微小残留病的检测方法及其标志

白血病复发是当前白血病治疗的主要障碍，白血病复发的根源主要来自体内残留的白血病细胞。所谓急性白血病微小残留病(MRD)，是指在白血病诱导化疗完全缓解后(包括骨髓移植后)，残存在体内少量白血病细胞的状态。微小残留白血病和白血病之间没有固定的界线，这主要取决于检测方法的敏感性。提高残留白血病细胞检测技术的水平其重要意义在于：(1)指导白血病化疗，根据体内白血病细胞的负荷决定是继续治疗……     

基因甲基化在急性白血病微小残留中的研究进展

摘 要：微小残留病（minimal residual disease,MRD）是白血病患者治疗达到完全缓解后复发的主要原因,而复发则是影响白血病患者生存的主要因素。监测急性白血病中肿瘤细胞的微小残留对白血病的治疗及预后具有重要意义。研究表明一些特异基因异常甲基化可作为一种生物标志物用于MRD的检测,能够较早的预测疾病复发及指导白血病的治疗。DKK3、CDKN2A、CTGF基因异常甲基化在多种肿瘤中均可检测到,其在急性白血病中亦存在异常基因甲基化现象。全文分析上述基因在急性白血病初发、完全缓解、尤其缓解后复发时的甲基化状态,结合患者临床症状,评价其在MRD监测中的临床价值。     

微小残留白血病研究的新进展

急性白血病微小残留病（minmaresidualdisease，MRD）或称微小残留白血病（minimalresidualleukemia，MRL），自80年代初作为一个独立的概念提出以来，目前已成为白血病研究热点之一。一、白血病细胞基因标志及其在MRD检测中的应用由于聚合酶链反应（PCR）技术的建立和改进，MR     

PCR检测骨髓移植后慢粒白血病微小残留病的研究现状

对微小残留病(Minimal Residual Disease,MRD)的检测是当前白血病研究中的一个重要课题。hcr/abl基因重组是慢性粒细胞白血病(ChronicMyeloid Leukemia,CML)重要分子生物学特征,可作为CML特征性克隆标志用于MRD的研究。随着高度敏感特异的PCR(Polymerase Chain Reac-tion,聚合酶链反应),技术在MRD检测中的应用,使CML MRD的检测方法有了突破性的进步,检测敏感度得到了极大的提高。用PCR检测CML     

急性淋巴细胞性白血病可用bcr/abl基因做微小残留病的标志

目的 :检测急性淋巴细胞白血病 (AL L)完全缓解后微小残留病 (MRD) ,探讨其临床意义。方法 :应用反转录 -巢式聚合酶链反应 (nest- PCR)检测 AL L 完全缓解后 bcr/abl m RNA。结果 :2 3例 AL L 患者中阳性 5例 ,5例阳性者 2月～ 13月内复发 ;而 MRD阴性的 18例中 2例于缓解后 2月、4月复发 ,余 16例无复发。结论 :AL L治疗完全缓解 (CR)后仍存在 MRD者有较高的复发危险 ,应进行巩固治疗和定期监测 ;MRD阴性可以做为临床疗效观察的客观指标。该方法检测 MRD敏感度高 ,适用于临床。     

WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义

 目的 探讨WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义。方法 运用RT-PCR方法检测 WT1基因在50例白血病患者中的表达。结果 急性髓细胞白血病（AML）和急性淋巴细胞白血病（ALL）WT1表达阳性率分别为77.3 %（17／22）和54.5 %（6／11）。慢性粒细胞白血病（CML）慢性期WT1表达均阴性,急变期55.6 %（5／9）表达阳性。WT1阳性患者化疗缓解率低于阴性患者（分别为31.3 %和69.2 %,P <0.05）。结论 WT1在白血病患者中高表达,可作为临床评估预后、检测微小残留病（MRD）的标志。     

多聚酶链反应检测急性淋巴细胞白血病微量残留病的进展

白血病复发的主要原因是体内残留白血病细胞克隆的再增殖,因此如何早期、微量、特异地检测微量残留病(MRD)显得十分重要。目前常用的形态学、免疫学、细胞遗传学及DNA印迹杂交等不能发现少于1%～5%的微量残留白血病细胞(MRLC);双色免疫荧光加流式细胞仪虽能检到10~(-1)水平,但操作复杂、假阴性高。多聚酶链反应(PCR)技术通过体外扩增肿瘤特异性靶DNA或mRNA已使MRD的检测水平达10~(-4)～10~(-7)。急性淋巴细胞白血病(ALL)是克隆性疾病,其肿瘤特异性基因重排和染色体异位等可作扩增靶用于MRD的检测。     

从微小残留病角度看恶性血液病的个体化治疗

微小残留病(MRD)已被用于包括急性白血病在内的恶性血液病的复发预警、指导治疗方法选择等方面。文章基于第64届美国血液学会(ASH)年会报道的MRD相关内容, 以急性髓系白血病为主要着眼点讨论MRD指导的恶性血液病的个体化治疗进展。     

白血病患者WT1基因表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在白血病中表达情况与临床意义。方法:采用筑巢式逆转录聚合酶链反应(NestRT-PCR)检测K562白血病细胞系、78例急性白血病(AL)患者、10例慢性粒细胞白血病(CML)患者和22例正常对照骨髓或外周血细胞的WT1基因表达。结果:60例初治或复发AL中有44例患者高表达WT1基因,阳性率73.3%。在急性非淋巴细胞白血病(ANLL)和急性淋巴细胞白血病(ALL)阳性率分别为70.8%和83.3%,两组无显著性差异。随着WT1基因表达水平的升高,完全缓解(CR)率有明显下降的趋势,CR后WT1基因表达水平明显下降,复发后又显著升高。结论:用NestRT-PCR测定WT1基因的表达可用作检测白血病微小残留病(MRD)的一项指标。     

利用实时反向转录PCR的分子定量监测TEL-AML1+儿童急性淋巴细胞性白血病的治疗反应和缓解状况

运用分子生物学技术及流式细胞术,对治疗反应和微小残留白血病病灶(MRD)进行灵敏的定量分析,可以更加可靠地预测儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者的预后及复发风险。分子水平的研究大多数利用T细胞受体(TCR)和免疫球蛋白基因重排作为唯一克隆特异性标志来监测MRD,但这种DNA水平上的研究方法时间长、费用高而且工作量大。在儿童     

儿童T-ALL的研究进展

小儿童急性淋巴细胞白血病为儿童恶性肿瘤的最常见类型,预后较好。由于儿童T-淋巴细胞白血病(T-ALL)特殊的临床和生物学特性,决定了它的不良预后。了解T-ALL常见的分子生物学异常改变,不仅可以对该型白血病的临床治疗、预后判断、微小残留病(MRD)的检测提供帮助,更有利于其发病机制的深入研究。     

以IgH bcl-2/IgH为分子标志检测B细胞淋巴瘤微小残留病研究进展

肿瘤的复发与停止治疗时患者体内仍存在用常规方法无法检测出的微小残留病(minimal residual disease，MRD)有关，关于MRD的研究已成为肿瘤研究领域的热点。B细胞所特有的基因重排等遗传学特征为我们提供了可用于检测B细胞淋巴瘤(B-NHL)MRD的分子标志，本文就这一方面的研究进展进行综述。     

PCR检测骨髓移植后慢粒白血病微小残留病的研究现状

对微小残留病(Minimal Residual Disease，MRD)的检测是当前白血病研究中的一个重要课题。bcr／abl基因重组是慢性粒细胞自血病(Chronic Myelold Leukemia CML)重要分子生物学特征，可作为CML特征性克隆标志用于MRD的研究。随着高度敏感特异的PCR(Polymerase Choin Reaction，聚合酶链反应) 技术在MRD检测中的应用，使CMLMRD的检测方法有了突破性的进步，检测敏感度得到了极大的提高。用PCR检测CMLMRD正在迅速地普及推广，它的临床意义及优越性也将得到越来越充分的认识。     

急性B淋巴细胞白血病微小残留病的监测

  微小残留病（MRD）是白血病复发的根源,动态监测MRD是目前国内外的研究热点,也是难点。B淋巴细胞白血病MRD的监测有其自身的特点：正常增生骨髓中会出现数量较多的B系前体细胞,较容易误认为白血病细胞残留;也没有可以简便快捷检测的特异基因改变。现对流式细胞术的抗体组合及监测时机选择、聚合酶链反应检测的基因进行了归纳总结,作为B淋巴细胞白血病MRD监测的参考。     

白血病融合基因与微小残留病的研究进展

随着急性白血病化疗方案的改善和造血干细胞移植的进展 ,急性白血病的完全缓解 (ＣＲ)率明显提高。然而仍有许多ＣＲ患者在数年内复发 ,其主要原因是血液学ＣＲ后体内仍残留 10 6～ 10 9白血病细胞 ,称为微小残留病(ＭＲＤ)。有学者认为ＭＲＤ是血液学ＣＲ乃至持续完全缓解(ＣＣＲ)期间白血病复发的根源[1] 。如何早期准确地诊断ＭＲＤ ,是防治急性白血病复发的前提。目前已用于检测ＭＲＤ的技术主要有流式细胞计数法和聚合酶链反应法(ＰＣＲ) ,敏感性都可达到 10 3 (10 3 细胞中有 1个肿瘤细胞 )以上。应用最广的是ＰＣＲ技术 ,其关键是…     

流式细胞术检测急性淋巴细胞白血病B细胞系患儿骨髓微小残留病的临床意义

 【摘要】目的 探讨流式细胞术（FCM）检测儿童急性淋巴细胞白血病ALL-B细胞系患儿骨髓微小残留病（MRD）的临床意义。方法 以多种四色荧光标记抗原采用FCM检测ALL-B残留肿瘤细胞对52例ALL-B初诊患儿骨髓细胞进行有效免疫表型组合,并用这些免疫表型组合对ALL-B患儿不同治疗时期的骨髓标本进行MRD监测。结果 52例ALL-B患儿诱导化疗33天,3个月,6个月分别行BM 及MRD监测。并进行长期随访。按照疾病危险度分组,标危组(SR)21例,中危组(IR)23例,高危组(HR)8例,化疗6个月时,MRD阳性数：SR组：21例阳性数4例(19%),IR组：23例阳性数8例(34%),HR组：8例阳性数5例（62%),B-All 52例9例复发,其中SR 21例 2例复发,IR 23例 4例复发 HR 8例 3例复发。结论MRD水平与疾病复发之间存在一定的关系,是具有重要指导意义的疾病预后因素。应用FCM技术对儿童B-ALL进行动态定时监测MRD,对实现白血病治疗个体化早期预测复发,选择合适的治疗方法如不同强度的化疗及骨髓移植具有重要的临床意义。 【关键词】:急性; B-ALL, 流式细胞仪,肿瘤 残留; 复发; 儿童     

急性髓系白血病细胞衍生的树突状细胞

微量残留病(MRD)是导致急性髓系白血病(AML)复发的根本原因，人们一直在不断找寻根除MRD的方法。大量研究表明细胞免疫治疗方法已经成熟，可根除MRD从而治愈AML。AML细胞在体内不能有效被T细胞识别，主要机制为70％的AML细胞表面缺乏共刺激分子CD(80)和CD(86)(分别为T细胞共刺激受体CD(28)和CTLA-4的配体)，不能提供T细胞活化必需的第二信号，从而导致肿瘤特异性T细胞克隆……     

生存五年以上死亡急性白血病17例报告

目的:探讨急性白血病(AL)生存五年以上死亡原因.方法:采用回顾性系列研究,统计本院生存五年以上死亡急性白血病患儿的发病年龄、性别、化疗前病程、分型、病史、临床表现、血常规、骨髓象、并发症、微小残留病灶检测(MRD)、染色体检测、诱导方案、完全缓解(CR)时间、复发时间、直接死因等进行分析.结果:急性淋巴细胞白血病、男性、白细胞数过高、化疗强度不够、出现髓外白血病、MRD( )易复发,复发后放弃治疗或不规则治疗易全身浸润造成多器官脏器功能衰竭(MOF)死亡,化疗后骨髓抑制易出血、感染死亡.结论:白血病应坚持规范化、个体化长期治疗,停药后仍应定期监测以防复发,复发再诱导缓解后应进行干细胞移植根治白血病.     

黑色素瘤特异性抗原基因定量检测在急性髓系白血病及微小残留病监测中的应用

目的 探讨黑色素瘤特异性抗原(PRAME)mRNA在初诊急性髓系白血病(AML)患者中的表达,评估其在微小残留病(MRD)监测中的作用.方法 收集63例初诊AML患者骨髓标本,并在28个月内追踪了11例患者的34份样本,用Taqman探针的荧光定量PCR技术检测PRAME mRNA的表达.结果 初诊患者中PRAME基因表达阳性率52.4 ％(33/63),不同类型的AML中PRAME基因表达以M3最高;治疗缓解后PRAME基因转阴,形态学复发前数月可检测到PRAME mRNA的升高.结论 PRAMEmRNA在AML中高表达,可作为一个广谱的白血病标志物,用于MRD的监测.     

微小残留白血病的检测方法及临床应用进展

越来越多的研究证实,微小残留白血病(minimal residualleukema,MRL)是导致白血病复发的主要因素.初治白血病患者体内白细胞总数为1012～1013,诱导完全缓解(CR)后体内残留的白血病细胞仍可能高达108-109,但常规形态学方法难以检测,而定期检测MRL能动态掌握MRL的演变,早期采取措施,对延长患者的生存期甚至治愈具有重要意义,兹将近年来开展的主要检测方法及临床意义作一综述.