贵州不同产地葛根中总黄酮和葛根素的含量测定

目的:考察贵州不同产地葛根中总黄酮、葛根素含量。方法:采用紫外分光光度法,测定总黄酮的含量;采用高效液相色谱法,测定葛根素的含量,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18,流动相为甲醇—水(25∶75),柱温25℃,检测波长为250 nm,流速为1.0 ml/min。结果:总黄酮的含量为4.73%~9.78%,葛根素含量为0.27%~3.58%。结论:分析方法简便、准确、重复性好,可用于葛根中葛根素和总黄酮的测定。     

亲水作用色谱法同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖

目的建立亲水作用色谱结合PDA检测器同时测定保健品中硫酸软骨素和氨基葡萄糖的高效液相色谱法。方法采用Waters Xbridge HILIC色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-10 mmol/L乙酸铵(95∶5,V/V)为流动相,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为192 nm,进样体积为5μl。结果在上述色谱条件下,硫酸软骨素和氨基葡萄糖在10μg/ml~200μg/ml内线性关系良好,硫酸软骨素和氨基葡萄糖的检出限均为3.0μg/ml,回收率分别为94.18%、93.45%。混合溶液在48 h内稳定。结论本方法经方法学检验,灵敏度和专属性高,稳定可靠,适用于同时测定保健品中的硫酸软骨素和氨基葡萄糖。     

反相液相色谱法测定保健食品中葛根素

目的:以反相高效液相色谱测定保健食品中胶囊、口服液、片剂、保健茶等样品中葛根素的含量。方法:以0 1% 磷酸水溶液+乙腈(92+8)为流动相,在KromasilODS柱(3 9mm×150mm, 5μm)流速1 0ml/min时, 239nm紫外波长下以峰高-峰面积进行测定,进样量10μl。结果:葛根素在40~200μg/ml时,浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0 9995)加标回收率92 .1% ~102 .2%,最低检出限2μg/ml,最低检出浓度0 .1mg/g,相对标准偏差(RSD) 3 .5%。结论:本方法简便、准确,可用于保健食品中胶囊、片剂、保健茶等样品类型中葛根素含量的测定。     

亲水色谱-高效液相色谱法测定保健品中维生素C的含量

目的建立一种快速准确测定保健品中维生素C含量的高效液相色谱方法。方法以片剂、胶囊剂和颗粒剂多种基质的保健品为研究试样,以50%乙腈(含2%乙酸)为溶剂,制备每毫升含10μg维生素C的溶液作为标准品溶液。试样经粉碎研细混匀后,用50%乙腈(含2%乙酸)超声提取保健品中的维生素C,进样待测。采用亲水色谱Hilic柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-100 mmol/L乙酸铵水溶液(75∶25,V/V)为流动相,流速为0.8 ml/min,检测波长为268 nm,以外标法定量。结果维生素C的进样量在10 ng~1 500 ng时,与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=6.824 82x-57.578 17,r=0.999 8。多种保健品的回收率为98.75%~103.09%,平均回收率为100.90%,检出限为0.28μg/ml。结论本法前处理简单、分析速度快、灵敏、准确、专属性强,可用于保健品中维生素C含量的测定。     

气相色谱-质谱法同时测定食物中毒样品中氟乙酰胺与毒鼠强

目的建立气相色谱-质谱法(GC-MS)同时测定食物中毒样品中氟乙酰胺与毒鼠强的方法。方法样品加入乙酰胺内标与适量氯化钠,用丙酮-乙酸乙酯(9∶1,V/V)混合溶液提取,采用GC-MS测定,氟乙酰胺采用内标法定量,毒鼠强用外标法定量。结果氟乙酰胺浓度在0.05μg/ml~10μg/ml时的相关系数为0.999 7,相对标准偏差为0.63%~1.52%(n=7),加标回收率为110%~122%(n=3),方法检出限为0.017 mg/kg;毒鼠强浓度在0.02μg/ml~10μg/ml时的相关系数为0.999 4,相对标准偏差为0.65%~3.02%(n=7),加标回收率为80.2%~104.0%(n=3),方法检出限为0.007 mg/kg。结论方法简便快速、准确度和灵敏度高,适用于食物中毒样品中氟乙酰胺与毒鼠强的测定。     

空气中丙烯酰胺的高效液相色谱法研究

目的通过实验,建立了高效液相色谱法测定工作场所空气中丙烯酰胺含量的测定方法。方法样品经吸收液采集后,用高效液相色谱分析,外标法定量。本法采用ODS-3反相色谱柱(4.6 mm×150 mm),波长为200 nm,流动相为甲醇-水(5∶95,V/V),流速为1.000 ml/min,进行等梯度洗脱,保留时间为3.376 min。结果丙烯酰胺的浓度为0.0μg/ml~2.0μg/ml时,线性关系良好,线性方程为y=4.425×10-6x-0.008,相关系数(r)为1.0。本法的检出限为9.9×10-5μg/ml,加标回收率为98.1%~100.0%,RSD为0.08%~0.30%。结论本法样品无需处理,直接进样,出峰快、方便快捷、灵敏度高、线性范围宽、重复性好、定性定量准确,适合工作场所空气中丙烯酰胺的测定。     

HPLC法同时测定葛根食品中葛根素,大豆苷,染料木苷,大豆素,染料木素的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定葛根食品中葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素5种组分含量的方法。方法:选用Cosmosil C18-AR(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,采用甲醇和水为流动相,梯度洗脱,流速为1 ml/min,紫外检测波长为250 nm。结果:葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素的线性范围分别是0.035μg～1.76μg(r=1.0000),0.051μg～0.20μg(r=0.9992),0.045μg～0.18μg(r=0.9992),0.047μg～0.18μg(r=0.9998),0.055μg～0.21μg(r=0.9997);平均加标回收率(n=6)分别为98.58%、110.38%、98.58%、100.04%、100.67%。结论:本方法提取简便,测定结果准确、可靠、灵敏度高、重现性及稳定性均较好,适用于同时测定葛根食品中以上5种组分的含量。     

高效液相色谱-荧光检测法分析血浆中ALA的含量

目的建立血浆中δ-氨基-γ-酮戊酸(ALA)含量的高效液相色谱-荧光检测方法。方法将血浆样品与乙酰丙酮工作液(乙酰丙酮-乙醇-水,15∶10∶75,V/V)和10%甲醛溶液在沸水浴中反应10 min后,置于冰水浴中充分冷却。经微孔滤膜过滤后以C18柱为分析柱进行高效液相色谱测定。色谱分析以甲醇-水-乙酸(1 000∶1 000∶2,V/V)为流动相,流速为0.6 ml/min;荧光检测器的激发波长为370 nm,发射波长为460 nm,柱温为40℃。结果 ALA浓度为5μg/L~100μg/L时,与色谱峰面积之间呈良好的线性关系。本方法的最低检出限为0.5μg/L,定量限为2.0μg/L,多次重复测定结果的RSD为0.35%(n=6),不同浓度的平均加标回收率为86.56%~100.09%。结论所建立的血浆中ALA含量的高效液相色谱-荧光检测法,简便、准确,可用于血浆中ALA含量的测定,为生物样品中ALA低浓度水平的检测提供了新的途径。     

高效液相色谱法测定早餐谷物中的烟酸和烟酰胺

目的建立高效液相色谱法同时测定早餐谷物中烟酸和烟酰胺含量的方法。方法样品经人工胃液在37℃水浴中放置过夜提取,放至室温,摇匀,离心,取上清液用0.45μm滤膜过滤,采用DIKMA Spursil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以1-癸烷磺酸钠溶液(1.22 g→850 ml)-乙腈-磷酸(850∶150∶1,V/V)为流动相,柱温为30℃,体积流速为1.0 ml/min,进样量为20μl,通过二极管阵列检测器进行检测,检测波长为261 nm。结果烟酸和烟酰胺均在1μg/ml~100μg/ml时呈现良好的线性关系(r0.999),平均加标回收率为98.5%~102.6%,相对标准偏差(RSD)为2.3%~4.2%,方法的检出限分别为0.23 mg/kg、0.28 mg/kg。结论该方法操作简便,重现性良好,测定结果准确、可靠,可用于早餐谷物中烟酸和烟酰胺含量的同时测定。     

血浆样品中叶黄素的快速测定

目的建立一种血浆样品一步处理的简易方法,以解决血浆中叶黄素的大批量快速测定问题。方法取人体新鲜静脉血为样品,采用甲醇去蛋白并提取叶黄素,液相色谱测定。色谱条件为:C18色谱柱(250 mm×4.60 mm×5μm),甲醇∶乙腈(65∶35)为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长446 nm,进样量20μl,柱温25℃。同时测定叶黄素标准溶液及血浆样品在常温下放置10 h及-20℃条件下放置10 d内叶黄素含量的变化情况。结果叶黄素在0.005~0.200μg/ml浓度范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999);回收率为95.2%~96.0%;方法的检出限(LOD)为0.010μg/ml,定量限(LOQ)为0.05μg/ml;相对标准偏差为1.5%。同时血浆样品在-20℃冷冻状态下10 d之内稳定。结论该方法操作简单,稳定性好,适用于大样本人群叶黄素的测定。     

高效液相色谱法同时测定抗疲劳保健食品中的3种违禁成分

目的 建立抗疲劳类保健食品中违禁成分咖啡因、西地那非和他达那非的高效液相色谱法。方法 样品中的待测组分经甲醇超声提取、过滤后,采用Welch C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)为分离柱,以三乙胺溶液(取三乙胺7 ml,加水至1 L,并用磷酸调节pH值至4.0)(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱流速为1.0 ml/min;检测波长为280 nm;柱温为40 ℃,标准曲线法定量。结果 3种化合物分离度良好,线性相关系数均大于0.999 9,回收率为93.2 %～103.7 %,检出限为3.0～4.4 μg/g,定量限为8.9～13.2 μg/g。结论 本法简便、准确,可用于抗疲劳类保健食品中非法添加化学药物的检测。     

关于保健食品中黄芪甲苷含量测定的研究

目的建立保健食品中黄芪甲苷的HPLC检测方法。方法对超声提取、液液萃取、大孔吸附树脂柱层析、固相萃取、衍生化反应、高效液相色谱等测定条件进行了探讨。结果用甲醇为提取溶剂进行超声提取,用乙醚、水饱和正丁醇、1%KOH进行液液萃取,用DM-301大孔吸附树脂进行柱层析,Oasis HLB 3cc型固相萃取柱进行富集纯化,用苯甲酰氯和三氯甲烷反应衍生为苯甲酰黄芪甲苷进行测定。线性范围为3.84～153.60μg/ml,检测限为2.13μg/ml,加标回收率为74.85%～91.83%。结论柱前衍生化-高效液相色谱法能较好的消除杂质干扰,检测限、回收率符合实验要求。     

空气中过氧化氢的四氯化钛比色法

本文叙述了一个简单快速的车间空气中过氧化氢的四氯化钛比色测定法。方法的最低检测浓度为1.0mg/m~3(采10L空气样品),批间变异系数为0.9%～4.1%(n=6,40～5mgH_2O_2/L),一个大型气泡吸收管的采样效率为100%;空气中共存的SO_2浓度不超过3mg/m~3时不干扰测定。     

壳聚糖对人子宫内膜癌细胞影响的实验研究

目的:研究壳聚糖对人子宫内膜癌Ishikawa细胞的影响,为将壳聚糖做为宫内节育器材料提供依据。方法:以添加不同浓度壳聚糖培养的细胞为实验组,正常培养的细胞为空白对照组,使用添加20%胎牛血清和添加阿霉素培养的细胞为阳性对照组。各组细胞处理48h后,噻唑蓝法测定细胞增殖活性及毒性,5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法测定DNA合成情况,流式细胞仪检测细胞周期变化。结果:与空白对照组比较,在壳聚糖浓度≤10μg/ml时各实验组细胞增殖能力无明显变化(P﹥0.05),细胞DNA合成速率无明显影响(P﹥0.05);壳聚糖浓度≤100μg/ml无明显的细胞毒性产生;在10μg/ml浓度壳聚糖组细胞周期分析时G1期、G2期、S期均无明显变化(P﹥0.05)。结论:壳聚糖浓度在<10μg/ml对Ishikawa细胞的增殖生长、DNA合成与细胞周期均无明显影响,≤100μg/ml未见细胞毒性产生。壳聚糖具有作为宫内节育器的生物缓释材料使用的前景。     

HPLC测定丹葛胶囊剂中葛根素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定丹葛胶囊剂中葛根素含量的测定方法。方法:色谱柱为Hypersil ODS(4.0mm×250mm,5μm);以甲醇-水-醋酸(25:75:1)为流动相;流速:1.0ml/min;检测波长:270nm进行实验。结果:线性回归方程为Y=1.738×106X+4404.5,相关系数r=0.9998,葛根素在0.050~2.00μg范围内呈线性,平均回收率为99.83%,RSD为1.52%。结论:本方法准确可靠,稳定性、重现性好,适用于丹葛胶囊剂的含量测定。     

塞曼石墨炉原子吸收法测定血清中镍

将２００μｌ血清样品加入到２ｍｌ小烧杯中，在不锈钢烤箱中于５０～８０℃下分阶段干燥后，用低温灰化炉灰化，并将灰分用２００μｌ１％ＨＣｌ溶解，以１０％Ｍｇ（ＮＯ３）２为基体改进剂，用塞曼石墨炉原子吸收仪直接测定镍检出限为０．７４μｇ／Ｌ，平行样的相对误差为０～２８．２％，平均为８．６０％。用本方法测得的血清参考物的结果与其参考值具有较好的可比性。     

双份饭中铁、锌、钙的火焰原子吸收测定法

目的建立火焰原子吸收法测定双份饭中铁、锌、钙的方法。方法样品经馄合酸(硝酸+高氯酸=4+1)消解后,钙用20g/L的氧化镧溶液定容,铁、锌用纯水定容后直接测定。结果铁浓度在0.20～2.00μg/ml范围时,相关系数为0.9996,加标回收率为96.5%～102.7%,检出限(3σ)0.006μg/ml;锌浓度在0.10～1.50μg/ml范围时,相关系数为0.9997,加标同收率为95.0%～101.5%,检出限(3σ)0.004μg/ml;钙浓度在1.00～10.00μg/ml范同时,相关系数为0.9994,加标回收率为96.8%～103.6%,检出限(3σ)0.008μg/ml。结论该方法简便快捷,测定结果准确可靠,适合于双份饭分析。     

新生儿及以上人群接种不同剂量重组乙型肝炎疫苗（酿酒酵母）的免疫学效果观察分析

目的观察新生儿及以上人群接种10微克（μg）/0．5毫升（m1）和5μg/O．5ml重组乙型肝炎（乙肝）疫苗（酿酒酵母）（Hepatitis B Vaccine Made by Recombinant Deoxyribonucleic Acid Techniques in Saccharomyce sCerevisideYeast,HepB．SCY）的免疫学效果,以及对乙肝病毒表面抗原[Hepatitis B Virus（HBV）Surface Antigen,HBsAg]阳性母亲的新生儿免疫后阻断母婴传播的效果。方法采用随机、对照和盲法的临床试验,各组按1：1比例分别接种long和5μgHepB-SCY。将新生儿分三组：即母亲HBsAg和乙肝病毒e抗原（HBV e HBeAg）均为阴性组,母亲HBsAg阳性、HBeAg阴性组,母亲HBsAg和HBeAg均为阳性组。将非新生儿人群分成1月龄～5岁、6～15岁、≥16岁组。检测各组免疫前、后抗乙肝病毒表面抗原抗体（AntibodytoHBsAg,Anti-HBs）阳转率和HBsAg阳性母亲的新生儿阻断HBV母婴传播的保护率。结果lOggHepB．SCY对新生儿及以上人群全程免疫后,Anti．HBs阳转率为95．27％～98．86％,Anti-HBs几何平均浓度（Geometrics Mean Concentration,GMC）为340．87毫国际单位,毫升（mlU/ml）～837．56mlU/ml;与使用5峭HepB．SCY全程免疫后的Anti-HBs阳转率91-3％～98．8％和GMC220．86mIU/ml～701．30mIU/ml相比,各年龄组问Anti-HBs的阳转率差异无统计学意义,GMC除新生儿组（X2=4．012,P=0．045）外,其余各组问差异亦无统计学意义。1Ogg和5ggHepB-SCY在HBsAg和HBeAg双阳性组全程免疫后,Anti．HBs阳转率分别为90．70％和88．6％,阻断HBV母婴传播保护率分别为92．25％和84．85％,两组间差异无统计学意义。在HBsAg单阳性组中,Anti．HBs阳转率分别为95．7％和100．0％、保护率分别为95．75％和100．0％,两组间差异无统计学意义。结论1Ogg和51．tgHepB-SCY对新生儿及以上人群均有良好的免疫原性,除新生儿组Anti．HBs阳转率差异有统计学意义外,其余指标的的差异均无统计学意义,且对HBsAg阳性母亲的新生儿阻断HBV母婴传播的保护率的差异亦无统计学意义。临床试验注册国家药品食品监督管理局《药物临床试验》2008L02895号。     

催化动力学光度法测定水中痕量铬(Ⅵ)

目的:建立了催化动力学光度法测定水样中痕量Cr(Ⅵ)的新方法。方法:在硫酸介质中,痕量Cr(Ⅵ)催化过硫酸铵氧化邻甲氧基酚显色,其化合物的最大吸收波长为513nm。结果:方法的线性范围为01016～116μg/25ml Cr(Ⅵ),检出限为5142×10-10g/ml Cr(Ⅵ),相对标准偏差(RSD)<3.27%,样品加标回收率为9716%～10111%。结论:该法用于环境水样中微量铬含量的测定快速、准确、简便。     

雌激素与不同剂量的葛根素联合对去卵巢大鼠骨质疏松的影响

目的:观察雌二醇与不同剂量的葛根素组合对去卵巢大鼠骨组织的影响,为中西医结合的雌激素与葛根素最佳组合剂量治疗Ⅰ型骨质疏松症提供实验依据。方法:5月龄健康雌性大白鼠70只,分成7个实验组(每组10只),除假手术组外均建立去卵巢动物模型。葛根素-50组(Pr-50),皮下注射葛根素50 mg/kg,1次/天;雌二醇-200组(E2-200),皮下注射雌二醇200μg/kg,2次/周;雌二醇+葛根素-10组(E2+Pr-10),皮下注射雌二醇100μg/kg,2次/周,葛根素10 mg/kg,1次/天;雌二醇+葛根素-25组(E2+Pr-25),皮下注射雌二醇100μg/kg,2次/周和葛根素25 mg/kg,1次/天;雌二醇+葛根素-40组(E2+Pr-40),皮下注射雌二醇100μg/kg,2次/周和葛根素40 mg/kg,1次/天。各实验组在第10周和第20周,随机取5只大鼠取左股骨切片观察骨组织,取右股骨测量骨密度、骨钙、骨磷含量。结果:OVX组在第10周和第20周的骨密度和骨钙、骨磷明显低于假手术组和5个用药组(P<0.05),骨组织呈骨质疏松的病理改变;E2+Pr-25组在第10周和第20周的骨密度和骨钙、骨磷明显高于E2+Pr-10组(P<0.05);而与假手术组、Pr-50、E2-200和E2+Pr-40相比无统计学差异(P>0.05)。结论:E2+Pr-25组葛根素与雌二醇的组合剂量治疗去卵巢大鼠骨质疏松效果明显优于E2+Pr-10组的小剂量,与假手术组、相对较大剂量的E2+Pr-40组和单一较大剂量Pr-50、E2-200组相比治疗效果无明显差异。