电针不同穴位对分娩大鼠行为学及中枢DA mRNA与蛋白表达的影响

目的探讨不同穴位电针对分娩大鼠行为学及中枢DA、Drd2 mRNA与蛋白表达的影响。方法 120例孕鼠随机分为空白对照组、电针三阴交穴、合谷穴、合谷加三阴交、血海穴等不同穴位组及药物组。热水甩尾测痛观察电针穴位对大鼠行为学的影响、Real-Time PCR及Western blot检测大鼠中枢DA、Drd2 mRNA与蛋白表达。结果电针对分娩大鼠行为学影响显示,治疗前大鼠痛阈,组间差别(F=0.736,P=0.5980.05)无统计学意义,治疗后,组间差别明显(F=216.361,P0.01)有统计学意义,不同穴位依次为三阴交穴合谷穴合谷+三阴交血海不同程度提高大鼠痛阈;大脑灰质DA、Drd2 mRNA与蛋白表达水平,组间差异显著,有统计学意义(P0.01),与空白组相比,电针各穴位组、药物组DA、Drd2 mRNA与蛋白表达水平明显降低,依次为空白组血海组/合谷加三阴交组/合谷组三阴交组药物组;而脊髓DA、Drd2 mRNA与蛋白表达水平比较,组间差异不明显,无统计学意义(P0.05)。结论电针穴位有镇痛作用;不同穴位有不同程度提高大鼠痛阈的作用,依次为三阴交穴合谷穴合谷+三阴交血海;不同穴位产生不同针效与电针由低至高依次为空白组血海组/合谷加三阴交组/合谷组三阴交组药物组不同程度降低大脑灰质DA、Drd2 mRNA与蛋白表达水平呈负相关。揭示大脑灰质区为电针穴位DA镇痛作用机制的靶点。     

电针不同穴位对大鼠分娩镇痛效应及其神经递质作用的影响

目的探讨电针不同穴位对大鼠分娩镇痛效应及其神经递质的作用机制。方法 120例模型孕鼠随机分为空白组(A组),电针三阴交穴组(B组),电针合谷穴组(C组),电针合谷加三阴交组(D组),电针血海穴组(E组),药物组(F组),每组20只。采用热水甩尾测痛法观察大鼠痛阈值;Real-time PCR及Western blot检测大鼠中枢神经递质5羟色胺(5-HT)及5羟色胺2A受体(5-HT2A)、去甲肾上腺素转运蛋白(NET)及去甲肾上腺素α2-A受体(α2-AR)、多巴胺(DA)及多巴胺D2受体(Drd2)、前强啡肽原(Pdyn)及阿片受体(Oprk1)的mRNA与蛋白表达。结果 (1)大鼠痛阈值比较,干预前各组间差异无统计学意义(P0.05);干预后,与A组比较,B、C、D、E、F组痛阈明显升高(P0.01)。(2)与A组比较,B、C、D、E、F组中枢神经中大脑灰质5-HT、5-HT2A及NET、α2-AR mRNA及蛋白表达均明显升高(P0.01);DA、Drd2均明显降低(P0.01);Pdyn、Oprk1差异无统计学意义(P0.05)。而脊髓中5-HT、5-HT2A及Pdyn、Oprk1明显升高(P0.01);NET、α2-AR明显降低(P0.01);DA、Drd2差异无统计学意义(P0.05)。结论不同穴位产生不同针效作用,以B组较好,E组相对较差。穴位间出现的这种差异,可能与穴位所在的经络腧穴功效及其所处的神经解剖学位置有关。     

电针预处理对慢性应激抑郁模型大鼠海马内5-HT及5-HT转运体表达的影响

目的：观察电针及其预处理对慢性应激抑郁模型（CUMS）大鼠海马中5-羟色胺（5-HT）及5-羟色胺转运体（5-HTT）表达的影响,探讨5-HT、5-HTT在大鼠实验性抑郁症发病过程中的作用机制及电针干预的影响。方法：将60只清洁健康雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组、脉冲电针组、电针预处理组及百忧解组,每组12只。孤养结合CUMS 21天复制抑郁症模型,通过开野试验观察大鼠行为学变化,采用免疫组织化学法检测5-HT、5-HTT在大鼠海马中的表达情况。结果：模型组大鼠开野实验水平运动及垂直运动明显减少,脉冲电针组、电针预处理组及百忧解组均可改善此变化;模型组大鼠海马内5-HT、5-HTT表达均明显降低,脉冲电针组、电针预处理组及百忧解组可逆转此病理变化,在5-HT方面,两组电针治疗及百忧解治疗之间无明显统计学差异;在5-HTT方面,电针预处理有上调趋势,但无统计学意义,较脉冲电针与百忧解组疗效稍逊色。结论：抑郁大鼠的5-HT、5-HTT含量低于正常,电针治疗抑郁症可能通过升高5-HT、5-HTT的含量而发挥抗抑郁作用。电针预处理与脉冲电针治疗抑郁症效果差异不明显。     

褪黑素对大鼠电针镇痛效应的影响

本实验以 5 0℃热水刺激引起的大鼠甩尾反应为痛反应指标 ,观察腹腔注射 (i p )不同剂量褪黑素 (MEL) 3 0、60、1 2 0mg/kg的镇痛效应 ,及MEL 60mg/kg对电针镇痛效应的影响。结果显示 ,i p MEL 3 0mg/kg对大鼠甩尾潜伏期无影响 ;i p MEL 60、1 2 0mg/kg均能显著延长大鼠甩尾潜伏期 ,作用随着剂量增大而增强 ;i p MEL 60mg/kg 3 0分钟后给予电针刺激 3 0分钟 ,大鼠甩尾潜伏期显著长于单纯给药组和单纯电针组 ,提示褪黑素具有镇痛作用 ,并能加强电针镇痛效应。     

电针刺激不同穴位对颈部切口痛大鼠镇痛效应及对颈髓神经营养因子及其受体mRNA表达的影响

目的:观察电针"扶突"穴区等对颈部切口痛痛反应及颈髓胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)等神经营养因子及其受体基因表达的影响,探讨针刺缓解颈部切口痛的机制。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶突组、内关-合谷组及足三里-阳陵泉组,每组10只。沿大鼠颈中线做长约1.5cm的纵行切口,制作切口痛模型。用辐射热在术前、术后4h及针刺治疗后测大鼠切口部位热痛阈。电针刺激上述各穴区30min后,取颈髓(C1-C4)段组织。用实时荧光定量聚合酶链反应法分析颈髓GDNF及其受体GFRα-1、脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkA、TrkB mRNA的表达。结果:颈部切口手术后各组与术前相比痛阈显著降低(P<0.05),扶突组、内关-合谷组及足三里-阳陵泉组治疗后与本组切口术后比较,热痛阈明显增高(P<0.05)。模型组GDNF mRNA、GFRα-1mRNA的表达明显低于正常组(P<0.05),3个电针组治疗后两个指标均明显高于模型组(P<0.001)。模型组BDNF mRNA的表达明显高于正常组(P<0.05),TrkA mRNA、TrkB mRNA与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);电针各组3个指标与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针刺激能显著提高颈部切口痛大鼠痛阈,上调颈部脊髓GDNF及其受体GFRα-1基因表达的水平,表明GDNF及其受体GFRα-1参与电针对颈部切口痛的镇痛效应。     

经前舒颗粒对大鼠海马5-HT3B受体mRNA水平和蛋白表达的影响

目的:观察经前舒颗粒对郁怒模型大鼠海马5-HT3B受体蛋白表达和mRNA水平以及5-HT含量的影响,研究郁怒情绪的中枢机制,探讨经前舒颗粒的中枢作用机制。方法:以居住入侵方法制备大鼠郁怒情绪模型,给药组给予调肝方药经前舒颗粒,模型组给予灭菌饮用水,并设不造模正常组,用蛋白质印迹技术(WB)检测各组大鼠海马5-HT3B受体蛋白水平表达量,半定量RT-PCR技术检测各组大鼠海马5-HT3B受体mRNA的表达。高效液相色谱-荧光检测器检测海马中5-HT的含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠海马5-HT3B受体mRNA水平和蛋白表达水平都极显著升高(P<0.01),5-HT含量显著下降(P<0.05);与模型组比较,经前舒颗粒组大鼠海马蛋白表达和mRNA水平都极显著降低(P<0.01),5-HT含量显著升高。结论:郁怒刺激能显著升高大鼠海马5-HT3B受体蛋白表达和mRNA表达水平并显著降低5-HT的含量,调肝方药经前舒颗粒可能通过下调海马过高的5-HT3B受体蛋白表达和mRNA水平以及上调5-HT含量达到调肝解郁治疗疾病的目的。     

电针不同穴位对分娩大鼠痛阈及血清神经递质表达水平的影响

目的探讨电针不同穴位对分娩大鼠痛阈及血清神经递质表达水平的影响。方法 120例模型大鼠随机分为空白对照组,电针不同穴位组,药物组。进行相应处理后,应用热水甩尾测痛法观察大鼠痛阈;ELISA检测大鼠血清5-HT、NE、DA、Dyn表达水平。结果 16组大鼠痛阈值比较,干预前,差别无统计学意义(P0.05)。干预后,有统计学意义(P0.01)。配对t检验结果显示,除空白组外,其它各组均显著高于干预前。进一步LSD多重比较结果显示:与空白组相比,电针各穴位组及药物组痛阈明显升高。痛阈由低至高依次为空白对照组血海组合谷加三阴交组合谷组三阴交组药物组。2干预后,6组大鼠血清5-HT、DA及NE表达水平不同程度降低,而DYN表达水平则出现不同程度提高,组间差异均有统计学意义(P0.001)。6组降低及提高作用由低至高依次为空白组血海组合谷加三阴交组合谷组三阴交组/药物组。结论电针不同穴位由低至高依次为空白对照组血海组合谷加三阴交组合谷组三阴交组药物组,不同程度提高分娩大鼠痛阈及血清DYN表达水平;降低大鼠血清5-HT、DA、NE表达水平的镇痛作用机制。     

电针不同穴位对功能性腹泻大鼠空肠SERT蛋白及SERTmRNA表达的影响

探讨电针不同穴位对功能性腹泻大鼠空肠黏膜SERT蛋白(5-羟色胺转运蛋白)及SERTmRNA表达的影响。方法:成年SD大鼠60只,随机分为正常组、模型组、电针1组(取双侧上巨虚)、电针2组(取双侧曲池)、电针3组(取双侧天枢)、电针4组(取双侧大肠俞),每组10只。以番泻叶煎剂灌胃复制功能性腹泻大鼠模型,通过电针刺激干预,测定空肠黏膜SERT蛋白和SERTmRNA表达。结果:电针Ⅲ组空肠中SERT蛋白和SERTmRNA水平明显升高,与模型组比较有极显著性差异(P0.01)。结论:电针可能是通过显著提升SERT蛋白和SERTmRNA的表达,促使空肠肠神经元突触间隙内的5-HT摄取增多,减弱神经信号传导,致使空肠肠蠕动及分泌功能减弱,使得功能性腹泻大鼠空肠功能恢复正常。电针3组作用优于其他三组,提示取天枢干预功能性腹泻效果更好。     

电针不同穴位对功能性便秘大鼠结肠SERT蛋白及SERTmRNA表达的影响

目的:研究电针不同穴位对功能性便秘大鼠结肠黏膜SERT蛋白及SERTmRNA表达水平影响及作用机制,探讨电针调节结肠动力障碍的穴位特异性。方法:将3.5月龄的SD大鼠随机分为6组,分别是正常组、模型组、电针Ⅰ组(上巨虚组)、电针Ⅱ组(曲池组)、电针Ⅲ组(天枢组)、电针Ⅳ组(大肠俞组),每组10只。功能性便秘大鼠模型复制采用0℃生理盐水进行灌胃,采用疏密波型的电针刺激不同穴位对其进行干预10 d,观察大鼠肠道炭末推进率,western blot法测定大鼠结肠黏膜SERT蛋白表达,RT-PCR法测定大鼠结肠黏膜SERTmRNA表达。结果:与模型组相比较,电针干预四组中,大鼠结肠黏膜SERT蛋白及SERTmRNA表达水平以电针Ⅰ组降低最为显著(P<0.01)。结论:电针上巨虚具有较好促进大鼠肠动力的作用,其作用机制可能是通过降低大鼠结肠黏膜SERT蛋白和SERTmRNA的表达水平,进而减少位于结肠肠神经元突触间隙内的5-HT摄取量,使减弱的肠道神经信号传导得以增强,达到增强结肠蠕动和分泌功能的目的。     

慢性应激对大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的影响

目的：探讨慢性应激对大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法：选择open-feild法评分相近的20只成年SD大鼠随机分为对照组和模型组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型，以免疫组化法和原位杂交法检测大鼠海马5-HT2AR及其mRNA的表达。结果：（1）模型组体重增长14d时明显低于对照组。（2）模型组水平活动和垂直活动于第7天后明显降低；糖水消耗量于第14天后明显减少。（3）模型组海马5-HT2AR及其mRNA表达均低于对照组（均P〈0．01）。结论：慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁，其机制与海马5-HT2AR及其mRNA的低表达有关。     

辣椒素对电针镇痛效应的影响

针刺镇痛的研究中外周神经中那一类纤维参与针刺镇痛效应一直是个争论性问题。我们利用辣椒素镇痛效应一直是个争论性问题。我们利用辣椒素阻断外周神经中C纤维传人的效应来进一步分析这个问题。     

切断大鼠前根对痛阈及电针镇痛效应的影响

本实验研究了前根在痛信息和针刺镇痛信息中的传入作用：（1）切断大鼠左侧L4、L5前根前，大鼠处于正常状态下，左右两侧大腿外侧部痛阈没有明显差异。（2）切断左侧L4、L5前根后第三天，切断侧痛阈较切断前和对照侧的痛阈均明显增加。（3）如果在切断后第三天给予电针刺激，切断侧针效与切断前电针刺激后的针效和对照侧电针刺激后的针效相比较，虽有升高，但无明显差异。     

电针内关、足三里对IBS模型大鼠行为学及结肠5-HT2A受体表达的影响

目的:探讨电针内关、足三里对IBS模型大鼠行为学及结肠5-HT2A受体表达的影响,从靶器官痛相关物质变化角度揭示不同穴位干预慢性内脏痛的部分分子机制。方法:采用新生期母婴分离和醋酸灌肠并在后期结直肠球囊扩张刺激法联合制备肠易激综合征大鼠模型。分为空白对照组、模型组、内关穴组、足三里穴组。空白对照组和模型组不做任何处理,内关穴组和足三里穴组进行电针干预。采用腹部回撤反射及高架十字迷宫实验评价IBS模型大鼠的肠道敏感性和情绪心理变化及针刺不同穴位的干预效应。采用免疫组织化学方法检测大鼠结肠组织5-HT2A受体的免疫反应物的表达。结果:(1)腹部回撤反射:与空白对照组比较,模型组大鼠腹部回撤反射潜伏期缩短(P0.01);模型组、内关穴组、足三里穴组的腹部回撤收缩波个数增加(P0.01或P0.05)。与模型组比较,内关穴组、足三里穴组的潜伏期延长(P0.05或P0.01),收缩波个数减少(P0.05或P0.01)。与内关穴组比较,足三里穴组的收缩波个数减少(P0.05)。(2)高架十字迷宫:与空白对照组比较,模型组进入开放臂次数百分比减少(P0.05),总距离减少(P0.05),内关穴组开放臂停留时间百分比减少(P0.01),总距离减少(P0.05)。(3)5-HT2A受体表达:与空白对照组比较,模型组、内关穴组、足三里穴组的5-HT2A受体免疫反应物阳性的表达增强(P0.01)。与模型组比较,足三里穴组的5-HT2A受体免疫反应物阳性表达减弱(P0.01)。与内关穴组比较,足三里穴组5-HT2A受体免疫反应物阳性表达减弱(P0.05)。结论:IBS模型大鼠内脏疼痛敏感性增高,情绪心理行为异常改变,符合IBS病理特征,表明母子分离加醋酸灌肠结合结直肠球囊扩张刺激可以成功制备IBS大鼠模型;针刺内关穴、足三里穴可降低IBS模型大鼠肠道敏感性,缓解内脏疼痛症状,且足三里穴优于内关穴。针刺可抑制5-HT2A受体免疫反应物的异常表达,参与疼痛的调节。     

人参皂苷Rb1对抑郁症大鼠海马5-HT及5-HT1A受体表达的影响

目的研究人参皂苷Rb1对抑郁大鼠海马5-HT及5-HT1A受体的作用,探讨人参皂苷Rb1抗抑郁作用机制。方法选用成年Wistar大鼠45只,分为对照组、模型组和治疗组。给予慢性不可预性温和应激(CUMS)建立抑郁模型,治疗组给予人参皂苷Rb1。采用糖水偏好实验、高架十字迷宫实验和Morris水迷宫实验进行行为学检测,采用高效液相色谱法测定海马5-HT浓度,Western blot检测5-HT1A受体表达。结果模型组大鼠糖水偏好百分比明显降低(P0.05),进入开臂次数和停留时间百分比增高(P0.05),水迷宫逃避潜伏期延长(P0.05);治疗组能逆转这些改变;模型组大鼠海马5-HT含量和5-HT1A受体表达水平明显低于对照组(P0.05),治疗组5-HT含量和5-HT1A受体表达水平明显升高,但仍低于对照组(P0.05)。结论人参皂苷Rb1抗抑郁作用可能与影响海马5-HT水平及5-HT1A受体表达有关。     

电针超前镇痛对分娩产妇应激反应及硬膜外镇痛疗效的影响

目的:观察产程潜伏期电针干预对产妇应激激素水平及对硬膜外分娩镇痛效果的影响。方法:将104例阴道分娩初产妇随机分为硬膜外阻滞组31例、假电针组36例和电针组37例。电针组于宫口开至1 cm时予电针刺激双侧合谷、三阴交直至活跃期开始(宫口开至3 cm时);假电针组仅轻刺不通电。各组均于宫口开至3 cm时行硬膜外阻滞及自控硬膜外镇痛(PCEA)。记录电针刺激即刻、电针刺激1 h、电针刺激2 h、硬膜外阻滞即刻、硬膜外阻滞1 h、硬膜外阻滞2 h、宫口开全时各组产妇的视觉模拟量尺(VAS)评分及PCEA使用情况;于电针刺激1 h、电针刺激2 h、硬膜外阻滞即刻、宫口开全时采用ELISA法检测产妇血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(COR)含量。结果:各组产妇电针刺激即刻VAS评分比较差异无统计学意义(P>0. 05)。与硬膜外阻滞组、假电针组比较,电针组除电针刺激即刻外,其余各时间点VAS评分均显著降低(P<0. 05)。与电针刺激即刻比较,电针组各时点VAS评分均显著降低(P<0. 05),硬膜外阻滞组、假电针组硬膜外阻滞1 h、硬膜外阻滞2 h、宫口开全时VAS评分显著降低(P<0. 05)。与电针刺激1 h比较,各组电针刺激2 h、硬膜外阻滞即刻、宫口开全时血清ACTH、COR含量显著升高(P<0. 05),且随产程进展其含量逐渐增加。与硬膜外阻滞组、假电针组比较,电针组电针刺激2 h、硬膜外阻滞即刻、宫口开全时血清ACTH、COR含量显著降低(P<0. 05)。与硬膜外阻滞组、假电针组比较,电针组罗哌卡因、舒芬太尼用量及PCEA有效按压次数、总按压次数均显著降低(P<0. 05)。结论:潜伏期电针分娩镇痛可有效减轻阴道分娩产妇疼痛,抑制产妇应激反应,加强硬膜外阻滞分娩疗效,减少硬膜外分娩镇痛药物用量,两者联合使用可安全用于全产程镇痛。     

经前舒颗粒对大鼠海马5-HT含量及其5-HT3B受体表达的影响

目的:观察经前舒颗粒对郁怒模型大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA水平以及5-HT含量的影响,研究郁怒情绪的中枢机制,探讨经前舒颗粒的中枢作用机制.方法:以居住入侵方法制备大鼠郁怒情绪模型,给药组给予调肝方药经前舒颗粒,模型组给予灭菌饮用水,并设不造模正常组,用蛋白质印迹技术(WB)检测各组大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白水平表达量,半定量RT-PCR技术检测各组大鼠海马5-HT<,3B>受体mRNA的表达.高效液相色谱-荧光检测器检测海马中5-HT的含量.结果:与正常组比较,模型组大鼠海马5-HT<,3B>受体mRNA水平和蛋白表达水平都极显著升高(P<0.01),5-HT含量显著下降(P<0.05);与模型组比较,经前舒颗粒组大鼠海马蛋白表达和mRNA水平都极显著降低(P<0.01),5-HT含量显著升高.结论:郁怒刺激能显著升高大鼠海马5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA表达水平并显著降低5-HT的含量,调肝方药经前舒颗粒可能通过下调海马过高的5-HT<,3B>受体蛋白表达和mRNA水平以及上调5-HT含量达到调肝解郁治疗疾病的目的.     

电针刺激后大鼠血清对成骨细胞OPG、RANKL mRNA及其蛋白表达的影响

目的观察电针刺激去卵巢骨质疏松症模型大鼠的血清对体外培养成骨细胞的骨形成因子骨保护素(osteoprotegerin, OPG)和骨吸收因子(receptor activator for nuclear factor-?B ligand, RANKL)mRNA表达及其蛋白浓度的影响。方法将45只雌性SD大鼠,随机分为空白组(A组)、模型组(B组)、电针刺激组(C组),每组15只。除A组外,B组、C组均切除双侧卵巢。造模成功后,C组给予电针刺激,B组正常饲养,A组不做任何处理,常规正常饲养。12周后,采用水合氯醛麻醉各组大鼠,心脏采血,经过处理后加到体外培养的大鼠成骨细胞培养液中。采用碱性磷酸酶(ALP)检测成骨细胞活性,RT-qPCR法检测大鼠血清对OPG、RANKL mRNA表达的影响,ELISA法检测大鼠血清对OPG、RANKL蛋白浓度的影响。结果各组大鼠血清处理成骨细胞后,与A组比较,B组ALP的活性明显降低(P0.05),C组电刺激后成骨细胞内ALP的活性明显增加(P0.05)。与B组比较,A组及C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P0.05);与A组比较,C组OPG mRNA表达及其蛋白浓度均明显降低(P0.05)。与B组比较,C组及A组RANKL mRNA表达及其蛋白浓度表达明显降低(P0.05);与A组比较,C组RANKL mRNA及蛋白浓度明显降低(P0.05)。C组大鼠骨密度明显高于B组(P0.05)。结论电刺激后的大鼠血清可以提升ALP、OPG水平,降低RANKL水平,其治疗骨质疏松症的机制可能与此有关。     

伤害性刺激电针后中缝背核生长抑素mRNA的表达及其与5-HT的共存

本实验用原住杂交和免疫组化ABC相结合的双标记技术，观察了大鼠中缝背核（RD）内生长抑素（SOM）fllRNA在正常、伤害性刺激、单纯电针和电针镇痛（EA）下的变化特点。结果发现RD正常情况下有一定SOMmRNA表达，伤害性刺激和单纯电针后SOMmRNANA表达增强，EA后进一步增强。在正常情况下RD内有少量的SOMmRNA与5－HT双标记细胞。与正常组相比，伤害性刺激和单纯针刺后双标细胞增多，EA后更甚。结果提示：（1）SOM可能参与痛觉调杯（2）SOM可能参与EA。（3）RD内SOMmRNA与SNT共存，二者可能协同作用，共同参与EA。