青蒿琥酯和TRAIL对前列腺癌细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的探讨青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的诱导作用。方法培养前列腺癌PC-3、LNCaP细胞,分别加入不同浓度的青蒿琥酯和TRAIL,随机分为7个组:对照组、青蒿琥酯Ⅰ组(低剂量组)、青蒿琥酯Ⅱ组(高剂量组)、TRAILⅠ组(低剂量组)、TRAILⅡ组(高剂量组)、TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(1mmol/L)Ⅰ组及TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(5 mmol/L)Ⅱ组。流式细胞仪检测青蒿琥酯和TRAIL诱导前列腺癌细胞凋亡的凋亡率。结果青蒿琥酯和TRAIL均可增加前列腺癌细胞凋亡的凋亡率,二者联合使用诱导的前列腺癌细胞的凋亡率明显高于两种药物单独使用。结论青蒿琥酯与TRAIL联合使用对前列腺癌存在诱导凋亡的协同作用。青蒿琥酯能诱导提高前列腺癌细胞对TRAIL的敏感性,加强TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合8-氯腺苷在前列腺癌治疗中的作用及机制研究

目的观察低剂量8-氟腺苷对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导细胞凋亡的增敏作用。方法人前列腺癌细胞株PC-3M经过TRAIL（100ng／ml）、低剂量8-氟腺苷（0-200μmol／L）以及联合用药处理96h，用流式细胞分析仪和蛋白质免疫印迹分析测定细胞生存率、细胞周期以及相关细胞凋亡蛋白的动态变化。结果人前列腺癌细胞株PC-3M单独经过TRAIL或低剂量8-氟腺苷处理后并不能降低其存活率，但联合用药后细胞生存率大大降低。结论低剂量8-氟腺苷可以增强TRAIL对前列腺癌细胞的杀伤效应，效果优于二种药物的单独使用。8-氟腺苷主要诱导人前列腺癌细胞株PC-3M发生G2／M期阻滞和细胞凋亡，p53和p21蛋白参与了这一分子生物学事件。     

甘草甜素诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的体外研究

目的:探讨甘草甜素(GL)诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的作用机制。方法:采用不同浓度的GL处理细胞后,用流式细胞仪检测前列腺癌细胞株DU145的凋亡率及细胞周期分布。结果:50、100μmol/L浓度的GL能诱导前列腺癌细胞DU145凋亡,凋亡率与剂量成正相关;DU145随药物浓度及作用时间变化,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论:甘草甜素能诱导前列腺癌细胞凋亡,并明显抑制癌细胞增殖,具有直接抗肿瘤作用。     

EGCG诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡及对Survivin蛋白表达的影响

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocat-echin-3-gallate,EGCG)对人前列腺癌细胞PC-3凋亡及对其Survivin蛋白表达的影响。方法使用不同浓度的EGCG(0、20、40、80μg/mL)处理前列腺癌细胞株PC-3,通过细胞增殖曲线实验检测EGCG对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞仪检测不同浓度EGCG处理PC-3细胞48h后对细胞周期及凋亡的影响;用RT-PCR法检测各浓度EGCG作用48h后PC-3细胞中Survivin基因的表达差异,使用Western blot进行确认。结果 EGCG可以抑制PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用随EGCG浓度的增加而增强(P<0.05);Sur-vivin在PC-3细胞中高表达,EGCG促使PC-3细胞的Survivin表达下调,其表达水平随EGCG浓度的增加而减少(P<0.01)。结论 EGCG能下调PC-3细胞中Survivin蛋白的表达,这可能是EGCG抑制PC-3细胞增殖、诱导其凋亡的关键机制。     

PDCD5和TRAIL诱导胃癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨PDCD5及TRAIL对胃癌细胞株MKN28体外诱导凋亡的作用及机制。方法培养,MTT法分析细胞增殖抑制率及细胞存活率,流式细胞仪分析细胞凋亡及细胞周期．AO／EB染色进行观察凋亡细胞？结果TRAIL可明显抑制MKN28细胞增殖,并可诱导凋亡。PDCD5对MKN28细胞抑制增殖、诱导凋亡作用不明显。PDCD5、TRAIL联合应用对MKN28细胞有显著的抑制增殖、诱导凋亡作用。两者具有协同作用。结论TRAIL对MKN28细胞株有一定程度的凋亡诱导作用。PDCD5对MKN28细胞的凋亡作用不明显。TRAIL联合PDCD5可以高效诱导MKN28细胞凋亡。     

苦参碱对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:探讨苦参碱治疗前列腺癌的可行性及机制。方法:用不同药物浓度苦参碱诱导PC-3M细胞不同时间后,在相差倒置显微镜观察细胞形态;用MTT法测细胞的增殖抑制情况;用流式细胞仪(FCM)进行细胞凋亡率检测;RT-PCR法检测PC-3M细胞内bcl-2、bax基因表达水平。结果:用苦参碱干预后随着药物浓度增加PC-3M细胞株生长明显受抑制;在FCM上可见凋亡率逐渐增加;PC-3M细胞中bcl-2 mRNA表达水平逐渐下调,bax mRNA表达水平逐渐上调,且呈时间-浓度依赖性。结论:苦参碱体外能有效抑制前列腺癌细胞株生长,其机制可能与诱导细胞凋亡、下调bcl-2表达及上调bax水平有关。     

双氢青蒿素诱导前列腺癌 PC-3 细胞凋亡及其机制研究

目的 研究双氢青蒿素对前列腺癌 PC-3 细胞的凋亡诱导作用,并探讨其可能的机制。方法 MTT 法测定不同浓度双氢青蒿素对 PC-3 细胞增殖的影响,流式细胞仪 (FCM)、透射电镜 (TEM) 观察双氢青蒿素对 PC-3 细胞的凋亡诱导作用,免疫组化 (SP) 检测双氢青蒿素对 PC-3 细胞内 Bax、Bcl-2 蛋白阳性表达的影响。结果 双氢青蒿素对 PC-3 细胞有明显增殖抑制效应,能诱导 PC-3 细胞凋亡且具有浓度-时间依赖性,导致 PC-3 细胞线粒体肿胀、核碎裂、凋亡小体形成;随着双氢青蒿素浓度的增加,Bcl-2 蛋白阳性表达降低,而 Bax 蛋白阳性表达增加。结论 双氢青蒿素可能通过上调 Bax,下调 Bcl-2 蛋白表达诱导前列腺癌 PC-3 细胞凋亡。     

重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨

目的探讨重组人可溶性TRAIL蛋白(rhsTRAIL)诱导细胞凋亡的机理.方法应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡;流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局,荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性.结果100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性,但可诱导肿瘤细胞凋亡,不同的肿瘤细胞凋亡率有差异,凋亡范围在26%～57%.不同细胞表面TRAIL受体表达量不同,外周血淋巴细胞的死亡受体DR4、DR5受体表达5%,而诱骗受体DcRl表达55%,相反肿瘤细胞上的DR4、DR5表达高(40%～88%),而DcRl表达很低(8%～17%).rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡,其细胞内Caspase-3活性增高.ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性.结论重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡,凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关.     

重组人可溶性TRAIL分子诱导细胞凋亡机理探讨

目的 探讨重组人可溶性TRAIL蛋白（rhsTRAIL）诱导细胞凋亡的机理。方法 应用DNA染料和流式细胞仪定性分别检测rhsTRAIL诱导的细胞凋亡；流式细胞仪检测靶细胞膜表面TRAIL受体表达格局，荧光定量法检测凋亡细胞中Caspase-3活性。结果 100ng/ml人可溶性TRAIL蛋白分子对外周血淋巴细胞无明显毒性，但可诱导肿瘤细胞凋亡，不同的肿瘤细胞凋亡率有差异。凋亡范围在26%-57%。不同细胞表面TRAIL受体表达量不同，外周血淋巴细胞的死亡受体DR4，DR5受体表达5%，而诱骗受体DcR1表达55%，相反肿瘤细胞上的DR4，DR5表达高（40%——88%）。而DcR1表达很低（8%-17%），rhsTRAIL诱导HL-60细胞发生凋亡，其细胞内Caspase-3活性增高，ActD可增加TRAIL抑制细胞生长活性。结论 重组人可溶性TRAIL蛋白分子可诱导肿瘤细胞凋亡，凋亡活性TRAIL受体类型及Caspase-3活性增高有关。     

TRAIL联合放射线对肺癌细胞增殖及凋亡影响

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合放射线对Lewis肺癌细胞增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测不同浓度TRAIL对Lewis肺癌细胞增殖的影响;流式细胞仪检测TRAIL、X射线及两者联合对Lewis细胞凋亡率及细胞周期的影响。结果 TRAIL对Lewis细胞的体外抑制作用与浓度相关(F=9.017～12.465,P<0.05)。TRAIL与X射线联用能够使Lewis细胞的凋亡率及G2/M期比例提高,与对照组及单用TRAIL组和单用X射线组相比,差异有统计学意义(F=203.175、149.276,P<0.05)。结论 TRAIL可抑制Lewis细胞的增殖,并与浓度相关。TRAIL与放射线联用能够提高肿瘤细胞的凋亡率及细胞周期中G2/M期的比例。     

紫杉醇在子宫颈癌及子宫内膜癌治疗中的应用

目的探讨紫杉醇在子宫颈癌以及子宫内膜癌治疗中的应用效果。方法选取2005年7月-2012年7月入住我院的经临床诊断为子宫颈癌以及子宫内膜癌患者180例,其中子宫颈癌患者数为100例,子宫内膜癌患者数为80例。将上述两组患者随机分为对照组与观察组,对照组患者给予（40～60）mg/m2静脉滴注阿霉紊,观察组患者于化疗前的6、12h预防性给予20mg地塞米松,然后使用紫杉醇注射液0．5h静脉滴注,对比两组患者不同病理类型的缓解率。结果子宫颈癌组：对照组与观察组两组患者的缓解率分别为52．0％、94．0％,差异有高度统计学意义（P〈0．01）。子宫内膜癌组：对照组与观察组两组患者的缓解率分别为67．5％、85．0％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论紫杉醇注射液在子宫颈癌以及子宫内膜癌的临床治疗之中的疗效显著,值得在临床上加以推广并应用。     

生存素在膀胱癌中的表达与癌细胞增殖和肿瘤复发关系的研究

目的:探讨新的凋亡抑制基因生存素(survivin)在膀胱移行细胞癌(bladdertrantionalcellcancer,BTCC)中的表达和ki67基因表达的相关性,及其与肿瘤复发的关系。方法:应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP),检测survivin和ki67在58例BTCC中的表达,另取10例癌旁正常组织做对照,同时进行随访,随访时间为11￣48月,平均为29月,观察肿瘤复发情况。结果:survivin基因在BTCC中呈高表达,58例BTCC中41例表达阳性,占70.7%;而10例癌旁正常组织均无survivin的表达。survivin表达阳性和阴性病例中,ki67阳性表达分别为68.3%(28/43)和35.5%(6/17),两者比较差异有显著性。膀胱癌Ⅰ-Ⅱ级病例的Survivin表达阴性病例首次复发时间为29±15个月,而Survivin阳性者为11±9个月,两者相比差异有显著性(P<0.001)。结论:抑癌基因survivin在BTCC中的表达不仅与BTCC的病理分级和临床分期呈正相关,而且与膀胱癌细胞的增殖密切相关。在同一级别膀胱肿瘤中,survivin表达阳性的膀胱肿瘤更倾向于复发。