保肾冲剂血清对人系膜细胞增殖及分泌IL-1β的影响

目的 探讨保肾冲剂含药血清对人膜细胞（MC）增及分泌炎性介质的作用。方法 应用血清药理学方法，观察不同浓度保肾冲剂含药血清对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及分泌IL－1β水平的影响。结果 3种浓度含药血清均能在一定程度上对抗LPS诱导的MC增殖及IL－1β蛋白质产量的增加，这种对抗作用呈现出一定的剂量依赖性。结论 保肾冲剂血清能抑制MC增殖并能干预活化MC分泌细胞因子。     

加味参芪地黄汤含药血清对人系膜细胞分泌细胞因子的影响

目的：探讨加味参芪地黄汤含药血清对人系膜细胞分泌炎性介质的作用。方法：应用血清药理学方法，观察不同浓度加味参芪地黄汤含药血清对体外培养的人肾小球系膜细胞分泌IL－1β及IL－6水平的影响。结果：三种浓度含药血清均能在一定程度上对抗LPS诱导的IL－1β及IL－6蛋白质产量的增加，且这种对抗作用呈现出一定的剂量依赖性。结论：加味参芪地黄汤血清能干预活化的人肾小球系膜细胞分泌细胞因子，具有免疫调节作用。     

调肾祛斑颗粒含药血清对UVA辐照后人皮MC增殖的影响

目的:研究调肾祛斑颗粒(TSQBG)含药人血清对长波紫外线(UVA)辐照后人皮人皮黑素细胞(MC)增殖的影响。方法:含药黄褐斑患者血清分8组:空白组、无药组、低浓度TSQBG组、中浓度TSQBG组、高浓度TSQBG组、低浓度沙棘冲剂(SJG)组、中浓度SJG组、高浓度SJG组。采用细胞学和血清药理学方法,观察TSQBG含药人血清对长波紫外线(UVA)照射后的体外原代培养的人皮黑素细胞(MC)的细胞增殖的影响。结果:0.2 J/cm2剂量UVA照射的增殖效果优于各剂量组(P0.01)。各浓度TSQBG组间比较,中、高浓度TSQBG组含药血清对MC增殖的抑制作用均较低浓度组强(P0.01),高浓度TSQBG组含药血清对MC增殖的抑制作用又较中浓度组强(P0.01)。各浓度SJG组间比较,中、高浓度SJG组含药血清对MC增殖的抑制作用均较低浓度组强(P0.01),高浓度SJG组含药血清对MC增殖的抑制作用又较中浓度组强(P0.01);表明不同浓度TSQBG含药人血清对UVA诱导的人皮MC的增殖均有抑制作用,且浓度越高抑制作用越强,并随作用时间的延长细胞增殖率不断降低,呈现量效和时效关系。结论:调肾祛斑颗粒能下调UVA诱导的人皮MC的细胞增殖率的上调,这可能是调肾祛斑颗粒治疗黄褐斑的重要作用机理之一。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞(MC)增殖的不同抑制作用强度。方法采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法，观察具有降逆泄浊、益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用，但在等效剂量浓度下，肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利。结论MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞，抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

保肾片诱导人肾脏系膜细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨对慢性肾衰治疗有效的中药复方保肾片对人肾脏系膜细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :以健康志愿者服用保肾片 ,取含药人血清加入系膜细胞体外培养体系中 ,应用倒置显微镜、光镜、透射电镜及流式细胞仪观察研究保肾片对系膜细胞的诱导凋亡现象。结果 :含中药保肾片的血清组 ,与正常人血清对照组相比 ,能诱导系膜细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理之一与诱导系膜细胞发生凋亡有关。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的：探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞（MC）增殖的不同抑制作用强度。方法：采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法,观察具有降逆泄浊,益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果：肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用,但在等效剂量浓度下,肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利,结论：MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞,抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

解聚复肾宁对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

目的:探讨解聚复肾宁(黄芪、地黄、黄连、丹参、姜黄、葛根等)(JJFSN)治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:高糖诱导系膜细胞(MC)增殖以及细胞外基质(ECM)分泌,制备不同浓度JJFSN含药血清作用于体外培养的MC,用MTT法检测细胞增殖,放射免疫技术(RIA)检测细胞培养上清中Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层黏连蛋白(Ln)的含量。结果:JJFSN含药血清可抑制高糖诱导的MC过度增殖(P0.05),并且这种作用具有药物剂量和时间依赖关系。同时,JJFSN可逆转高糖对ColⅣ和Ln分泌的影响,降低MC培养上清中ColⅣ和Ln的含量(P0.05),并且这种作用随着JJFSN剂量的增加而增强。结论:JJFSN抑制高糖诱导的MC过度增殖并减少ECM的过量分泌,可能是其防治DN早期的作用机制。     

肾衰宁对体外培养的肾小球系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素-1的影响

目的：探讨肾衰宁对系膜细胞增殖及其分泌细胞因子白细胞介素－１（ＩＬ １）的影响。方法：采用血清药理学方法，提取动物的含药血清作用于体外培养的人系膜细胞（ＨＭＣ）体系，观察具有益气固本、化瘀泻浊作用的中药肾衰宁对ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的影响。结果：肾衰宁具有抑制ＨＭＣ增殖及其分泌细胞因子ＩＬ １的作用，该抑制作用具有一定的量效关系。结论：ＨＭＣ是肾衰宁发挥治疗作用的重要靶细胞，这可能是该方防治慢性肾功能衰竭的机制之一。     

中药复方“通脉口服液”对肾小球系膜细胞增殖及分泌IL-1β的影响

目的观察中药复方“通脉口服液”对体外培养条件下大鼠肾小球系膜细胞（MsC）增殖和分泌IL-1β的影响。方法应用细胞培养技术进行肾小球系膜细胞的传代培养，采用血清药理学方法，制备通脉口服液含药血清、黄芪含药血清、三七含药血清，采用MTT法观察各组含药血清对正常培养条件下及LPS刺激状态下肾小球系膜细胞增殖的影响，ELISA法测定LPS刺激下通脉口服液组细胞上清中IL-1β的含量。结果3组含药血清均可抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖．三组之间比较，通脉口服液组作用要优于黄芪组及三七组。ELISA结果表明：通脉口服液含药血清可以抑制肾小球系膜细胞分泌IL-1β。结论中药复方“通脉口服液”可抑制肾小球系膜细胞的增殖及LPS诱导的系膜细胞IL-1β的产生，肾小球系膜细胞是通脉口服液防治慢性肾炎，延缓肾小球硬化的重要靶细胞之一。     

青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响

目的:研究青蒿琥酯对人结肠癌HCT-8细胞凋亡和细胞周期的影响.方法:实验分为10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组,阴性对照组和空白对照组.采用透射电镜和流式细胞仪检测青蒿琥酯对HCT-8细胞的凋亡诱导效果;采用流式细胞仪分析青蒿琥酯对HCT-8细胞周期的影响;采用Western blot印迹法检测青蒿琥酯对细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的影响.结果:经青蒿琥酯处理后,电镜下可见HCT-8细胞膜皱缩、染色质凝聚、核碎裂、凋亡小体形成.10,20,30 μmol·L-1青蒿琥酯处理组凋亡率分别为17.1％±3.8％,29.5％±5.1％,41.4％±5.8％,显著高于空白对照组5.1％±1.4％.P＜0.05.在20 μmol· L-1青蒿琥酯处理组,HCT-8细胞G0/G1期所占比例随着药物作用时间延长而增加,S期与G2/M期细胞所占比例则下降.10,20,30 μmol·L -1青蒿琥酯处理组Bax蛋白表达水平分别为0.20±0.03,0.40±0.05和0.50±0.08显著高于空白对照组(0.06 ±0.02),P＜0.05;Bcl-2蛋白表达水平未见明显变化,Bcl-2/Bax呈下降趋势.结论:青蒿琥酯可以抑制人结肠癌细胞HCT-8增殖,诱导细胞凋亡,其诱导凋亡作用机制可能与其阻滞结肠癌细胞周期和上调促癌基因Bax表达有关.     

淫羊藿苷对血管平滑肌细胞周期及周期相关蛋白表达的影响

目的 研究淫羊藿苷（icariin．ICA）对同型半胱氨酸（homocysteinemia,HCY）诱导增殖的血管平滑肌细胞（vascular smooth musckle cell．VSMC）细胞周期的影响及其机制。方法建立HCY诱导的兔VSMC增殖模型,与不同浓度的ICA共同培养48h后,用流式细胞仪检测VSMC细胞周期变化及细胞周期调控相关蛋白Cyclin D1和CDK4的表达。结果0．2mg／L、0．4mg／L ICA组G0／G1期细胞数明显增多,s期细胞数明显减少,与HCY组相比有统计学意义（P〈0．01）;CyclinDl和CDK4的表达量均随ICA剂量增加而减少。结论 ICA桔抗HCY诱导的兔VSMC增殖．其主要机制可能与Cyclin D1及CDK4的低表达所致的细胞周期抑制有关。     

富于T/组织细胞型的弥漫大B细胞性淋巴瘤的误诊分析

目的：探讨富于T细胞/组织细胞型的弥漫大B细胞性淋巴瘤（TCRBCL）的病理形态、预后和免疫组化的特点及鉴别诊断。方法：根据WHO淋巴瘤分类（2008版）的标准对4例TCRBCL进行临床、组织病理和免疫组化分析,应用全自动免疫组化仪（DAKO）检测瘤细胞及背景细胞的免疫表型,抗体包括CD20,CD79a, CD3,CD15,CD68,CD30、CD10,BCL-6,CD21。结果：少量肿瘤性大细胞分布于小淋巴细胞及组织细胞背景中,免疫组化肿瘤性大细胞CD20阳性,背景小细胞CD3阳性,组织细胞CD68阳性。结论：TCRBCL是一个独立的组织学类型,是弥漫大B细胞性淋巴瘤的形态学变异体,易误诊为霍奇金淋巴瘤、反应性淋巴组织增生、淋巴瘤样肉芽肿病等,诊断应结合形态学和免疫表型特征。     

细胞凋亡机制概述

细胞凋亡是一种重要的生物学过程,是在基因调控下所发生的一系列细胞主动死亡过程。就近几年细胞凋亡信号传递机制、酶学机制以及基因调控机制的研究作一概述。     

细胞凋亡机制概述

细胞凋亡是一种重要的生物学过程,是在基因调控下所发生的一系列细胞主动死亡过程。就近几年细胞凋亡信号传递机制、酶学机制以及基因调控机制的研究作一概述。     

通莲I号方及其拆方对食管癌Eca109细胞增殖及细胞周期的影响

目的: 研究通莲I号方及其拆方在不同浓度下对食管癌Eca109细胞形态和生长周期的调节作用;探讨该方抑制食管癌细胞增殖的机制。 方法: 将Eca109细胞以1×10⁶个/皿密度接种于Φ100 mm培养皿中,以10％小牛血清DMEM培养液培养,37 ℃,5%饱和湿度的CO₂培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25~3 200 mg·L^-1倍比梯度的通莲I号方(T)、清热解毒拆方(Q)、活血行气拆方(H)、滋阴养血拆方(Z)等4方提取液,孵育48 h后,MTT比色法检测细胞增殖变化、光镜观察细胞形态、流式细胞技术(FCM)测定细胞周期。 结果: T,Q,H的IC₅₀值分别为386,771,729 mg·L^-1;与空白对照组(C)相比,T,Q,H 3方显著影响Eca109细胞周期变化:G1期细胞所占比率分别为69.43%,60.84%,61.90%。同时,T,Q,H组细胞的S期与C组比较,均有显著性差异(P<0.05),T方作用最强。而Z方对细胞的抑制作用较弱,与C组无显著性差异。 结论: 通莲I号方通过抑制细胞进入S增殖期从而干预食管癌Eca109细胞生长,各拆方具有协同作用,全方作用最优。     

健脾化瘀方对胃癌细胞SGC-7901凋亡和周期的影响

目的:观察健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:①采用MTT法观察不同浓度健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用;②用Annexin V/PI荧光双染法检测健脾化瘀方诱导肿瘤细胞进入凋亡的影响;③用流式细胞仪检测健脾化瘀方对SGC-7901细胞周期的阻滞效应。结果:①健脾化瘀方能抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,随着药物浓度的增大以及作用时间的延长,其对细胞的抑制率也明显增强,呈现剂量及时间依赖性。②当2mg/ml和4mg/ml健脾化瘀方作用于人胃癌SGC-7901细胞48h可显著诱导细胞凋亡的产生。③细胞周期方面,健脾化瘀方作用于人胃癌细胞SGC-7901后G2/M期比例与阴性对照组相较显著上升,G0/G1期稍有上升,而S期比例下降,表明细胞被阻滞于G2/M期。结论:健脾化瘀方可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖作用并能够诱导该细胞凋亡,改变细胞周期。     

通莲Ⅰ号方及其拆方对食管癌Eca109细胞增殖及细胞周期的影响

目的:研究通莲Ⅰ号方及其拆方在不同浓度下对食管癌Eca109细胞形态和生长周期的调节作用;探讨该方抑制食管癌细胞增殖的机制.方法:将Eca109细胞以l x106个／皿密度接种于Φ100 mm培养皿中,以10％小牛血清DMEM培养液培养,37℃,5％饱和湿度的CO2培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25～3 200 mg·L-1倍比梯度的通莲Ⅰ号方(T)、清热解毒拆方(Q)、活血行气拆方(H)、滋阴养血拆方(Z)等4方提取液,孵育48 h后,MTT比色法检测细胞增殖变化、光镜观察细胞形态、流式细胞技术(FCM)测定细胞周期.结果:T,Q,H的1C50值分别为386,771,729 mg·L-1;与空白对照组(C)相比,T,Q,H3方显著影响Eca109细胞周期变化:G1期细胞所占比率分别为69.43％,60.84％,61.90％.同时,T,Q,H组细胞的S期与C组比较,均有显著性差异(P＜0.05),T方作用最强.而Z方对细胞的抑制作用较弱,与C组无显著性差异.结论:通莲Ⅰ号方通过抑质细胞进入S增殖期从而干预食管癌Eca109细胞生长,各拆方具有协同作用,全方作用最优.     

中药胃康宁对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子的影响

目的 观察中药胃康宁含药血清对胃癌细胞生长与胃癌细胞周期调控因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2（Cyclin dependant kinase2,CDK2）Cdk4、Cdk6和p16^INK4a、p27^KIP1mRNA及其蛋白表达的作用。 方法 分别将高、中、低不同剂量的中药胃康宁制剂对SD大鼠进行灌胃,制备含药血清,然后分别用不同剂量含药血清培养胃癌细胞,用流式细胞仪检测细胞周期的变化;采用免疫组织化学SABC法及RT-PCR法检测各组胃癌细胞中CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4、Cdk6和p16^INK4a、p27^KIP1蛋白和mRNA的表达。 结果 中药胃康宁能将增殖过程中的MGC-803胃癌细胞阻滞于G0-G1期,使之不进入或延迟进入S期（即DNA合成期）,抑制胃癌细胞的生长;免疫组化法结果显示,与空白对照组比较,中药胃康宁高、中剂量组CyclinE和Cdk2,CyclinD2和Cdk4、Cdk6蛋白均有明显升高,而p27KIP1、p16INK4a蛋白则显著降低（P＜0.01）;RT-PCR结果显示,中药胃康宁高、中剂量组均能明显降低CyclinD2、CyclinE、Cdk2和Cdk4、Cdk6 OPTD值,同时升高p27KIP1、p16INK4a OPTDI值（P＜0.01）。 结论 中药胃康宁可抑制胃癌细胞促细胞周期相关因子CyclinD2、CyclinE、Cdk2、Cdk4和Cdk6的表达,同时增强胃癌细胞周期抑制因子p27^KIP1、p16^INK4a的表达,这可能是中药胃康宁抑制胃癌细胞生长的作用机制。     

淫羊藿甙对人高转移肺癌细胞膜的影响

本研究采用流式细胞术及荧光探针标记技术检测了淫羊藿甙对人高转移肺癌细胞膜的影响。结果表明,淫羊藿甙可提高PG细胞膜流动性,增加膜表面HLA-ABC抗原的表达,增强肿瘤细胞的抗原性,这可能是淫羊藿甙的抗瘤作用机制之一。