A novel Danshensu/tetramethylpyrazine protects against Myocardial Ischemia Reperfusion Injury in rats

A new Danshensu/tetramethylpyrazine derivative (ADTM) with cardio-protection effects such as antioxidant, arterial relaxation, pro-angiogenesis and antiplatelet activities. Platelet activating factor receptor (PAFR) plays a key role in myocardial ischemia reperfusion (MIR) injury. This study aims to investigate the protective role of ADTM in MIR injury and clarify the potential role of PAFR. We measured the effects of ADTM on MIR injury in rats in vivo and hypoxia re-oxygenation (HR) injury in neonatal rat ventricular myocytes (NRVMs) in vitro. The results show that ADTM can significantly improve the IR-induced decline in heart function as increasing EF and FS, and restore the decreased cardiac hemodynamic parameters (LVSP, ± dp/dt max) and increased the level of LVEDP, decrease the infarct size of damaged myocardium and lactate dehydrogenase (LDH) activity in serum. Additionally, ADTM inhibits cardiomyocytes apoptosis, caspase-3 activity, and inflammatory response as well as down-regulates the MIR-induced IL-1β and TNFα production. Next, PAFR expression was significantly down-regulated in cardiomyocytes of MIR model in vivo and in vitro after treated with ADTM compare to IR group. At the same time, ADTM and PAFR small interfering RNA (siRNA) could inhibit cardiomyocytes apoptosis and inflammation during HR, while PAF presents the opposite effect. Furthermore, the above effects of PAF in HR induced cardiomyocytes were reversed by co-treatment of ADTM. Our findings demonstrate for the first time that ADTM protects against MIR injury through inhibition of PAFR signaling, which provides a new treatment for MIR.     

肾移植缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡机制的实验研究

目的 :探讨肾移植缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡机制。方法 :12头四川白猪根据组织配型选出 6头配型较好者行同种异体肾移植 ,另 6头行自体肾移植 ,分别测定其血清中肿瘤坏死因子 α(TNF α)水平及移植肾组织细胞凋亡荧光密度值。结果 :两种肾移植术后血清TNF α含量明显增高 ,并于术后 1月维持较高水平 (P <0 .0 5)。术后肾组织细胞凋亡也明显重于术前 (P <0 .0 5)。与自体肾移植相比 ,同种异体肾移植术后血清TNF α增高幅度较大 (P <0 .0 5) ,且移植肾组织中细胞凋亡荧光密度值大于自体肾移植组 (P <0 .0 5)。统计学分析显示 :血清TNF α水平与移植肾组织原位细胞凋亡荧光密度值有相关关系 (r=0 .8756 )。结论 :①血清TNF α水平增高可能与组织细胞凋亡有关。②细胞凋亡过度参与了缺血再灌注损伤移植肾功能。③缺血再灌注可以单独引起移植肾损伤或与免疫因素协同作用加重移植肾的损伤。     

Candida Administration Worsens Neutrophil Extracellular Traps in Renal Ischemia Reperfusion Injury Mice: An Impact of Gut Fungi on Acute Kidney Injury

Because of gut-barrier defect (gut-leakage) after acute kidney injury (AKI) and higher abundance of Candida albicans in human intestines compared with mouse guts, Candida administration in renal ischemia reperfusion injury (I/R) mice possibly more closely resemble patients with AKI than non-Candida model. Fungi in feces were detectable only in mice with Candida administration. Candida renal-I/R mice, when compared with non-Candida I/R, demonstrated more profound injuries, including (i) gut-leakage; FITC-dextran assay and serum (1→3)-β-D-glucan (BG), (ii) systemic inflammation (serum cytokines), and (iii) neutrophil extracellular traps (NETs); gene expression of peptidyl arginase 4 (PAD4) and IL-1β, nuclear morphology staining by 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) and co-staining of myeloperoxidase (MPO) with neutrophil elastase (NE) in peripheral blood neutrophils. Although renal excretory function (serum creatinine) and renal histology score were nondifferent between renal-I/R mice with and without Candida, prominent renal NETs (PAD4 and IL-1β expression with MPO and NE co-staining) was demonstrated in Candida renal-I/R mice. Additionally, neutrophil activation by lipopolysaccharide (LPS) plus BG (LPS + BG), when compared with LPS alone, caused (i) NETs formation; dsDNA, DAPI-stained nuclear morphology and MPO with NE co-staining, (ii) inflammatory responses; Spleen tyrosine kinase (Syk) and NFκB expression, and (iii) reduced cell energy status (maximal respiratory capacity using extracellular flux analysis). Also, LPS + BG-activated NETs formation was inhibited by a dectin-1 inhibitor, supporting an impact of BG signaling. In conclusion, Candida-renal I/R demonstrated more prominent serum BG and LPS from gut translocation that increased systemic inflammation and NETs through TLR-4 and dectin-1 activation. The influence of gut fungi in AKI should be concerned.     

川芎嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

实验观察了川芎嗪对家兔心肌缺血再灌注损伤时心脏血流动力学、血清中和心肌组织中氧自由基和脂质过氧化物的影响。川芎嗪保护组与非保护组比较显示，①左室内压峰值（ＬＶＳＰ）明显升高（Ｐ＜０．０５）、左室内压上升最大速率（ＬＶ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ）和左室内压下降最大速率（ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ）均升高非常显著（Ｐ＜０．０１）；②血清中丙二醛（ＭＤＡ）明显降低（Ｐ＜０．０５），而谷胱甘肽过氧化物酶／脂质过氧化物（ＧＳＨ－ＰＸ／ＬＰＯ）升高非常明显（Ｐ＜０．０１）；③缺血再灌注损伤区心肌组织中ＭＤＡ显著降低，并伴随超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和ＧＳＨ－ＰＸ／ＬＰＯ显著升高（均Ｐ＜０．０５）。表明川芎嗪可通过提高对氧自由基的清除及拮抗脂质过氧化反应而保护缺血再灌注损伤的心肌。     

褪黑素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨褪黑素对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 将72只6—7周龄的健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组,即褪黑素处理组（Mel组）、酒精溶媒对照组（Ale组）、生理盐水对照组（NS组）。建立肝缺血再灌注损伤模型,于不同时点用TBA法和黄嘌呤氧化酶法分别测定肝组织丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）含量,免疫组织化学方法检测分析核因子-kB（NF-kB）的表达情况,结果MDA含量在再灌注后各时点的Mel组均显著低于Ale及NS对照组（P〈0．05）,SOD含量在再灌注后3h、12h、24h时点的Mel组显著高于Ale及NS对照组（P〈0．05）;Mel组再灌注后各时点的NF-kB蛋白表达阳性率均显著低于Ale组和NS组（P〈0．05）。以上各项指标在各时点Alc组与NS组相比无显著性差异。结论 Mel抗氧化及抑制肝细胞NF—kB的表扶,可能是大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用机制之一。     

升压治疗急性脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的:探讨升压治疗局灶性脑缺血的保护作用及治疗的维持时间。方法:采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,40只大鼠随机分为五组:模型对照组(A)、升压维持15min组(B)、维持45min组(C)、维持90min组(D)和120min组(E),观察各组神经功能评分、脑梗死体积和病理学改变。结果:神经功能缺损评分B、C、D组明显低于A组;B、C、D、E各组脑梗死体积明显低于A组,C、D、E组明显低于B组;各治疗组组织病理学改变比对照组轻,B组最轻。结论:缺血3h再灌注时,升压维持时间在2h以内对脑损伤有保护作用,升压最佳维持时间是15min。     

注射用内给氧对缺血再灌注损伤兔肝脏SOD、GSH-PX活性和MDA含量的影响

目的 探讨注射用内给氧对缺血再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）损伤兔肝脏超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量的影响。方法 48只健康新西兰长耳大白兔随机分为四组：假手术组（A组）、缺血再灌注组（B组）、缺血再灌注＋周围静脉注射用内给氧组（C组）、缺血再灌注＋肝动脉注射内给氧组（D组），每组12只。采用Pringle氏法建立肝脏I／R模型。比较四组大白兔缺血再灌注后1、2、24h肝组织的抗氧化能力（SOD、GSH-PX）、脂质过氧化产物丙二酮（MDA）含量。结果 与A组比较，B、C、D三组肝组织SOD、GSH．PX活力降低，MDA含量增高（P〈0．05）；与B组比较，C、D两组肝组织SOD、GSH-PX活力升高，MDA含量降低（P〈0．05）；C组与D组比较，各参数差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 注射用内给氧对肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，可降低MDA含量，提高SOD活力和GSH-PX活性。     

基因芯片技术在移植器官缺血再灌注损伤研究中的应用

基因芯片技术已经成为检测不同状态下生物体基因变化的重要手段。通过基因芯片技术从基因水平上研究移植排斥相关问题是目前的新趋势。缺血再灌注损伤作为移植器官的早发事件，利用基因芯片技术研究这个病理过程，可望能够深入了解移植排斥的机理，为临床上观测和治疗器官移植后器官排斥提供有效的理论指导。     

肝缺血／再灌注损伤对大鼠肺组织结构及leptin蛋白表达的影响

目的：研究肝缺血／再灌注损伤（I／R）对肺组织结构和leptin蛋白表达的影响，探讨leptln与肝I／R后肺损伤的联系。方法：建立大鼠70％肝I／R模型，设立假手术、缺血60min／再灌注60min（I60’R60’）、I60’R150’、I60’R240’、I60’R360’等实验组，每组9只大鼠。于相应时间点采集肺组织，分别用石蜡切片H．E．染色和免疫组化法观察肺组织结构和leptin蛋白表达的变化。结果：肝I／R对肺组织造成损害，随着再灌注时间的延长发生不同程度的改变。与假手术组肺leptin蛋白表达水平相比，四个损伤组均显著降低。四个损伤组之间leptin蛋白表达两两相比均有显著差异，以I60’R150’组最高，I60’R60’、I60’R360’、I60’R240’组依次递减。结论：肝I／R造成肺组织结构不同程度的损害，并直接抑制了肺leptin蛋白的表达，提示leptin与肝I／R后的肺损伤存在密切的联系。     

绞股蓝总皂甙对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

结扎大鼠冠状动脉40分钟,解除结扎恢复血流再灌注20分钟,复制大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察绞股蓝总皂甙(GP)对心肌缺血/再灌注损伤的影响。结果,GP明显提高心肌组织GSH-Px活性,降低心肌MDA含量,使降低的线粒体膜流动性恢复,减轻再灌注导致心肌超微结构损伤。提示,GP对大鼠心肌缺血/再灌注损伤有保护作用,作用机理与抗氧化作用有关。     

WDR5在大鼠肾脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

目的:探讨WDR5基因在肾脏缺血再灌注损伤中的作用及机制.方法:成年雄性SD大鼠48只,按照随机数表法分为对照组、缺血再灌注损伤组(IR组)、药物溶剂组(DMSO组)、WDR5-0103低剂量组(1mg/kg)、WDR5-0103中剂量组(5mg/kg)、WDR5-0103高剂量组(25mg/kg).对照组:仅切除大鼠...     

左卡尼汀对肾缺血／再灌注损伤的保护作用

目的探讨左卡尼汀在肾缺血／再灌注损伤中的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠肾急性缺血／再灌注模型,随机分为对照组（n=24）和左卡尼汀治疗组（n=24）,组内再分为假手术组及再灌注1、6、12h组。检测大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）水平和肾组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量,并观察肾组织形态学变化。结果对照组的BUN、Scr再灌注6h后开始与假手术组出现统计学差异（P〈0．05和P〈0．01）;治疗组再灌注12h的BUN和再灌注6、12h的Scr也显著高于假手术组（P〈0．05,P〈0．05和P〈0．01）,但低于同时点对照组（均P〈0．01）,治疗组再灌注12h后SOD活力显著高于（P〈0．01）,而MDA含量低于对照组（P〈0．01）,且病理损伤较同期对照组明显减轻。结论左卡尼汀对肾缺血／再灌注损伤具有保护作用,其机制与增强SOD活性,降低肾脏过氧化程度从而抗氧自由基损伤有关。     

IL-8单抗保护兔肝脏免受中性粒细胞介导的再灌注损伤

通过建立新西兰家兔的肝缺血再灌注损伤模型 ,观察抗IL 8中和性单克隆抗体对缺血再灌注 (IR )损伤肝脏的保护作用。肝缺血再灌注 4h后 ,外周血中各种肝功能指标酶活性与假手术组相比显著升高 (P <0 0 5 ) ,同时肝脏出现大量散点状中性粒细胞的浸润 ,此时肝细胞明显肿胀 ,细胞呈散乱状排列 ,细胞壁结构不完整并出现液化现象。而使用抗IL 8抗体后可明显阻断再灌注过程中中性粒细胞对肝脏的浸润 ,肝细胞虽仍有肿胀现象 ,但细胞呈正常的规则排列 ,细胞壁结构完整。其外周血肝功能指标酶活性与对照组相比无显著差别。该结果显示在肝再灌注损伤过程中 ,IL 8是趋化中性粒细胞浸润的关键因子 ,抗IL 8单克隆抗体对肝缺血再灌损伤肝脏有保护作用。     

心肌缺血再灌注损伤大鼠冠状微循环改变的实验研究

目的研究心肌缺血再灌注损伤大鼠冠状微循环变化的特点及与影响因素的关系.方法对心肌缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠模型、心肌缺血(MCI)大鼠模型和假手术后大鼠3组的心肌毛细血管墨汁灌流数、大鼠冠状微循环荧光变化时间及心肌组织丙二醛(MDA)、心肌组织一氧化氮(NO)含量、心肌组织钠-钾-ATP酶(Na -K -ATPase)、心肌组织钙-ATP酶(Ca2 -ATPase)、血清肌酸激酶(CK)活性、血浆血栓素B2(TXB2)和血浆6-酮-前列环素F1α(6-K-PGF1α)含量进行检测和相关分析.结果较之MCI模型组和假手术后组,①CIRI模型组大鼠右室前壁外层、左室前壁中内层、室间隔前2/3部位毛细血管灌流数均明显减少;心脏表面荧光出现时间(AT)、密布时间(FT)和饱和时间(ST)均延长(均P＜0.05或＜0.01).②CIRI模型组大鼠心肌组织MDA含量明显增高,而NO含量减少;血浆6-K-PGF1α含量下降,而TXB2含量显著升高;Na -K -ATPase和Ca2 -ATPase活性均降低,而血清CK水平升高(均P＜0.05或＜0.01).③CIRI模型组大鼠心脏左室前壁中内层毛细血管墨汁灌流数与MDA、NO、TXB2、6-K-PGF1α、Ca2 -ATPase、CK等6项指标的变化都有相关关系(均P＜0.05或＜0.01),与这6项指标的阳性率亦相同(均P＞0.05).结论冠状微循环障碍是CIRI形成的一个重要病理生理环节,其形成与氧自由基生成增多、钙超载、血管内皮细胞功能明显受损等多种机制有关.     

前列腺素E1对肾缺血再灌注损伤大鼠内皮的Rho/Rho激酶信号通路的影响

探讨前列腺素E1对肾缺血再灌注损伤大鼠内皮细胞Rho/Rho激酶信号通路的影响.建立大鼠IRI模型,将健康Wistar大鼠75只随机平均分为假手术组、模型组、治疗组,每组各25只;并按术后观察时间分为6、12、24、48、72 h5个不同时段亚组,每组各5只.检测各组血清肌酐(Scr)、血管内皮生长因子(Vascula...     

氟伐他汀对缺血再灌注损伤兔心肌细胞间粘附分子的影响

目的:探讨氟伐他汀短期预处理对缺血再灌注损伤兔心肌的保护作用及其机制。方法:日本大耳白兔21只随机分为3组:①假手术对照组(Sham组),②缺血再灌注组(IR组),③氟伐他汀干预组(F组)。实验中持续监测左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LWEDP)、左室内收缩压最大上升速率和下降速率(±dp/dtmax)的变化,再灌注结束后用伊文氏蓝和TTC染色法确定缺血和梗死心肌范围,用RT-PCR进行心肌局部ICAM-1 mRNA表达测定。结果:缺血再灌注后,F组上述心功能各项指标较IR组明显改善,心肌组织ICAM-1 mRNA水平较IR组显著降低;心肌梗死面积较IR组明显减小。结论:氟伐他汀短期预处理可降低心肌缺血再灌注后心肌ICAM-1 mRNA表达,降低心肌梗死程度,改善心功能,对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

活血通脉汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血浆TXB2、6-keto-PGF1α的影响

目的探讨活血通脉汤对脑缺血再灌注损伤大鼠血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮前列环素F1α(6-keto-PGF1α)的影响。方法制作脑缺血再灌注模型,70只大鼠随机平均分为活血通脉汤组、阿司匹林阳性对照组、手术组和假手术组,应用放免法分别测定缺血再灌注24、48 h血浆TXB2、6-keto-PGF1α及其比值。结果手术组大鼠脑缺血再灌注24、48h血浆TXB2水平明显高于假手术对照组(P<0.01),6-keto-PGF1α显著低于假手术对照组(P<0.01),血浆TXB2/6-keto-PGF1α比值增加(P<0.01),缺血再灌注24、48 h脑组织缺血范围显著大于假手术对照组(P<0.01)。使用活血通脉汤治疗能降低TXB2水平,升高6-keto-PGF1α水平,使血浆TXB2/6-keto-PGF1α比值保持在正常水平,减少缺血脑组织范围。结论活血通脉汤可纠正脑缺血再灌注后循环血中TXB2/6-keto-PGF1α的平衡失调及降低脑组织缺血程度,减轻脑缺血再灌注损伤。     

促炎因子白细胞介素-1参与缺氧/复氧损伤的体外研究

目的研究促炎因子IL-1参与缺氧/复氧损伤的可能机制,探讨保护缺氧/复氧损伤的方法.方法 ECV304细胞株接种于培养瓶中,随机分为A、B、C、D四组,D为正常对照组,A组为实验组,行缺氧(60min)/复氧(240 min)培养,B、C组分别与IL-1和IL-1α受体拮抗剂共孵育.测定各组细胞的成活率,并应用细胞免疫组化分析ECV304细胞表面黏附分子的表达水平.结果经不同试剂培养后,各组细胞的成活率明显不同,A、B组显著低于D组,尤以B组为最;细胞形态学也发生相应改变;H/R孵育后ECV304细胞株表达ICAM-1和E-selectin增加,外源性IL-1可以进一步上调ICAM-1和E-selectin的表达,而IL-1受体拮抗剂则可明显抑制这种增多现象.结论缺氧/复氧损伤过程中产生的内源性IL-1在调控ICAM-l和E-selectin的表达及中性粒细胞的黏附中发挥着重要作用;采取措施降低IL-1的生物学活性,可能为临床治疗缺氧/复氧损伤提供新的途径.     

大鼠脑缺血-再灌注损伤对脑微血管通透性的影响

目的 :探讨大鼠脑缺血 -再灌注后脑组织微血管通透性的变化规律 ,为进一步探讨脑缺血及再灌注损伤机制提供参考数据。方法 :应用荧光素钠 (分子量 3 86 ,Fl Na)和 FITC标记的右旋糖苷( FD4,分子量 40 0 0 )为荧光示踪剂 ,以单侧颈总动脉远心端及同侧颈静脉插管并连接二管造成颈总动脉向颈静脉的引流 ,同时用动脉夹夹闭对侧颈总动脉造成脑缺血模型。缺血 1h后松开动脉夹并中断引流造成再灌注模型。测量脑组织荧光强度反映脑微血管通透性的变化。结果 :单纯的脑缺血即可引起脑组织微血管通透性的增强 ,再灌注后对小分子量物质的通透性随再灌注时间的延长有增加的趋势 ,而对较大分子量物质的通透性基本维持在同一水平。结论 :即使是在再灌注损伤最严重时 ,脑微血管对较大分子量的物质通透仍不明显 ,说明血 -脑屏障的存在可以有效地防止有害物质通过微血管壁侵入脑组织 ,但一旦进入脑组织 ,将滞留于脑组织中不易清除。     

肢体缺血/再灌注后氧自由基与Bax蛋白、细胞凋亡的关系

目的　阐明氧自由基与Bax蛋白、细胞凋亡在大鼠肢体缺血 /再灌注不同时相中的变化规律及相互关系。方法　采用大鼠股动脉夹闭模型 ,阻断股动脉血流 5h后再灌注 ,设立缺血组、再灌注组 ,再灌注组设立 1,6 ,12 ,2 4h 4个检测时相 ,应用硫代巴比妥酸法测定肌肉组织中脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)水平 ,应用免疫组化方法测定Bax蛋白表达的变化 ,应用原位末端标记法及电镜方法观察细胞凋亡现象。结果　随着再灌注时间的延长 ,MDA水平、Bax蛋白表达强度、细胞凋亡指数 (AI)进行性升高 ,且三者呈显著正相关。结论　氧自由基与细胞凋亡同时参与肢体再灌注损伤 ,氧自由基可能通过调节Bax蛋白表达促进细胞凋亡的发生。