白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化,探讨其在子痫前期发病过程中的作用。方法:选取子痫前期(子痫前期轻度组和重度组)和正常妊娠孕妇作为研究组和对照组,采用免疫组化法测定其胎盘组织中LIF的表达,并通过BI2000医学图像分析系统对染色结果进行定量检测并作比较。结果:LIF在3组中均有表达,且主要表达于滋养细胞胞质中;子痫前期轻度组及重度组与正常妊娠组相比,胎盘组织中LIF的表达明显减弱,差异有统计学意义(P<0.01);子痫前期轻度组与重度组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对正常妊娠的维持起到了一定的保护作用;LIF在胎盘组织中的低表达影响了滋养细胞的浸润能力,可能是子痫前期发病的病因之一。     

REDD1蛋白在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中REDD1蛋白的表达情况。方法选择2011年12月至2012年4月四川大学华西第二医院收治的确诊为子痫前期,年龄为(31.4±1.4)岁的单胎妊娠孕妇29例为研究对象。按照妊娠中子痫前期发生的时间,将其分为早发型子痫前期组(n=15)和晚发型子痫前期组(n=14)。同时按入院顺序号随机选择孕期在本院产前检查,年龄为(32.0±2.8)岁的单胎妊娠健康孕妇20例纳入对照组(本研究遵循的程序符合四川大学华西第二医院人体试验委员会制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象知情同意,并与之签署临床研究知情同意书)。采用SP免疫组织化学染色技术,Western bloting杂交及实时荧光定量PCR检测受试者REDD1蛋白及其mRNA在胎盘组织中的表达,并采用相关统计学方法分析早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及对照组胎盘组织中REDD1蛋白表达差异。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组患者的一般临床资料(年龄、孕周及产次)分别与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结果 REDD1蛋白表达于胎盘滋养细胞的细胞质。早发型子痫前期组及晚发型子痫前期组胎盘组织中REDD1蛋白水平均较对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。早发型子痫前期组REDD1mRNA表达水平较对照组明显增高,差异亦有统计学意义(P<0.05);但晚发型子痫前期组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 REDD1蛋白可能在子痫前期发病机制中起重要作用。     

Fas/FasL及Bcl-2在子痫前期胎盘的表达及意义

目的:探讨Fas抗原(Fas)及其配体(FasL)、Bcl-2在子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中的表达变化及其意义。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法检测20例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、20例轻度子痫前期产妇(轻度子痫前期组)及20例重度子痫前期产妇(重度子痫前期组)胎盘组织中Fas、FasL及Bcl-2表达水平。结果:Fas、FasL及Bcl-2主要表达于胎盘合体滋养细胞胞质及胞膜中。FasL、Bcl-2在轻度子痫前期组(62.28±4.92、80.67±6.19)及重度子痫前期组(41.74±6.38、64.42±5.43)胎盘中的表达均低于正常晚孕组(80.72±6.01、92.49±7.88),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。Fas在轻度子痫前期组(55.94±4.35)及重度子痫前期组(75.98±6.01)胎盘中的表达均高于正常晚孕组(40.58±5.43),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Fas、FasL及Bcl-2在子痫前期胎盘合体滋养细胞中表达失衡,可能与子痫前期的发病及发展有关。     

RANKL在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的探讨胎盘中RANKL的表达及与子痫前期的关系。方法选择2008年11月~2009年7月在四川大学华西第二医院产科住院分娩的正常妊娠妇女30例和子痫前期妇女60例(轻度和重度各30例)。采用免疫组织化学法检测胎盘组织中RANKL蛋白的表达强度。结果 (1)3组研究对象绒毛细胞滋养细胞及合体滋养细胞胞浆内均有RANKL蛋白的阳性表达;(2)各组胎盘母面与子面RANKL蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05);(3)重度子痫前期组胎盘RANKL蛋白表达水平高于轻度子痫前期组及正常妊娠组,差异有统计学意义(P﹤0.001);而轻度子痫前期组RANKL蛋白表达水平也高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P﹤0.001)。(4)子痫前期患者胎盘RANKL的蛋白表达与分娩前收缩压、舒张压及24h尿蛋白呈正相关。结论 RANKL在胎盘组织中的异常表达与其病情的严重程度密切相关。     

重度子痫前期患者胎盘组织中miR-21的表达及其临床意义

目的:检测miR-21在重度子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中的表达差异。方法:收集2011年1月～2011年8月在江西省妇幼保健院产科行剖宫产的16例重度子痫前期患者和16例正常妊娠妇女的胎盘组织,通过实时荧光定量PCR技术检测胎盘组织中miR-21的表达水平。结果:miR-21在重度子痫前期患者胎盘组织中表达水平明显升高,为正常对照组表达水平的2.02倍(P<0.05)。结论:miR-21在胎盘组织中的表达水平可能与子痫前期的发生发展病理过程存在一定相关性。     

白血病抑制因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的:测定白血病抑制因子(LIF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达,探讨其在妊娠高血压发病中的作用。方法:采用免疫组化技术-链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接(SP)法对在正常妊娠(正常妊娠组)、子痫前期(轻度子痫前期组和重度子痫前期组)孕妇胎盘组织中LIF的表达进行组织学定位和半定量分析。结果:3组孕妇胎盘组织中LIF均呈现阳性表达,阳性染色主要位于滋养细胞胞质中,胞核无明显着色。轻度子痫前期组和重度子痫前期组分别与正常妊娠组比较,胎盘组织的染色强度及范围显著减弱,差异有统计学意义(P<0.01),而轻度子痫前期组和重度子痫前期组的胎盘组织染色范围和强度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LIF对维持正常妊娠有一定的保护作用,LIF分泌或调控异常,影响了滋养细胞的浸润能力,导致病理妊娠,在胎盘组织中的低表达,参与了子痫前期发病机制。     

Fas表达异常与重度子痫前期的关系研究

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞Fas(又称APO-1,CD95)的表达及意义。方法:采用免疫组化法观察24例Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的表达,并与24例正常晚期妊娠胎盘比较。结果:Fas主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(P<0.05),差异有显著性。Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达与新生儿出生体重和胎盘重量均有明显相关性。结论:Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞中表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应及滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅,影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关。     

子痫前期胎盘中TGF-β1的表达及意义

目的:检测胎盘组织中转化生长因子β1(TGF-β1)的定位及表达水平,初步评估TGF-β1与子痫前期发病的关系及在子痫前期中的作用。方法:应用免疫组化法检测正常妊娠组14例和子痫前期组36例的胎盘组织中TGF-β1的定位及半定量检测TGF-β1在滋养细胞中的表达。结果:TGF-β1主要表达于滋养细胞,部分表达于蜕膜细胞,偶见于胎盘绒毛血管内皮细胞及间质。子痫前期组滋养细胞中TGF-β1表达较对照组增高(P<0.05),并随病情的发展而增高,轻、重度存在显著性差异(P<0.05)。结论:①TGF-β1的增加可能与子痫前期的发生及子痫前期的部分病理生理变化有关。②TGF-β1表达随病情发展而增高,提示可能与子痫前期严重程度有关。     

子痫前期患者胎盘组织中Ang-2及HIF-1α表达及意义

目的:通过检测子痫前期患者及正常孕妇胎盘组织中Ang-2及HIF-1α的表达,探讨其与子痫前期发病的关系。方法:选择子痫前期患者52例,并随机选择正常晚期妊娠妇女20例为对照组。两组胎盘组织HE染色高倍镜下计数绒毛滋养细胞层增生细胞结节数和绒毛间质的血管数,采用免疫组织化学方法检测胎盘组织中Ang-2及HIF-1α的表达情况。结果:子痫前期患者胎盘绒毛滋养层细胞增生结节数与正常晚孕组比较数量明显增多,绒毛间质血管密度显著下降(P<0.05)。子痫前期组Ang-2在胎盘组织中的表达明显低于正常对照组(P<0.05),而HIF-1α的表达显著高于对照组(P<0.01)。HIF-1α的表达水平与滋养层细胞增生结节数呈正相关(rs=0.794,P<0.05),Ang-2表达与绒毛间质血管密度呈负相关(rs=-0.38,P<0.05)。结论:胎盘滋养细胞浸润能力下降致绒毛血管密度减少可能是子痫前期发病的重要原因,Ang-2和HIF-1α的异常表达可能参与此发病机制。     

TNF-α、COX-2及CXCL12在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨TNF-α、COX-2及CXCL12子痫前期患者胎盘组织中的表达和意义,寻求新的模式解释子痫前期的发病机制。方法采用数字表法随机选取自2016年1月-2018年1月北京圣宝妇产医院妇产科就诊的100例子痫前期患者。其中轻度子痫前期患者50例,年龄(24. 39±2. 98)岁,BMI为(27. 98±5. 33) kg/m2,孕周(25. 34±3. 18)周;重度子痫前期患者50例,年龄(25. 01±4. 27)岁,BMI为(28. 02±6. 17) kg/m2,孕周为(26. 01±5. 32)周;同时选取50例妊娠正常的志愿者为对照组,年龄(25. 01±4. 27)岁,BMI为(28. 02±6. 17) kg/m2,孕周为(26. 01±5. 32)周。酶联免疫吸附法(ELISA法)分别检测入组者血清中TNF-α、COX-2及CXCL12的表达,免疫组织化学染色检测胎盘标本中TNF-α、COX-2及CXCL12的表达。结果轻度子痫患者血清中炎性因子TNF-α和COX-2的含量明显高于空白对照组(P0. 05);重度子痫患者血清中炎性因子TNF-α和COX-2的含量明显高于轻度子痫患者组(P0. 05)。轻度子痫患者血清中趋化因子CXCL12的含量明显低于空白对照组(P0. 05);重度子痫患者血清中趋化因子CXCL12的含量明显低于轻度子痫患者组(P0. 05)。免疫组织化学染色结果显示,轻度子痫患者胎盘组织中炎性因子TNF-α和COX-2的含量明显高于空白对照组(P0. 05);重度子痫患者胎盘组织中炎性因子TNF-α和COX-2的含量明显高于轻度子痫患者组(P0. 05)。TNF-α与COX-2成正相关(r=2. 891,P0. 05),TNF-α与CXCL12成负相关(r=-0. 774,P0. 05),COX-2与CXCL12成负相关(r=-0. 759,P0. 05)。结论炎性因子TNF-α、COX-2及趋化因子CXCL12的共作用下的免疫—炎症联合机制在子痫前期的发生和发展过程中起到一定作用,可作为临床治疗靶点。     

急性肺损伤新生大鼠肺组织细胞凋亡及其相关基因的表达和意义

【目的】　探讨细胞凋亡与其相关基因Fas/FasL系统表达在缺氧、缺氧后吸入纯氧致肺损伤发病机理中的意义。　【方法】　通过复制缺氧、缺氧后吸入纯氧大鼠肺损伤模型,采用TUNEL法、原位杂交检测、SqRT-PCR技术观察肺组织细胞凋亡情况、FasmRNA、FasLmRNA表达强度探讨其相关基因的表达。　【结果】　缺氧组或缺氧后吸入纯氧组在缺氧4 h后即可见大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞出现凋亡现象,并随着时间延长,细胞凋亡指数增高(P均<0.01),同时FasmRNA、FasLmRNA表达均上调,且缺氧后吸入纯氧组大鼠FasmRNA、FasLmRNA表达均较单纯缺氧组明显增强(P<0.05)。　【结论】　细胞凋亡与FasmRNA、FasLmRNA表达的上调可能参与缺氧和缺氧后吸入纯氧时导致的肺损伤。     

Fas和FasL在乳腺癌中表达及临床意义

目的:研究Fas蛋白(CD95/Apol21,Fas)、Fas配体(Fasligand,FasL)在乳腺癌组织中的表达,并探讨其与淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组化LSAB法检测50例乳腺癌组织Fas和FasL的表达。结果:Fas及FasL在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为38和82。乳腺癌组织FasL的阳性表达率明显高于正常组织(P<0.05),Fas明显低于正常组织(P<0.05)。Fas的表达与淋巴结转移有关(P<0.05)。结论:Fas及FasL的表达与乳腺癌的临床特征和预后有关。     

母胎界面Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系

目的:探讨母胎界面上Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系。方法:采用免疫组化方法对49例产妇母胎界面上Fas及其配体FasL表达进行测定,其中正常孕足月产妇16人,妊娠期高血压疾病轻度子痫前期产妇18名,妊娠期高血压疾病重度子痫前期15名,所有患者均为剖宫产分娩。结果:妊娠期高血压疾病组胎盘滋养细胞Fas表达较正常孕足月组增强并随病情加重更为明显,而FasL着色较正常孕足月组减弱,随病情加重更为明显。在底蜕膜细胞中,随妊娠期高血压疾病的加重FasL表达与正常孕足月相比逐渐减弱。结论:母胎界面Fas及其配体FasL表达紊乱,致使局部免疫反应增强,免役豁免机制被破坏,而高表达的Fas引起胎盘滋养细胞及底蜕膜细胞随之增加,导致胎盘侵蚀异常,血管重铸障碍,可能是妊娠期高血压疾病发病的重要机制之一。     

慢性肝病患者外周血单核细胞Fas系统的临床研究

目的 探讨Fas抗原及其配体参与的细胞凋亡机制在慢性肝病发病机制中的作用及意义.方法 检测40例慢性乙型肝炎患者和20例脂肪肝患者外周血单核细胞(PBMC)Fas及FasL阳性细胞的百分率,并分析ALT、血清肝纤维化系列指标与Fas及FasL阳性率的相关性,设对照组26人.结果 (1)40例慢性乙型肝炎和20例脂肪肝患者PBMC Fas阳性细胞平均百分率分别为0.36和0.37,FasL阳性细胞平均百分率分别为0.42和0.45,对照组为0.29和0.28.经方差分析P＜0.01,差异有统计学意义.(2)根据ALT增高程度不同,Fas及FasL的检测结果经方差分析,P值均＜0.01,差异有统计学意义,对照组的Fas和FasL值明显低于ALT增高组.(3)对肝纤维化系列指标与Fas和FasL的检测及相关分析发现,大部分指标之间无相关性.结论 慢性肝病患者的PBMC Fas和FasL表达均明显高于正常对照组,而脂肪肝患者PBMC Fas及FasL的表达增多,提示在脂肪肝的发病中存在Fas/FasL系统介导的免疫应答.     

肾癌Fas和FasL蛋白表达异常对其免疫逃避机制的影响

目的探讨肾癌系统表达异常对其免疫逃避机制的影响。方法采用免疫组化方法分析44例肾癌组织及相邻正常肾组织Fas、FasL表达情况;用TUNEL法检测44例肾癌标本中浸润性T淋巴细胞的凋亡。体外培养786-0肾癌细胞株,流式细胞仪(FCM)分析肾癌细胞株Fas、FasL的表达及肿瘤细胞的凋亡;体外培养Fas+的Jurkat细胞,FCM检测其凋亡情况。结果肾癌细胞Fas表达率为22.8%,显著低于其在正常肾组织中表达率(53.8%,P<0.01)。而FasL表达率(46.5%)显著高于其在相邻正常肾组织在的表达(23.2%)。肾癌组织Fas、FasL表达呈负相关(r=-0.46,P<0.05);肾癌浸润性T淋巴细胞凋亡率(33.1%)与肾癌FasL表达呈正相关(r=0.96,P<0.01)。化疗药物5-Fu能上调肾癌细胞株786-0Fas的表达,并增强肾癌细胞对Fas抗体的细胞毒效应,通过抑制肾癌细胞株786-0FasL表达而降低其攻击JurkatT淋巴细胞的能力。讨论肾癌细胞免疫逃避机制包括两方面:一方面通过Fas低表达,能逃避Fas单克隆抗体介导的凋亡;另一方面通过FasL高表达,具有主动攻击免疫淋巴细胞的能力。临床化疗药物5-Fu就Fas系统而言通过上调Fas、抑制FasL的表达发挥一定的疗效。     

Fas／FasL参与热诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的调控

目的：探讨睾丸局部加热致大鼠睾丸生精细胞凋亡及Fas/FasL信号通路在生精细胞凋亡调控中的作用。方法16只成年SD雄性大鼠随机均分为加热组和对照组。加热组进行大鼠睾丸43℃水浴15 min;对照组行大鼠睾丸22℃水浴15 min。24 h后进行灌流和内固定,取睾丸。制作5μm的组织切片,采用睾丸原位末端标记法（TUNEL）和免疫组化分析,检测生精细胞凋亡及 Fas 和 FasL 表达。化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果加热组睾丸生精细胞凋亡率（15.8％±1.6％）较对照组（2.2％±0.5％）显著增加;加热后Fas和FasL在生精细胞和支持细胞表达水平也明显升高;对照组和加热组血清睾酮（T）水平无差异。结论睾丸局部加热诱导生精细胞凋亡,Fas和FasL系统为该凋亡过程的信号通路之一。     

Fas/FasL系统介导的细胞凋亡与卵泡闭锁及稽留流产的关系

Fas/FasL是细胞表面的两种跨膜蛋白。目前研究认为FasL是死亡因子,Fas则是其受体。当一个细胞的FasL与另一个细胞的Fas结合时,可以导致表达Fas的细胞凋亡。Fas又称Apo-1,即CD95分子。人Fas基因定位于10号染色体q23,基因长度约25Kb。人FasL基因定位于1号染色体q23,基因长度约8Kb。Fas/FasL系统与卵泡闭锁生理过程、自身免疫疾病、肿瘤发生、移植物耐受等均有密切关系。近年来细胞凋亡因素导致稽留流产的发生受到人们的关注,而其中Fas/FasL系统在促进绒毛组织细胞凋亡方面占据重要的地位。     

产前束缚应激对子代大鼠听力及耳蜗核Fas／FasL表达的影响

目的 确定产前束缚应激刺激对子代大鼠听性脑干反应(Auditory Brainstem evoked Response,ABR)和耳蜗核中Fas和FasL表达的影响.方法 在母鼠怀孕的13～19d,每天进行3次束缚应激,每次45min.大鼠7天龄时测ABR和对脑组织切片应用免疫组化方法检测耳蜗核中Fas和FasL的表达.结果 S组ABR反应阈为59±7.18dB nHL,对照组ABR反应阈为30±5.68dB nHL.S组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期及Ⅰ～Ⅱ、Ⅱ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅲ波间期明显延长.应激组Fas的表达强于对照组(P＜0.05),FasL的表达强于对照组(P＜0.05),Fas和FasL的表达两组间没有显著性差异(P＞0.05).结论 产前束缚应激刺激可使子代大鼠耳蜗核神经元中Fas/FasL表达上调,并引起耳蜗核细胞凋亡的发生,从而使子代大鼠ABR阈值升高和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ波潜伏期及Ⅰ～Ⅱ、Ⅱ～Ⅲ、Ⅰ～Ⅲ波间期延长,因而产前慢性应激对子代听力有损伤.