五味子乙素对AngⅡ诱导心肌纤维化中AkT、mTOR、TGF-β1表达的影响

目的探讨五味子乙素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌纤维化中AkT、mTOR、TGF-β1表达的影响。方法胶原酶与差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞后,将细胞随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+五味子乙素低剂量组(2.5×10~(-5) mol/L)、AngⅡ+五味子乙素高剂量组(7.5×10~(-5) mol/L)、AngⅡ+雷帕霉素组。然后,Western blot检测蛋白激酶B(AkT)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)蛋白表达。结果与对照组比较,AngⅡ显著刺激心肌成纤维细胞下调p-AkT蛋白表达,上调p-mTOR、TGF-β1、CollagenⅠ蛋白表达(P0.05);与AngⅡ组比较,AngⅡ+五味子乙素组显著下调p-mTOR、TGF-β1、CollagenⅠ蛋白表达,上调p-AkT蛋白表达(P0.05)。结论五味子乙素可通过促进AkT磷酸化,抑制p-mTOR、TGF-β1蛋白表达,减少CollagenⅠ合成来改善AngⅡ诱导心肌纤维化。     

养肝益水颗粒对自发性高血压大鼠血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA表达的影响

目的观察养肝益水颗粒对12周龄自发性高血压大鼠(SHR)血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)含量和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA表达的影响,以进一步探讨养肝益水颗粒发挥肾脏保护的可能作用机制。方法将40只12周龄雄性SHR大鼠随机分为模型组、贝拉普利组[1.8mg/(kg·d)]、养肝益水颗粒低剂量组[5.4g/(kg·d),简称低剂量组]、养肝益水颗粒高剂量组[27g/(kg·d),简称高剂量组],每组10只;并设Wistar-Kyoto大鼠(WKY)10只作为正常对照组;模型组和正常对照组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,共6周。检测各组大鼠血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF浓度和肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果模型组,低、高剂量组血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量显著高于正常对照组(P<0.01),贝拉普利组与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);贝拉普利组与高剂量组血浆AngⅡ、TGF-β1、CTGF含量显著低于模型组(P<0.01,P<0.05),低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05);贝拉普利组及高、低剂量组肾皮质AngⅡ、TGF-β1、CTGFmRNA的表达显著低于模型组(P<0.01,P<0.05);高剂量组优于贝拉普利组和低剂量组(P<0.01,P<0.05)。结论养肝益水颗粒主要通过降低肾脏局部AngⅡ、TGF-β1及CTGF的表达而发挥肾脏保护作用。     

姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1及smad7表达的影响

目的：观察姜黄素对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)刺激大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1及smad7表达的影响,探讨姜黄素改善肾间质纤维化的作用机制。方法培养大鼠肾小管上皮细胞,按随机数字表法分为空白组,AngⅡ对照组,姜黄素低、中、高剂量组。除空白组外,于其余各组细胞培养液中加入10-8mol/L的AngⅡ溶液进行干预;姜黄素低、中、高剂量组分别加入2.5、5.0、10.0μmol/L姜黄素溶液进行干预。干预48 h后,采用Western blot检测各组肾小管上皮细胞TGF-β1、smad7蛋白表达,采用RT-PCR检测肾小管上皮细胞TGF-β1、smad7 mRNA表达。结果与空白组比较,AngⅡ对照组肾小管上皮细胞TGF-β1蛋白[(0.23±0.03)比(0.16±0.01)]、TGF-β1 mRNA[(1.89±0.20)比(1.00±0.00)]表达升高(P＜0.05),smad7蛋白[(0.19±0.03)比(0.24±0.02)]、smad7 mRNA[(0.48±0.05)比(1.00±0.00)]表达降低(P＜0.05);与 AngⅡ对照组比较,姜黄素低、中、高剂量组 TGF-β1蛋白[(0.18±0.02)、(0.17±0.02)、(0.16±0.03)比(0.23±0.03)]、TGF-β1 mRNA[(1.58±0.11)、(1.34±0.16)、(0.97±0.19)比(1.89±0.20)]表达下降(P＜0.05),smad7蛋白[(0.28±0.04)、(0.31±0.03)、(0.34±0.04)比(0.19±0.03)]、smad7 mRNA[(0.68±0.07)、(0.80±0.06)、(0.98±0.09)比(0.48±0.05)]表达升高(P＜0.05)。结论姜黄素可对抗AngⅡ介导的肾间质纤维化从而发挥肾脏保护作用,其作用机制可能与降低TGF-β1蛋白及其mRNA表达、上调smad7蛋白及其mRNA表达有关。     

丹皮酚联合三七总皂苷对AngⅡ诱导的心脏成纤维细胞增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响

目的探讨丹皮酚联合三七总皂苷应用对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导新生大鼠的心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖及TGF-β/Smads信号通路的影响。方法采用胰酶消化法分离培养的CFs随机分为6组:正常对照组,模型组,三七总皂苷组,丹皮酚组,丹皮酚与三七总皂苷联合用药大、小剂量组。采用MTT比色法测定各组培养液中CFs增殖情况,免疫细胞化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达水平,RTPCR法检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,Tgfb1)的mRNA表达水平,Western blot法检测TGF-β1、磷酸化的Smad2/3(p-Smad2/3)的蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,模型组大鼠CFs增殖明显增高,Tgfb1的mRNA表达显著增加,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著增加;与模型组比较,丹皮酚组、三七总皂苷组、联合用药的大剂量和小剂量组均可抑制由AngⅡ诱导的CFs的增殖,Tgfb1的mRNA表达显著减少,α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达显著减少;与丹皮酚组、三七总皂苷组比较,联合用药大、小剂量组在抑制CFs增殖的作用上显著增强,抑制Tgfb1的mRNA表达效果显著增强,抑制α-SMA及TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达效果显著增强;与联合用药小剂量组比较,联合用药大剂量组对以上指标的抑制效果更佳,显示一定的剂量依赖性。结论丹皮酚与三七总皂苷联合应用对抑制CFs增殖,呈现明显的协同作用。其作用机制与抑制TGF-β/Smads信号通路的传导有关。     

丹参酮ⅡA对阿霉素肾病大鼠肾小球nephrin和 TGF-β1的表达影响

目的:探讨肾小球足细胞跨膜蛋白(nephrin)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达变化及丹参酮ⅡA对其影响。方法:SD大鼠56只随机分为2组,模型组44只和对照组12只。模型组大鼠尾静脉一次注射盐酸阿霉素(ADR)0.007 g.kg-1,对照组大鼠尾静脉注射等容积生理盐水,注射ADR 1周后尿蛋白定量>100 mg.(24 h)-1即算建模成功,共有40只大鼠建模成功,随机又分为肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组,每组10只。泼尼松组给予泼尼松0.01 g.kg-1.d-1 ig;丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组分别给予丹参酮ⅡA 0.02,0.04 g.kg-1.d-1 ig,共4周。对照组和肾病模型组给予等容积生理盐水ig。实验结束后检测各组大鼠血、尿生化指标,光镜观察肾脏病理学改变,免疫组化技术和Western blotting技术检测nephrin和TGF-β1的表达。结果:肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组24 h尿蛋白定量、胆固醇、甘油三酯、血尿素氮、血肌酐和肾小球TGF-β1表达均高于对照组(P<0.05),但泼尼松组和丹参酮ⅡA高剂量组上述指标均低于肾病模型组(P<0.05);肾病模型组、泼尼松组、丹参酮ⅡA低剂量组和高剂量组血清总蛋白、白蛋白、肾小球nephrin表达低于对照组(P<0.05),但泼尼松组和丹参酮IIA高剂量组血清总蛋白、白蛋白、nephrin表达高于肾病模型组(P<0.05)。结论:Nephrin及TGF-β1在阿霉素肾病发病机制中起重要作用;丹参酮ⅡA能够增加肾组织nephrin的表达,抑制TGF-β1的表达,减少阿霉素肾病大鼠尿蛋白的排出,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用。     

丹酚酸B及隐丹参酮对自发性高血压大鼠血管重塑的影响及机制研究

目的:探讨两种丹参提取物——丹酚酸B及隐丹参酮对自发性高血压大鼠疾病的改善及对血管重塑的影响与相关机制。方法:选取自发性高血压大鼠,分为卡托普利组、丹酚酸B组、隐丹参酮组和模型组,并提取外周血单核细胞(PBMC),观察大鼠主动脉形态学变化,血浆中血管紧张素(AngⅡ)及一氧化氮(NO)含量,肾组织及PBMC中碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β(TGF-β)mRNA及蛋白表达变化。结果:与模型组及卡托普利组比较,丹酚酸B组及隐丹参酮组大鼠主动脉中膜厚度、AngⅡ含量显著降低,NO含量显著升高,肾组织及PBMC中b FGF、MMP-9、TGF-βmRNA及蛋白表达显著降低(P0.05)。结论:丹酚酸B及隐丹参酮可通过调控b FGF、MMP-9及TGF-β表达显著改善高血压大鼠的病情,并抑制高血压血管重塑。     

活血潜阳颗粒对SHR大鼠肾局部组织糜酶系统的作用研究

目的:通过活血潜阳颗粒对SHR大鼠肾局部组织的糜酶系统作用,探讨活血潜阳法治疗高血压肾病的可能机制,为活血潜阳颗粒的肾靶器官保护的临床运用提供实验依据。方法:42只SPF级19周龄雄性SHR大鼠随机分为活血潜阳颗粒大剂量组、活血潜阳颗粒中剂量组、活血潜阳颗粒小剂量组,糜酶抑制剂组,模型组,8只SPF级19周龄wky大鼠作为正常对照组。活血潜阳颗粒大剂量组、活血潜阳颗粒中剂量组、活血潜阳颗粒小剂量组分别予活血潜阳颗粒清膏灌胃;糜酶抑制剂组给予SBTI 10 mg·kg-1·d-1灌胃,模型组和WKY组双蒸水5 m L·d-1·只-1灌胃,连续4周。检测血压,尿总蛋白,24 h尿蛋白,肾皮质匀浆AngⅡ,RT-PCR检测各肾皮质PAR-2、TGF-β1及chymse mRNA的表达。结果:活血潜阳颗粒可降低血压(P0.05),以减少SHR尿总蛋白及24 h尿蛋白定量的排出(P0.05),抑制肾皮质PAR-2、TGF-β1及chymse的mRNA的表达(P0.05),减少肾局部组织AngⅡ的生成(P0.05)。结论:活血潜阳颗粒可能是通过减少尿总蛋白和降压以抑制肾局部组织肥大细胞浸润,减少肾局部组织chymase mRNA表达,从而减少PAR-2介导的大分子尿蛋白的排出,延缓肾纤维化。     

芪蓟肾康汤对血管紧张素Ⅱ诱导的人肾小球系膜细胞FN、TGF-β_1影响的研究

目的观察芪蓟肾康汤对AngⅡ诱导人肾小球系膜细胞FN及TGF-β_1表达,探讨不同剂量芪蓟肾康汤改善肾小球硬化作用机制。方法用酶联免疫法吸附试验(ELISA)法检测空白组,模型组,替米沙坦组及低、中、高剂量组芪蓟肾康汤含药血清培养AngⅡ诱导人肾小球系膜细胞株FN、TGF-β_1的表达。结果 24 h和48 h的FN、TGF-β_1含量表达,模型组高于正常组(明显)(P0.01);低、中、高剂量组芪蓟肾康汤较模型组减少,作用时间越长抑制效果越好(P0.01);中、高剂量组芪蓟肾康汤低于西药组,中药组间剂量芪蓟肾康汤越高抑制效果越好(P0.05)。结论芪蓟肾康汤可有效抑制FN、TGF-β_1的表达,从而抑制AngⅡ诱导人肾小球系膜细胞增殖,潜在改善肾小球硬化程度。     

复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织血管紧张素Ⅱ及环氧化酶－2影响的研究

目的探讨复方青秦液对尿酸性肾病大鼠肾组织中血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ,AngⅡ）、环氧化酶－2 （cyclooxygenase-2,COX-2） mRNA转录及蛋白表达水平的影响。方法将SD大鼠按照编号随机取码原则随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、中药大、中、小剂量组,用腺嘌呤灌胃伴饲酵母造模。空白对照组及模型组每日灌胃蒸馏水;阳性对照组每日灌胃别嘌醇9.33 mg/kg;中药大、中、小剂量组每日给予复方青秦液3.77、1.89、0.09 g/kg灌胃,连续6周。在4周时每组随机部分大鼠（空白组3只,其余每组6只）,6周时处死剩余大鼠,取肾组织采用RT-PCR扩容AngⅡ 和COX-2 mRNA转录水平,采用ELISA测定AngⅡ蛋白表达水平,采用Western blot电泳技术及免疫组化测定COX-2蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组除4周AngⅡ mRNA表达,4、6周时 AngⅡ、COX-2 mRNA及蛋白表达均明显升高（P〈0.01,P〈0.05）。4周时,中药大、中剂量组COX-2蛋白表达明显低于模型组及中药小剂量组（P〈0.05）,阳性对照组COX-2蛋白平均积分光密度值也明显低于模型组（P〈0.01）。6周时,与模型组比较,除中药大剂量组AngⅡ mRNA表达外,阳性对照组及中药各剂量组AngⅡ mRNA及蛋白表达均降低（P〈0.05, P〈0.01）,其中中药大、中剂量组效果优于阳性对照组及中药小剂量组（P〈0.05, P〈0.01）;另外,阳性对照组及中药各剂量组COX-2 mRNA表达、平均积分光密度值以及阳性对照组、中药大、中剂量组COX-2蛋白表达均明显低于模型组（P〈0.05）,其中中药中剂量组COX-2 mRNA表达优于阳性对照组（P〈0.05）,中药大剂量组COX-2蛋白表达优于中药小剂量组（P〈0.05）。结论复方青秦液可以下调尿酸性肾病大鼠肾脏AngⅡ、COX-2 mRNA 转录及蛋白表达水平,从而抑制肾组织炎性病理损伤。     

化痰活血益心方对压力负荷性心肌肥厚大鼠AngⅡ,Trx的影响

[目的]研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),硫氧还蛋白(Trx)在大鼠压力负荷性心肌肥厚中的表达及化痰活血益心方的干预作用。[方法]采用部分缩窄腹主动脉方法制作大鼠压力负荷性心肌肥厚模型,模型对照组造模不给药,中药组(大、中及常规剂量组)造模2周后给予化痰活血益心方(10倍常规剂量、5倍常规剂量及常规剂量,常规剂量为0.12 g/kg),卡托普利组造模2周后给予卡托普利6.75 mg/kg,每日灌胃1次,共4周。观察各组大鼠心肌AngⅡ,Trx的含量。[结果]与模型对照组比较,中药大、中、常规剂量组及卡托普利组均能显著降低压力负荷性大鼠心肌AngⅡ含量(P0.01),中药大剂量组、卡托普利组降低AngⅡ与中药常规剂量、中剂量组比较,差异有显著性意义(P0.01或P0.05)。各组心肌Trx蛋白表达比较,与模型对照组比较,中药大、中、常规剂量组及卡托普利组Trx蛋白明显增加(P0.01),中药大剂量组Trx蛋白表达与中药中、常规剂量组比较,差异有显著性意义(P0.01)。[结论]化痰活血益心方能通过升高Trx及降低AngⅡ发挥抗氧化应激损伤作用,且化痰活血益心方大剂量升高Trx及降低AngⅡ作用更显著。     

二陈汤加味对COPD大鼠转化生长因子-β1，组蛋白去乙酰化酶2基因表达的影响

目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织中转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及其受体(TGF-βRII)基因表达,外周血单个核细胞(PBMCs)中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)基因表达及活性的影响。方法:采用烟熏加脂多糖方法制备COPD大鼠模型。随机分为正常组、模型组、二陈汤加味高、中、低剂量组(20,10,5 g·kg~(-1))。正常组、模型组灌胃生理盐水(10 g·kg~(-1)),二陈汤加味高、中、低剂量组分别灌胃,连续14 d。荧光酶联免疫法测定PBMCs中HDAC2活性,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定肺组织匀浆中TGF-β_1及PBMCs中HDAC2含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA及PBMCs中HDAC2 mRNA表达;免疫组化检测TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白在肺组织的原位表达,光镜观察组织结构。结果:与正常组比较,模型组大鼠肺组织匀浆中TGF-β_1含量升高(P0.05);肺组织中TGF-β_1mRNA,TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著增强(P0.01);模型组大鼠PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均明显减低(P0.05,P0.01),差异均有统计学意义。与模型组比较,二陈汤加味高、中剂量组肺组织匀浆中TGF-β_1mRNA表达(P0.01)和TGF-β_1蛋白含量均显著降低(P0.05,P0.01),免疫组化检测肺组织中TGF-β_1与TGF-βRⅡ蛋白表达均显著弱于模型组(P0.01),PBMCs中HDAC2 mRNA表达、含量及其活性均升高(P0.05,P0.01),肺组织结构明显改善。结论:二陈汤加味对COPD有抗炎作用。其机制可能与增强PBMCs中HDAC2基因表达,提高HDAC2活性,抑制TGF-β_1及其受体基因的表达有关。     

薏苡仁油对人肺泡上皮细胞间质转化的抑制作用研究

目的探讨薏苡仁油对人肺泡上皮细胞间质转化的影响,评估薏苡仁油在肺纤维化治疗方面的应用。方法以A549肺泡上皮细胞为研究对象,用TGF-β1诱导肺泡上皮细胞的间质转化,同时,加入不同浓度的薏苡仁油进行干预。TGF-β1刺激48 h后,应用圆形度定量分析细胞形态的变化;应用免疫细胞化学的方法分析细胞表面上皮特征性蛋白E-cadherin和间质特征性蛋白α-SMA、FN和Collagen I的表达;应用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测细胞分泌MMP-9和TIMP-1水平。结果与正常组比较,TGF-β1组圆形度显著降低(P0.01);E-cadherin表达显著降低(P0.05);FN表达显著升高(P0.01);α-SMA和Collagen I表达升高,MMP-9和TIMP-1的分泌量增加,但均无显著性(P0.05)。与TGF-β1组比较,高剂量组E-cad表达显著增加(P0.05);小剂量组Collagen I的表达显著降低(P0.05);小剂量组TIMP-1分泌量显著增加(P0.05),其它未显示出显著性的影响(P0.05)。结论薏苡仁油能有效抑制体外培养的人肺泡上皮细胞A549的上皮间质转化,抑制MMPs对细胞外基质的破坏。     

一贯煎抑制肝星状细胞活化作用机制的研究

目的探讨一贯煎对肝星状细胞(HSC-T6)活化的抑制作用。方法体外培养肝星状细胞,采用转化生长因子-β1(TGF-β1)制备肝星状细胞活化模型,将细胞分为正常组、模型组、阳性组、一贯煎小剂量组和一贯煎大剂量组。采用CCK-8法检测细胞活力,Western Blot技术检测肝星状细胞Ⅰ型胶原(anti-collagen type Ⅰ,COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(anti-collagen typeⅢ,COL-Ⅲ)蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期。结果阳性组、一贯煎小剂量组和一贯煎大剂量组能显著抑制细胞增殖(P0.05),能显著降低COL-I和COL-Ⅲ蛋白的表达(P0.05);阳性组能显著阻滞细胞周期于S期(P0.05);一贯煎小剂量组和一贯煎大剂量组能显著阻滞细胞周期于S期和G_2/M期(P0.05)。结论一贯煎抗肝纤维化的作用机制可能与抑制肝星状细胞活化,减少胶原蛋白合成和阻滞细胞周期有关。     

益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织TGF-β_1、α-SMA、HGF的影响

目的:研究益气活血降浊复方对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织TGF-β1、α-SMA、HGF蛋白及其mRNA表达的影响,探讨本方抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:132只雄性SD大鼠以单侧输尿管结扎术建立肾间质纤维化动物模型,造模成功后大鼠随机分为正常组,假手术组,模型组,西药组,益气活血降浊复方大、中、小剂量组。益气活血降浊复方大剂量组给药34.6g/kg,中剂量组17.3g/kg,小剂量组8.6g/kg灌胃给药,模型组和假手术组、正常组灌入相应0.9%氯化钠溶液,西药组灌胃福辛普利钠10g/kg,1次/d。采用免疫组化方法检测肾组织中TGF-β1、α-SMA、HGF蛋白表达,采用Real-time PCR方法检测TGF-β1、α-SMA、HGF mRNA表达。结果:与正常组、假手术组相比,模型组大鼠第1、2、3周肾间质中TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显增多(P0.01),益气活血降浊复方大、中、小剂量组及西药组正常组、假手术组在各个时间点TGF-β1、α-SMA蛋白表达有所增加,但与模型组比较显著降低(P0.01)。正常组肾小管上皮细胞胞浆中HGF呈弱阳性表达,随着梗阻时间的延长模型组HGF蛋白表达逐渐减少,益气活血降浊复方大、中、小剂量组与模型组相比,HGF蛋白阳性表达显著增加(P0.01)。与正常组、假手术组相比,造模后第3周模型组肾组织TGF-β1、α-SMA基因高表达(P0.05,P0.01),益气活血降浊复方大、小剂量组和福辛普利钠组与模型组比较TGF-β1、α-SMA基因低表达(P0.05)。造模后第1周,正常组、假手术组HGF基因低表达,益气活血降浊复方大、中、小剂量组与模型组比较HGF基因高表达(P0.05)。结论:益气活血降浊复方可以促进内源性HGF蛋白和基因的生成,使肾组织α-SMA基因、TGF-β1基因表达降低,抑制肾间质纤维化的发展。     

益肾汤对糖尿病肾病大鼠肾组织ET-1和TGF-β1表达的影响

目的:观察益肾汤对糖尿病肾病(DN)大鼠内皮素-1(ET-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,并观察肾脏病理形态学变化,以探讨其改善糖尿病肾病的作用机制。方法:将50只SD雄性大鼠,随机分为5组,对照组、模型组、益肾汤大剂量组、益肾汤小剂量组、洛汀新组,每组10只。对照组行左肾摘除假手术,其余4组摘除左肾。1周后,各组大鼠每天灌胃给药,益肾汤大剂量组灌胃1.0 g/mL;益肾汤小剂量组灌胃0.5 g/mL;洛汀新组0.33 mg/mL。对照组和模型组灌等体积的生理盐水。分别在第4、8周检测24h尿微量白蛋白,心脏采血检测血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)。HE染色肾组织送病理科评价病变程度;免疫组化法测定ET-1及TGF-β1蛋白的表达情况。结果:1各组大鼠BUN、SCr及24 h尿微量白蛋白的比较:4周末时,模型组各指标与对照组比较,差异有非常显著性意义(P0.01)。各给药组与模型组比较,差异均有显著性意义(P0.05),洛汀新组与益肾汤大、小剂量组比较,差异均无显著性意义(P0.05);第8周末时,模型组与对照组比较,差异有非常显著性意义(P0.01),各给药组与模型组比较,差异有显著性或非常显著性意义(P0.05,P0.01);洛汀新组与益肾汤大、小剂量组比较,差异均有显著性或非常显著性意义(P0.05,P0.01),益肾汤大、小剂量组比较,差异均有显著性意义(P0.05)。2肾组织病理改变:肾小球增生肥大、基底膜增厚、系膜基质增生减轻,肾小囊腔轻度狭窄,治疗8周后益肾汤组较同期模型组减轻,肾间质炎症细胞浸润减少。3各组大鼠肾组织TGF-β1和ET-1表达比较:4周时模型组TGF-β1、ET-1表达水平较对照组升高(P0.05),各给药组与模型组比较,差异均有显著性意义(P0.05)。8周时模型组大鼠肾组织中表达与对照组比较,差异均有非常显著性意义(P0.01),益肾汤大剂量组与模型组比较,差异均有非常显著性意义(P0.01),益肾汤大剂量组表达减少;益肾汤小剂量组、洛汀新组表达水平均高于益肾汤大剂量组(P0.01),益肾汤小剂量组与洛汀新组无差异(P0.05)。结论:益肾汤可通过减少TGF-β1和ET-1在DN模型组肾组织中的表达,减轻DN大鼠的肾脏组织损伤,提示益肾汤发挥肾脏保护作用的机制可能部分的是通过调节TGF-β1和ET-1的表达实现的。     

齐墩果酸抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞转化生长因子β1分泌的实验研究

目的 探讨齐墩果酸(OA)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌成纤维细胞(CFs)分泌转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法 采用胰酶消化法及差速贴壁法培养大鼠CFs,建立AngⅡ诱导的大鼠心肌间质纤维化体外模型,采用MTT法检测各组CFs增殖活性,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组CFs上清液中TGF-β1水平.结果 与对照组比较,AngⅡ组CFs增殖活性及分泌TGF-β1水平明显增加(P＜0.05);60,100μmol/L OA组CFs增殖活性及分泌TGF-β1水平较AngⅡ组明显降低(P＜0.05).结论 OA能抑制AngⅡ诱导的CFs增殖,其机制可能与抑制TGF-β1分泌有关.     

追风透骨胶囊对类风湿关节炎大鼠关节滑液及滑膜组织中miR-155、TGF-β1表达的影响

目的观察中药复方追风透骨胶囊(ZFTG)对类风湿关节炎大鼠关节滑液及滑膜组织中微小RNA-155(mi R-155)、转化生长因子(TGF-β1)表达的影响并探讨其机制。方法取80只大鼠,随机选出10只为空白组,其余70只注射Ⅱ型胶原制备类风湿关节炎大鼠模型;将造模成功大鼠随机分为模型组、阳性对照组、ZFTG低剂量组、ZFTG中剂量组、ZFTG高剂量组;观察并记录给药后各组大鼠右后足肿胀体积;并对各组大鼠关节滑液及滑膜组织中mi R-155的表达量、TGF-β1蛋白及mRNA的表达水平进行检测。结果治疗28 d后,模型组及各治疗组肿胀体积均大于空白组;随ZFTG剂量的增加,肿胀体积逐渐减小(P0.05),且ZFTG高剂量组效果显著优于阳性对照组(P0.05);模型组及各治疗组大鼠关节滑液及滑膜组织中mi R-155的表达、TGF-β1蛋白及mRNA的表达均高于空白组;随ZFTG剂量的增加,mi R-155的表达、TGF-β1蛋白及mRNA的表达水平均逐渐下调(P0.05),且ZFTG高剂量组下调效果显著优于阳性对照组(P0.05)。结论追风透骨胶囊可能通过下调类风湿关节炎大鼠关节滑液及滑膜组织中mi R-155、TGF-β1的表达治疗类风湿关节炎,为临床RA的治疗及发病机理提供理论依据。     

基于自噬途径探讨加味麻杏石甘汤干预放射性肺损伤的分子机制

目的:从自噬相关因子的表达研究加味麻杏石甘汤干预放射性肺损伤的发生机制。方法:将肺泡细胞A549分为空白组、模型组及麻杏石甘汤低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组)。除空白组外,其余各组细胞进行X线照射,建立放射性肺损伤细胞模型。模型组细胞用10%正常大鼠血清培养,低、中、高剂量组分别用10%低、中、高剂量的含药血清培养。分别采用Western-blot及RT-PCR检测肺泡细胞A549中转化生长因子-β1 (TGF-β1)、Beclin-1、LC3蛋白及mRNA表达。结果:与空白组比较,模型组细胞中TGF-β1、Beclin-1、LC3蛋白及mRNA表达均升高(P0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组细胞中TGF-β1、Beclin-1、LC3 mRNA表达均下降(P0.05),且随着剂量的升高而下降(P0.05);低、中、高剂量组TGF-β1蛋白表达下降(P0.05),中、高剂量组Beclin-1、LC3蛋白表达下降(P0.05),且TGF-β1、Beclin-1、LC3蛋白表达随着剂量的升高而下降(P0.05)。结论:加味麻杏石甘汤可通过下调肺泡细胞A549内TGF-β1、LC3、Beclin-1水平,调控自噬过程,减轻放射性肺损伤。     

不同剂量麝香保心丸对慢性心衰冠心病患者心室重塑的影响

目的观察不同剂量的麝香保心丸干预慢性心衰冠心病患者心室重塑的效果。方法 90例患者按随机数字表法分为对照组、麝香保心丸小剂量组、麝香保心丸大剂量组3组各30例。对照组给予指南规定的抗心衰治疗;麝香保心丸小剂量组在对照组基础上予以麝香保心丸每次2片,每日3次;麝香保心丸大剂量组在对照组基础上予以麝香保心丸每次4片,每日3次。疗程均为6个月。治疗后比较3组氨基末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-2水平的差异;比较3组左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期容积(LVESV)、左室舒张末期容积(LVEDV)和室壁运动积分指数(WMSI)的差异。结果麝香保心丸大剂量组的NT-pro BNP、AngⅡ、ALD、MMP2水平与麝香保心丸小剂量组和对照组比较均降低(均P0.05),而TIMP2水平则升高(均P0.05)。麝香保心丸小剂量组的NT-proBNP、AngⅡ、ALD、MMP2及TIMP2水平与对照组比较差别均不大(均P0.05)。与麝香保心丸小剂量组与对照组比较,麝香保心丸大剂量组的LVEF升高,LVESV、LVEDV、WMSI水平降低(均P0.05)。麝香保心丸小剂量组与对照组的LVEF、LVESV、LVEDV及WMSI水平差别均不大(均P0.05)。结论大剂量麝香保心丸能显著改善慢性心衰冠心病患者的心室重塑程度,但小剂量则效果不明显。