微波辐射对雄性小鼠生殖系统的影响

目的观察微波辐射对雄性小鼠生殖系统的影响,并初步探讨其作用机制。方法将48只雄性昆明小鼠随机分成微波辐射低、中、高强度组(微波辐射功率密度分别为5、10、15mW/cm~2强度)和对照组,对小鼠辐射1h/d,连续30d。微波辐射结束后进行小鼠性行为能力的观察扑捉潜伏期(capture incubation period,CIP)、扑捉次数(capture times,CT)、精子相对计数、精子畸形数、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)等指标的检测。结果 15mW/cm~2强度辐射后15d小鼠的扑捉潜伏期显著延长、扑捉次数显著减少(P0.05),10mW/cm~2强度辐射后30d小鼠的扑捉潜伏期显著延长、扑捉次数显著减少(P0.05);精子相对计数明显减少(P0.05);精子畸形率明显增加(P0.05);血清和睾丸组织中SOD的活性显著降低(P0.05);血清和睾丸组织中MDA的含量显著增加(P0.05);5mW/cm~2强度辐射组上述各项指标与对照组相比均未见明显变化。结论低功率微波辐射可对雄性小鼠生殖系统产生影响,其作用机制可能与生殖细胞的氧化损伤有关。     

烟雾暴露大鼠氧化应激生精损害的中医药治疗实验研究

目的 研究补肾填精中药麒麟丸对烟雾暴露造成氧化应激所致大鼠睾丸、附睾与精子的抗氧化作用。方法 随机将60只雄性成年大鼠均分6组:空白组、模型组、五子衍宗丸组、麒麟丸低剂量组、麒麟丸中剂量组、麒麟丸高剂量组。除空白组外,每天上午烟雾暴露制备大鼠睾丸生殖毒性模型,下午灌胃给药,每周测量体质量,调整给药剂量,连续56d后,处死大鼠取样检测,取血清测定睾酮(T)水平;分别称取大鼠精囊腺、附睾、睾丸的质量并计算相应器官指数;留取附睾内精液,进行计算机辅助的精液分析(CASA)及精子DNA完整率分析;酶联法测定睾丸谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;睾丸附睾病理组织学检查。结果 模型组大鼠精子总活力[前向运动(PR)%+非前向运动(NP)%]显著下降,睾丸附睾匀浆MDA水平(28.0±3.2)显著升高,而SOD(13.2±2.0)、GSH-Px(21.1±8.3)明显降低,与空白组相比均有显著差异(P0.05);麒麟丸各剂量组大鼠精子浓度及总活力比空白组下降,但仍显著高于模型组(P0.05),MDA显著低于模型组(P0.05),SOD及GSH-Px显著高于模型组(P0.05);麒麟丸中、高剂量组大鼠精子正常形态率及各剂量组DNA完整率显著高于模型组(P0.05)。病理检查:与空白组相比,模型组呈生精功能减低改变。表现为睾丸生精小管萎缩,排列变稀疏,生精上皮变薄,生精细胞减少;附睾管腔内成熟精子变少;精囊腺管腔内分泌物减少,上皮乳头萎缩、数量减少。麒麟丸组与模型组相比,随着剂量增加,生精功能减低的例数逐渐减少,疗效与剂量间有依从关系。结论 补肾填精中药麒麟丸可通过提高抗氧化酶活性,抑制氧化应激的发生,起到抗氧化作用,同时可以修复烟雾暴露对睾丸、附睾、精囊腺造成的病理损伤,最终可以保护生精功能,提高精子浓度、总活力与正常形态率,降低精子DNA碎片率。     

新生期甲醛染毒对成年后大鼠雄性性行为、睾丸重量以及血清睾酮水平的影响

目的观察新生期甲醛染毒对成年后大鼠雄性性行为、睾丸重量和血清睾酮水平的影响。方法选用健康清洁级新生7日龄雄性SD大鼠24只,随机分为高剂量甲醛（10mg/m3）、低剂量甲醛（0.1mg/m3）染毒组和对照组3组,甲醛染毒14d后常规饲养4周至成年。然后分别观察成年后雄性大鼠的扑捉潜伏期（CLP）和60min内扑捉雌鼠的次数（CT）,称量睾丸重量以及利用放免法测定大鼠血清睾酮（T）水平。结果低剂量甲醛染毒组大鼠CLP,CT,睾丸重量以及血清睾酮含量与对照组相比没有明显差异。但高剂量甲醛染毒组大鼠的扑捉潜伏期（CLP）与对照组相比明显升高（P〈0.05）;60min内扑捉雌鼠的次数（CT）、睾丸重量与对照组相比均明显下降（P〈0.05）;大鼠血清睾酮水平与对照组和低剂量甲醛染毒组相比轻度下降。结论新生期甲醛染毒对成年后雄性大鼠性行为以及睾丸有一定的损伤作用,并且损伤具有剂量依赖性。     

维生素E对邻苯二甲酸二异辛酯致雄性大鼠生殖毒性的拮抗作用

目的:探索维生素E(VE)对青春期邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)暴露致雄性大鼠生殖毒性的干预作用以及其机制。方法:将30只35日龄雄性SD大鼠(体重96~122 g)随机分为对照组(玉米油),低[10 mg/(kg·d)]、中[100 mg/(kg·d)]、高[500 mg/(kg·d)]DEHP组,以及VE干预组[(500 mg/(kg·d)DEHP+100 mg/(kg·d)VE],各组给予相应食物30 d。在染毒干预结束后,分别检测大鼠睾丸组织氧化应激指标、附睾尾部精子参数、血清生殖激素水平、凋亡相关靶基因及蛋白的表达。结果:与对照组比较,中、高DEHP组血清中FSH、LH和T水平明显降低,精子运动参数VAP、VCL明显降低,SOD和GSH-Px活力显著降低,Bak、Bax基因表达和Bax/Bcl-2基因表达比值显著升高,细胞色素C mRNA表达及细胞色素C和Caspase-3蛋白表达均显著上调(P均0.05);高DEHP组MDA含量[(3.32±0.87)nmol/mg pro vs(2.13±0.49)nmol/mg pro]明显升高,精子运动参数VAP、VCL、VSL、STR、LIN、WOR均明显降低(P0.05)。与高DEHP组比较,VE干预组的LH和T水平明显升高;VAP、VSL、VCL、STR和WOB明显升高;SOD和GSH-Px活力显著升高;MDA含量明显降低;Bak、Bax基因表达和Bax/Bcl-2基因表达比值显著降低;细胞色素C、Caspase-3 mRNA表达及蛋白表达均显著下调(P均0.05)。结论:青春期DEHP暴露可抑制生殖激素分泌或释放,导致雄性大鼠睾丸组织氧化损伤,激活细胞线粒体凋亡通路,也可导致附睾精子质量下降;而VE对DEHP所诱导的雄性生殖毒性具有一定的拮抗作用。     

光照应激对雄性大鼠生殖相关参数的影响

目的 观察比较光照应激状态下不同应激时间段SD大鼠生殖相关参数的变化.方法 建立SD大鼠的光照应激模型分为光照应激短期(2d、3d、4d、7d)和光照应激长期(14d、21d、28d),并分别取应激状态下SD大鼠睾丸、附睾称重,对附睾尾精子计数,HE染色观察睾丸结构,应用免疫组织化学和westernblot分析3 β-HSD表达,比较各实验组和对照组问上述指标的变化.结果 短期光照应激组(2d、3d、4d、7d)与对照组相比,大鼠体重、睾丸重量、附睾重量、精子数量没有明显变化(P>0.05),HE染色显示睾丸结构无明显变化,免疫组化和western blot显示3β-HSD表达无明显变化.长期光照应激组与对照组相比,大鼠重量、睾丸和附睾重量都有明显增加.与对照组相比,14 d实验组的附睾重量有显著性差异(P<0.05):21 d、28 d实验组的睾丸重量有显著差异(P<0.05),21 d、28 d实验组的体重、附睾重量和精子相对计数都有极显著差异(P<0.01).HE染色显示睾丸内生精小管变粗,管腔内生精细胞增多,免疫组化和western blot显示长期应激组14 d的3β-HSD相对表达量增加20.3%,有显著性差异(P<0.05);21d和28d实验组3β-HSD的相对含量分别增加30.4%和43.3%,差异极显著(P<0.01).结论 短期光照应激不能破坏大鼠机体内稳态的调节机制,对生殖的影响并不明显;而长期处于光照应激状态下的雄性大鼠,超出机体内稳态的调节能力,对生殖的影响不仅表现在体重、睾丸、附睾和附睾尾的重量增加,而且精子相对计数及睾丸结构都发生相应变化,3β-HSD表达量也明显增加.提示光照是影响大鼠生殖功能的一个因素.     

巴戟天根两种提取物对微波损伤大鼠生精功能的影响

目的:探讨巴戟天根不同浓度提取物对微波损伤的雄性SD大鼠生精功能的影响。方法:40只健康雄性SD大鼠先分为正常对照组和辐射组,辐射后再将辐射组分为辐射模型组,巴戟天根水提物治疗组和巴戟天根醇提物治疗组,每组10只。辐射组应用微波信号发生器(900 HZ 1.0 W),功率密度为218μm/cm2,12 h/d,持续辐射2周。治疗组在辐射后分别给予巴戟天根水提物和巴戟天根醇提物20 g/(kg.d)持续灌胃2周。观察各组大鼠生长发育,扑捉潜伏期(CIP)和扑捉次数(CT),睾丸和附睾指数及精子形态学的差异,精子浓度、精子畸形率以及血清睾酮的浓度。结果:与正常对照组[(269.50±36.07)g]相比,辐射模型组[(254.77±20.38)g]大鼠体重稍降低,CIP延长及CT减少(P<0.05),精子浓度[(87.717±12.365)×106/ml]降低及精子畸形率[(0.126±0.100)×106/ml]明显升高(P<0.05);睾丸和附睾出现不同程度的病理损伤改变,睾丸指数降低,血清睾酮水平无明显变化。两治疗组较正常对照组体重显著下降(P<0.05),血清睾酮的水平显著升高,且与辐射模型组相比CT增加、CIP缩短、精子浓度显著升高、畸形率显著下降、血清睾酮的水平升高(P<0.05)。治疗组睾丸的病理性损伤显著修复,附睾管内除见大量精子外,还可见大量脱落的细胞。结论:巴戟天根的水提取物和醇提取物均可促进微波辐射损伤的生殖器官的修复以及精子的生成。     

慢性疼痛应激对雄性SD大鼠生殖相关参数的影响

目的 观察不伺时间段慢性疼痛应激后,SD大鼠生殖相关参数的变化.方法 建立坐骨神经分支选择性损伤模型.经不同时间疼痛应激后,于14 d、21 d和28 d处死大鼠,取睾丸、附睾称重,并对附睾尾精子计数,HE染色显示睾丸结构变化,western blot检测3 β-HSD蛋白表达的改变.结果 14 d和21 d手术组大鼠体重均略低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).不同时间段各组大鼠睾丸和附睾系数均无明显变化.28 d后手术组附睾尾精子相对计数显著低于对照组(P<0.05).HE染色显示,坐骨神经分支选择性损伤诱导疼痛应激28 d后睾丸生精上皮中生精细胞减少,生精小管腔内精子数量减少.Western blot结果显示28 d手术组3 β-HSD表达显著低于正常照组和假手术组(P<0.05).结论 慢性疼痛应激如其他方式应激一样,能引起大鼠附睾尾精子相对计数减少,睾丸生精上皮中生精细胞减少,睾丸内3 β-HSD含量降低,慢性疼痛应激降低了大鼠的生精功能.     

4G手机射频电磁辐射阴囊暴露对成年大鼠生精能力和血-睾屏障的影响

目的:探讨4G手机射频电磁辐射阴囊暴露对成年大鼠睾丸的直接影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组及暴露组,建立阴囊局部暴露模型,暴露组接受6 h/d的辐射,共150 d。分析精液质量和生精上皮变化;检测抗氧化酶-过氧化物水平及血-睾屏障蛋白的表达。结果:与对照组相比,暴露组精子浓度(6.39±0.82 vs 4.74±0.87)(×10~7/ml)、活率(62.11±8.82 vs 41.44±7.33)(%)、总活力(55.71±7.39 vs 36.22±6.36)(%)及正常形态精子百分率(84.89±5.11 vs 70.78±8.11)(%)明显降低(P0.05);暴露组Johnsen评分明显减低(8.38±0.98 vs 6.11±1.56,P0.05),Coentino评分明显增高(1.36±0.21 vs 1.81±0.34,P0.05);暴露组MDA水平明显上升(P0.05),SOD、GSH及CAT水平明显下降(P0.05);暴露组Occludin、ZO-1、CAR及N-Cadherin水平显著降低(P0.05)。结论:4G手机射频电磁辐射阴囊局部暴露可直接导致成年睾丸损伤、血-睾屏障紊乱及精子质量下降,造成大鼠生育力下降。     

pH2AX蛋白在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化

目的:探讨pH2AX在单次热应激致小鼠睾丸生殖功能可逆性中的表达变化。方法:C57雄性小鼠24只,随机按1、7、14 d分为对照组(n=6)和热应激组(n=6)。热应激组和对照组小鼠下腹部分别置于43℃和25℃水浴中干预15 min,于处理后1、7、14 d取睾丸组织。TUNEL检测睾丸细胞凋亡情况,免疫组化染色检测pH2AX蛋白定位及表达,Western印迹检测pH2AX蛋白表达水平。结果:TUNEL结果显示,在热应激后的第1天生精小管中的凋亡细胞数量最多,第7、14天细胞凋亡基本消失。免疫组化显示,pH2AX蛋白在睾丸生精小管基底膜处细胞核表达。Western印迹检测显示,与对照组相比,热应激后的第1天,pH2AX蛋白表达明显增加(0.47±0.02 vs 1.61±0.04,P0.01);第7天(0.85±0.03)与热应激处理第1天相比pH2AX蛋白表达显著减少(P0.01);第14天(1.72±0.02)与热应激处理第1、7天及对照组相比pH2AX蛋白表达显著增加(P均0.01)。结论:小鼠睾丸热应激处理后pH2AX蛋白表达量在睾丸中出现动态变化,这种变化与热应激后睾丸生精细胞的增殖分裂相关。     

枸杞多糖对热应激大鼠生精细胞Bax和Cyt C表达的影响

目的研究枸杞多糖(L B P )对热应激睾丸组织形态学及生精细胞中B a x 和细胞色素C (cytochrome c,Cyt C)表达的影响.方法90只雄性SD大鼠,随机分为正常对照组、热应激组、LBP高剂量组(100mg/kg ·d-1)、中剂量(50 mg/kg ·d-1)和低剂量组(10 mg/kg ·d-1).LB P 组大鼠按以上剂量给予LBP连续灌胃14 d,正常对照组及热应激组给予等量生理盐水灌胃,于第15天给予热应激组和LBP组大鼠43℃水浴30min.于热应激后1d、2d和7d,分别处死各组大鼠,取出睾丸组织.采用HE染色观察睾丸组织形态学变化,免疫组化法检测睾丸生精细胞Bax和Cyt C的表达.结果与热应激组比较,各LBP组大鼠的体质量、睾丸质量、睾丸指数及生精小管直径显著增加(P<0.05),生精细胞中Bax和Cyt C的表达显著降低(P<0.05),以10mg/kg·d-1组效果最为明显.结论 LBP可能通过抑制Bax的活化,从而抑制Cyt C自线粒体释放到胞浆,进而减少Caspase-3的活化,通过线粒体途径起到保护睾丸组织的作用.     

尾悬吊状态对性成熟期雄性大鼠生殖功能的影响

目的:探讨尾悬吊造成的模拟失重状态对性成熟期雄性大鼠生殖功能的影响及其机制,为研究太空环境对人类生殖功能的影响打基础。方法:性成熟期健康SD雄性大鼠40只,随机分为4组,每组10只,分为实验1组(尾悬吊14 d)、实验2组(尾悬吊28 d)和对照1组(自由活动14 d)、对照2组(自由活动28 d),观察睾丸的重量和形态学改变、精子数量和质量改变、血液中激素含量的改变,并利用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸细胞的凋亡。结果:各悬吊组大鼠睾丸重量与相应对照组相比明显下降(P<0.05),附睾精子数量和活动率明显减少(P<0.05),精子畸形率和凋亡率明显增加(P<0.05),卵泡刺激素和黄体生成素轻度增高,而睾酮含量明显下降(P<0.05)。但上述变化在悬吊14 d组和28 d组之间无明显差异(P>0.05)。另外,悬吊组睾丸组织生精小管萎缩,生精上皮细胞层数逐渐减少,管腔内的精子数明显减少,悬吊28 d组比悬吊14 d组改变更明显。结论:模拟失重对性成熟期雄性大鼠生殖功能有较明显的损害,这种损伤可能与引起睾丸生精细胞凋亡有关。抑制睾丸生精细胞凋亡也许可以防护失重状态下的生殖损害。     

丹血通注射液对大鼠睾丸扭转复位后的保护作用

目的:研究丹血通注射液对大鼠睾丸扭转复位后缺血再灌注损伤的保护作用。方法:将32只4周龄健康SD雄性大鼠,随机分为丹血通注射液单次给药组、丹血通注射液连续给药组、生理盐水组和假手术组,每组8只。建立单侧睾丸扭转复位动物模型(720°,2 h)。于术后6周处死大鼠,计算睾丸系数,测定精子计数和精子活动率,检测睾丸组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性与丙二醛(MDA)含量。结果:丹血通注射液单次给药组、连续给药组手术侧睾丸系数(0.35±0.04、0.40±0.06)比同侧生理盐水组(0.11±0.03)均显著升高(P均0.05);精子计数[(1.44±0.50)、(3.00±1.28)×109/ml]和精子活动率[(39.63±5.04)%、(76.31±3.67)%]比同侧生理盐水组[(0.46±0.10)×109/ml、(13.63±14.04)%]均显著升高(P均0.05);两给药组SOD(116.25±8.83、133.20±13.84)、T-AOC(13.34±5.81、19.21±5.69)活性和MDA含量(20.94±5.65、15.02±1.03)比同侧生理盐水组SOD(72.76±5.58)、T-AOC(5.58±1.07)活性升高和MDA含量(42.38±8.94)显著降低(P均0.05)。且连续给药组手术侧与单次给药组睾丸系数、精子计数、精子活动率、SOD、MDA、T-AOC比较差异均有显著性(P均0.05)。结论:丹血通注射液可有效清除氧自由基,通过抗氧化作用可以提高精子的活动率和数量,对青春前期大鼠睾丸缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,对其对侧睾丸亦有一定的保护作用,且连续给药效果明显优于单次给药。     

氰戊菊酯对大鼠精子及生殖激素的影响

目的探讨氰戊菊酯(Fen)对雄性大鼠精子计数、活力以及生殖激素的影响。方法成年雄性SD大鼠,分别以0、20、40、80mg/kg剂量的Fen连续灌胃染毒15和30d,按常规方法进行精子计数和精子活力检测,应用放射免疫法和化学发光免疫法测定大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)和睾丸匀浆中T、E2水平。结果Fen染毒15d时,与0mg/kg组相比,40mg/kg剂量组精子数量明显减少(P<0.01),20和40mg/kg组睾丸匀浆中T水平显著降低(P<0.01,P<0.05),血清LH、FSH水平随染毒剂量的增加而升高,且FSH水平和染毒剂量有显著的剂量-效应关系(P<0.05);Fen染毒至30d时,各组间精子数量差异不显著,与0mg/kg组相比,40mg/kg剂量组(a+b)级精子活力显著降低(P<0.05),血清LH、FSH水平随染毒剂量的增加而升高,但差异不显著。结论Fen对雄性大鼠有明显的生殖毒性作用,能够改变血清和睾丸中的生殖激素水平。     

灯盏花素对青春前期大鼠睾丸扭转复位双侧睾丸的保护作用

目的:探讨灯盏花素青春前期大鼠睾丸扭转复位双侧睾丸的远期保护作用。方法:对建立左侧睾丸扭转复位动物模型,将32只4周龄健康SD雄性大鼠随机分为4组:假手术组、生理盐水组(腹腔内注射生理盐水2 mg/kg)、灯盏花素单次给药组(睾丸复位前30 min,腹腔缓慢注入灯盏花素2 mg/kg,给药体积为0.5 ml/100 g体重)和灯盏花素连续给药组(在单次给药组的基础上,于术后每天注射同等剂量灯盏花素注射液1次,连续7 d),每组8只。术后6周处死大鼠,取双侧睾丸和附睾,检测睾丸组织总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性与丙二醛(MDA)含量,测定精子浓度、存活率和活动率,行睾丸组织病理学观察。结果:与同侧生理盐水组比较,两给药组双侧SOD、T-AOC、NOS活性、精子浓度、精子存活率和精子活动率均升高,MDA含量下降,其中各检测指标除单次给药组健侧T-AOC活性、精子浓度、精子活动率、双侧NOS活性及连续给药组健侧NOS活性外差异均显著(P0.05);与同侧单次给药组比较,连续给药组双侧SOD、T-AOC、NOS活性、精子浓度、精子存活率和精子活动率均升高,MDA含量下降,其中各项指标除健侧NOS活性外差异均显著(P0.05)。生理盐水组可见双侧生精小管退变,间质水肿,且患侧受损明显大于健侧;两给药组使双侧睾丸扭转复位后损伤的组织学改变明显改善。结论:灯盏花素可通过有效清除氧自由基,减轻脂质过氧化损伤,对青春前期大鼠睾丸扭转复位双侧睾丸有明显的保护作用,且连续给药明显优于单次给药。     

金匮肾气丸拮抗环磷酰胺对大鼠生殖毒性的实验研究

目的 探讨金匮肾气丸对腹腔注射环磷酞胺(CTX)雄性SD大鼠生殖功能的影响.方法 取15月龄雄性SD大鼠40只,随机分成模型组和金匮肾气丸高、中、低剂量治疗组,每组均10只,每组大鼠均给予腹腔注射环磷酰胺混悬液(1ml/kg·d-1,qd)连续5d.模型组以蒸馏水灌胃,治疗组以金匮肾气丸混悬液高、中、低剂量灌胃,连续28d.末次给药24h后处死动物,测睾丸、附睾的湿重:观察精子密度、活力和活率.结果 用药后,金匮肾气丸组大鼠睾丸及附睾脏器系数与模型组相比显著提高(P＜0.01):与模型组比较,金匮肾气丸各组精子密度明显升高(P＜0.05);与模型组比较,高剂量组精子活力升高(P＜0.05),而中、低剂量组则差异无统计学意义,P＞0.05;与模型组比较,中、高剂量组精子活率明显升高(P＜0.05),其中,以高剂量组最为明显(P＜0.01),而低剂量组则差异无统计学意义.结论 金匮肾气丸可以提高环磷酞胺染毒大鼠的睾丸、附睾脏器系数,提高精子密度、活力和活率.金匮肾气丸可以有效拮抗环磷酞胺对SD大鼠的生殖毒性,保护其生殖功能.     

通痹合剂对雄性大鼠生殖系统的影响

目的 观察通痹合剂对雄性大鼠性激素水平及生殖功能的影响.方法 27只成熟雄性SD大鼠,随机分成3组:正常组、合剂1组和合剂2组每组9只.对照组喂服生理盐水10ml/kg·d-1,合剂1组喂服合剂30g/kg·d-1,合剂2组喂服合剂10g/kg·d-1,60d后处死.检测睾丸系数、精子密度、形态、活力等及血清生殖激素(T、FSH、LH、E2).光镜观察睾丸和附睾组织的病理变化.结果 各组间血清生殖激素水平无统计学差异(P＞0.05).与正常组比较,合剂1组睾丸系数、精子密度显著下降(P＜0.01),合剂2组无统计学差异(P＞0.05).给药组精子形态异常,活动力丧失.光镜下合剂1组睾丸组织严重损伤,合剂2组睾丸组织几乎无损伤.结论 通痹合剂具有明显的抗雄性生育作用,其影响程度呈剂量-效应关系.     

虾青素在奥硝唑致少弱精子症大鼠氧化损伤中的保护作用研究

目的:探讨虾青素(AST)对奥硝唑(ORN)致少弱精子症大鼠精子质量的改善作用及其机制。方法:40只成年雄性SD大鼠,随机分成5组,每组8只。分别为A组(溶剂对照组):0.5%羧甲基纤维素钠溶剂+1 ml玉米油、B组(ORN低剂量造模组):ORN 400 mg/(kg·d)、C组(ORN高剂量造模组):ORN 800 mg/(kg·d)、D组(ORN低剂量造模+AST治疗组):ORN 400 mg/(kg·d)+AST 20 mg/(kg·d)、E组(ORN高剂量造模+AST治疗组):ORN 800 mg/(kg·d)+AST 20 mg/(kg·d),灌胃3周后水合氯醛腹腔麻醉大鼠;取1侧附睾尾部检测精子浓度和活力,另1侧附睾组织匀浆,检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽还原酶(GR)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与A组相比,B组附睾尾精子活力,附睾GSH-Px、SOD活性显著降低,MDA含量显著上升(P﹤0.05);C组附睾尾精子活力、浓度、睾丸系数,附睾组织GSH-Px、GR、CAT、SOD活性均显著降低,而MDA含量显著上升(P﹤0.05)。AST治疗组:与B组相比,D组附睾尾精子活力和附睾组织SOD活性显著增加[(45.3±8.7)%vs(66.3±8.9)%;(116.7±25.3)U/mg prot vs(146.1±23.8)U/mg prot,P﹤0.05],而MDA含量显著下降[(1.68±0.45)nmol/mg prot vs(1.19±0.42)nmol/mg prot,P﹤0.05];与C组相比,E组实验后体重增量、精子活力显著增加,而MDA含量显著下降[(89.0±9.5)%vs(99.9±4.1)%;(17.9±3.5)%vs(27.3±5.3)%;(2.03±0.30)nmol/mg prot vs(1.52±0.41)nmol/mg prot,P﹤0.05]。结论:AST可提高ORN致大鼠少弱精子症模型的精子质量,其机制可能是提高了大鼠附睾的抗氧化能力。     

他达拉非对大鼠睾丸缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨5型磷酸二酯酶抑制剂他达拉非在大鼠睾丸缺血再灌注模型中的保护作用。方法:将84只健康成年雄性SD大鼠随机分成4组,A组:假手术组;B组:小剂量他达拉非组;C组:大剂量他达拉非组;D组:安慰剂组。每组21只,B、C、D组建立右侧睾丸扭转复位模型(720°,2 h)。术后立即予A、B组按他达拉非剂量为0.5 mg/(kg·d)灌胃,C组按他达拉非剂量为2 mg/(kg·d)灌胃,D组用等剂量的生理盐水灌胃,用药3、7、14 d后,取各组7只大鼠扭转侧睾丸,检测睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,并光镜检测睾丸组织病理学参数。结果:B组[3 d:(254.46±7.43)n U/mg prot;7 d:(278.49±8.33)n U/mg prot;14 d:(317.99±3.31)n U/mg prot]、C组[3 d:(277.12±8.80)n U/mg prot;7 d:(309.40±2.14)n U/mg prot;14 d:(320.39±4.72)n U/mg prot]SOD活性均显著高于同期D组[3 d:(223.21±4.65)n U/mg prot;7 d:(231.45±4.16)n U/mg prot;14 d:(248.28±5.74)n U/mg prot],MDA含量均显著低于同期D组。C组3、7 d的SOD活性显著高于同期B组(P0.01),而MDA含量显著低于同期B组(P0.01),14 d时的SOD与MDA两组间没有显著性差异(P0.05)。睾丸组织的病理学改变:A组睾丸组织未见明显损伤,B组3、7、14 d之间病理学参数(生精上皮层数、睾丸结构得分、生精小管直径)存在显著差异(P0.01),B组14 d时和C组7 d时测得的生精上皮层数、睾丸结构评分、生精小管直径与A组14 d时没有显著性差异。结论:他达拉非可明显改善睾丸扭转后的缺血再灌注损伤,改善程度与用药时间、用药剂量呈明显的相关性。     

吗啡耐受对雄性大鼠生精功能影响的初步探讨

目的:研究在吗啡耐受模型中吗啡治疗疼痛时,对雄性大鼠的生殖能力造成的影响,并探讨其机制。方法:20只SD雄性大鼠,体重200~250 g,随机分为2组,Ⅰ组对照组,Ⅱ组吗啡耐受组,第一天行行为学测试,测定大鼠基础热缩足潜伏期(PWTL),然后皮下注射吗啡10 mg/kg,计算30 min时各组大鼠吗啡的MPE值。第2天,Ⅰ组注射生理盐水,每天2次;Ⅱ组皮下注射吗啡10 mg/kg,每天2次;Ⅰ组和Ⅱ组连续注射7 d,皮下注射时间为每天8:00和17:00,第7天进行行为学测试,方法同第1天。行为学检测完毕立即处死大鼠,留取附睾,对附睾尾进行精子计数;睾丸,采用免疫组织化学检测Bax和Caspase-3的表达。结果:第1天两组大鼠基础热痛阈和MPE值无明显差异。第7天两组大鼠的基础热痛阈无明显差异,但与Ⅰ组相比,Ⅱ组的MPE值降低(P0.05);说明吗啡耐受模型制作成功,精子计数显示,吗啡耐受组精子相对数目明显减少(P0.05),睾丸组织切片中,吗啡组Bax和Caspase-3的阳性表达都高于对照组。结论:吗啡耐受模型中,雄性SD大鼠的精子相对数目减少,吗啡组Bax和Caspase-3的阳性表达都高于对照组,由此推测,吗啡耐受可能通过上调Bax和Caspase-3增加雄性大鼠生殖系统的细胞凋亡,影响精子浓度。     

肥胖对雄性大鼠生殖功能影响的机制研究

目的研究肥胖对雄性大鼠生殖功能的影响,初步探讨其氧化损伤的相关机制。方法 6周龄SD雄性大鼠随机分成对照组(普通饮食,15只)和肥胖组(高脂饮食,30只)。喂养16周后,处死,测定体重、脏器系数、代谢参数和生殖内分泌激素(GnRH、FSH、LH、TT、E_2)和SHBG,检测睾丸生精细胞凋亡、氧化应激和附睾精子参数,比较两组各指标差异。结果与对照组大鼠相比,肥胖组大鼠体重和Lee指数明显增加,血清瘦素(Lep)[(3.17±0.23)ng/ml vs.(2.33±0.21)ng/ml]、胰岛素(INS)[(28.99±2.43)μU/ml vs.(20.62±1.72)μU/ml]和甘油三酯(TG)[(0.55±0.03)mmol/L vs.(0.36±0.04)mmol/L]显著升高,血清GnRH[(36.46±1.95)pg/ml vs.(45.51±2.75)pg/ml]、LH[(3.06±0.37)U/L vs.(4.67±0.70)U/L]、总睾酮(TT)[(0.81±0.13)ng/ml vs.(1.98±0.32)ng/ml]、SHBG[(55.31±3.80)nmol/L vs.(71.69±4.65)nmol/L]显著降低,差异均有统计学意义(P0.05);TUNEL结果显示,肥胖组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数显著高于对照组[(4.26±0.35)%vs.(3.09±0.28)%,P0.05];氧化应激结果表明,肥胖组大鼠的MDA上升、SOD降低,差异有统计学意义(P0.05);附睾精子分析发现,与对照组相比,肥胖组大鼠的精子活力显著下降[(14.36±7.67)%vs.(36.40±9.17)%,P0.01],而精子浓度无显著性差异(P0.05)。结论高脂饮食诱导雄性大鼠的肥胖,代谢和生殖内分泌紊乱,氧化损伤增加,导致生精细胞凋亡增加,并最终使精子活力下降。