成纤维细胞生长因子2和转化生长因子-β1在四肢骨折愈合过程中表达调控的研究

目的探讨四肢骨折愈合过程中成纤维细胞生长因子2（FGF-2）和转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达调控。方法选择158例四肢骨折患者,检测患者治疗前、治疗后2周和4周血清FGF-2、TGF-β1变化,分析FGF-2,TGF-131在四肢骨折愈合过程中的表达调控。结果患者治疗后2周FGF-2与治疗前比较,差异无统计学意义（t=3．187,P〉0．05）;但治疗后2周的FGF-2水平低于治疗前。患者治疗后4周的FGF-2与治疗前比较,差异有统计学意义（t=8．261,P〈0．05）,且治疗后4周的FGF-2水平低于治疗前。患者治疗后2周的TGF-β1与治疗前比较,差异有统计学意义（t=4．883,P〈0．05）,且治疗后2周的TGF—β1水平低于治疗前。患者治疗后4周的TGF-β1与治疗前比较,差异有统计学意义（t=7．732,P〈0．05）,且治疗后4周的TGF-β1水平低于治疗前。对患者治疗后2周和4周FGF-2与TGF-β1水平进行相关性分析,两者呈正相关（r=0．589,P〈0．05）。结论四肢骨折愈合过程中FGF-2与TGF—β1血清含量逐渐降低至正常水平,并具有协同表达,加速组织的修复,促进骨折愈合的作用。     

转化生长因子-β在骨质疏松骨折愈合过程中表达的实验研究

骨质疏松（osteoporosis,OP）是一种以骨组织显微结构破坏/骨矿成分和骨基质等比例不断减少,骨质变薄,骨小梁数量减少,导致骨骼脆性增加和易发生骨折的全身代谢障碍性疾病,是老年人的常见病与多发病,尤以绝经期妇女为重。骨质疏松骨折的愈合由于其骨质疏松的特殊性,与正常骨折的愈合又有区别。转化生子因子（TGF）-β是TGF超家族的一部分,现有TGF-β1~5 5个成员。     

骨形态发生蛋白2在骨损伤不同时期的表达

目的:检测骨形态发生蛋白2(BMP2)在骨损伤不同时期的表达,了解其高峰表达时间。方法:实验组18只大鼠胫骨损伤造模,对照组6只大鼠假手术后处死,实验组平均分为3组,分别于术后第5天、第15天和第30天处死,提取大鼠骨组织总RNA,RT-PCR后扩增BMP2开放读框中编码成熟肽的基因片段,与pGEM-TEasy载体连接纯化后建立实时荧光定量PCR的标准曲线,检测BMP2的表达水平。结果:BMP2的表达在骨损伤后第5天开始升高,第15天达到高峰,第30天稍高于正常水平。结论:高峰表达时间的确定为进一步研究提供了理论上的依据。     

慢性饮酒对大鼠肺组织TGF-β1和bFGF mRNA表达的影响

目的:观察慢性饮酒后大鼠肺组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达,探讨慢性饮酒对肺间质的影响。方法:健康雄性Sprague-Dawley大鼠20只随机分为无乙醇液体饲料的对照组和乙醇液体饲料的乙醇组,每组10只。喂养16周后观察所有大鼠肺泡内炎性细胞浸润程度并评分,Masson染色观察肺间质胶原沉积情况,电镜观察肺组织超微结构变化,实时荧光定量PCR检测肺组织TGF-β1和bFGF mRNA的表达量。结果:光镜下肺泡内炎性细胞浸润程度评分乙醇组高于对照组,差异有统计学意义(Z=50,P<0.05)。乙醇组电镜可见线粒体膜和嵴均有不同程度融合、模糊不清,细胞间隔均可见不同程度的胶原纤维沉积。乙醇组肺组织中TGF-β1和bFGF mRNA表达量高于对照组,差异有统计学意义(t分别为3.702和3.487,均P<0.01)。结论:慢性饮酒可增加大鼠肺组织中TGF-β1、bFGF mRNA表达量,使肺组织胶原沉积,引起肺泡炎症和肺间质疾病。     

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠脊髓损伤后的表达及意义

目的:探讨脊髓损伤后的自我保护修复机制.方法:采用改良的Allen’s法建立SD大鼠T11节段脊髓损伤模型,观察术后不同时间段脊髓内碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白表达分布及变化情况.结果:脊髓损伤各时间段bFGF阳性神经元数较正常组显著增加.7 d达高峰,21 d恢复正常.结论:脊髓损伤后bFGF表达,提示其参与了脊髓损伤后神经元的保护作用.     

碱性成纤维细胞生长因子在骨不连和骨折正常愈合组织中的表达差异

目的：观察碱性成纤维细胞生长因子在骨不连和骨折正常愈合组织中的表达差异。方法于骨不连手术和骨折正常愈合取出内固定手术中收集骨痂及周围疤痕组织标本,利用ABC免疫组织化学方法检测碱性成纤维细胞生长因子在骨痂组织中的分布。结果骨折正常愈合取出内固定手术收集的骨痂中碱性成纤维细胞生长因子阳性指数明显高于骨不连手术。结论碱性成纤维细胞生长因子参与了修复过程,在骨折愈合中发挥着重要的作用。     

大鼠肺纤维化过程中转化生长因子-β1在不同肺组织中的表达变化及意义

目的 观察转化生长因子-β(TGF-β<,1>)在博莱霉素(BLM)所诱导的肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中的动态变化及其意义.方法 BLM制成大鼠肺间质纤维化模型,观察组13只大鼠气管注入BLM 0.2～0.3ml,对照组5只大鼠气管注入等量生理盐水,并将各组动物处死后提取肺组织及支气管肺泡灌洗液(BALF)进行病理定量分析,检测BALF中TGF-<,1>的水平变化.结果 观察组TGF-β<,1>水平高于对照组,第7、14天比较差异有统计学意义(P<0.01).TGF-β<,1>在观察组成纤维细胞(Fb)和肺泡巨噬细胞(AM)中表达于实验第7天显著增强,于实验第14天达到高峰,至第28天有所降低,但明显高于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 TGF-β<,1>在肺纤维化中及其病理发生发展过程中均发挥重要作用.     

塞来昔布对老年大鼠骨质疏松性骨折愈合过程中转化生长因子β_1的影响

目的探讨塞来昔布(Celecoxib)对老年大鼠骨质疏松性骨折早期愈合过程中转化生长因子(TGF)-β1的影响。方法选用22月龄老年雄性SD大鼠60只,经随机抽取10只测出全身骨密度,与随机抽取的10只12月龄雄性SD大鼠的骨密度对比并做统计学分析,数值降低(P<0.05),确立老年大鼠骨质疏松模型。将老年大鼠制成左股骨骨折模型,随机分为对照组和Celecoxib组,Celecoxib组于术后给予Celecoxib 3 mg·kg-1·d-1灌胃,对照组给予同体积0.9%氯化钠注射液灌胃,共10d。术后在不同阶段处死,取骨痂进行苏木素-伊红(HE)染色、TGF-β1免疫组织化学染色观察及免疫组织化学图像分析。结果HE染色:塞来昔布组软骨生成及软骨内成骨过程较对照组延迟;TGF-β1免疫组织化学染色:两组TGF-β1表达的定位无差别,经图像分析,塞来昔布组在各个时间段TGF-β1蛋白阳性表达的积分吸光度(IA)值均弱于对照组,差异有统计学意义。结论塞来昔布通过抑制TGF-β1的表达,延缓老年大鼠骨质疏松性骨折的愈合。     

不同浓度乙醇对大鼠肺组织TGF-β1和bFGF表达的影响

目的:探讨不同浓度乙醇对大鼠肺组织中转化生长因子(TGF)-β1和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响及其与肺纤维化之间的关系.方法:雄性Wistar大鼠32只随机分成对照(C)组、3%(A3)、10%(AIO)和20%乙醇(A20)组,每组8只,A3、A10、A20饮入不同浓度的白酒,C组自由饮水.16周后免疫组化法检测TGF-β1和bFGF在大鼠肺组织中的表达,通过Masson染色观察肺间质中胶原沉积的情况.结果:(1)TGF-β1的阳性细胞数在乙醇组中增高;对照组与A20组、A10组间差别均有统计学意义(P＜0.05),但与A3组比较差别无统计学意义(P＞0.05.(2)bFGF的阳性细胞数在乙醇组中增高:随着乙醇浓度增高阳性细胞数增加,A3、A10、A20组间差异均有统计学意义(P＞0.05).Masson结果示乙醇组较对照组在肺泡间隔中胶原纤维沉积增多,以A20组最为明显.结论:肺泡Ⅱ型上皮细胞和巨噬细胞中TGF-β1、bFGF的表达随乙醇浓度的升高而增多,且一定浓度的乙醇会引起肺组织胶原沉积,提示乙醇可能是导致肺纤维化的因为之一.     

健胃汤对大鼠胃溃疡愈合质量及表皮生长因子受体表达的影响

目的探讨健胃汤对溃疡愈合质量的影响及作用机制。方法采用大鼠乙酸胃溃疡模型，观察健胃汤对该模型溃疡愈合质量的影响，并用原位分子杂交法检测表皮生长因子受体mRNA（EGFR mRNA）的表达。结果健胃汤能改善胃黏膜组织损伤并提高溃疡周围组织EGFR mRNA的表达，与模型对照组比较，差异有显著意义（P〈0．05）。结论健胃汤能提高溃疡愈合质量，增强溃疡瘢痕处EGF mRNA的表达可能是其作用机制之一。     

糖尿病大鼠早期骨组织中BMP-2基因表达初探

目的:观察糖尿病大鼠早期骨密度、骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)基因的表达。方法:清洁级健康成年雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组(每组10只)。A组以普通饲料喂养4周,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液;B组以高脂饲料喂养4周,以STZ按30mg/kg体质量腹腔内注射;C组以普通饲料喂养4周,STZ按50mg/kg体质量腹腔内注射。腹腔注射1周后采静脉血测定血生化指标。腹腔注射8周后,分别测定各组大鼠骨密度并采用原位杂交技术检测骨组织中BMP2-mRNA的表达。结果:与A组比较,B、C组空腹血糖(FBG)显著升高(P<0.01);C组空腹胰岛素(FINS)明显减少(P<0.05),B组明显升高(P<0.05);胰岛素敏感指数(ISI)绝对值B、C组均明显高于A组(P<0.05);B、C组糖化血红蛋白(HbA1c)均高于A组(P<0.05)。与A组相比,腰椎骨密度(BMD)在B、C组大鼠显著降低(P<0.05);股骨、胫骨BMD仅C组大鼠显著降低(P<0.05)。与A组相比,B组大鼠椎骨、胫骨上段BMP2-mRNA表达染色平均光密度显著升高(P<0.05)。结论:糖尿病大鼠早期,已存在不同程度的骨量的丢失;高胰岛素血症可引起骨组织中BMP2-mRNA表达增加。     

蛇床子素对青年大鼠骨代谢的影响研究

目的 探讨蛇床子素对青年大鼠骨代谢的影响.方法 30只雌性wistar大鼠按体重随机分为A、B、C组,A组为正常对照组给予等体积蒸馏水灌胃,B组给予雌二醇灌胃,C组给予蛇床子素灌胃.3组分别在灌胃后4、8、12周分别测定全身骨密度,并在12周后检测左侧股骨和腰椎骨密度及右侧股骨和第4腰椎生物力学性能;检测血清抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRAP-5b)和骨钙素(0C)含量,分析右侧胫骨骨形态计量学.结果 B、C组灌胃12周后全身骨密度及离体骨密度均高于A组,但C组低于B组(P＜0.01).B、C组生物力学性能指标均高于A组,C组股骨弹性模量和腰椎最大载荷低于B组(P＜0.05).B、C组TRAP-5b水平均低于A组,OC水平高于A组(P＜0.01);C组TRAP-5b水平高于B组,OC水平低于B组(P＜0.01).B、C组胫骨骨组织中骨小梁数量密集,骨小梁分离度低于A组,B组骨小梁数量高于C组,骨小梁分离度低于C组.结论 蛇床子素能够提高青年大鼠骨密度、生物力学性能及骨组织微结构,增加青年大鼠骨质量,但其作用效果略低于雌激素.     

血管内皮生长因子在非小细胞肺癌中的表达

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其与肿瘤血管形成、临床分期、淋巴结转移的关系.方法 应用免疫组织化学方法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测56例NSCLC患者的肺癌组织和血清中VEGF的表达水平,并分析其临床意义.结果 NSCLC组织中VEGF的表达水平明显高于正常黏膜组织和癌旁组织(P＜0.05),且随临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期的顺序明显上升(P＜0.05);同时有淋巴结转移的VEGF阳性率明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05);NSCLC患者血清VEGF水平显著高于正常对照组(P＜0.01),并随肺癌临床分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期的顺序明显上升(P＜0.05);淋巴结转移组患者血清VEGF水平明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05).结论 VEGF在NSCLC组织中表达明显增高,并与NSCLC的发生、发展及其淋巴结转移有关,血清VEGF是NSCLC生长、转移的重要指标.     

低氧大鼠肺内凝血酶敏感蛋白-1与表皮生长因子受体表达的变化

目的:了解低氧肺动脉高压时肺内凝血酶敏感蛋白-1 (TSP-1)和表皮生长因子受体(EGFR)表达与肺血管重建的关系.方法:将20只雄性Wistar大鼠分为低氧性肺动脉高压组(低氧组)和对照组各10只,低氧组以常压低氧3周建立肺动脉高压模型,以微导管法测定2组大鼠肺动脉压,采用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肺内TSP-1、EGFR蛋白及mRNA的表达,对肺组织切片进行图像分析.结果:低氧3周后,低氧组形成明显的肺动脉高压模型,肺小动脉管壁增厚和管腔狭窄,低氧组肺动脉压、右心室肥厚指数[RV/(LV+S)]、管壁厚度占外径的百分比(WT％)、管壁面积占血管总面积的百分比(WA％)均较对照组明显升高(P＜0.05);低氧组肺小动脉TSP-1、EGFR蛋白阳性染色和TSP-1 、EGFR mRNA阳性染色均较对照组明显增强(P＜0.01).结论:低氧所致TSP-1及EGFR增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用.     

大鼠颅脑创伤应激性胃黏膜病变及GAS、EGF、β-EP的变化

目的：探讨大鼠颅脑创伤应激过程血中胃泌素（GAS）、表皮生长因子（EGF）及β-内啡肽（β-EP）含量的变化及作用。方法：制作大鼠颅脑创伤模型并按应激时间不同分组。应用放射免疫分析法检测大鼠应激过程中血清GAS、血浆EGF及β-EP的动态变化。结果：分别有4只及5只大鼠胃黏膜于应激24h及应激48h出现应激性溃疡，于应激168h未见胃黏膜病理性改变。应激24h组、48h组血清GAS含量高于对照组（P〈0．05）。应激48h组、168h组血浆EGF含量低于对照组（P〈0．05）。应激24h组、48h组及168h组血浆β-EP含量均显著高于对照组（P〈0．01）。结论：大鼠颅脑创伤后可致应激性溃疡；GAS、EGF、β-EP与大鼠应激性溃疡的发生和愈合有关。     

雌激素对大鼠心内神经节血管内皮生长因子表达的影响

目的:用免疫组织化学方法观察成年雌性大鼠,卵巢摘除组大鼠,卵巢摘除后17beta雌二醇肌肉注射组大鼠的心内神经节血管内皮生长因子(VEGF)的表达及变化。方法:免疫组织化学染色。结果:①各组大鼠心内神经节均存在VEGF表达阳性神经细胞;②卵巢摘除组大鼠心内神经节VEGF阳性神经元明显减少,表达明显减弱(P<0.05)。结论:心内神经节细胞表达血管内皮生长因子(VEGF);雌激素可能影响心内神经节VEGF的表达。     

PDGF-AA和PDGF-BB在大鼠矽肺组织中的表达及意义

目的 研究血小板衍生生长因子-AA(PDGF-AA)和血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)在二氧化硅所致矽肺大鼠肺组织中的表达.方法 40只SD大鼠随机分为模型组和对照组,每组20只,雌雄各半.模型组大鼠向气管灌注石英粉尘制作矽肺模型;正常对照组以灭菌生理盐水lml代替.45d后,观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化方法观察肺组织中PDGF-AA和PDGF-BB的蛋白表达情况.结果 PDGF-AA和PDGF-BB在实验组矽肺模型肺组织中的表达量均高于在正常对照组大鼠肺组织中的表达量.且差异有统计学意义(P＜0.05);两者蛋白表达量间无直线相关关系(P＞0.05).结论 PDGF-AA和PDGF-BB可能参与了尘肺的发生发展.     

南蛇藤乙醇提取物对大鼠骨创伤愈合的影响

目的研究南蛇藤乙醇提取物对大鼠骨创伤模型愈合的影响,为临床用药提供理论和实验依据。方法40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组、南蛇藤乙醇提取物高剂量组和低剂量组。复制大鼠骨创伤模型,除假手术组外,各组大鼠每天1次给药,连续给药45d。给药期间观察大鼠的一般状况、伤肢活动和伤口愈合情况。末次给药后2h处死大鼠,采血分离血清,测定血清中钙、磷浓度和碱性磷酸酶水平。取股骨照骨痂X光片,分析骨痂骨密度,用折力仪测定骨痂抗折强度。结果骨创伤大鼠股骨骨痂密度、抗折力、血清钙磷含量、碱性磷酸酶水平均降低,而阳性药和高剂量南蛇藤乙醇提取物能增加血清钙、磷含量和碱性磷酸酶水平,提高骨创伤大鼠骨痂密度和抗折力（P〈0．05或P〈0．01）。结论南蛇藤乙醇提取物能有效促进大鼠骨创伤愈合。     

低氧大鼠肺内TSP-1与EGFR的表达变化及意义

摘要 目的 了解低氧肺动脉高压时肺内凝血酶敏感蛋白-1（TSP-1）和表皮生长因子受体（EGFR）表达与肺血管重建的关系。 方法 将20只雄性Wistar大鼠分为低氧性肺动脉高压组（n=10）和对照组（n=10）两组,肺动脉高压组以常压低氧建立大鼠肺动脉高压模型,以微导管法测定各组大鼠肺动脉压,采用免疫组化和原位杂交法检测各组大鼠肺内TSP-1蛋白、EGFR蛋白及TSP-1mRNA、EGFRmRNA的表达,对肺组织切片进行图象分析。 结果 低氧3周后,低氧组大鼠形成明显的肺动脉高压,管壁增厚和管腔狭窄,低氧组大鼠肺动脉压（2.86±0.39）kP,右心室肥厚指数﹝RV/(LV+S)﹞为43.53±3.38、管壁厚度占外径的百分比（WT%）为35.24±11.2,管壁面积占血管总面积的百分比（WA％）为55.09±12.38,分别与正常对照组(1.35±0.28)kP、23.68±3.48、23.63±9.74和41.62±12.83相比明显升高（P<0.01）;肺小动脉TSP-1免疫阳性染色在低氧肺动脉高压组大鼠为1.32±0.04,与正常对照组（0.96±0.03）相比增强（P<0.01）,低氧肺动脉高压组大鼠EGFR蛋白免疫染色为1.48±0.07,与正常对照组（1.09±0.02）相比增强（P<0.01）。肺小动脉TSP-1mRNA阳性染色在低氧组大鼠为1.44±0.03,与正常对照组1.12±0.05相比明显增强（P<0.01）,低氧组大鼠EGFRmRNA阳性染色为1.43±0.05,与正常对照组1.10±0.04相比明显增强（P<0.01）。 结论 低氧所致TSP-1及EGFR增多在低氧性肺血管重建和肺动脉高压的发病过程中起一定的作用。     

七氟烷对乳鼠心肌细胞血管内皮生长因子表达的影响

［摘要］目的探讨七氟烷对乳鼠心肌细胞血管内皮生长因子（VEGF）的直接调节作用及其可能参与的细胞内信号转导通路。方法SD新生（1～3 d）大鼠,分离培养原代心肌细胞,随机分为6组（n＝6）：对照组（C组）培养后的细胞不经任何处理;不同浓度七氟烷组（S1～S3组）细胞分别经0.5,1.0,1.5 MAC七氟烷处理6 h;p38MAPK抑制药组（P组） 细胞培养液中给予p38MAPK特异性抑制药SB203580,终浓度50 nmol&#8226;L－1孵育6 h;七氟烷+p38MAPK抑制药组（SP组）心肌细胞培养液中加入SB203580后,置入无菌密闭容器,持续输入1.0 MAC七氟烷6 h。采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定细胞培养液VEGF浓度。结果①C组、S1组、S2组、S3组、P组、SP组VEGF含量分别为（61.09±6.21）,（73.67±8.02）,（123.32±11.56）,（177.46±31.03）,（64.31±8.47）,（76.95±6.23） pg&#8226;mL－1。与C组和S1组比较,S2和S3组细胞培养液VEGF值均显著升高（P＜0.05或P＜0.01）;②SB203580能抑制七氟烷处理引起的VEGF分泌,但对乳鼠心肌细胞分泌VEGF无显著影响,与S2组比较,SP组细胞培养液VEGF浓度降低（P＜0.01）,P组VEGF分泌无显著影响（P＞0.05）。结论七氟烷诱导心肌细胞释放VEGF,可能是七氟烷心肌保护机制之一;p38MAPK信号通路参与了七氟烷诱导的VEGF表达。