靶向性基因治疗

靶向性基因治疗是一种理想的基因治疗模式，本文总结了近年来这一领域的发展情况，并从细胞水平及分子水平分别加以阐述，着重介绍受体介导的基因治疗和基因的同源重组。     

靶向基因治疗的研究进展

基因治疗的靶向性研究近年来取得了许多新的进展,借助抗体或配体将治疗基因定向导入靶细胞,利用特异的基因启动子使治疗基因的表达严格限定于疾病部位,通过外源性口服药物控制治疗基因的表达时间和表达水平,以及缺陷或突变的基因的原位修复术等方法都显示出了良好的前景,可是要实现靶向基因治疗应用于临床实践的目标,还需要基础研究的进一步深入。     

肝靶向性基因治疗的研究现状和展望

肝靶向性基因治疗是肝病基因治疗的一个热点，关于肝靶向性基因治疗的研究正日益广泛，本文总结了当前各种类型肝病肝靶向性基因治疗的概况和展望。     

肝靶向性基因治疗的研究现状和展望

肝靶向性基因治疗是肝病基因治疗的一个热点,关于肝靶向性基因治疗的研究正日益广泛,本文总结了当前各种类型肝病肝靶向性基因治疗的概况和展望.     

抗体在靶向基因治疗中的应用

基因治疗是将人的正常基因或有疾病治疗作用的基因导入人体靶细胞,从而达到治疗目的的生物医学技术。基因治疗正处于持续发展的阶段,已成为重要的医药产业。综合来说,抗体在基因治疗中主要应用于两方面:1直接将抗体基因导入体内,表达出的蛋白产物作为治疗分子发挥治疗作用[1-2];2作为基因转移系统的靶向成分在基因治疗中发挥作用。本文将重点介绍第二方面的研究进展。将编码治疗分子的DNA,siRNA(small interfering RNA)或反义RNA(antisense oliognucleotides)高效、准确地转入体内靶组织和靶细胞是将基因治疗应用于临床的     

CK靶向特异性基因治疗的前景

关于基因治疗问题，我们在《现代癌症生物治疗学》一书中已作比较详细地介绍[1]。此外，我们在另文中又介绍了抗癌基因治疗工程研究现状[2]。这里仅就CK靶向特异性基因治疗前景谈点粗浅看法。一、从目的基因方面分析[3]现知CK（Cytokine，CK）共有6大类，即：干扰素类（InterferonsIFNs）、白细胞介素类（Interleukins，ILs）、集落刺激因子类（Coloneystimulatingfactors，CSFs）、肿瘤坏死因子类（TumorNecroslsfactors，TNFs）和生长因子类（Growthfactors，GFs）。现已研究证实，这6大类CK中的很多成员在抗病毒和抗肿瘤方面…     

感染靶向性重组腺相关病毒载体在基因治疗中的研究进展

重组腺相关病毒（rAAV）是一种非常有希望的人体细胞基因治疗载体.它既可以转染分裂细胞又可以转染非分裂细胞.rAAV在宿主体内以定向整合的方式存在.AAV重组体在细胞内能长期稳定地表达,且在体内不引起明显的病理变化,然而它广泛的宿主范围是体内基因治疗的一个缺点,因为它不具备组织特异性或器官局限性转导能力从而难以增加其在基因治疗中的安全性和效率.因此,开发具有组织或器官靶向性的重组腺相关载体是腺相关病毒载体发展的方向.本文就近年来感染靶向性腺相关病毒在基因治疗中的进展作一综述.     

感染靶向性重组腺相关病毒载体在基因治疗中的研究进展

重组腺相关病毒(rAAV)是一种非常有希望的人体细胞基因治疗载体.它既可以转染分裂细胞又可以转染非分裂细胞.rAAV在宿主体内以定向整合的方式存在.AAV重组体在细胞内能长期稳定地表达,且在体内不引起明显的病理变化,然而它广泛的宿主范围是体内基因治疗的一个缺点,因为它不具备组织特异性或器官局限性转导能力从而难以增加其在基因治疗中的安全性和效率.因此,开发具有组织或器官靶向性的重组腺相关载体是腺相关病毒载体发展的方向.本文就近年来感染靶向性腺相关病毒在基因治疗中的进展作一综述.     

肿瘤基因治疗中两种新的靶向分子

肿瘤基因治疗通过适当的载体在肿瘤细胞中表达抗癌基因以治疗癌症。目前肿瘤细胞中发现很多重要的致癌相关分子,它们有些与肿瘤细胞无限繁殖密切相关,有些能够抑制细胞的凋亡,有些能够促进肿瘤细胞血管新生或者逃避免疫监视。这些分子无疑是今后肿瘤基因治疗中的理想靶向分子。本文选取了目前肿瘤基因治疗研究中较新并具有一定代表性的2种致癌相关分子：缺氧诱导因子1(HIF-1)、信号转导与转录活化因子3／5(STAT3／5),对其特点及其在癌症治疗中的应用作一综述。     

CD147单抗介导的基因治疗纳米颗粒的肺癌细胞靶向性研究

目的:本研究采用靶向CD147的单克隆抗体对纳米基因载体颗粒进行靶向修饰后,进行针对肺癌细胞的蛋白激酶Cε(protein kinase Cε,PKCε)小干扰RNA基因治疗,观察其对肺癌细胞增殖和迁移能力的抑制效果。方法:制作可靶向CD147蛋白的磁性纳米基因载体。激光扫描共聚焦显微镜观察肺癌细胞CD147表达量。分别设立CP组、CN组和LP组复合物,按每6孔板孔质粒总量250 ng进行细胞转染。另设CD147靶向载体对照CA组和未转染细胞的对照(control)组。激光扫描共聚焦显微镜观察纳米造影剂的细胞内吞效果。实时荧光定量PCR检测PKCε的mRNA表达。Western blot法检测PKCε、Ki67、MMP3、Wnt1和GAPDH的蛋白表达。平板克隆形成实验检测细胞的增殖能力。Transwell法检测细胞的迁移能力。结果:免疫荧光法染色观察证实,人肺癌A549细胞的胞膜高表达CD147蛋白。CP组细胞中siRNA高效进入A549细胞,质粒内吞效率大于CN组和LP组。CP组、CN组、LP组和CA组的A549细胞中PKCε的mRNA相对表达量分别为control组的(9.76±0.18)%、(98.51±0.32)%、(99.17±0.16)%和(99.68±0.11)%,CP组与control组间的差异有统计学显著性(P0.05),CN组、LP组与control组间的差异无统计学显著性。CP组PKCε、Ki-67、MMP3及Wnt1蛋白的表达量明显降低,CN组和LP组与对照组之间的蛋白表达量的差异无统计学显著性。CP组的克隆形成数量明显少于control组,差异具有统计学显著性(P0.05)。CN组、LP组和CA组的有效克隆数量与control组相比差异没有统计学显著性。CP组的过膜细胞数量明显少于control组,差异具有统计学显著性(P0.05)。CN组、LP组和CA组的数量与control组相比差异没有统计学显著性。结论:靶向CD147修饰的纳米基因载体,可以对肺癌细胞进行高效的PKCε-siRNA基因治疗,实现对肺癌细胞增殖和迁移能力的高效抑制。     

脾内途经的肝脏靶向性基因治疗中Kupfier细胞的抗原提呈作用

目的探讨肝脏Kupffer细胞(KC)在脾内途径的肝脏靶向性基因治疗中的抗原提呈作用及可能机制。方法以结肠癌肝转移小鼠为模型,以脾内移植GM-CSF基因修饰的胎肝细胞(FILC-GM)与低剂量IL-2、5-Fu腹腔注射作为基因治疗与化学免疫治疗联合应用方案。结果荷瘤小鼠治疗后2w,整个肝小叶KC数目均扩增;KC对99mTc-亚锡植酸钠吞噬功能明显增强;与KC抗原提呈功能和活化T细胞功能密切相关的共刺激分子CD40虽在对照组KC中有基础性表达,但在基因治疗联合化学免疫治疗组中,其表达水平皆有不同程度的上调;此外,联合治疗后KC体外能有效诱导同种T细胞增殖反应,细胞因子IL-12和IL-12的分泌水平亦升高,并且这些反应能被抗CD40L抗体所封闭。结论脾内途径的肝脏靶向性基因治疗能有效提高KC的抗原提呈功能,CD40/CD40L分子在其中发挥了重要的共刺激作用。     

脾内途径的肝脏靶向性基因治疗中Kupffer细胞的抗原提呈作用

目的：探讨肝脏Kupffer细胞（KC）在脾内途径的肝脏靶向性基因治疗中的抗原是呈作用及可能机制。方法：以结肠癌肝转移小鼠为模型。以脾内移植GM-CSF基因修饰的胎肝细胞（FLC-GM）与低剂量IL-2、5-Fu腹腔注射作为基因治疗与化学免疫治疗联合应用方案。结果：荷瘤小鼠治疗后2w,整个肝小叶KC数目均扩增;KC对^99mTc-亚锡植酸钠吞噬功能明显增强;与KC抗原提呈功能和活化T细胞功能密切相关的共刺激分子CD40虽在对照组KC中有基础性表达,但在基础治疗联合化学免疫治疗组中,其表达水平皆有不同程度的上调,此外,联合治疗后KC体外能有效诱导同种T细胞增殖反应。细胞因子IL-12和IL-12的分泌水平亦升高,并且这些反应能被抗CD40L抗体所封闭。结论：脾内途径的肝脏靶向性基因治疗能有效提高KC的抗原提呈功能,CD40/CD40L分子在其中发挥了重要的共刺激作用。     

肝细胞癌新型靶向基因治疗体系的构建及应用研究

构建肝细胞癌(HCC)新型靶向基因治疗体系,并以存活素(survivin)基因为靶点,探讨该体系体外杀伤肝癌细胞的作用。构建由巨细胞病毒(CMV)增强子和甲胎蛋白(AFP)启动子构成的融合启动子(AV)驱动的pcD-NA3.1(-)AV质粒,及含绿色荧光蛋白(GFP)的pcDNA3.1(-)AVGFP和含siRNA-survivin的pcDNA3.1(-)AV-siRNA-survivin质粒,以磷酸钙纳米为载体,导入HepG2、SMMC-7721和Hela细胞中,观察转染效率及体外对肝癌细胞的杀伤效应,并采用流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率。结果显示:AV启动子可特异性驱动下游基因在HepG2细胞表达。此外,pcDNA3.1(-)AVsiRNA-survivin在HepG2细胞中可有效沉默survivin的mRNA和蛋白表达,并诱导68.8%的细胞死亡,而在Hela和SMMC-7721细胞中无显著作用。生长曲线结果显示,转染了pcD-NA3.1(-)AVsiRNA-survivin的HepG2细胞的生长显著受抑(P<0.05)。结果表明,该新型靶向基因治疗体系可高选择性作用于肝癌细胞,可为临床肝癌的基因治疗提供新的研究思路。     

靶向重组腺病毒载体研究进展及其在肿瘤基因治疗中的应用

腺病毒载体已经广泛应用于肿瘤的基因治疗临床试验,然而某些组织和细胞表面缺乏或低表达其相应的受体,使得腺病毒不能有效感染并发挥作用。研究新型重组腺病毒载体使之特异性感染靶器官,降低对正常组织的损伤,已成为肿瘤基因治疗研究的热点。靶向基因治疗可通过靶向性导入和靶向性基因表达调控等策略来达到。本文介绍了重组腺病毒载体系统靶向改造及在肿瘤基因治疗应用方面的最新研究进展。     

靶向重组腺病毒载体研究进展及其在肿瘤基因治疗中的应用

腺病毒载体已经广泛应用于肿瘤的基因治疗临床试验,然而某些组织和细胞表面缺乏或低表达其相应的受体,使得腺病毒不能有效感染并发挥作用。研究新型重组腺病毒载体使之特异性感染靶器官,降低对正常组织的损伤,已成为肿瘤基因治疗研究的热点。靶向基因治疗可通过靶向性导入和靶向性基因表达调控等策略来达到。本文介绍了重组腺病毒载体系统靶向改造及在肿瘤基因治疗应用方面的最新研究进展。     

靶向IL-6慢病毒介导RNA干扰实验性基因治疗类风湿关节炎

目的:探讨靶向小鼠IL-6基因RNA干扰慢病毒载体颗粒(LV-IL-6-RNAi)对小鼠巨噬细胞株J774A.1细胞IL-6表达的影响,及其对胶原诱导性关节炎(CIA)的治疗作用。方法:设计合成3对特异性针对小鼠IL-6基因的小干扰RNA(siRNA)序列,筛选最高效siRNA序,构建高效LV-IL-6-RNAi。LV-IL-6-RNAi感染小鼠巨噬细胞株J774A.1细胞,并设慢病毒阴性对照(LV-NC-RNAi)、培养基空白对照,RT-qPCR检测J774A.1细胞的IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和IL-1β mRNA相对表达水平,以检测LV-IL-6-RNAi体外干扰效率。取DBA/小鼠构建CIA模型并随机分为4组:LV-IL-6-RNAi组、LV-NC-RNAi组、甲氨蝶呤(MTX)阳性对照组、PBS空白对照组,分别关节腔注射LV-IL-6-RNAi、LV-NC-RNAi、腹腔注射MTX、PBS溶液,记录CIA小鼠关节炎评分,ELISA检测小鼠IL-6、IL-1β和TNF-α血清水平,组织病理检测炎症关节的炎症细胞浸润数。结果:成功构建了高效LV-IL-6-RNAi。...     

垂体性侏儒症的基因治疗与进展

对于垂体性侏儒症,目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本从基因治疗的体外试验、体内试验方法总结了其研究成果及最新进展。     

垂体性侏儒症的基因治疗与进展

对于垂体性侏儒症 ,目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本文从基因治疗的体外试验、体内试验方法总结了其研究成果及最新进展     

RNA干扰的组织靶向性

RNA干扰是一种转录后基因沉默现象,可通过双链诱导使靶基因失活。为了增强对组织靶向性的治疗应用,目前研究有利用载体的特异性及基因重组构建进行调控作用于靶组织,也可以小分子基团特异性化学修饰小RNA双链或载体及其他微粒等方法提高组织靶向性。现已有部分RNA干扰治疗应用于临床,且通过组织靶向作用可拓展疾病治疗途径。