人羊膜、药物与生长因子预防肌腱损伤修复术后的粘连

文题释义： 肌腱损伤：肌腱的过度使用、退变和外伤,均会引起肌腱的急性或慢性损伤。造成急性肌腱损伤的原因主要有：挫伤、撕裂及拉力过载。拉力过载甚至导致肌腱实质的断裂或肌腱附着点的撕脱骨折。急性肌腱损伤多发生于运动量大的年轻人,或因外伤而发生。慢性肌腱损伤发生率随年龄的增大而增长,多由肌腱的炎症及变性造成。部分药物,如喹诺酮类也可造成肌腱损伤。 肌腱粘连：肌腱有内源性愈合和外源性愈合两种愈合机制。血液、组织液和淋巴液是肌腱的营养来源。肌腱发生损伤后,肌腱周围结构遭到破坏,使肌腱细胞得不到足够营养供应,增殖较慢,即内源性愈合不能迅速参与到肌腱修复当中。腱周炎性细胞大量聚集,并渗透到肌腱损伤部位,形成肉芽组织,最后机化形成瘢痕粘连肌腱,这就是外源性愈合。因此,要减少乃至完全预防肌腱粘连,重要的是对肌腱周围结构的重建,促进内源性愈合及抑制外源性愈合。 背景：关于肌腱损伤重建术后肌腱粘连已有大量研究,但目前尚不能做到肌腱的无粘连重建。 目的：侧重于人羊膜、药物、生长因子3个方面,综述预防肌腱粘连的研究进展。 方法：应用计算机检索万方、CNKI和Medline数据库中2000年1月到2019年4月期间收录的文章。英文检索词为“tendon injury,tendon adhesions,drug,human amniotic membrane,growth factor”,中文检索词为“肌腱损伤,肌腱粘连,生长因子,羊膜,药物”。选择文章内容与预防肌腱损伤后粘连相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章,最终纳入50篇文献进行结果分析。 结果与结论：羊膜及脱细胞羊膜用于预防肌腱粘连效果满意。药物可以从多方面产生作用,达到预防粘连的目的,当药物与缓释载体结合后效果更佳。多数生长因子既有促进肌腱愈合的作用,又有促使粘连组织形成的作用,通过干预生长因子在损伤局部的浓度,可以减少粘连组织的形成。 ORCID: 0000-0002-3708-1372(冯勇) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

蚕丝组织工程化肌腱的生物力学研究

目的探讨用蚕丝与同种异体肌腱细胞联合培养植入体内,构建组织工程化肌腱的生物力学指标。方法实验分2组,一组是植入附着了肌腱细胞的蚕丝材料组,另一组是单纯植入蚕丝材料组。分别在术后的第2,4,6,8周进行随机取材,在每次取材时每组分别取20只,对材料进行生物力学测定。所得数据均采用SPSS13．0统计软件进行处理和分析。结果在第2,4,6,8周进行取材,生物力学的测定结果显示在同时间点内,细胞组的结果明显优于非细胞组（P≮0．05）,细胞组自身在不同时间点的比较中,发现除第8周以外（P〉O．05）,时间越长,力学的结果越优秀（P〈O．05）;而在非细胞组则只有第8周的结果与前3次测定结果的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论本实验的结果说明蚕丝材料对肌腱细胞的黏附性好,生物力学性能优越,附着肌腱细胞后可以构成组织工程化肌腱。经更深入的实验和研究,蚕丝材料可能会在肌腱缺损的治疗方面具有良好的应用前景。     

脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞促进兔腱-骨愈合

文题释义： 脱细胞羊膜支架：是一种通过对新鲜羊膜进行脱细胞处理后得到的天然支架,富含有丰富的细胞外基质成分,细胞能够在该支架表面正常生长。 Scleraxis：是肌腱细胞/韧带细胞的特异性标志分子,在肌腱细胞和韧带细胞的发育和分化过程中发挥着重要的作用。 背景：脱细胞羊膜支架是一种天然支架,具有良好的生物相容性,已经广泛应用于组织工程的相关领域。Scleraxis能够促进人羊膜间充质干细胞向人韧带细胞分化,进而促进腱-骨愈合。 目的：探讨脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞能否促进兔腱-骨愈合。 方法：①体外分离培养人羊膜间充质干细胞,经过传代培养后观察细胞的形态;②体外构建Scleraxis慢病毒然后以最适感染复数转染第3代人羊膜间充质干细胞,q-PCR检测其转染效率;③用酶消化法制备脱细胞羊膜支架,然后体外将转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞接种到脱细胞羊膜支架上面,鬼笔环肽染色观察细胞在支架上的生长情况;④将脱细胞羊膜支架复合转染Scleraxis慢病毒的人羊膜间充质干细胞包裹新西兰大白兔跟腱,然后移植到骨隧道内,观察其对腱-骨愈合的影响。 结果与结论：①第3代人羊膜间充质干细胞呈贴壁生长,细胞生长状态良好;②Scleraxis慢病毒转染后96 h表达稳定的绿色荧光,Slclerxis的mRNA表达水平明显提高,说明转染成功;③脱细胞羊膜支架的上皮细胞基本消失,证明脱细胞比较彻底,同时其基底层完整保留,细胞外基质成分仍然存在;④通过鬼笔环肽染色发现细胞在脱细胞羊膜支架上生长良好,增殖未受到影响;⑤体内实验结果提示：人脱细胞羊膜支架复合Scleraxis慢病毒转染的人羊膜间充质干细胞具有促进腱-骨愈合的作用。 ORCID: 0000-0002-6798-6156(张骏) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

新鲜羊膜移植治疗复发性翼状胬肉的临床疗效

目的探讨新鲜羊膜移植治疗复发性翼状胬肉的临床疗效。方法对30例(36只眼)复发性胬肉患者行胬肉切除及部分睑球粘连分离联合新鲜羊膜移植。结果术后平均随访12个月,所有患者除4只眼有复发外,其余全部治愈。移植术后复发率为11.1%。结论新鲜羊膜移植是治疗复发性胬肉的有效方法。     

羊膜修复肌腱、韧带损伤的研究进展

肌腱、韧带损伤后造成缺损、粘连和功能障碍的问题,当今尚未得到解决。组织工程技术,特别是生物羊膜,在眼科、烧伤整形科、耳鼻喉科等专科已经得到了较好的应用,羊膜能否用于肌腱、韧带的损伤修复目前尚无足够多的研究。本研究拟就羊膜特性及其在修复肌腱、韧带损伤方面的应用加以概述。     

组织工程化肌腱种子细胞的研究

组织工程化肌腱有望成为临床肌腱缺损修复最为理想的替代物。随着种子细胞功能研究的逐步深入、新型种子细胞的不断发掘以及相关科学技术的进步,制约组织工程化肌腱发展的瓶颈之一“种子细胞”问题逐渐得到解决,组织工程化肌腱的体外构建及体内应用亦随之日趋成熟。着重就肌腱种子细胞的研究进展作一综述。     

吻合血管大收肌腱复合组织瓣移植修复跟腱缺损的应用解剖

目的 :为吻合血管的大收肌腱复合组织瓣移植修复跟腱缺损新术式提供解剖学依据。方法 :在 40侧经动脉灌注红色乳胶成人尸体下肢标本上 ,对膝降动脉的起始、走行、分支和分布 ,以及大收肌腱的形态、血供等解剖观察。结果 :膝降动脉 95 %起于股动脉 ,起始处距收肌结节 7.8± 0 .8cm ,膝降动脉90 %发出隐支、股内侧肌支和关节支 ,膝降动脉和关节支起始外径分别为 :1.9± 0 .4mm和 1.4± 0 .4mm ,关节支伴大收肌腱下行 ,分支供养大收肌腱及股骨内侧髁。结论 :以膝降血管为蒂可形成大收肌腱骨皮复合组织瓣 ,吻合血管移植可修复不同类型的跟腱缺损 ,术式简便易行 ,供区损伤小。     

脱细胞羊膜与医用膜修复腱鞘缺损防治肌腱粘连的比较

BACKGROUND: Experiments have demonstrated that biological membranes can be used to reconstruct the tendon sheath and inhibit exogenous healing of the tendon. Therefore, these membranes provide a good bed for tendon gliding and reduce tendon adhesion.     

孕中期羊水中细胞研究进展

孕中期羊水中细胞培养和核型鉴定广泛应用于产前诊断领域,可以发现一系列胎儿发育异常。近来,许多研究表明羊水中含有胎儿的干细胞,这些细胞能否应用于干细胞和组织工程学领域成为研究热点。综述了羊水中细胞的组成、来源、生物学特性、干细胞特性及组织工程学应用等方面的内容,并对研究前景进行展望。     

去细胞人羊膜基质的制备及免疫原性

目的制备去细胞人羊膜基质(AHAM)并分析其移植至小鼠体内后的免疫反应,评价去细胞人羊膜基质作为细胞移植支架的免疫原性。方法利用胰蛋白酶-EDTA消化人羊膜(HAM),去除人羊膜上皮细胞,制备新鲜去细胞人羊膜基质;新鲜去细胞人羊膜基质置于含硫酸软骨素及甘油的冷冻保护液中,-80℃保存;使用前经PBS复水处理后即冷冻去细胞人羊膜基质;免疫细胞化学分析去细胞人羊膜基质中人类白细胞抗原的表达情况;将冷冻的去细胞人羊膜基质移植至BALB/c小鼠肝脏内4周后,分析脾脏组织中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞比例的变化。结果新鲜及冷冻保存后的去细胞人羊膜基质均不表达人类白细胞抗原;冷冻的去细胞人羊膜基质移植至小鼠体内后,脾脏组织中CD4~+、CD8~+T淋巴细胞无明显变化。结论去细胞人羊膜基质的免疫原性较低,移植后不会引起由T细胞介导的特异性排斥反应,可以作为免疫安全性的生物支架用于疾病的细胞移植治疗。     

组织工程人工肌腱的研究进展

本文对目前组织工程肌腱的研究成果作一综述,主要从细胞支架、种子细胞、生长因子、周期性张力等各方面进行了阐述。今后,对材料进行合理改进,使之能供给肌腱细胞最适合的生存环境,解决种子细胞的来源问题,加入适当的生长因子,并施以符合生理条件的周期性张力,组织工程化肌腱将成为修复肌腱缺损的一种理想而可靠的方法。     

早期新鲜羊膜移植治疗重度眼热烧伤的临床分析

目的研究早期新鲜羊膜移植术在重度眼热烧伤重建眼表中的临床效果。方法收集整理急性重度眼热烧伤47例55眼，手术组28例28眼（Ⅲ度10眼，Ⅳ度18眼）早期（伤后3周内）行新鲜羊膜移植术，对照组27例27眼（Ⅲ度19眼，Ⅳ度8眼）予药物治疗，比较两种治疗方法的眼表重建效果。结果手术组Ⅲ度10眼术后眼表重建成功；手术组Ⅳ度18眼及对照组24眼丧失正常眼表结构，发生睑球粘连，5眼角膜穿孔，所有眼视力均下降，手术组眼表上皮化时间显著低于对照组（P〈0．05）。结论早期新鲜羊膜移植术可作为重度眼热烧伤后重建眼表的第一步。     

多层羊膜填塞治疗微小角膜溃疡穿孔

目的观察多层羊膜填塞治疗微小角膜溃疡穿孔的临床效果,了解其有效性、安全性和局限性。方法对12例12眼角膜溃疡继发微小穿孔（穿孔直径0．5～3．0mm）患者采用多层羊膜填塞治疗。其中细菌性6例、病毒性2例、真菌性4例。清除溃疡处坏死组织,用多层羊膜填塞穿孔,其表层羊膜间断或连续缝合固定于浅层角膜上,单层羊膜再次覆盖于整个角膜表面,连续或间断缝合固定于角巩缘。术后继续使用药物治疗原发病。随访6—24个月。观察患眼溃疡愈合、前房形成、角膜厚度及并发症等。结果术后第1天,患眼前房均形成,穿孔区密闭良好,炎症控制。术后40—60d,溃疡瘢痕愈合,溃疡表面完全被角膜上皮覆盖,角膜厚度基本正常,视力均有不同程度提高,随访期间前房稳定,未出现溃疡复发及严重并发症。结论羊膜填塞治疗微小角膜溃疡穿孔安全有效。但溃疡以瘢痕愈合。     

组织工程肌腱研究进展

肌腱组织工程是组织工程中开展较早的研究领域之一[1] 。经过几十年有关肌腱替代物以及十余年肌腱组织工程的研究 ,取得了一些突破性进展。但由于肌腱解剖结构和功能要求的特殊性 ,特别是常见的人体手部肌腱损伤的修复 ,至今仍是临床工作和组织工程研究的难点之一。主要存在以下几个方面的问题 :肌腱组织工程种子细胞的来源 ;同种异体肌腱细胞的免疫学反应 ;特殊力学强度和降解性能支架材料的制备和筛选 ;细胞与支架材料之间相互作用关系及细胞—材料复合体与周围组织相互关系的问题等等。现对上述问题的研究进展作一综述。1　肌腱组织工程…     

大收肌腱复合组织瓣移植修复手部肌腱皮肤缺损术式解剖研究

目的为带膝降动脉大收肌腱复合组织瓣修复手部肌腱伴皮肤(骨)缺损新术式提供应用解剖学基础.方法在30侧经动脉灌注红色乳胶成人尸体下肢标本上对膝降动脉的起始、走行、分支和分布及大收肌腱的形态特点和血管分布进行了解剖观测.结果①膝降动脉的主干长(1.22±0.48)cm,起点外径为(1.85±0.64)mm,主要分支有股内侧肌支、关节支、隐支.②关节支的主干长(5.2±1.12)cm;起点外径为(1.16±0.31)mm,分支营养大收肌腱和股骨内侧髁,并参与形成膝关节动脉网.③隐动脉起点外径(1.14±0.29)mm,分支营养缝匠肌下部、膝内侧上部皮肤,并参与膝关节动脉网形成.④大收肌肌腱质部长(9.4±2.1)cm,宽(12.2±0.28)mm,厚(1.92±0.64)mm.大收肌腱移行部长(4.5±0.71)cm,宽(20.0±2.7)mm,厚(5.8±2.1)mm.结论以膝降动脉血管为蒂带其分支可形成大收肌腱骨肌皮复合组织瓣,吻合血管移植可修复不同类型的手部肌腱伴皮肌(骨)缺损,术式设计具有可行性,供区损伤小.     

Muscle and tendon connective tissue adaptation to unloading,exercise and NSAID

The extracellular matrix network of skeletal muscle and tendon connective tissue is primarily composed of collagen and connects the muscle contractile protein to the bones in the human body. The mechanical properties of the connective tissue are important for the effectiveness of which the muscle force is transformed into movement. Periods of unloading and exercise affect the synthesis rate of connective tissue collagen protein, whereas only sparse information exits regarding collagen protein degradation. It is likely, though, that changes in both collagen protein synthesis and degradation are required for remodeling of the connective tissue internal structure that ultimately results in altered mechanical properties of the connective tissue. Both unloading and exercise lead to increased production of growth factors and inflammatory mediators that are involved in connective tissue remodeling. Despite the fact that non-steroidal anti-inflammatory drugs seem to inhibit the healing process of connective tissue and the stimulating effect of exercise on connective tissue protein synthesis, these drugs are often consumed in relation to connective tissue injury and soreness. However, the potential effect of non-steroidal anti-inflammatory drugs on connective tissue needs further investigation.     

肌腱组织工程研究新进展

组织工程的发展为失能器官的治疗提供了新的希望 ,本文由肌腱组织工程入手 ,综合国内外最新文献 ,就肌腱组织工程的种子细胞来源、细胞外基质 (ECM)复合材料的研究、肌腱细胞与ECM的适应性研究等方面的进展进行了综述。     

Suppression of inflammatory and fibrotic responses in allergic inflammation by the amniotic membrane stromal matrix

BACKGROUND: The amniotic membrane (AM), which is the innermost layer of the placenta, was shown to possess anti-inflammatory and anti-fibrotic properties in various in vitro and clinical studies. PURPOSE: To evaluate the anti-fibrotic and anti-inflammatory effects of the AM matrix (AMM) on human conjunctival and lung fibroblasts in an in vitro system that tests fibrotic and inflammatory responses at the effector stages of allergic inflammation. METHODS: Human conjunctival or lung fibroblasts were seeded on plastic or on the stromal aspect of the AM, which was mounted on plastic inserts. Sonicates of human peripheral blood eosinophils activated with lipopolysaccharide (LPS), or human mast cell (HMC-1) leukaemia cell sonicates, were added to sub-confluent fibroblast monolayers. Proliferation of the sub-confluent fibroblasts was assessed using the [3H]-thymidine incorporation assay. The production of transforming growth factor (TGF)-beta1, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and IL-8 in conjunctival or lung fibroblasts was measured in conditioned media from these cultures by ELISA. RESULTS: After 4 days in culture, the [3H]-thymidine incorporation assay indicated a reduced proliferation of activated conjunctival and lung fibroblasts when cultured directly on the AMM. The production of both TGF-beta1 and IL-8 was significantly suppressed in activated conjunctival fibroblasts cultured on the AMM compared with those cultured on plastic, while the production of both TGF-beta1 and GM-CSF was decreased in human lung fibroblast cultured on the AMM. CONCLUSIONS: The AMM is capable of suppressing fibrotic responses in an in vitro system of effector stages of ocular allergic inflammation. These data may provide a basis for exploring matrix components in the AM for the treatment of allergic eye disease.     

Decellularization and genipin crosslinking of amniotic membrane suitable for tissue engineering applications

Abstract

Amniotic membrane has the potential to be used as scaffold in various tissue engineering applications. However, increasing its biostability at the same time maintaining its biocompatibility is important to enhance its usage as a scaffold. This studied characteristics genipin-crosslinked amniotic membrane as a bioscaffold. Redundant human amniotic membranes (HAM) divided into native (nAM), decellularized (dAM) and genipin-crosslinked (clAM) groups. The dAM and clAM group were decellularized using thermolysin (TL) and sodium hydroxide (NaOH) solution. Next, clAM group was crosslinked with 0.5% and 1.0% (w/v) genipin. The HAM was then studied for in vitro degradation, percentage of swelling, optical clarity, ultrastructure and mechanical strength. Meanwhile, fibroblasts isolated from nasal turbinates were then seeded onto nAM, dAM and clAM for biocompatibility studies. clAM had the slowest degradation rate and were still morphologically intact after 30 days of incubation in 0.01% collagenase type 1 solution. The dAM had a significantly highest percentage of swelling than other groups (p?<?0.05). Besides, the dAM retained the collagen content at similar level of nAM. Although the dAM had highest mechanical strength compared to the rest of the groups, the differences were statistically insignificant. Cell attachment on dAM and 0.5% clAM was higher compared to that on nAM and 1.0% clAM. In conclusion, clAM have better biostability and biocompatibility compared to the nAM and dAM. Together with other suitable characteristics of the clAM such as percentage of swelling, structural integrity and ECM content, clAM is suitable as scaffold for various tissue engineering applications.     

间充质干细胞在肌腱组织工程中的应用

在骨髓等组织内存在着一种非造血的干细胞——间充质干细胞,它可以在体内和体外被诱导,分化为骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、肌肉细胞和脂肪细胞等,具有多潜能的分化特性,而且比较易于提取和培养。随着肌腱组织工程理论和技术的不断发展,间充质干细胞的应用前景越来越广泛,并且发挥着重要的作用。就肌腱组织工程进行概述,对间充质干细胞的一般性质、来源以及将间充质干细胞作为种子细胞用于肌腱组织工程的进展等方面加以综述,并展望其发展前景。