淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量的HPLC测定

淫羊藿药材为《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版收载品种 ,淫羊藿苷为其中有效成分。为了控制其质量 ,本实验建立了 HPLC法测定淫羊藿提取物中淫羊藿苷的含量 ,并在方法学考察过程中 ,对文献 [1～ 6 ]报道的多种色谱条件进行了比较 ,建立了合适的测定方法。1　仪器与试剂Waters(2 690 -996)高效液相色谱仪 ,Sart-o-rius BP2 1 1 D型电子天平 ,CQ-2 5 0超声波清洗仪。淫羊藿提取物 (浸膏粉 )为本公司自制。淫羊藿苷对照品 (中国药品生物制品检定所提供 ,供含量测定用 ,批号 :0 73 7-2 0 0 1 1 1 )。乙腈为色谱纯 ,甲醇为分析纯 ,水为重…     

HPLC测定补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量

目的:补肾壮骨颗粒为我院院内制剂,淫羊藿是方中君药.文中采用HPLC建立补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷含量的测定方法. 方法:采用HPLC法,色谱柱:Agilent HC-18(150mm×4.6mm,5μm),柱温:30℃,以乙腈-水(30∶ 70)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长270nm,测定了3批补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量. 结果:在HPLC色谱中,淫羊藿苷可与其他成分分离,且在0.0962～0.6734μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r2=1(P<0.001),样品平均回收率为94.4%,RSD为1.83%(n=6). 结论:该法分离效果好,分析快速、准确,灵敏度高、重现性好,可用于补肾壮骨颗粒中淫羊藿苷的含量测定.     

高效液相色谱法测定骨宁片中淫羊藿苷的含量

[目的 ]用高效液相色谱法测定骨宁片中淫羊藿苷的含量 .[方法 ]采用ZoobaxC18(4 6mm×2 5 0 0mm)色谱柱 ,乙腈 水 (体积比为 30∶70 )为流动相 ,检测波长为 2 70nm ,柱温为 4 0℃ ,流速为 1 0mL/min .[结果 ]线性范围为 0 0 80 4～ 0 4 82 4 μg ,线性关系良好 ,回归方程为Y =6 6 75 3 3X +110 2 7,相关系数为r =0 9999,平均回收率为 99 0 % ,RSD为 1 0 % .[结论 ]高效液相色谱法适合于测定骨宁片中淫羊藿苷的含量     

脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定

【目的】建立脑忆源胶囊中总黄酮和淫羊藿苷含量的测定方法。【方法】采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中规定的方法,以芦丁为对照品,采用紫外—可见分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱(HPLC)法测定胶囊中淫羊藿苷含量,色谱柱:luna Cl8(2)100R(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈—水(体积比为30∶70),流速:1.0 mL/min,检测波长:270 nm。【结果】芦丁在0～24.75μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.999 0,平均加样回收率为102.29%,sR为1.34%(N=5);淫羊藿苷含量在6.9×10-2～4.83×10-1μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为95.39%,sR为2.5%(N=5)。【结论】本研究所建立的方法能够准确测定脑忆源胶囊中黄酮类成分的含量。     

安神补脑胶囊中淫羊藿苷含量测定方法的研究

目的:建立安神补脑胶囊中淫羊藿苷含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%三氟乙酸(30∶70);检测波长:270 nm;流速:1.0 m L/min。结果:淫羊藿苷在0.050 6~2.024 0μg范围内有良好的线性关系(r~2=0.999),平均回收率为96.4%,RSD=0.56%。结论:该方法准确、快速、简便,可用于安神补脑胶囊中淫羊藿苷的含量测定。     

复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的薄层鉴别与含量测定

目的建立复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的鉴别和含量测定方法。方法采用TLC法鉴别淫羊藿;采用HPLC法测定复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的含量。结果供试品薄层色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同的暗红色斑点;喷以三氯化铝试液,再置紫外光灯下检视,显相同的橙红色荧光斑点。淫羊藿苷在0.01~0.500μg/mL浓度范围内有良好的线性关系,r=0.9 999,平均回收率为100.6%,RSD值为1.4%。结论TLC法可用于复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的定性鉴别,HPLC法可用于复方淫羊藿颗粒中淫羊藿苷的含量测定。     

高效液相色谱法测定更年舒片中淫羊藿苷的含量

目的建立更年舒片中淫羊藿苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,以C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm);乙腈-水(30∶70)为流动相;流速为1.0 mL.min-1,检测波长为270 nm。结果淫羊藿苷在0.092μg~1.472μg范围内呈良好的线性关系,r=0.999 7。平均回收率为101.4%,RSD为1.0%。结论该方法简单、灵敏度高,可用于更年舒片中淫羊藿苷的含量测定。     

HPLC法测定不同产地淫羊藿中7种主要黄酮类成分的含量

目的 采用HPLC法测定不同产地淫羊藿药材中7种主要黄酮类成分的含量。 方法 色谱柱为SHISEIDO MG-C18柱 (3.0 mm×100 mm, 3.0 μm);流动相为乙腈(A)和0.1％的甲酸水溶液(B),梯度洗脱,A相含量随时间的变化：25%(0～10 min),25%～40%(10～12 min),40%～45% (12～22 min), 45%～75% (22～25 min), 75%(25～30min);流速0.6 mL/min;检测波长270 nm;柱温25 ℃;进样量5 μL。淫羊藿药材以70%乙醇超声提取。 结果 7种黄酮类成分朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷I、淫羊藿次苷II、脱水淫羊藿素在30 min内基线分离。方法学验证表明,线性关系良好(r＝0.9999),日内日间精密度RSD%均小于2.0%,回收率在98%～102%之间,稳定性和重复性RSD%也均小于2.0%,符合方法学要求。测定了对照药材及辽宁、甘肃、湖北3个产地淫羊藿中7种黄酮类成分的含量。　结论 该方法快速简便,可为淫羊藿药材的质量控制提供依据,也为进一步开展淫羊藿中黄酮类成分的药动学及组织分布研究奠定了良好的基础。     

HPLC法测定前列舒乐胶囊中淫羊藿苷的含量

目的:建立前列舒乐胶囊中淫羊藿苷含量测定方法.方法:采用高效注相色谱法,色谱柱为(Dia-monsil(TM)C18柱,流动相为乙腈-水(30:70);检测波长为270nm.结果:淫羊藿苷的线性范围为0.307～1.53μg,r=0.9999,回收率为99.22%,RSD(%)=1.12%(n=6).结论:本测定方法简便、准确、重复性好,可用于测定前列舒乐胶囊中淫羊藿苷的含量.     

心叶淫羊藿化学成分研究(Ⅱ)

目的 对心叶淫羊藿 Epimedium brevicornum 全草进行化学成分研究.方法 利用硅胶柱色谱、高效液相色谱分离和纯化,通过理化方法及波谱数据分析鉴定其结构.结果 分离得到8个化合物,波谱鉴定为:5-羟基-2-异戊烯基苯酚-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅰ)、4-羟基-2-异戊烯基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、5,7,4'-三羟基黄酮-7-O-a-L-鼠李糖苷(Ⅱ)、宝藿苷Ⅰ(baohuoside Ⅰ,Ⅳ)、宝藿苷Ⅱ(baohuoside Ⅰ,Ⅴ)、淫羊藿苷C(icariside C,Ⅵ)、淫羊藿苷(icariin,Ⅶ)和淫羊藿苷I(icariside Ⅰ,Ⅷ).结论 化合物Ⅰ为新化合物,命名为淫羊藿酚;化合物Ⅰ和Ⅱ系首次从该植物中分离得到.     

扶肾颗粒质量标准研究

[目的]建立扶肾颗粒的质量标准.[方法]采用薄层色谱(TLC)法鉴别制剂中黄芪、当归、丹参、大黄、陈皮药材,用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中淫羊藿苷的含量.[结果]TLC斑点清楚,专属性强.淫羊藿苷0.048 5～0.97 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r分别为0.999 9);平均回收率分别为97.0％,相对标准偏差(RSD)分别为0.7％.[结论]所建标准可用于扶肾颗粒的质量控制.     

HPLC测定旭痹颗粒中淫羊藿苷的含量

目的：建立HPLC测定旭痹颗粒中淫羊藿苷含量的方法。方法：流动相为甲醇-水-冰醋酸（55：44：1）；流速1．0ml／min；柱温25℃；进样量：10μl；检测波长为270nm。结果：淫羊藿苷在0．0574-0．5740μg线性关系良好，r=0．9997，方法的平均回收率为99．68％（RSD=0．77％）。结论：本法操作简便、准确、重现性好，能够控制旭痹颗粒的质量。     

淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

中药复方更年春含药血清及其主要单体对β淀粉样蛋白所致细胞损伤的保护作用

目的：观察中药复方更年春含药血清及其主要单体成分对β淀粉样蛋白（amyloid β—protein,Aβ）所致肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞损伤的保护作用。方法：采用Aβ25-35作用PC12细胞构建阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）细胞模型,相差显微镜观察细胞形态改变。运用中药血清药理学方法制备大鼠更年春含药血清,以四甲基偶氮唑盐法观察更年春含药血清及其主要单体芍药苷、黄连素、知母皂苷AⅢ、淫羊藿苷对体外培养的PC12细胞活力的影响及其拮抗Aβ损伤的作用,采用流式细胞仪观察更年春复方含药血清及复方主要单体对Aβ诱导的PC12细胞凋亡的影响。结果：PC12细胞在Aβ25-35作用后,有活力细胞数目减少,细胞间连接较松,胞浆较暗淡,细胞碎片较多,贴壁细胞欠透明,部分发生皱缩,胞浆中有较多颗粒。Aβ25-35剂量、时间依赖性地抑制PC12细胞的活力。更年春含药血清可以增强PC12细胞活力,不同浓度更年春含药血清培养细胞24、48、72h后,其增强PC12细胞活力均在20％浓度作用最强。更年春复方含药血清及复方主要单体之一的黄连素及主要单体混合液（包括芍药苷、黄连素、知母皂苷A-Ⅲ、淫羊藿苷）均有拮抗Aβ对PC12细胞损伤的作用,且均能抑制Aβ诱导的PC12细胞早期凋亡,其中更年春含药血清作用最强,中药单体混合液作用其次,而单体黄连素作用最弱。结论：更年春对AD细胞模型有保护作用,其含药血清作用强于主要中药单体及主要单体的混合液。     

淫羊藿甙对小鼠体外脾脏细胞增殖及产生集落刺激因子样活性的影响

为探讨淫羊藿甙（ＩＣＡ）对免疫功能的影响。本实验采用［~３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法及骨髓细胞［~３Ｈ］－ＴｄＲ掺入法，观察了ＩＣＡ对刀豆球蛋白（ＣｏｎＡ）诱导小鼠脾淋巴细胞增殖反应及ＩＣＡ对ｃｏｎＡ或脂多糖（ＬＰＳ）诱导的小鼠脾淋巴细胞产生集落刺激因子（ＣＳＦ）样活性的影响。实验结果表明：ＩＣＡ能显著促进ＣｏｎＡ诱导的小鼠体外脾淋巴细胞增殖；同时检测ＩＣＡ和小鼠脾淋巴细胞培养上清液证明；ＩＣＡ在ＣｏｎＡ诱导作用下可显著促进小鼠脾淋巴细胞产生ＣＳＦ样活性。提示淫羊藿甙能增强免疫功能。     

CPA矩阵法测定复方氯丙嗪中二组分含量

目的：测定复方氯丙嗪中的盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪二组分含量。方法：ＣＰＡ矩阵紫外分光光度法测定复方药物中的二组分含量,微机处理数据。     

防止复方间苯二酚洗剂变色的方法研究

目的分析复方间苯二酚洗剂变色的原因并找出解决办法。方法根据复方间苯二酚洗剂处方的性质,参照抗氧剂和金属络合剂的常用浓度,在复方间苯二酚洗剂中分别加入0.2%焦亚硫酸钠、0.2%亚硫酸氢钠、0.2%焦亚硫酸钠+0.2%亚硫酸氢钠、0.2%焦亚硫酸钠+0.15%硫代硫酸钠、0.2%焦亚硫酸钠+0.02%乙二胺四乙酸二钠、0.2%焦亚硫酸钠+0.1%维生素C,分组放置180 d,于不同光照条件下,观察其颜色变化和含量情况。结果加0.2%焦亚硫酸钠+0.2%亚硫酸氢钠组放置90 d、120 d、180 d后,其颜色和含量测定均符合规定,且显著优于其他各组(P<0.01)。结论选用0.2%焦亚硫酸钠+0.2%亚硫酸氢钠为复方间苯二酚洗剂的抗氧剂,能有效解决该洗剂的变色问题。     

复方制剂中土霉素的含量测定

采用一种直接旋光法，以复方制剂中有色组分的0．1NHCI饱和液为溶媒，对复方制剂中的土霉素进行含量测定。结果表明：对自制6批的复方制剂的含量测定，回收率为99．98％(S=0．35，CV=0．35％)；测定含量的百分率为100．68％(S=1．91，CV=1．90％)。本实验方法测定土霉素的含量准确，可靠、操作简单，可采用此方法对复方制剂中的土霉素含量进行标准检验及生产过程中的质量控制。     

清热解毒复方对头孢拉定的抑菌增效作用及机理

目的 研究清热解毒中药复方对头孢拉定的体外抑菌增效作用及其机制.方法 采用棋盘法观察中药复方与头孢拉定联用对金黄色葡萄球菌的抑菌作用;利用生物大分子分析、糖代谢、AKP的含量测定等方法,来验证清热解毒中药复方的药效作用.结果 清热解毒中药复方与头孢拉定两药联用对金黄色葡萄球菌的抑菌浓度指数(FIC)为0.125;中药复方作用金黄色葡萄球菌后,DNA和RNA的含量比正常组仅增加0.47%,糖浓度仅增加5.47%,AKP含量比正常组增加484.7%;菌体可溶性蛋白表达与正常组相比有明显变化.结论 清热解毒中药复方对头孢拉定有协同抑菌作用,其机理与增加细胞壁透性、影响蛋白质表达有关.     

一阶导数分光光度法测定复方蛋黄乳膏中VitB-2的含量

目的:建立复方蛋黄乳膏中VitB2的含量测定方法。方法:采用一阶导数分光光度法测定复方蛋黄乳膏中的VitB2含量,VitB2的检测波长范围为386~554 nm。结果:浓度范围为0.011 9~0.023 8 mg/ml,测定振幅D与浓度呈良好的线性关系(γ=0.999 2),回收率为99.4%,RSD为0.4%。结论:本法可消除其它组分的干扰,简便、易行、准确,适合医院制剂的质量控制。