乙型肝炎病毒变异与临床的关系

乙型肝炎病毒(HBV)是一种高变异病毒,由于它在复制过程中,必须经过RNA中间体的逆转录复制,在这一逆转录复制过程中,因DNA聚合酶和逆转录酶缺乏校正功能,使病毒基因在复制过程中,可发生一个核苷酸(点突变)和多人核苷酸的变异.发生变异的病毒常引起其生物学特性的改变,尤其是HBV编码蛋白如抗原蛋白等发生变异.近年发现HBV感染的不同疾病谱和血清学表现的不典型均与病毒变异有关.阅读有关文献,对HBV变异所引起的临床、血清学表现防治等方面的变化,作如下归纳.     

乙型肝炎病毒基因组前C区突变及其临床意义

乙型肝炎病毒(HBV)感染的临床表现复杂多样，如病程长短、病情轻重及预后等均差异很大。以往人们一直认为这仅仅是由于宿主对病毒产物的免疫应答的类型和程度不同所致，但近年的研究显示，HBV本身，特别是基因组内变异占有重要的地位。HBV P基因编码的多聚酶缺乏校正功能，因此在复制过程中常发生一个或多个核苷酸变异。病毒变异常引起其生     

慢性乙型肝炎病毒变异及其中医辨证论治研究进展

乙型肝炎病毒（HBV）的复制是以其RNA为中间体，通过反转录酶的作用而进行的，可能由于缺乏校读的功能，因此，与大多数DNA病毒相比，HBV具有较高的突变率，故了解其变化特点十分重要。现就HBV不同的基因型与病毒变异及临床的关系，不同基因位点变异的临床意义以及中医辨证论治研究概况介绍如下。     

HBV BCP变异、前C区变异与HBeAg、HBV DNA的关系

目的 探讨慢性乙型肝炎HBV BCP变异、前c区变异与HBeAg表达、HBV DNA的关系.方法 HBV基因变异检测采用乙型肝炎病毒基因多态性检测芯片技术;血清HBV DNA水平和HBV-M的检测分别采用荧光定量核酸技术和ELISA法.结果HBV BCP变异株与HBeAg的阴转无显著相关性(P>0.05),但e抗原(+)/e抗体(-)组HBV DNA水平明显高于e抗原(-)/e抗体(+)组(P<0.001);HBV BCP联合前C区变异株与HBeAg阴性表达显著相关(P<0.001);且HBVDNA水平低于单纯HBV BCP变异组(P<0.05).结论 HBV BCP变异不能显著影响HBeAg的阴转,但可增加HBV DNA合成,使病毒复制进一步增强;前C区变异对HBeAg阴性的影响较大,但可导致HBV DNA的复制下降.     

乙型肝炎病毒前C/基本核心启动子区变异的生物学意义

<正>乙型肝炎病毒(HBV)基因组变异率约为其他DNA病毒的104倍,主要原因:(1)HBV复制是以mRNA为模板反转录合成子代病毒DNA,该过程中缺乏校对酶的作用,容易发生碱基错配;(2)在内源性(宿主免疫清除)和外源性(疫苗接种、乙型肝炎免疫球蛋白注射、抗病毒药物治疗和诊断试剂检测)选择性压力下,HBV频繁发生随机/选择性核苷酸变异。HBV     

乙型肝炎病毒的变异及临床意义

变异是病毒复制过程中的自然现象,乙型肝炎病毒(HBV)比其他DNA病毒变异高出100倍。近年来发现,在体内长期免疫压力下,HBV发生变异,借以逃脱免疫监控,继续生存、复制、传播。由于PCR和DNA测序等分子生物学技术的发展,可以研究和检测HBV的变异。HBV变异使HBV感染的发病机制、病原诊断、病情演变及疫苗预防等发生了很大变化,也使临床上对HBV感染后血清标志物(两对半)检测结果的解释发生了一些变化,成为医学界关注的热点。现将有关情况综述如下。     

慢性乙型肝炎患者基因型以及其病毒载量前C区突变的研究

乙型肝炎病毒是引起慢性病毒性肝炎的重要病原之一，并可导致肝硬化和肝癌发生，严重危害人类健康。根据HBV基因组DNA序列差异〉8％为判断标准，HBV被分为A-G八个基因型，而且其分布有地域性差异。基因型是影响病毒复制，抗病毒治疗疗效以及病毒变异的重要因素，基因型且与疾病的预后、治疗药物的选择等均有一定关系。作通过实时荧光定量PCT、多引物对巢式PCR技术和DNA序列分析，分别测定142例慢性乙肝患血清中HBV DNA的病毒载量、乙肝病毒的基因型以及其前C区（G1896A）突变，旨在探讨浙江部分地区的HBV基因型的分布情况以及各基因型之间的病毒及前C区的突变的差异。为以后选择抗病毒药物治疗打下理论基础；现报告如下。     

含多糖中药抗病毒的研究进展

病毒性疾病是危害人类健康的一种重要疾病。与肿瘤、心血管和神经系统的疾病不同,它具有高度的传染性,且是许多其他疾病的病因。病毒为细胞内寄生的微生物,利用宿主细胞的DNA、RNA及蛋白合成系统进行复制,甚至可以将自身的核酸信息整合到宿主细胞的DNA中,与宿主细胞同期复制,并且在不断的复制中产生错误而形成变异。作为抗病     

乙型肝炎病毒YMDD变异与基因分型及临床关系的研究

目的了解青岛市乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（HBV）基因变异特征,探讨HBV YMDD变异与基因分型、DNA载量及临床分型的关系。方法应用实时荧光聚合酶链反应（PCR）技术对820例乙肝患者血清进行基因变异检测,HBV DNA定量监测及基因分型检测。结果 820例HBV感染者中检出YMDD变异154例,变异率18.78%;各基因型间YMDD变异的差异有统计学意义,P〈0.05;患者HBeAg阳性与否与YMDD变异差异有统计学意义（P〈0.05）,HBeAg阳性者更易发生变异;HBV感染者临床分型各组间YMDD变异的差异有统计学意义（P〈0.05）,其中以LC（36/113）、CHB（97/368）为主;病毒变异在性别、年龄及DNA载量各组间的差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 HBV YMDD变异的监测对乙肝患者的治疗、病情预测和转归都有重要临床意义。     

乙肝病毒前S1抗原与常规乙肝血清标志物联合检测的临床意义

HBV为嗜肝DNA病毒，PreS1Ag位于病毒颗粒表面，在病毒感染、装配、复制和刺激机体产生免疫反应方面有十分重要意义。有报道PreS1Ag与HBV—DNA的检出率高度相关，HBV—DNA检测通常作为HBV感染和复制的金标准，但因其实验室要求较高，操作复杂，一般实验室无法开展；     

核激素受体等对乙型肝炎病毒转录与复制的影响

目的建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源细胞复制体系,观察核激素受体等对HBV基因转录和复制的调控作用。方法用复制型HBV重组质粒pHBV4.1与核激素受体HNF4、和RXRa/PPARa以及HNF3的表达质粒,分别共转染非肝源细胞株NIH3T3;用Northern吸印杂交检测HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平。结果复制型HBV重组质粒pHBV4.1在肝癌细胞中,能检测到3.5 kb HBV RNA转录产物和HBV DNA复制中间体;用pHBV4.1转染NIH3T3细胞后,在没有核激素受体表达质粒共转染时未能检出3.5 kb HBV RNA等转录产物,也无HBV DNA复制中间体;当用核激素受体HNF4和RXRa/PPARa共转染时,能够激活3.5 kb HBV RNA转录和HBV DNA复制,而HNF3未能激活HBV复制,但在核激素受体HNF4或RXRα/PPARα介导的病毒复制体系中,同时共转染HNF3时,均可见3.5 kb HBV mRNA的转录和HBV DNA复制水平下降。结论利用核激素受体等成功地建立HBV在非肝源细胞中的转录与复制,且显示HNF4和RXRa/PPARa可支持HBV在非肝源细胞中转录与复制;HNF3抑制HBV肝特异性基因转录与复制。     

HBV前S1抗原相对浓度检测方法的建立和临床应用

<正>前S1(Pre-S1)抗原蛋白是完整乙型肝炎病毒(HBV)外壳蛋白成分之一,具有增强HBV表面抗原免疫原性的作用,也有助于HBV吸附至肝细胞,对肝细胞损伤、病毒DNA复制有辅助作用。前S1抗原与HBV DNA的检出率高度相符,在反映HBV复制、传染性方面与HBV DNA呈高度正相关,HBVDNA病毒载量检测是判断HBV复制、观察疗效的金指     

乙型肝炎病毒基因型与相关肝病防治

乙型肝炎病毒(HBV)属嗜肝DNA病毒科,复制中存在逆转录环节,因此比一般DNA病毒更容易发生变异[1].根据核苷酸和氨基酸序列差异,可将HBV分为不同基因型和血清型,不同基因型和血清型在流行病学、所致肝脏疾病及对抗病毒药物的敏感程度方面各有异同.……     

乙型肝炎病毒rtA181V/T和rtN236T变异阿德福韦耐药株表达质粒的构建及其病毒学特征

目的构建乙型肝炎病毒阿德福韦耐药变异株（rtA181T／V和rtN236T）表达载体并对其体外复制能力和耐药性等病毒学特征进行体外研究。方法以含1．2倍拷贝HBV DNA全基因的质粒PUC-HBV1．2WT为模板，PCR定点诱变技术构建含阿德福韦耐药株（rtA181V／T和rtN236T）的目的质粒，测序验证并利用变异株特异检测引物进行PCR检测；转染人肝癌细胞系HepG2，ELISA检测上清中分泌的HBsAg和HBeAg水平，荧光定量PCR检测上清中病毒DNA水平，Southern blotting检测胞浆HBV复制中间体水平，比较野生株和变异株体外复制能力和对阿德福韦敏感性的差异。结果构建的rtA181T、rtA181V和rtN236T表达质粒可用于变异株特异检测引物检测相应变异的阳性对照品；转染HepG2细胞后均可获得高水平的病毒抗原表达，胞浆和细胞培养上清中可以检测到HBV复制中间体和病毒颗粒的存在；三种变异均可单独导致对阿德福韦耐药，IC50为野生株的2．8至4．7倍；体外复制能力较野生株降低，分别为野生株的94．2％、89．0％和77．7％。结论成功构建乙型肝炎病毒阿德福韦变异株表达质粒并应用于变异株特异引物扩增检测技术，体外实验证实rtA181V／T和rtN236T单独变异均可导致HBV对阿德福韦耐药，且变异株的病毒复制能力较野生株有所下降。     

定量检测乙型肝炎病毒cccDNA的临床意义

在感染乙型肝炎病毒(HBV)的肝细胞核内可检测到一种不同形式的病毒DNA-共价闭合环状DNA(covalentlyclosed circular DNA,cccDNA).cccDNA是乙肝病毒基因组的复制中间体,是病毒mRNA和前基因组RNA转录的模板,它的存在是病毒复制的一个重要指标.应用荧光定量PCR方法检测慢性乙肝患者肝组织HBV cccDNA水平,同时检测肝组织、血清HBV DNA,肝细胞HBcAg表达及肝功能等,以探讨HBV cccDNA与病毒复制、肝实质损害的关系及在抗病毒治疗中的意义,为确定抗病毒治疗的最佳方案、治疗终点等提供理论依据.     

血清乙肝病毒颗粒的存在形式及其临床价值

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)在宿主体内的复制以病毒颗粒的形式存在,血清中的病毒复制产物是实验室诊断和监测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)的基础。寻找血液中能够有效反映肝内病毒转录活性和药物疗效的生物学标志物一直是热点和难点。该文对HBV颗粒性产物在CHB患者血清中的存在形式及其对CHB抗病毒药物的疗效监测和停药时机判断的意义,特别是新标志物如HBV RNA、HBV核心相关抗原(HBcrAg)和空病毒颗粒等的发现及应用作一述评。     

血清乙肝病毒颗粒的存在形式及其实验诊断价值[*]

乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV）在宿主体内的复制以病毒颗粒的形式存在，血清中的病毒复制产物是实验室诊断和监测慢性乙型肝炎（Chronic Hepatitis B, CHB）的基础。寻找血液中能够有效反映肝内病毒转录活性和药物疗效的生物学标志物一直是热点和难点。本文对HBV颗粒性产物在CHB患者血清中的存在形式及其对CHB抗病毒药物的疗效监测和停药时机判断的意义，特别是新标志物如HBV RNA、HBV核心相关抗原（HBcrAg）和空病毒颗粒等的发现及应用作一述评。     

乙肝病毒前C基因区1896位点变异的实验研究

目的探讨慢性乙肝病人血清HBV DNA前c基因区nt1896的变异情况及其与HBV DNA水平及转氨酶（ALT）关系。方法将172例慢性乙肝患者分为两组：大三阳组（106例）和小三组（66例）。检测ALT、HBV DNA及前C区nt1896的变异情况。结果大三阳组与小三阳组HBV DNA阳性率有显著差异（P〈0．05）,nt1896变异率无显著差异（P〉0．05）。小三阳患者中ALT升高组（〉40U／L）HBV DNA（＋）患者nt1896变异率100％,而ALT正常组HBV DNA（＋）患者nt1896变异率30％（3／10）（P〈0．05）。结论大三阳和小三阳慢性乙型肝炎病人都存在较高的前C区nt1896变异率（P〉0．05）。前C区nt1896变异可能是影响HBV DNA复制的一个因素。     

乙型肝炎病毒基因型、YMDD变异与病毒复制水平的关系

目的研究拉米夫定治疗慢性乙型肝炎(CHB)期间乙肝病毒(HBV)YMDD变异的情况及其与HBV基因型和病毒复制水平的关系。方法检测53例CHB患者在使用拉米夫定治疗后的YMDD突变情况,考察其与HBV基因型和病毒复制水平的关系。结果患者在用药9个月和12个月后发生YMDD突变的概率为1.8%和9.4%;基因型B的治疗有效率明显高于基因型C(P<0.05)。基因型C的YMDD突变率明显高于基因型B的YMDD突变率。结论拉米夫定能迅速抑制HBV复制、改善肝功能,但长期用药部分患者会出现耐药,其YMDD突变概率随治疗时间的延长而增加。     

乙肝病毒大蛋白阳性患者血清中HBV DNA及HBV血清学标志物的检测及意义

目的探讨乙型肝炎病毒大蛋白（HBV-LP）与乙型肝炎病毒（HBV）DNA及乙型肝炎病毒标志物（HBV-M）的相关性及意义。方法用荧光定量聚合酶链反应法检测HBV DNA,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV-M和HBV-LP。结果 213例HBV-LP阳性患者血清HBV DNA的总阳性率为86.32%,且HBV-LP测定的吸光度值与HBV DNA的拷贝数呈正相关。结论 HBV-LP能反映出HBV的复制情况,与HBV DNA具有良好的相关性,可作为判断HBV感染者体内病毒复制的可靠指标。