生物素─链霉亲和素系统在检测巨细胞病毒抗体中的应用

本文用自制ＣＭＶ抗原和生物素－链霉亲和素系统试剂，通过最适条件的对比，建立了检测人血清中抗巨细胞病毒ＩｇＭ、ＩｇＡ类抗体的ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ，并与普通ＥＬＩＳＡ作比较，结果表明，ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ的非特异性吸附明显低于普通ＥＬＩＳＡ，与普通ＥＬＩＳＡ相比，抗体效价分别提高５和７倍，阳性率分别提高６８％和１５３．５％。在实际工作中曾用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测临床样品１６５份，就所得结果进行分析。表明ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ检测ＣＭＶＩｇＭ和ＩｇＡ可提高特异性和灵敏度，值得推广应用。     

地高辛的生物素—链霉亲和素免疫法测定方法的建立

目的：将生物素链霉亲和素免疫反应系统引入地高辛血药浓度监测中，准确地监测地高辛血药浓度。方法：将生物素与抗ＤＩＧＩｇＧ化学连接，ＤＩＧ通过ＨＳＡ与ＨＲＰ连接，建立了生物素链霉亲和素免疫反应系统测定地高辛的竞争反应模型。结果：以０５、１、２、３、５μｇ／Ｌ五个标准点建立了竞争反应曲线，同时将ＢＮＨＳＩｇＧ作了１：４００、１：８００、１：１６００、１：３２００的稀释，探讨了竞争反应曲线的规律性变化，运用流行的四参数曲线拟合法对竞争曲线作了拟合。同时做了方法学评价。结论：流行的生物素链霉亲和素技术可以引入被动的酶联免疫吸附法中，提高反应的灵敏度     

生物素—链霉亲和素系统在放射免疫显像中的应用（文献综述）

本文综述了生物素－链霉亲和素（ＢＳＡ）系统在放射免疫显像中的应用原理，生物素和亲和素与单抗偶联物的制备方法，及其放射性核素标记方法以及该系统ＲＩＩ的动物实验和人体应用的初步结果。资料表明该方法具有提高ＲＩＩ的Ｔ／ＮＴ比值，降低非靶器官吸收剂量，可利用理想显像枋素如９９ｍＴＣ，１１１Ｉｎ以及避免抗体活性辐射损伤等优点。     

自制链霉亲和素的纯化和特性

应用生物素亲和层析法从streptomyces avidinii菌培养液中纯化链霉亲和素(SA),经反复试验.1L培养液中平均约含36mgSA,2-亚氨基生物素琼脂糖珠4B凝胶的结合客量为3.8～5.2mg/ml,解离波为pH 4.0 50mmol/L醋酸铵,从凝胶上解离回收的纯化SA量为20～42mg,平均回收率为80.5％,蛋白活性为14.4U/mg。经鉴定所得SA的分子量为63241,比消光系数为E~(1％)_(280)=33.56,每分子SA可结合4分子生物素,制备的SA-HRP用于ELISA所得P/N值比AV-HRP提高一倍,酶结合物的效价在8个月中保持80％以上。     

生物素-链霉亲和素系统在检测人PBMC IL-2R_α中的应用

本文报道用自制生物素-链霉亲和素系统配以抗IL-2R_aMcAb,建立检测人PBMCIL-2R_a的方法,并对本法中的关键条件进行探索,确定生物素化二抗和链霉亲和素的最适浓度以及多种诱导物的最适诱导时间和浓度。用本法对比检测了健康献血者和肿瘤患者PBMC IL-2R_a的表达水平,表明未经诱导的肿瘤患者PBMC IL-2R_a百分率显著高于正常人(P<0.01)。     

肾脏疾病患者巨细胞病毒IgM抗体检测

巨细胞病毒(CMV)是一种可导致多种疾病的DNA病毒。为探讨肾脏疾病同CMV感染的关系，我们对患者血清进行了CMV IgM抗体的检测，现将结果报道如下。     

孕妇和新生儿血清中的巨细胞病毒特异性IgM抗体

应用间接ＥＬＩＳＡ方法检测了兰州地区７５７例孕妇和６２４例新生儿血清中巨细胞病毒特异性ＩｇＭ抗体（ＣＭＶ－ＩｇＭ）。孕妇组阳性者７４例（９．７８％），其中妊娠早期阳性者１９例，妊娠中期阳性者４４例，妊娠晚期阳性者１１例。新生儿组阳性者９例（１．４４％）。实验结果显示：兰州地区孕妇中有一定数量的ＣＭＶ活动性感染病例，以致伴有新生儿ＣＭＶ先天性感染。     

用BAS免疫细胞化学法检测人抗脊髓灰质炎病毒抗体

采用生物素─链霉亲和素系统（ＢＡＳ）试剂，通过免疫细胞化学法技术，检测接种脊髓灰质炎疫苗儿童血清中Ｉ、Ⅱ脊髓灰质炎病毒抗体，并与传统的中和试验作对比。结果表明，ＢＡＳ免疫细胞化学法所测得抗体效价明显高于中和试验结果。前者操作简便，反应快速，更适合大批标本的检测。     

应用生物素-亲和素系统检测胸水特异性IgG抗体的研究

应用亲和素—生物素化过氧化物酶复合物酶联免疫吸附试验(ABC-ELISA)检测159份结核性胸水和82份对照胸水中的抗PPD—IgG,并在同一滴定板上做常规ELISA对比。结果表明在82.4％的胸水中,ABC—ELISA较常规ELISA敏感,前者的抗体几何平均滴度为后者的2.4倍。本法敏感性为90.6％,特异性为95.1％,提示可作为结核性胸膜炎的辅助诊断方法。动态观察尚可为疗效判定提供依据。     

尿毒症患者巨细胞病毒感染及与输血关系的研究

应用间接酶联免疫吸附试验法检测５２例尿毒症患者血清中巨细胞病毒特异性ＩｇＭ，ＩｇＡ抗体。结果表明特异性ＩｇＭ，ＩｇＡ抗体阳性率分别为６９．６％和１３．８％，明显高出对照组人群，统计学处理Ｐ〈０．０１，差异非常显著。     

眼肌结合抗体的ELISA检测及应用

自猪和牛眼肌提取眼肌抗原，建立了检测人血清中眼肌结合抗体（ＥＭ－Ａｂ）的ＥＬＩＳＡ法。检测４０例甲亢患者阳性率为３０．０％，２３例ＳＬＥ患者阳性率为２６．９％，与正常对照组比较有显著差别（Ｐ〈０．０１）。ＥＭ－Ａｂ与甲状腺疾病的一些自身抗体无显著相关性，提示此是与眼病自身免疫反应有关的一种自身抗体。     

免疫酶点技术(Elispot)检测抗体分泌细胞的应用

<正> Jerne和Nordin首先应用溶血空斑技术,体外检测单细胞水平的抗体分泌细胞(B淋巴细胞),但它存在操作步骤繁杂,实验结果受许多因素影响等,促使许多学者寻找简易而重复性较好的新检测方法。 近年来,Sedgwick和Holt、Czerkinsky等应用ELISA基本原理建立了特异性抗     

检测金属硫蛋白夹心法ELISA的建立和初步应用

采用两种能识别兔杆金属硫蛋白Ⅱ分子上不同抗原决定簇的单克隆抗体建立了夹心法ＥＬＩＳＡ。鉴定表明，该法测定兔ＭＴ的灵敏度为２０ｎｇ／ｍｌ批内和批间变异系数分别为１２．２％和９．３％，用于测定人体ＭＴ也有较好的灵敏性和可靠性。     

VALIDATION OF THE FLUORESCENCE POLARIZATION ASSAY FOR DETECTION OF MILK ANTIBODY TO BRUCELLA ABORTUS

A fluorescence polarization assay (FPA) for detection of antibody to Brucella abortus in individual milk samples was developed and validated. Samples from 190 cattle from which B. abortus was isolated; milk samples from cattle in herds infected with B. abortus (n = 1086) and positive in the milk ring test (MRT), as well as milk samples from Canadian cattle (with no evidence of brucellosis, n = 2974) were tested by the indirect enzyme immunoassay (IELISA) and the FPA. The sensitivity (based on samples from culture positive cattle) and specificity (based on Canadian milk samples) of the IELISA and the FPA were 100%. The relative sensitivity value obtained with milk from cattle of infected herds and the specificity values of the IELISA were 98.5 and 99.9%, respectively. The relative sensitivity and specificity of the FPA with the same samples were 82.2 and 99.4% using a cut-off value of 90 millipolarization units (mP).The low relative sensitivity value of the FPA was shown, by competitive enzyme immunoassay (CELISA), to be due to vaccinal antibody (assumed as vaccinal antibody against B. abortus S19 is excluded by the FPA and CELISA but not by the MRT and the IELISA), present in some of the milk samples. The FPA is a homogeneous assay which, unlike the MRT and the IELISA, may be used for testing in the field.     

一种简便有效的检测细胞体外分泌抗体的方法

本文采用ABC-细胞ELISA(ABC-CELISA)测定体外分泌抗体。将经纯白喉类毒素(PDT)免疫的小鼠脾细胞悬液(5～10×10~(?)/ml,经过充分洗涤),注入用PDT包被的酶板小孔,温育4～6小时。洗去细胞,加生物素化抗小鼠IgG以使生物素分子固相比。洗涤后,加亲和素-生物素化HRP复合物(ABC),继加底物溶液。显色反应表明,此法可检出少至10~4只脾细胞所分泌的抗体。由无关抗原免疫的鼠脾细胞或未免疫细胞只造成低度非特异性反应。试验重复性也较满意。认为ABC-CELISA是测定体外产生的抗体的一种简便、有效手段。     

弓形虫IgM抗体检测方法的研究

本文以鼠抗人μ链单克隆抗体捕获被测人血清中ＩｇＭ抗体，再以辣根过氧化物酶标记的弓形虫抗原进行直接酶联免疫吸附试验，检测人血清中特异性抗弓形虫ＩｇＭ抗体，并以阻断试验证实该方法的特异性。与风疹病毒ＩｇＭ抗体阳性血清，巨细胞病毒ＩｇＭ抗体阳性血清和类风湿因子等无交叉反应。与进口试剂盒以酶联免疫吸附试验双夹心法（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ－Ｔｏｘ－ＩｇＭ）进行比较检测了临床血清样品１０５３份，两者阳性符合率为９５．５６％，ＤＳ－ＥＬＩＳＡ阴性血清在Ｄ－ＥＬＩＳＡ法亦阴性，而且后者灵敏度略高。酶标记抗原和包被抗体的酶标板在４℃中保存６个月仍稳定。试剂盒操作简便，快速，适用于弓形虫病的早期诊断。     

检测IL-8的ELISA间接夹心法的建立

利用抗IL-8的单克隆抗体4C3(包被抗体)和免抗IL-8多克隆抗体(第二抗体)建立了检测IL-8的间接夹心法ELISA,当包被抗体浓度为0.5μg/ml、第二抗体浓度为2μg/ml时,其检测下限可达1ng/ml。初步应用此法在部分感染病人血清中检测到明显高于正常人水平的IL-8。