精浆中细胞因子研究

细胞因子是指由活化免疫细胞和某些基质细胞分泌的小分子多肽,种类繁多,其共同特点是低分子量、高效能、旁分泌或自分泌,通过与靶细胞上受体结合,参与免疫调节和炎性反应。各细胞因子间可相互协同或相互拮抗,其生物学作用及调节机制具有双向性、多样性和网络性。现就白细胞介素(IL-1)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的来源、作用机制及在男性生殖系内的作用作一综述。1　IL-1和TNF-︿的来源及作用机制IL-1和TNF-α主要由单核巨噬细胞分泌,有学者在体外试验时已观察到睾丸间质巨噬细胞能表达IL-1和TNF-αmRNA以及巨噬细胞与Leydig细胞存在…     

男性不育患者精浆透明质酸含量观察

男性不育是男性学研究的重要课题,病因较为复杂,我们观察了80例患者精浆透明质酸(Hyaluronic acid,HA)含量,现报告如下。 对象和方法生育组30例,为正常生过1胎的男性志愿者,年龄24～32岁,平均26.6岁,精液常规检查正常。流产组22例,为妻子有过习惯